种子生活力快速测定(TTC法红墨水法)

红墨水染色法
种子处理
取大豆种子 100 粒， 新、陈种子各 1份， 用冷水浸泡一夜或 用 40 ℃左右温水浸 泡40-60min ，取出 沥干水分，用单面 刀片沿胚的中心纵 切为两半
种子染色
取其中胚的各部分 比较完整的一半， 放在小烧杯内，加 经稀释的红墨水至 浸没种子，染色 20min 左右
冲洗种子
知识链接：玉米、大豆种子结构
操作规程
? 选取的种子要有代表性，要随机抽取需要的种子。
TTC染色法
试剂配制
取1gTTC 溶于 1L蒸 馏水或冷开水中， 配制成的 0.1% 的 TTC 溶液。药液 pH 应在 6.5-7.5 ，以pH 试纸试之
种子处理
取玉米种子 100 粒， 新、陈种子各 1份， 用冷水浸泡一夜或 用40 ℃左右温水浸 泡40-60min ，取出 沥干水分，用单面 刀片沿胚的中心纵 切为两半
? 2、为何用TTC染色法，种胚染红的为活种子，而用红墨 水染色法，种胚不着色的为活种子？ ? TTC(无色) 氧化还原反应 TTF(红色) ? 原生质膜具有半渗透性,染料无法进入活细胞内
作业
? 1.以玉米为例 ,分析说明TTC染色法快速测定种子生活力 的方法.
? 2.以大豆为例,分析说明红墨水染色法快速测定种子生活 力的方法.
? 2。当TTC溶液渗入种胚的活细跑内，并作为氢受体被脱 氢辅酶（NADH或NADPH) 还原时，可生红色的三苯甲腙 （TTF），胚便染成红色
? 3。如种胚死亡便不被染色；如种胚生活力下降，呼吸作 用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，染色较浅；故可 根据种胚染色的部位或深浅来鉴定种子的生活力。
? 红墨水染色法（染料染色法）（酸性大红G)
种子生活力快速测定
TTC法、红墨水法
1 实验目的
2 实验原理
3 实验准备
4 操作规程
C
目 O
N T
录 E
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? 种子生活力： ? 种子能够萌发的潜在能力或胚具有的生命力。
实验目的
? 1.了解种子生活力快速测定的方法 ? 2.理解TTC/红墨水测定种子生活力的原理
实验原理
? TTC染色法 ? 1。凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还 原反应，而无生活力的种胚则无此反应
? 1.有生命力种胚细胞的 原生质膜 具有半透性 ，有选择吸 收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染 色。
? 2.而丧失生命力的种子，其胚部细胞原生质膜丧失了选 择吸收能力，染料可自由进入细胞内使胚部染色。所以可 根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。
实验准备
? （一）材料：玉米种子、大豆种子 ? （二）仪器设备：恒温培养箱、刀片、镊子、培养皿、 放大镜、滤纸 ? （三）TTC染液、5%的红墨水
种子染色
取其中胚的各部分 比较完整的一半， 放在小烧杯内，加 入0.1%TTC 溶液， 以浸没种子为宜
计算
计算种胚不着色的 （活种子）种子个 数，计算种子发芽 率。 发芽率 =发芽种子粒 数 ÷用做发芽种子 的总数× 100%
冲洗种子
保温后，倾出药液， 用清水冲洗 1-2次
生活力观察
立即对比观察新旧 种子种胚着色情况， 判断种子的生活力
染色到预定时间， 倒去红墨水，用自 来水冲洗 2-3 次
生活力观察
立即对比观察新旧 种子种胚着色情况， 判断种子的生活力
计算
计算种胚不着色的 （活种子）种子个 数，计算种子发芽 率。 发芽率 =发芽种子粒 数 ÷用做发芽种子 的总数× 100%
问题处理
? 1、比较TTC染色法和红墨水染色法测定何不同？