大鼠肝细胞微粒体及线粒体的脂肪酸组成分析
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（９３． １８）
ｉ ｏ ｐ ｏｅｈｌ Ｉ ｄ Ｄ ９１ ｅｅ ．３ ｅ ｆ ｓ ｙ－ ａ Ｎ －０ ｗ ｒ ９ ５－ ｓ ｈ ｔ Ａ ｎ ９ １１５ ％ ａｄ ． ９ ０．５ ， ｅ ｅｔ ｅ ．Ｔ ｅ ０．６ ｎ ９ ７ －１２３ ％ ｒｓ ｃｖｌ ｈ ９ ｐ ｉ ｙ ｃｅｆｉ ｔ ｏ ｖｒ ｔ ｎ ｒ ０５ ａｄ ０ ％， ｏｆｃ ｎｓ ａａｉ ｗ ｅ ６％ １ ２ ｉｅ ｆ ｉ ｏ ｅ ． ｎ ．
Ｔ ｅ ｌ ｒｔ ｎ ｔｒ ｍａ ｃｚｂ ｔｅ ｘｕ ｅ ｈ ｃ ｉ ａｉ ｆｃｏ ｏ ａｂ ｏ ａ ｆ ｎ ｏｅ ｉ ｈ ｍｉｔｒ ｉ ｎ ｓ ｃ ｓ ｔ １ ０ Ｔ ｅ ｅｎ ｌ ｎ ａｄ ｒ－ｕａｏ ）ｓ ｌ ｅ ０ ． ｈ ｉｔｒ ａ ｓａ ｄｒ （ ｔ ｔｎ ｌ ｉ ｏ ｏ ｎ ｔ ｔ ｂ ｅ
［］ ２ 肖功华 国外医学卫生学分册 ，，７（９１． ５２３１８） ［］ ３ Ｌ ｗｙ ａ ， ． ｉ．Ｃ ｅ ， ９ ，６ ．Ｈ．ｏ ｒ ｅ ｌ ＪＢｏ ｈｍ １３２５ ｔ ． ｌ
（９ ） １ ５１ ．
［ ］ ．． ａ ｄ ｎ ａ． ｉｃ ｅ ４ Ｆ ＪＬ ｎ ｏ ｅ ｌ，Ｂｏｈ ｍ．Ｐ ａｍａｏ． ３３ ５ ｔ ｈ ｒ ｃｌ，３ ， ５ ３ （９ ４ ． １８）
结果与讨论 用上述方法测定了正常大鼠肝细胞微粒体及线
粒体的脂肪酸组成 ， 见图２３图１ 。 为十三种脂肪酸 的 标准 色谱 图 。 由图１２ ３ 见 ， Ｏ －７填 充 柱在 可 用 Ｖ ２５ ２ｍ ｎ内即 可将 Ｃ２ Ｃ２ 之 间各主要脂 肪酸进行 ０ｉ １０ ２ ： ：
满意地分离， 这是一种比较理想的脂肪酸分离填充
［］ １ 王
Ａ ｗ， ｉｐｅ ａｃｒｔ ａｄ ｓｉ ｍ ｔ ｄ ｎ ｅ ｓ ｌ， ｃ ａ ｎ ｓｎｉｖ ｅｈ ｍ ｕ ｅ ｅ ｔ ｅ ｏ ｆ ｔｅ ｅｍ ｎｔｎ ｐｏｅｈｌ ｌ Ｎ －０ ｏ ｈ ｄｔ ｉ ｉ ｏ ｈｓｔｙ Ａ ａｄ ９１ ｒ ｅ ｒ ａ ｏ ｆ － ｎ Ｄ ｂ ｈａｓａｅ ｏ ａｏｒ ｈ ｈｓ ｎ ｖｌ ｅ ． ｙ ｄｐｃ ｃｒｍ ｔｇａ ｙ ｂｅ ｄ ｅ ｐｄ ｅ ｈ ｐ ａ ｅ ｅ ｏ
间（ 单位 ： ｉ） ｍ ｎ分别 为 ： ． ２ （ ０ ： ４ １ Ｃ ６）Ｃ ６３９ ）Ｃ６ ５ １ （．２ １： ０ （．４ 、 １０ ６２ ） Ｃ８ （．９ 、 １２ ８１ ） ４４ ） Ｃ８ （ ．４ 、 １ ６８ ） Ｃ８ （．８ 、 ： ： １ ：
Ｃ ８ ｎ （． ８ ２４－ １ ． ２ ２６－ １． ６ 。 １３６ ９３ ）Ｃ ０ ｎ （４ ２ ）Ｃ２ ｎ （８ ９ ） ： ：６ ：３
酸（１ ｎ） Ｃ８ －购自Ｆｕａ ３３ ｌ 公司， ｋ 所有标准品均为甲酯，
