栀子苷对大鼠肝指数、肝功能及肝脏微粒体中CYP3A2的影响

任公司产品 ；Ａ Ｔ Ｆ ＩＨ一１０ ００全 自动生化 分析仪 ， 南京劳 拉电子有限公 司产 品 ； Ｌ １８ Ｕ Ｔ ３６—３一Ｖ １ 低温冷 冻 ４超 柜， 产地美 国； Ｐ Ｕ Ａ— Ｌ Ｓ恒温振荡摇床 ， 产地美 国。
１４ ． 分 组 与 给 药 、
细胞 色 素 Ｃ Ｐ Ａ Ｙ ３ ２含量 ， 通过 红霉 素 Ｎ 一去 甲基 反 应 评 价 酶 活 性 。结果 ： 苷 大 剂 量组 对 大 鼠肝 功 能 有 损 害 ； 酶 活性 方 栀子 在 面 ， 子 苷小 、 大 ３个 剂量 组均 高 于空 白对 照 组 ， 有 统 计 栀 中、 差别
族 占 Ｐ５ ４ ０酶总 含量 的 ２ ％ ， Ｙ ３ ５ Ｃ Ｐ Ａ对 外 源性 物 质
代谢 ， 尤其是 对 药 物 代 谢 最 为 重 要 ， 临床 上 ６ ％ 的 ０ 药 物需 经 Ｃ Ｐ Ａ代 谢 以排 出体 外 。Ｃ Ｐ Ａ Ｙ３ Ｙ ３ ２是 存 在于 大 鼠肝 脏 中的重 要 药 物代 谢 酶 ， 大 鼠肝脏 内 在
主要表 达 Ｃ Ｐ Ａ 。Ｃ Ｐ Ａ在许 多 内源性 和外 源性 Ｙ３２ Ｙ３ 化合 物的氧化 与还 原代谢 中起 重要 作用 。本文 旨在 研究栀 子苷对 大 鼠肝脏 Ｃ Ｐ Ａ Ｙ ３ ２的影 响 ， 以期 为 进
一
冰 浴 ５ｒ ｎ 轻轻 搅拌 数次 ， ｉ， ａ 混合 液在 低 温 高速 离 心
中医 研 究
２１ ０ ０年 ３月 第 ２ ３卷 第 ３期
Ｔ Ｍ Ｒｅ． ｒｈ２ １ ｏ．３Ｎ ． Ｃ ｓＭａｃ ０ ０Ｖ １２ ｏ３
文章编号：０ １ ６ １ （０ ０ ０ ０ ２ ０ １０ — ９ ０ ２ １ ） ３— ０ ０— ３
・实 验 研 究
－
栀子苷对 大 鼠肝 指数 、 肝功能及肝脏微粒体 中 Ｃ Ｐ Ａ Ｙ ３ ２的影 响 水
步探 讨栀 子苷致 大 鼠肝 毒性 提供 实验依 据 。
值为 ７４的 ＴｉＨ １ 存液 （ ２％ 甘油 ， ， ． ｒ —Ｃ 贮 ｓ 含 ０ ４ｏ 轻 Ｃ）
柔 吹打 ， 后分装 ， 一 ０℃下保存备用 。 重悬 于 ８ １ ６ 牛 血清 白蛋 白标 准 曲线制 备 ． 配制 ４ ｍ ／ Ｌ牛血 清 白蛋 白储 备 液 ； ｇｍ 临用 前 配
（ Ｖ） Ｗ／ 比例加 入 Ｔ Ｓ缓 冲 液 于 玻 璃 管 内匀 浆 ， Ｍ 玻 璃管 置 于 冰 浴 中 ， 使 起 泡 。匀 浆 液 于 ４ ℃ 下 ， 勿 １ ０ ２０ ０ ｇ高速 离 心 ２ ｉ ， 沉 淀 ； 上 清 液 ， 每 ０ｒｎ 弃 ａ 取 按
毫 升上 清液加 ０ １ｍ ８ｍ ｌＬ Ｃ Ｃ ， ． Ｌ８ ｍｏ ａ １液 混匀 ， ／ 置
１ ２ 药 物 与 试 剂 ．
将 ０ ５ｍ ／ ． ｇ ｍＬ牛 血 清 白蛋 白使 用 液 稀 释 成 ０ ０ ， ． ２
