微波快速脱钙及其脱钙液的选择.
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档火 力 ， 功率 为 １ ３ ５ Ｗ， 频率 为 ２ ４ ５ ０ ＭＨｚ ，
作者单 位 ： 广 州 军 区 广 州 总 医 院 医学 宴 验 科 ５ １ Ｏ Ｏ ｉ Ｏ
结构保存 良好 ： 骨细胞位于骨 陷窝 内， 胞体呈 棱形（ 由于 切 面 位 置 不 同 也 可 呈 圆 形 ） ， 并 向 周 围伸 出许 多 突 起 。胞 核 大 ， 异染色质凝集 ， 核 膜清晰 ， 胞质较 少 ， 电子 密 度较 大 ， 细 胞 器 少。 陷 窝鞘 内为 电子 密度 较 低 的 无 定 形 物 质 ， 陷窝边 缘 由着色极深的 嗜锇板层 勾蜘 出来 ， 非常清晰 。 陷窝 边 缘 周 髓 有 许 多胶 原 纤维 ． 可 见 胶 原 纤 维 的 周 期性 横 纹 （ 图 １ ， ２ ） Ｂ液 组 的 超 微 结 构 保 存 较 差 ， 只 能 看 见
第六图书馆
临床 与实验 病理 学杂 志
Ｊ ａ Ｅ印 Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ １ ９ ９ ６ ；Ｎ ｏ ｖ １ ２ （ ４ ）
骨 陷窝 、 细 胞膜 、 细胞 核的轮廓 ， 其 超 微 结 构 已模 糊 不 清 。 ３ 讨 论 微设 脱钙过 程要 不断更换脱 钙渡 ， 一 方
的 目的 。
每 ５ ａｉ ｒ ｎ更 换 一 次 脱 钙 液 ， 脱 钙 液 瓶 置 于 内
装 ２ ０ ０ ｍｌ 水 的大 培 养 皿 内 ， 以 吸收 炉 内 热
量， 使 脱钙 液 的 的温度 保持 在 ２ ０ Ｕ～４ Ｏ ℃； 室温脱钙组 ： 每 ２ ４ ｈ更 换 一 次 脱钙 液 。 ｌ ＿ ６ 脱 钙 终 点 的测 量 方 法。 将 ４ｍ１ 脱 钙 液置 入带有 标本块 的小瓶 内， 每 更 换 一 次 脱 钙 液 时， 用吸量 管从 瓶 内取脱 钙 液 ２ ｍ１ ， 然 后 加沉淀剂 （ １ ０ 草酸钾 ） ２ ｍ１ 摇匀 ， 用 分 光 光 度计确 定波长光下透 射光 密度 ， 以 光 密 度 值为纵轴 。 时 间 为横 轴 ， 画 光 密 度 随 时 间 变 化 的关 系 曲线 图 。 当曲 线 坡 度 变 小 时 可 预 知 脱 钙 终点 即将到来 ， 当光密 度值趋 于恒定Ｈ ￣ ０ １ ￣ 为脱 钙 终 点 在 实际 工 作 中 ， 只 要 取几 次 脱 钙 液 沉 淀 后 测 光 密度 值 ， 最 后 两 次 相 差 为 零 时 即 为脱 钙 终 点 。
２ 结 果
ｌ 材 料和 方 法
ｌ ＿ ｌ 材料 新 西 兰 兔胫 骨 。
ｌ ２ 方 法 与 步 骤 先 用 戊 巴 比妥 钠 将 动 物 麻醉， 取胫 骨分 别锯成 ０ ． ５ ｃ ｍ长； 再 用锤＝ Ｆ 和 单 面 刀 片 沿 胫 骨 纵 向 劈 成 四段 ， 用 生 理 盐 水或 ０ ． １ ｍｏ ｌ ・Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ（ ｐ Ｈ ７ ． ２ ～７ ． ４ ） 缓 冲 液 洗 ２次 ； 然后入 ３ 戊 二醛 和 ４ 多 聚 甲醛
析 仪 器 厂 生产 。
Ａ 液、 ｃ液 加 微 波 及 空 白 对 照 组 的 超 微
ｌ ＿ ５ 实验 分 组 与 脱 钙 方 法 ｌ ＿ ５ ｌ 实验 分 组 微 波 脱 钙 组 三种 脱 钙 液 分 别在 微 波 条 件 下 脱 钙 ； 摩温脱钙组 ： 三种 脱 钙 液 分 别 在 室 温 条 件 下 脱钙 。 １ ． ５ ． ２ 脱钙方 法 微波组 ： 用微 波 炉 的最 小
第六图书馆
２ ． １ 脱 钙 骨 的熏 量 变 化
４Ｏ ～ ５ Ｏ 。
各 组 至 脱 钙 终 点
的 骨组 织 ， 脱 钙 后 的 重 量 比 脱 钙 前 均 减 少 附表 。