纯度 为９－ ９ ％。 ０ ９ （ 线粒 体及 微粒体 的制备 二） 将 Ｗｉａ 大 鼠断头处死 ， 新鲜肝组 织加入 冰 ｓｒ ｔ 取 冷 的 ０１ｍ ｌ Ｋ ｌ ．２ ｏ Ｌ ｉ Ｈ ｌ 冲液 ．５ ｏ／ Ｃ－ ０ｍ ｌ Ｔ ｓ Ｃ 缓 Ｌ ０ ／ ｒ－
顶空气谱 法的定量基础要求标样和试 样混合液
［］ ４ 化工部 化工 产品标准审 查委员会编 ，农药标准汇编 《 （９０ ）， １９年 罚中国标准 出版社 ， 京，．７ ，９１ 北 Ｐ ４３１９． （ 收稿 日期 ：９２ 月１ 日， １９年４ ７ 修回 日 ：月１ 日） 期 ８ ８
中的溶质、 介质必须一致（， ３ 因此， ） 为分析三乙膦酸
１， ０ 离心１ ｉ， ２０ ｇ ０ ０ ｎ将线粒体分离出来备用。 ｍ 再将
上清液采用钙沉淀法［，５０ｇ 离心１ｍｎ制成 ２ ２．０ ］ ５ ｉ， 微粒体备用。 以上操作均在０ ４ 下 进行。 ｏ ｒ 以Ｌｗ ｙ
氏法 〔测定线粒及微粒体的蛋 白含量 。 ３ 〕 （ 脂质 的 三） 提取 取 含 有４ ｇ 白的线 粒 体或 微粒 体 ， ｍ 氯 ｍ 蛋 用３ ｌ
（６８ 、１Ｃ （ ８６ ， ０ （ ３６ １． ％） ８ ４． ％） ２Ｃ ２． ％）和 ２Ｃ ２
６ ４ １８ ） ４ （９ ４ ．
（．％）我们的结果与其基本一致。 ８０ 。 从我们测定的 结果（ ） 表１可见， 肝细胞微粒体及线粒体的脂肪酸组
成及含量 比较相近 。
表 １ 脂 肪 酸 的 组 成 及 百分 含量 （ 甲 酯 总 量 以 １０ ０计 ）
国内尚未见报道。 我们应用Ｏ －７填充柱对大鼠肝 Ｖ ２５
细胞微粒体及线粒体 中的脂肪酸 组成进行 了气相 色 谱分 析 ， ２ｍｉ 内各主要 脂 肪酸均 得 到 比较 满 在 ０ ｎ之 意的分离 。
（Ｈ７４中制成１６ ｐ ．） ：匀浆， 然后采用差速离心法以 ６０ 离心５ ｎ去除结缔组织、 ０ ｍｉ， 完整细胞和胞核，
为丰富。 线粒体是细胞能量代谢的中心， 是细胞有氧
呼吸 的基 地和供 能的场 所 ， 细胞 生命活 动 中需 要的 能量 ， 约有 ９％由线 粒体 供应 。 ５ 微粒 体 （ ｃ ｓｍ ） ｍｉｏｏ ｅ ｒ
主要是细胞质内一些微细的内质网多能性结构， 它
与肝脏 的解毒 功能有关 。 脂肪 酸是 微粒体及线粒 体中重要 的化学组成之 一， 对维持其正常 的生理功能有 着重要 的意 义〔。 １有 〕 关肝 细 胞微粒体及 线粒 体的脂 肪酸组 成分 析， 目前
色谱 柱 。 肝细胞 微粒体 及线粒 体 内的 脂肪酸经 定性
Ａ 压 ｋ ， 温 ８ ４ｎ ８ ２ ｉ 力０ ａ １ ｍ ） ／ｉ ２ ｒ Ｐ 柱 ０（ ｉ ０
（ｍｎ ， 测 器及 汽 化室 温度 ２０ ， ８ ｉ）检 ４ 纸速 ２５ ｍ／ ．ｍ
ｍ 。
分析， 有九种主要脂肪酸得到了确认， 它们的保留时