０ ０ ，．６，． ８０ １ ，． ２ｍｇ ｍ ． ４ ０ ０ ０ ０ ，． ０ ０ １ ／ Ｌ系列 浓度 ， 取 各
别有 统计 学意 义 （ ００ ） Ｐ＜ ． １ 。结论 ： 子苷 具 有 肝 毒性 ， 可 能 栀 且 存在 基于 药物代 谢酶 机 制方 面 的 药 物 作用 ， 尚需进 一步 结合 此 代 谢方 面研 究 ， 综合分 析 、 明其作 用机 制。 以便 阐
关键 词 ： 子苷／ 栀 药效学 Ｃ Ｐ Ａ 大鼠 Ｙ３２ 中 图分类 号 ：２５５ Ｒ ８． 文献 标 志码 ： Ｂ 肝微 粒体 酶 活性
制成 ０ ５ｍｇ ｍ ． ／ Ｌ牛血清 白蛋 白
１ １ 动 物 ．
Ｓ Ｆ级 ｓ Ｐ Ｄ大 鼠 ， 雌雄各 半 ， 体质 量 １０— ２ ， ８ ２０ｇ
由河 南 医 科 大 学 动 物 中心 提 供 ， 可 证 号 ：Ｃ Ｋ 许 ＳＸ
（ ）０ ５— ０ １ 豫 ２０ ０ ０ 。
大 鼠， 肝脏 置于 一 ０℃冰箱 内保存 。 取 ８
１５ 肝微 粒体 制备 （ 沉 淀 法） ． 钙 …
Ｃ Ｐ Ａ是一 族重要 的 细胞 色 素 氧化 酶 ， Ｙ３ 在人 体
内主要 是 Ｃ Ｐ Ａ Ｙ ３ ４和 Ｃ Ｐ Ａ 。在 成人 肝 脏 中该 亚 Ｙ３７
肝 组 织 经 剪 碎 、 洗 、 干 后 称 重 ， １： 漂 吸 按 ４
学 意义 （ ００ ）但栀 子苷 大剂 量 组 明显低 于小 、 Ｐ＜ ．１ ， 中剂量 组 ， 差
将Ｓ Ｄ大 鼠 随机 分 成 空 白对 照 组 、 子 苷 药 物 栀 组 （ 剂量组 、 小 中剂 量 组 、 剂 量 组 ） 每 组 １ 大 ， ０只 。 空 白对 照 组 给 予 双 蒸 水 、 物 组 分 别 给 予 ６ ． ， 药 ２ ５ １ ５ ２ ０ｍｇ ｋ ２ ，５ ／ ｇ的栀子 苷水 溶 液 。各 组 动物 连 续灌 胃 ３ｄ 禁 食 ２ ， ４ｈ后 ， ４天股 动脉 取血 后断 头处 死 第
机上２ ０ ７０ ０ｇ离心 １ ｉ。弃 上 清 液 ， 所 得 沉 淀 ５ｍｎ 将
再用 １ｍ ＬＬ Ｔ ｓ （ ０ １ ｏ／ Ｃ ｐ ．０ ｏ／ ｆ 液 含 ．５ ｍ ＬＬＫ Ｉ，Ｈ ７ ４ ） ｉ
洗１ ， 次 沉淀 板按 初始匀浆 时每克肝 组织加 １ｍ Ｈ Ｌｐ
周 淑 娟 李 强 刘 卫 红 王 又红 ， ， ，
（． １ 河南 中 Ｉ学 院 ， 南 郑 州 ４ ０ ０ ； ． 南中 医学院 ｇ一 附属 医院 ， 南 郑 州 ４ ０ ０ ） Ｆ ， 河 ５０ ８ ２ 河 河 ５ ０ ０
摘要 目的 ： 究栀 子苷对 大 鼠肝指 数 、 研 肝功 能及肝 脏微 粒体 中 Ｃ ＰＡ 在 酶 活性方 面 的 影 响 ， 期 为 探 讨 栀 子 苷 致 大 鼠肝 毒 Ｙ３ ２ 以 性提 供 实验依 据 。方法 ： 紫外 分 光 光 度 法测 定 大 鼠肝 微 粒体 用