血小板实验流程
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血小板抗体检测实验操作流程
【实验步骤】
1、试剂盒平衡至室温(18-25℃)
2、将25倍的浓缩洗涤液用蒸馏水稀释成工作液(浓缩洗液与蒸馏水1:24稀释)
3、制备血小板悬液(将冻干血小板复溶后直接使用);
每支加500ul生理盐水→室温静置5分钟后混匀(现用现制备);
1滴(50ul)血小板抗体筛选细胞
10秒钟
5分钟(程序1)
3次
2滴(100ul)低离子强度溶液(紫色液体)
50ul患者样本;阴性对照(绿色)、阳性对照(红色)
℃水浴箱孵育30分钟(气浴35分钟)
5次
1滴(50ul)抗人球IgG
1滴(50ul)指示红细胞
5分钟(程序2)后即可观察结果。
【结果判定】
1、阳性结果:指示红细胞平铺在反应孔底部表面;若指示红细胞只结合到部分孔底有平铺趋势,细胞外沿有不规则毛刺,并且结合的区域比阴性对照大为弱阳性。表明患者血清或血浆中含有血小板抗体;或血小板交叉配型不合。
2、阴性结果:指示红细胞在反应孔底部中央形成红细胞聚集或红细胞聚集区出现少许中空形状但聚集区外沿光滑。表明患者血清或血浆中不含血小板抗体;或血小板交叉配型相合。
血小板抗体检测及交叉配型反应格局
-±1+2+3+4+如果结果可疑,或阳性对照和/或阴性对照未出现正确结果,则必须重新检测。