ｔｃ ｏ ｄ ｉ ａ ｄ ｉｒ ｓ ｍｅ ｆ ｖ ｒ ｅｌ Ｒａｓ ｏ ｈ ｎ ｒａ ｎ Ｍ ｃ ｏ ｏ ｏ Ｌｉｅ Ｃ ｌ ｉ ｎ ｔ
［］ ５ 中国医学科学 院卫 生研究所食品卫 生研 究室营 养组 ， 卫生研究 ，，２（９７． ４２８１７） ［］ ６ 中国医学科学院卫 生研究所食品卫生研 究室营 养组 ，
中华预防医学杂志 ４２３１７） ，４（９９． （ 收稿日 ： ９年５ ４ ， 期 １ ２ 月１日 修回日 ７ ０ ） ９ 期： 月１日 Ｔ ｅ ａ ｓ ｏ Ｆｔ Ａ ｉ Ｃ ｍ ｏｉｏ ｉ Ｍｉ ｈ Ａ ｌ ｉ ｆ ｔ ｃ ｏ ｐｓｉ ｎ － ｎ ｙ ｓ ａ ｙ ｄ ｔ ｎ
实验部分
（ 脂肪 酸标 准 品 一） 月桂酸 （ １ ）豆蔻酸（ １０、 Ｃ２ 、 ： ０ Ｃ４）软脂酸 （ １０、 ： Ｃ６）硬 ：
仿 甲醇－ Ｃ （ ： ：．２Ｖ Ｖ） 合 液 ， 烈 振 摇 Ｈ ｌ２ １ ００ ， ／ 混 猛
标准 品制备成 定性溶 液 ， 分别与 样品 中各组分 的保 留时 间进 行比较 。） ２加标准物 ， 其相应的峰增 高且峰 宽保持不变 。） ３用不同的柱温相结 合（ 恒温和 程序升 温） 进行 定性 。 定量分 析 在 Ｃ Ｒ Ａ 数据处 理机上进 行 ， － ２Ｘ 采
ｖ ｒｉ Ｃ ａ ｇ ｈ ｎ １ ０１ ｅｓｙ， ｈ ｎ ｃｕ ， ３ １ ８ ｔ
率提高， 峰高明显增加， 从而影响定量的准确性。
（ 小结 六） 本 法简便 、 、 快速 经济可靠 、 灵敏度 高、 线性 范围
宽， 除用于原药、 制剂分析外， 还可用于三乙膦酸铝
的残留分析和作用机制 、 导代谢等研 究工作。 输 致谢 本文 由刘伊玲教授 审阅 ， 深表谢意 。 在此 参
成熟红细胞外 ， 遍存在于各种细 胞中 ， 细胞 内尤 普 肝
脂酸（１ ）花生酸（２ ） Ｃ８ 、 ： ０ Ｃ０ 购自上海试剂一厂， ： ０ 软脂 油酸 （ ６ 、－ 麻酸 （ １３ ） 花生 四烯 酸 Ｃ１） 亚 ： Ｃ８ｎ 、 ：６
（２ ４）二十碳五烯酸 （２５３、 Ｃ０ － 、 ： Ｃ０ｎ）芥子 酸（ ２：、 ：－ Ｃ２ ）二 十二 碳 六 烯 酸 （ ２６３ 购 自 ＳＧ Ｃ２ｎ） ：－ Ｉ ＭＡ 公 司 ， 酸 油 （ １１、 Ｃ８）亚油酸 （１２购 自 Ｅ Ｍｅｃ 公 司， ： Ｃ８） ： ． ｒｋ 次亚麻油
２Ｌ－超速离心 机（Ｅ Ｋ Ｎ产 品） ．７ ５ ５ Ｂ Ｃ ＭＡ 。
Baidu Nhomakorabea（ 定性和定量 六）
定性分析 １比较 保留时间 （）将脂 肪酸 甲酯 ） ｔ： ｒ
表１ 显示出正常大鼠肝细胞微粒体及线粒体脂
肪酸 的组成 及含量 。 中所列 数据是将 九 只实验动 表
５．０ ； ３７ 单不饱和脂肪酸含量较少， 约占全部脂肪
酸 含量的 １％。 细胞微 粒体 中脂肪酸 含量若 以碳 ０ 肝
物的新鲜肝组织混合制成匀浆后进行测定的。 从测