Ｃ液 ： ＨＣ Ｉ 、 甲酸、 ＡＩ Ｃ Ｉ 、 脱 钙液 ， 简称 Ｃ
琶 ７
．
液： 混台 固定液 １ Ｏ ｍ １ ， 生理盐水 ８ Ｏ ｍ １ ， 甲酸 ７ ｍｌ ， ＨＣ Ｉ ８ ｍｌ ， Ａｌ Ｃ ｌ ： （ 结 晶） ６ ｇ ， 冰醋酸 ２ ． ５
微波快速脱钙及其脱钙液的选择
第六图书馆 骨组织 超微结构 切片 制备 脱钙临床与实验病理学杂志杨传红 赖晃文广州军区广州总医院医学实验科1996第六图书馆
第六图书馆
起杈 伺 ｆ ｊ ， 驯
临床 与实验 南理 学杂 志 Ｊ Ｃ ｌ ｉ ｎ Ｅ ｘ ｐ Ｐ 拍 １ ９ ９ ６ ；Ｎ ｏ ｖ １ ２ （ ４ ）
ｍ１
２ ． ２ 不 同 条件 下所 需 的脱 钙 时 间
附衰
不 同条件下所 需 的脱 钙时间
１ ４ 仪器 微 波炉 ｓ Ａ ＭＰ Ｏ． ＭＩ — Ｃ １ ０ ２型微 波炉 ， 北 京 新 宝 电器 有 限公 司 生产 。 分 光 光 度 计： ７ ２ ５型 紫 外 光 栅 分 光 光 度 计 ， 上 海 第 三 分
１：１混台 固定 液 固定 ４ ｈ 。
１ ． ３ 三 种 脱钙 液配 方 “ Ａ 液： ４ ＥＤ ＴＡ一 ２ Ｎａ脱 钙 液 ． 以 下 简 称 Ａ液； Ｂ液 ： ＨＣ Ｉ 脱钙 液 ， 简 称 Ｂ液 ： 混 台 固 定 液 １ ０ｍｌ ， ＨＣＩ ８ｍｌ ， 蒸 馏水 ７ ５ｍｌ ；
； ～ ；
微 波 快 速 脱 钙 及 其 脱 钙 液 的选 择
杨传 虹 赖晃 文 赓云 姜 旁 英
◇ 技 术 交 流 ◇
ｆ ５ ｆ 、
பைடு நூலகம்
骨 组 织 超 薄切 片 的制 备 是 进 行 骨 组 织 超 微结 构研 究 的 先决 条件 常 规 脱 钙 方 法 时 问 太 长 且超馓 结 构 保 存 不 良 ． 不 利 于 临 床 病 理 的快 速诊 断 。我 们 选择 不 同脱 钙 液 在 微 渡 条 件 下 探 讨 快 速 脱 钙 的方 法 ， 以达 到 快 速 诊 断
作者单 位 ： 广 州 军 区 广 州 总 医 院 医学 宴 验 科 ５ １ Ｏ Ｏ ｉ Ｏ
结构保存 良好 ： 骨细胞位于骨 陷窝 内， 胞体呈 棱形（ 由于 切 面 位 置 不 同 也 可 呈 圆 形 ） ， 并 向 周 围伸 出许 多 突 起 。胞 核 大 ， 异染色质凝集 ， 核 膜清晰 ， 胞质较 少 ， 电子 密 度较 大 ， 细 胞 器 少。 陷 窝鞘 内为 电子 密度 较 低 的 无 定 形 物 质 ， 陷窝边 缘 由着色极深的 嗜锇板层 勾蜘 出来 ， 非常清晰 。 陷窝 边 缘 周 髓 有 许 多胶 原 纤维 ． 可 见 胶 原 纤 维 的 周 期性 横 纹 （ 图 １ ， ２ ） Ｂ液 组 的 超 微 结 构 保 存 较 差 ， 只 能 看 见
第六图书馆
临床 与实验 病理 学杂 志
Ｊ ａ Ｅ印 Ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ １ ９ ９ ６ ；Ｎ ｏ ｖ １ ２ （ ４ ）
骨 陷窝 、 细 胞膜 、 细胞 核的轮廓 ， 其 超 微 结 构 已模 糊 不 清 。 ３ 讨 论 微设 脱钙过 程要 不断更换脱 钙渡 ， 一 方
的 目的 。
每 ５ ａｉ ｒ ｎ更 换 一 次 脱 钙 液 ， 脱 钙 液 瓶 置 于 内
装 ２ ０ ０ ｍｌ 水 的大 培 养 皿 内 ， 以 吸收 炉 内 热
