实验5 家兔离体肠肌活动的影响实验
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实验5 家兔离体肠肌活动的影响实验
【摘要】目的研究0.01%乙酰胆碱(Ach)、0.01%肾上腺素(E)、NaOH溶液、HCl溶液、25℃台氏液及缺氧条件对家兔离体肠肌运动的影响。方法家兔离体小肠平滑肌标本的制备,生物信号采集处理系统记录在不同因素作用下张力曲线。常用统计学方法和统计学指标。结果滴加0.01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;滴加0.01%肾上腺素(E)、1NHCl、肠肌运动张力和频率迅速降低;25℃台氏液刺激离体肠肌时,肠肌运动张力和频率先迅速下降后逐渐增大;停止通氧后,肠肌运动张力和频率逐渐降低。结论 0.01%乙酰胆碱(Ach)、1NNaOH溶液刺激能促进肠肌运动,0.01%肾上腺素(E)、1NHCl能抑制肠肌运动,短时低温能使肠肌运动稍降后又加强直至正常,缺氧使肠肌运动减弱。
关键词:HCl、NaOH、离体肠肌、乙酰胆碱、肾上腺素
目录
1.实验材料和方法 (2)
1.1. 实验材料 (2)
1.2. 实验方法: (2)
2.实验结果: (5)
3.实验讨论(见附页) (6)
4.实验结论: (6)
5.参考文献: (6)
附页 (6)
1.实验材料和方法
1.1.实验材料
1.1.1.实验动物:兔子(浙江中医药大学动物实验中心)
1.1.
2.实验材料和器械:家兔,麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能
器、铁支架、电脑、、木锤、止血钳、手术刀、20ml注射器、
手术剪、持针器、手术圆针、缝线、烧杯、手术盘、搪瓷碗
等。
1.1.3.实验药品:台氏液:(0.8%NaCl、0.02%KCl、0.026%MgSO477H2O、
0.0065%NaH2PO4、0.02%CaCl2、0.1%NaHCO3)、0.1%葡萄糖溶
液。1:10 000肾上腺素、1:10 000乙酰胆碱、1NHCl、1NNaOH
溶液。
1.2.实验方法:
1.2.1.准备好离体肠管描记装置,麦氏浴槽中加固定量(10ml-15ml)
的台式液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定
在39摄氏度上下。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用
螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节到浴槽中气泡一个一
个逸出为止。换能器输出线接微机生物信号处理系统,仪器
参数:
RM6240系统:点击实验菜单中的“肠肌收缩记录”项,参数:通道时间常数为直流,滤波频率为10Hz,灵敏度3g,采样频
率200Hz,扫描频率1s/div。
1.2.2.离体小肠段的制备:
1.2.2.1.准备两个小手术盘,一个小手术盘用于清洗肠内容物,另一小
手术盘盛预冷台氏液倒入中,其液体量已淹过小肠段为准。1.2.2.2.用持针器夹持手术圆针、穿线备用。
1.2.2.3.取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,迅速
进行以下操作:将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹白线
向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长,打开腹壁,暴露腹腔,顺
着胃找到与胃相连的十二指肠,沿十二指肠向空肠的方向取出
小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽取预冷台氏液
冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。将干净的小肠段放入另一
盛有预冷台氏液的小手术盘中,用手术刀刮去肠管外的血管和
系膜,将小肠段切割成小段,每小段肠约2cm长,并在小段肠
的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线,注意在操作过程
中,每10分钟换一次预冷台氏液。
1.2.3.取出固定架,将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩,并牢
固地绑紧在小钩上,将固定架放回内槽,小钩尽量靠近槽底,重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。
1.2.4.将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调
器缓慢升降拉线,保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。
1.2.5.换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用注射
器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中,其每次用量以淹过肠段的量为准。调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段的运动。
1.2.6.实验观察:
1.2.6.1.记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,向台氏液中加入1:10 000
乙酰胆碱2滴,观察小肠收缩活动的改变.反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.2.肠活动恢复后,向台氏液中加入1:10 000肾上腺素2滴,观察
小肠活动的改变, 待反应稳定后冲洗2遍, 再加入等量的
37℃ ~ 38℃的台氏液。
1.2.6.3.肠活动恢复后,向台氏液中加入1NNaOH 2滴,观察小肠收缩
活动的改变, 待反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.4.记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,观察其收缩活动的特点。
向台氏液中加入1NHCl盐酸2滴,观察小肠收缩活动的改变.
反应稳定后冲洗2遍。
1.2.6.5.肠活动恢复后,将原37℃ ~ 38℃台氏液换成等量的25℃台氏
液,观察肠活动的改变, 待其活动改变明显时,冲洗1遍, 再
加入等量的37℃ ~ 38℃的台氏液。
1.2.6.6.待肠活动恢复后,停止空气泵的工作,观察肠活动的改变,待
其收缩活动改变明显时反应稳定后冲洗1遍,再加入等量的
37 ℃~ 38℃的台氏液,空气泵描记一段肠段收缩活动恢复曲
线后终止实验。