定结 果看 ， 肝细 胞微粒体 和线 粒体 中多不饱和 脂肪
酸含量较多， 分别占全部脂肪酸含量的４．６ ９７％和
链的长度来分配， 则其浓度分别为１Ｃ（１６ 、 ６ ２．％） １Ｃ ４．％）２Ｃ（６１ 和２Ｃ ６４ 。 ８ （５９ ０ ２．％） ２ （．％）据文献 ［］ １报道， 大鼠肝细胞微粒体脂肪酸组成为１Ｃ ６
ｄｆｅ ｅ ｔ ｏ ｅｈ ｎ ｌ ｓ ｌ ｅｆｃｓ Ｔｈ ｒｃ ｖ ｒ ｉｆｒ ｎ ｆ ｍ ｔ ａ ｏ ｉ ａｔ ｅ ｔ． ｒ ｎ ｆ ｅ ｏ ｅ－ ｅ
考
文
献
仪等， 农药 ，０６ ，２１９） ３ （）２（９１．
［ ］ ． ． ｌｎｗ ｒ ｅ ａ ，Ｊ Ｆ ｏ Ｓｉ，４ ，９ ２ Ｔ Ａ Ｈｏｉｇ ｏｔ ｔ ｌ ｈ ｌ ． ｏ ｄ ． ８ ２０ ． ｃ
５ｉ ｍｎ提取脂质［ ００ 离心１ｍｎ用毛滴管将有 ］１０ ０ ｉ，
机层转移 至另一试管 中， ０ 在６ ℃水浴 中挥 去有机 物。 （ 甲酯化 四） 将 残 渣 用 ０５ ｌ 石 油 醚 （ ： ） 解 ， 入 ．ｍ 苯－ １１溶 加
０５ ｌ ｍ ｌ Ｋ Ｈ 甲醇溶液， ．ｍ ０４ ｏ／ Ｏ － ． Ｌ 混匀， 在室温下静 置１ｍｎ加入双蒸水终止反应， ０ ｉ， 取出有机层以无水
ｒｓｅｔ ｅｙ ｅｐ ｃｉ ｌ． ｖ
［ 李 ３ ］ 世壮等译， 《 液上气相色谱分析》上海科学技术出 ，
版社 ， 上海 ，． ，９１ Ｐ １１８．
大鼠肝细胞微粒体及线粒体的脂肪酸组成分析
满洪升 刘晓芳 仲来福 叶建新
（ 大连 医学院 ，１０３ １６２ ）
线粒体（ｉｃｏｄｉ） ｍｔ ｈｎｒ 是一种重要的细胞器， ｏ ａ 除
铝 及其混剂做 了各种 测定和 校正 。 分析 误 差主要来 源 于采样 ， 要 防止液化 又要 保持 反应瓶 内压 力的 既 恒 定。 同一温度 下 ， 压力 降低 ， 乙醇和 叔丁醇 的汽 化
Ｑ ａ ｔａｉ Ａ ａ ｓ ｏ Ｐ ｏｅ ｙ Ａ ａｄ － ｕｎｉ ｔｅ ｌ ｉ ｆ ｓｔ ｌ １ Ｎ ｔ ｖ ｎ ｙ ｓ ｈ ｈ － ｎ Ｄ ９１（ ｈｓ ｈ ｌ ｌ Ｍａｃｚｂ ｂ ａ ｅｄｐｃ ０ Ｐ ｏｅ ｙ Ａ ＋ ｔ － ｎｏｅ ） ｙ Ｈ ａｓａｅ Ｃ ｒｍ ｔ ｒｐｙ ｎ ｉｉ ，Ｓｎ Ｓ ｕａ ，Ｍａ ｈｏ ａｏ ａｈ Ｆ Ｚ ｘａ ｇ ａ ｈ ｎ ｏｇ ｙ ｏ ｈ Ｆ ｎｕ ｄ ｎ Ｚｑ ｎ ，Ｊｌ Ａ ｒ ｕｔ ａ Ｕ ｉ ａ ｒ ａ Ｌ ｇ ｉ ｇ ｉｎ ｉ ｌ ｒｌ － ｎ ｏ ｉａ ｉ ｇｃ ｕ ｎ
硫酸钠脱水 。 不澄 清 ， 入１ 滴 无水乙醇（ 如 可加 －２ ５ ）
用面积归一化法直接计算各组分在脂肪酸总量中所
占的重量百分 比（。 ）
（ 仪器和实验条件 五）