量， 使 脱钙 液 的 的温度 保持 在 ２ ０ Ｕ～４ Ｏ ℃； 室温脱钙组 ： 每 ２ ４ ｈ更 换 一 次 脱钙 液 。 ｌ ＿ ６ 脱 钙 终 点 的测 量 方 法。 将 ４ｍ１ 脱 钙 液置 入带有 标本块 的小瓶 内， 每 更 换 一 次 脱 钙 液 时， 用吸量 管从 瓶 内取脱 钙 液 ２ ｍ１ ， 然 后 加沉淀剂 （ １ ０ 草酸钾 ） ２ ｍ１ 摇匀 ， 用 分 光 光 度计确 定波长光下透 射光 密度 ， 以 光 密 度 值为纵轴 。 时 间 为横 轴 ， 画 光 密 度 随 时 间 变 化 的关 系 曲线 图 。 当曲 线 坡 度 变 小 时 可 预 知 脱 钙 终点 即将到来 ， 当光密 度值趋 于恒定Ｈ ￣ ０ １ ￣ 为脱 钙 终 点 在 实际 工 作 中 ， 只 要 取几 次 脱 钙 液 沉 淀 后 测 光 密度 值 ， 最 后 两 次 相 差 为 零 时 即 为脱 钙 终 点 。
２ 结 果
ｌ 材 料和 方 法
ｌ ＿ ｌ 材料 新 西 兰 兔胫 骨 。
ｌ ２ 方 法 与 步 骤 先 用 戊 巴 比妥 钠 将 动 物 麻醉， 取胫 骨分 别锯成 ０ ． ５ ｃ ｍ长； 再 用锤＝ Ｆ 和 单 面 刀 片 沿 胫 骨 纵 向 劈 成 四段 ， 用 生 理 盐 水或 ０ ． １ ｍｏ ｌ ・Ｌ Ｐ Ｂ Ｓ（ ｐ Ｈ ７ ． ２ ～７ ． ４ ） 缓 冲 液 洗 ２次 ； 然后入 ３ 戊 二醛 和 ４ 多 聚 甲醛
析 仪 器 厂 生产 。
Ａ 液、 ｃ液 加 微 波 及 空 白 对 照 组 的 超 微
ｌ ＿ ５ 实验 分 组 与 脱 钙 方 法 ｌ ＿ ５ ｌ 实验 分 组 微 波 脱 钙 组 三种 脱 钙 液 分 别在 微 波 条 件 下 脱 钙 ； 摩温脱钙组 ： 三种 脱 钙 液 分 别 在 室 温 条 件 下 脱钙 。 １ ． ５ ． ２ 脱钙方 法 微波组 ： 用微 波 炉 的最 小
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２ ． １ 脱 钙 骨 的熏 量 变 化
４Ｏ ～ ５ Ｏ 。
各 组 至 脱 钙 终 点
的 骨组 织 ， 脱 钙 后 的 重 量 比 脱 钙 前 均 减 少 附表 。
Ｃ液 ： ＨＣ Ｉ 、 甲酸、 ＡＩ Ｃ Ｉ 、 脱 钙液 ， 简称 Ｃ
琶 ７
．
液： 混台 固定液 １ Ｏ ｍ １ ， 生理盐水 ８ Ｏ ｍ １ ， 甲酸 ７ ｍｌ ， ＨＣ Ｉ ８ ｍｌ ， Ａｌ Ｃ ｌ ： （ 结 晶） ６ ｇ ， 冰醋酸 ２ ． ５
微波快速脱钙及其脱钙液的选择
第六图书馆 骨组织 超微结构 切片 制备 脱钙临床与实验病理学杂志杨传红 赖晃文广州军区广州总医院医学实验科1996第六图书馆
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起杈 伺 ｆ ｊ ， 驯
临床 与实验 南理 学杂 志 Ｊ Ｃ ｌ ｉ ｎ Ｅ ｘ ｐ Ｐ 拍 １ ９ ９ ６ ；Ｎ ｏ ｖ １ ２ （ ４ ）
ｍ１
２ ． ２ 不 同 条件 下所 需 的脱 钙 时 间
附衰
不 同条件下所 需 的脱 钙时间
１ ４ 仪器 微 波炉 ｓ Ａ ＭＰ Ｏ． ＭＩ — Ｃ １ ０ ２型微 波炉 ， 北 京 新 宝 电器 有 限公 司 生产 。 分 光 光 度 计： ７ ２ ５型 紫 外 光 栅 分 光 光 度 计 ， 上 海 第 三 分
１：１混台 固定 液 固定 ４ ｈ 。
１ ． ３ 三 种 脱钙 液配 方 “ Ａ 液： ４ ＥＤ ＴＡ一 ２ Ｎａ脱 钙 液 ． 以 下 简 称 Ａ液； Ｂ液 ： ＨＣ Ｉ 脱钙 液 ， 简 称 Ｂ液 ： 混 台 固 定 液 １ ０ｍｌ ， ＨＣＩ ８ｍｌ ， 蒸 馏水 ７ ５ｍｌ ；
； ～ ；
微 波 快 速 脱 钙 及 其 脱 钙 液 的选 择
杨传 虹 赖晃 文 赓云 姜 旁 英
◇ 技 术 交 流 ◇
ｆ ５ ｆ 、
பைடு நூலகம்
骨 组 织 超 薄切 片 的制 备 是 进 行 骨 组 织 超 微结 构研 究 的 先决 条件 常 规 脱 钙 方 法 时 问 太 长 且超馓 结 构 保 存 不 良 ． 不 利 于 临 床 病 理 的快 速诊 断 。我 们 选择 不 同脱 钙 液 在 微 渡 条 件 下 探 讨 快 速 脱 钙 的方 法 ， 以达 到 快 速 诊 断