１Ｇ －Ａ ． Ｃ ７ Ｇ气相色 谱仪 （ｈ ａｚ 产 品）检 测 Ｓ ｉ ｄｕ ｍ ， 器 ＦＤ， － ２ Ｘ数 据处 理机 ，．ｍ ３２ ｍ 玻璃 Ｉ ＣＲ Ａ ２１ ．ｍ 柱， 固定液 为 １ Ｏ －７ （ 兰 Ｃ ｒｍ ａｋ产品 ） ０ Ｖ ２ ５荷 ｈｏ ｐｃ ， 担 体 为 Ｃ ｒｍ ｏｂ Ａ ｉ Ｗａｈｄ– ． ． 口分 ｈｏ ｓｒ Ｗ ｃ ｄ ｓｅ Ｃ Ｎ 进 装 ）载气 （ ， 高纯 Ｎ ） 前压 力８ｋ ａＨ 压力 ６ｋ ａ ２柱 ５Ｐ ， ２ ５Ｐ ，
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［］ ２ 肖功华 国外医学卫生学分册 ，，７（９１． ５２３１８） ［］ ３ Ｌ ｗｙ ａ ， ． ｉ．Ｃ ｅ ， ９ ，６ ．Ｈ．ｏ ｒ ｅ ｌ ＪＢｏ ｈｍ １３２５ ｔ ． ｌ
（９ ） １ ５１ ．
［ ］ ．． ａ ｄ ｎ ａ． ｉｃ ｅ ４ Ｆ ＪＬ ｎ ｏ ｅ ｌ，Ｂｏｈ ｍ．Ｐ ａｍａｏ． ３３ ５ ｔ ｈ ｒ ｃｌ，３ ， ５ ３ （９ ４ ． １８）
结果与讨论 用上述方法测定了正常大鼠肝细胞微粒体及线
粒体的脂肪酸组成 ， 见图２３图１ 。 为十三种脂肪酸 的 标准 色谱 图 。 由图１２ ３ 见 ， Ｏ －７填 充 柱在 可 用 Ｖ ２５ ２ｍ ｎ内即 可将 Ｃ２ Ｃ２ 之 间各主要脂 肪酸进行 ０ｉ １０ ２ ： ：
满意地分离， 这是一种比较理想的脂肪酸分离填充
［］ １ 王
Ａ ｗ， ｉｐｅ ａｃｒｔ ａｄ ｓｉ ｍ ｔ ｄ ｎ ｅ ｓ ｌ， ｃ ａ ｎ ｓｎｉｖ ｅｈ ｍ ｕ ｅ ｅ ｔ ｅ ｏ ｆ ｔｅ ｅｍ ｎｔｎ ｐｏｅｈｌ ｌ Ｎ －０ ｏ ｈ ｄｔ ｉ ｉ ｏ ｈｓｔｙ Ａ ａｄ ９１ ｒ ｅ ｒ ａ ｏ ｆ － ｎ Ｄ ｂ ｈａｓａｅ ｏ ａｏｒ ｈ ｈｓ ｎ ｖｌ ｅ ． ｙ ｄｐｃ ｃｒｍ ｔｇａ ｙ ｂｅ ｄ ｅ ｐｄ ｅ ｈ ｐ ａ ｅ ｅ ｏ
间（ 单位 ： ｉ） ｍ ｎ分别 为 ： ． ２ （ ０ ： ４ １ Ｃ ６）Ｃ ６３９ ）Ｃ６ ５ １ （．２ １： ０ （．４ 、 １０ ６２ ） Ｃ８ （．９ 、 １２ ８１ ） ４４ ） Ｃ８ （ ．４ 、 １ ６８ ） Ｃ８ （．８ 、 ： ： １ ：
Ｃ ８ ｎ （． ８ ２４－ １ ． ２ ２６－ １． ６ 。 １３６ ９３ ）Ｃ ０ ｎ （４ ２ ）Ｃ２ ｎ （８ ９ ） ： ：６ ：３
酸（１ ｎ） Ｃ８ －购自Ｆｕａ ３３ ｌ 公司， ｋ 所有标准品均为甲酯，
纯度 为９－ ９ ％。 ０ ９ （ 线粒 体及 微粒体 的制备 二） 将 Ｗｉａ 大 鼠断头处死 ， 新鲜肝组 织加入 冰 ｓｒ ｔ 取 冷 的 ０１ｍ ｌ Ｋ ｌ ．２ ｏ Ｌ ｉ Ｈ ｌ 冲液 ．５ ｏ／ Ｃ－ ０ｍ ｌ Ｔ ｓ Ｃ 缓 Ｌ ０ ／ ｒ－
顶空气谱 法的定量基础要求标样和试 样混合液
［］ ４ 化工部 化工 产品标准审 查委员会编 ，农药标准汇编 《 （９０ ）， １９年 罚中国标准 出版社 ， 京，．７ ，９１ 北 Ｐ ４３１９． （ 收稿 日期 ：９２ 月１ 日， １９年４ ７ 修回 日 ：月１ 日） 期 ８ ８
中的溶质、 介质必须一致（， ３ 因此， ） 为分析三乙膦酸
１， ０ 离心１ ｉ， ２０ ｇ ０ ０ ｎ将线粒体分离出来备用。 ｍ 再将
上清液采用钙沉淀法［，５０ｇ 离心１ｍｎ制成 ２ ２．０ ］ ５ ｉ， 微粒体备用。 以上操作均在０ ４ 下 进行。 ｏ ｒ 以Ｌｗ ｙ
氏法 〔测定线粒及微粒体的蛋 白含量 。 ３ 〕 （ 脂质 的 三） 提取 取 含 有４ ｇ 白的线 粒 体或 微粒 体 ， ｍ 氯 ｍ 蛋 用３ ｌ
（６８ 、１Ｃ （ ８６ ， ０ （ ３６ １． ％） ８ ４． ％） ２Ｃ ２． ％）和 ２Ｃ ２
６ ４ １８ ） ４ （９ ４ ．
（．％）我们的结果与其基本一致。 ８０ 。 从我们测定的 结果（ ） 表１可见， 肝细胞微粒体及线粒体的脂肪酸组
成及含量 比较相近 。
表 １ 脂 肪 酸 的 组 成 及 百分 含量 （ 甲 酯 总 量 以 １０ ０计 ）
国内尚未见报道。 我们应用Ｏ －７填充柱对大鼠肝 Ｖ ２５
细胞微粒体及线粒体 中的脂肪酸 组成进行 了气相 色 谱分 析 ， ２ｍｉ 内各主要 脂 肪酸均 得 到 比较 满 在 ０ ｎ之 意的分离 。
（Ｈ７４中制成１６ ｐ ．） ：匀浆， 然后采用差速离心法以 ６０ 离心５ ｎ去除结缔组织、 ０ ｍｉ， 完整细胞和胞核，
为丰富。 线粒体是细胞能量代谢的中心， 是细胞有氧
呼吸 的基 地和供 能的场 所 ， 细胞 生命活 动 中需 要的 能量 ， 约有 ９％由线 粒体 供应 。 ５ 微粒 体 （ ｃ ｓｍ ） ｍｉｏｏ ｅ ｒ
主要是细胞质内一些微细的内质网多能性结构， 它
与肝脏 的解毒 功能有关 。 脂肪 酸是 微粒体及线粒 体中重要 的化学组成之 一， 对维持其正常 的生理功能有 着重要 的意 义〔。 １有 〕 关肝 细 胞微粒体及 线粒 体的脂 肪酸组 成分 析， 目前
色谱 柱 。 肝细胞 微粒体 及线粒 体 内的 脂肪酸经 定性
Ａ 压 ｋ ， 温 ８ ４ｎ ８ ２ ｉ 力０ ａ １ ｍ ） ／ｉ ２ ｒ Ｐ 柱 ０（ ｉ ０
（ｍｎ ， 测 器及 汽 化室 温度 ２０ ， ８ ｉ）检 ４ 纸速 ２５ ｍ／ ．ｍ
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分析， 有九种主要脂肪酸得到了确认， 它们的保留时
ｔｃ ｏ ｄ ｉ ａ ｄ ｉｒ ｓ ｍｅ ｆ ｖ ｒ ｅｌ Ｒａｓ ｏ ｈ ｎ ｒａ ｎ Ｍ ｃ ｏ ｏ ｏ Ｌｉｅ Ｃ ｌ ｉ ｎ ｔ
［］ ５ 中国医学科学 院卫 生研究所食品卫 生研 究室营 养组 ， 卫生研究 ，，２（９７． ４２８１７） ［］ ６ 中国医学科学院卫 生研究所食品卫生研 究室营 养组 ，
中华预防医学杂志 ４２３１７） ，４（９９． （ 收稿日 ： ９年５ ４ ， 期 １ ２ 月１日 修回日 ７ ０ ） ９ 期： 月１日 Ｔ ｅ ａ ｓ ｏ Ｆｔ Ａ ｉ Ｃ ｍ ｏｉｏ ｉ Ｍｉ ｈ Ａ ｌ ｉ ｆ ｔ ｃ ｏ ｐｓｉ ｎ － ｎ ｙ ｓ ａ ｙ ｄ ｔ ｎ
实验部分
（ 脂肪 酸标 准 品 一） 月桂酸 （ １ ）豆蔻酸（ １０、 Ｃ２ 、 ： ０ Ｃ４）软脂酸 （ １０、 ： Ｃ６）硬 ：
仿 甲醇－ Ｃ （ ： ：．２Ｖ Ｖ） 合 液 ， 烈 振 摇 Ｈ ｌ２ １ ００ ， ／ 混 猛
标准 品制备成 定性溶 液 ， 分别与 样品 中各组分 的保 留时 间进 行比较 。） ２加标准物 ， 其相应的峰增 高且峰 宽保持不变 。） ３用不同的柱温相结 合（ 恒温和 程序升 温） 进行 定性 。 定量分 析 在 Ｃ Ｒ Ａ 数据处 理机上进 行 ， － ２Ｘ 采
ｖ ｒｉ Ｃ ａ ｇ ｈ ｎ １ ０１ ｅｓｙ， ｈ ｎ ｃｕ ， ３ １ ８ ｔ
率提高， 峰高明显增加， 从而影响定量的准确性。
（ 小结 六） 本 法简便 、 、 快速 经济可靠 、 灵敏度 高、 线性 范围
宽， 除用于原药、 制剂分析外， 还可用于三乙膦酸铝
的残留分析和作用机制 、 导代谢等研 究工作。 输 致谢 本文 由刘伊玲教授 审阅 ， 深表谢意 。 在此 参
成熟红细胞外 ， 遍存在于各种细 胞中 ， 细胞 内尤 普 肝
脂酸（１ ）花生酸（２ ） Ｃ８ 、 ： ０ Ｃ０ 购自上海试剂一厂， ： ０ 软脂 油酸 （ ６ 、－ 麻酸 （ １３ ） 花生 四烯 酸 Ｃ１） 亚 ： Ｃ８ｎ 、 ：６
（２ ４）二十碳五烯酸 （２５３、 Ｃ０ － 、 ： Ｃ０ｎ）芥子 酸（ ２：、 ：－ Ｃ２ ）二 十二 碳 六 烯 酸 （ ２６３ 购 自 ＳＧ Ｃ２ｎ） ：－ Ｉ ＭＡ 公 司 ， 酸 油 （ １１、 Ｃ８）亚油酸 （１２购 自 Ｅ Ｍｅｃ 公 司， ： Ｃ８） ： ． ｒｋ 次亚麻油
２Ｌ－超速离心 机（Ｅ Ｋ Ｎ产 品） ．７ ５ ５ Ｂ Ｃ ＭＡ 。
Baidu Nhomakorabea（ 定性和定量 六）
定性分析 １比较 保留时间 （）将脂 肪酸 甲酯 ） ｔ： ｒ
表１ 显示出正常大鼠肝细胞微粒体及线粒体脂
肪酸 的组成 及含量 。 中所列 数据是将 九 只实验动 表
５．０ ； ３７ 单不饱和脂肪酸含量较少， 约占全部脂肪
酸 含量的 １％。 细胞微 粒体 中脂肪酸 含量若 以碳 ０ 肝
物的新鲜肝组织混合制成匀浆后进行测定的。 从测
定结 果看 ， 肝细 胞微粒体 和线 粒体 中多不饱和 脂肪
酸含量较多， 分别占全部脂肪酸含量的４．６ ９７％和
链的长度来分配， 则其浓度分别为１Ｃ（１６ 、 ６ ２．％） １Ｃ ４．％）２Ｃ（６１ 和２Ｃ ６４ 。 ８ （５９ ０ ２．％） ２ （．％）据文献 ［］ １报道， 大鼠肝细胞微粒体脂肪酸组成为１Ｃ ６
ｄｆｅ ｅ ｔ ｏ ｅｈ ｎ ｌ ｓ ｌ ｅｆｃｓ Ｔｈ ｒｃ ｖ ｒ ｉｆｒ ｎ ｆ ｍ ｔ ａ ｏ ｉ ａｔ ｅ ｔ． ｒ ｎ ｆ ｅ ｏ ｅ－ ｅ
考
文
献
仪等， 农药 ，０６ ，２１９） ３ （）２（９１．
［ ］ ． ． ｌｎｗ ｒ ｅ ａ ，Ｊ Ｆ ｏ Ｓｉ，４ ，９ ２ Ｔ Ａ Ｈｏｉｇ ｏｔ ｔ ｌ ｈ ｌ ． ｏ ｄ ． ８ ２０ ． ｃ
５ｉ ｍｎ提取脂质［ ００ 离心１ｍｎ用毛滴管将有 ］１０ ０ ｉ，
机层转移 至另一试管 中， ０ 在６ ℃水浴 中挥 去有机 物。 （ 甲酯化 四） 将 残 渣 用 ０５ ｌ 石 油 醚 （ ： ） 解 ， 入 ．ｍ 苯－ １１溶 加
０５ ｌ ｍ ｌ Ｋ Ｈ 甲醇溶液， ．ｍ ０４ ｏ／ Ｏ － ． Ｌ 混匀， 在室温下静 置１ｍｎ加入双蒸水终止反应， ０ ｉ， 取出有机层以无水
ｒｓｅｔ ｅｙ ｅｐ ｃｉ ｌ． ｖ
［ 李 ３ ］ 世壮等译， 《 液上气相色谱分析》上海科学技术出 ，
版社 ， 上海 ，． ，９１ Ｐ １１８．
大鼠肝细胞微粒体及线粒体的脂肪酸组成分析
满洪升 刘晓芳 仲来福 叶建新
（ 大连 医学院 ，１０３ １６２ ）
线粒体（ｉｃｏｄｉ） ｍｔ ｈｎｒ 是一种重要的细胞器， ｏ ａ 除
铝 及其混剂做 了各种 测定和 校正 。 分析 误 差主要来 源 于采样 ， 要 防止液化 又要 保持 反应瓶 内压 力的 既 恒 定。 同一温度 下 ， 压力 降低 ， 乙醇和 叔丁醇 的汽 化
Ｑ ａ ｔａｉ Ａ ａ ｓ ｏ Ｐ ｏｅ ｙ Ａ ａｄ － ｕｎｉ ｔｅ ｌ ｉ ｆ ｓｔ ｌ １ Ｎ ｔ ｖ ｎ ｙ ｓ ｈ ｈ － ｎ Ｄ ９１（ ｈｓ ｈ ｌ ｌ Ｍａｃｚｂ ｂ ａ ｅｄｐｃ ０ Ｐ ｏｅ ｙ Ａ ＋ ｔ － ｎｏｅ ） ｙ Ｈ ａｓａｅ Ｃ ｒｍ ｔ ｒｐｙ ｎ ｉｉ ，Ｓｎ Ｓ ｕａ ，Ｍａ ｈｏ ａｏ ａｈ Ｆ Ｚ ｘａ ｇ ａ ｈ ｎ ｏｇ ｙ ｏ ｈ Ｆ ｎｕ ｄ ｎ Ｚｑ ｎ ，Ｊｌ Ａ ｒ ｕｔ ａ Ｕ ｉ ａ ｒ ａ Ｌ ｇ ｉ ｇ ｉｎ ｉ ｌ ｒｌ － ｎ ｏ ｉａ ｉ ｇｃ ｕ ｎ
硫酸钠脱水 。 不澄 清 ， 入１ 滴 无水乙醇（ 如 可加 －２ ５ ）
用面积归一化法直接计算各组分在脂肪酸总量中所
占的重量百分 比（。 ）
（ 仪器和实验条件 五）
１Ｇ －Ａ ． Ｃ ７ Ｇ气相色 谱仪 （ｈ ａｚ 产 品）检 测 Ｓ ｉ ｄｕ ｍ ， 器 ＦＤ， － ２ Ｘ数 据处 理机 ，．ｍ ３２ ｍ 玻璃 Ｉ ＣＲ Ａ ２１ ．ｍ 柱， 固定液 为 １ Ｏ －７ （ 兰 Ｃ ｒｍ ａｋ产品 ） ０ Ｖ ２ ５荷 ｈｏ ｐｃ ， 担 体 为 Ｃ ｒｍ ｏｂ Ａ ｉ Ｗａｈｄ– ． ． 口分 ｈｏ ｓｒ Ｗ ｃ ｄ ｓｅ Ｃ Ｎ 进 装 ）载气 （ ， 高纯 Ｎ ） 前压 力８ｋ ａＨ 压力 ６ｋ ａ ２柱 ５Ｐ ， ２ ５Ｐ ，