呼吸系统疾病动物模型1上课讲义
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豚鼠是筛选镇咳药(antitu能诱发咳嗽，但其 咳嗽与喷嚏动作很难区别，变异较大，特别是反 复刺激时变异更大，故小鼠主要作为初筛镇咳药 时使用。
一、小鼠氨水引咳法
[造模原理] 浓氨水是一种较强的化学刺激物，动物吸入氨 水气雾后，刺激呼吸道感受器，引起咳嗽。 [动物和主要器材] 成年小鼠,性别不拘。500ml玻璃罩; 空气压缩 机(或脚踏风箱)。
2.豚鼠的咳嗽声响亮，应以能听到声音为咳嗽。 3.实验前1日豚鼠应预先挑选，喷雾后5 min内咳嗽 次数少于10次者应予以淘汰。
第二节
支气管哮喘动物模型
支气管哮喘(bronchial asthma)简称哮喘，是 气道的一种慢性变态反应性炎症性疾病。哮喘是 由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎 症细胞参与的慢性气道炎症，由此导致患者的气 道高反应性（气道对各种刺激因素出现过强或过 早的收缩反应），造成气道缩窄，气流受阻。
[模型评价与注意事项] 1.氨水诱发小鼠咳嗽反应变异性较大,可在初筛止咳药 时应用。 2.咳嗽潜伏期是指从喷入氨水开始至发生咳嗽所需的 时间(秒数)。小鼠咳嗽以腹肌收缩(缩胸)，同时张大嘴 为准，有时可有咳嗽声，观察必须仔细，也可用听诊器 听咳嗽声。 3.避免腹腔注射给予受试药,以免干扰动物的咳嗽反 应。
咳嗽动物模型 支气管哮喘动物模型
慢性支气管炎模型 肺气肿和肺心病动物模型
肺水肿动物模型 肺纤维化动物模型 肺结核病动物模型 肺硅沉着症动物模型
第一节
咳嗽动物模型
咳嗽是呼吸系统多种疾病的常见症状。确定受试 药物的镇咳作用,可采用小鼠氨水或二氧化硫引咳 法及豚鼠枸橼酸引咳法两种模型加以确定, 并与阳 性药物进行同步观察。
速发相阶段:肥大细胞是主要效应细胞，致敏抗 原与肥大细胞表面IgE抗体结合。当相同抗原再次 进入机体后，引发肥大细胞脱颗粒，释放组胺、 5-羟色胺等炎症介质，导致支气管痉挛、气管粘 膜微血管通透性增加、气管粘膜水肿和粘液分泌 亢进。
临床上表现为反复发作性喘息、呼气性呼吸困 难和胸闷等症状。哮喘是一种常见疾病，全球约 有1亿5千万，我国约有1千5百万哮喘病人，已成 为严重威胁人类健康的疾病之一。
哮喘的发病机制尚不完全清楚，有许多因素参 与。过去认为哮喘是IgE介导的I型超敏反应性疾 病，目前认识到哮喘是以气道高反应性为主要特 征的慢性气道炎症性疾病。哮喘发病分为速发相 和迟发相两个阶段。
二、小鼠二氧化硫引咳法
[造模原理] 二氧化硫是一种强的化学刺激物质,动物吸入 其气雾后刺激呼吸道感受器,反射性引起咳嗽。 无水亚硫酸钠与硫酸反应生成SO2。
[操作步骤] 用一带侧口的三角烧瓶,侧口通过橡皮管与
球囊连接,烧瓶内盛有无水亚硫酸钠,烧瓶塞上装一 滴定管,内灌硫酸，打开滴定管的活塞使硫酸滴到 亚硫酸钠上，在烧瓶内产生SO2气体，气体储存 于球囊内，用血管钳夹紧，应用时用注射器吸取 4~10ml，注入放置实验小鼠的广口瓶内。
×100%
模型组咳嗽潜伏期
[注意事项] 1.烧杯内SO2的浓度要求在1:50000，该浓度足以引 起咳嗽，如浓度过高(如1:10000)易造成动物中毒死亡。 2.实验中SO2产生的多少与实验室温度、无水亚硫酸 钠的量关系密切，故无水亚硫酸钠的称量应准确。
3.SO2引咳的个体差异较大,实验时应尽量减少各方面 误差。
3.观察药物的止咳作用 小鼠按体重均分3组，给药组灌 胃给予受试药，模型组灌胃给予等体积生理盐水，阳性对 照药组腹腔注射磷酸可待因30 mg/kg体重。灌胃给予受 试药1 h或腹腔注射给药30 min后，将小鼠置于充满SO2 的烧杯内，观察咳嗽潜伏期，按下式计算药物止咳率：
给药组咳嗽潜伏期
药物止咳率（%）＝
三、豚鼠枸橼酸引咳法
[造模原理] 豚鼠吸入枸橼酸溶液喷雾后，刺激呼吸道粘膜感受器， 反射性引起咳嗽。 [动物和主要器材] 体重200~250g豚鼠。 2~4L玻璃罩; 空气压缩机。
豚鼠体型短粗而圆，头较大，眼大而圆还 明亮，耳圆，上唇分裂，耳朵短小；四肢 短，前脚具4趾，后脚3趾，无外尾。
[操作步骤] 1.将豚鼠置于玻璃干燥器内,用超声雾化器喷入17.5%枸 橼酸雾化气5~10s，观察、记录豚鼠咳嗽潜伏期或记录 5min内豚鼠的咳嗽次数。
[操作步骤] 1.小鼠置玻璃罩内→空气压缩机以400mmHg 恒压将氨水喷入罩内→喷雾5s→记录动物咳嗽潜 伏期和2min内咳嗽次数。也可用引起一半小鼠咳 嗽的喷雾时间(FDT50)为指标。 2.观察药物的止咳作用 小鼠按体重均分3组，每 组至少15只小鼠。给药组灌服受试药，模型组灌服 等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待 因30mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h后、腹腔注 射给予受试药30min后开始喷雾。喷雾一定时间， 终止喷雾，观察咳嗽反应。
2.观察药物的止咳作用 将豚鼠按体重随机分为3组,给 药组灌胃给予受试药,模型组灌胃给予等体积生理盐水, 阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因5mg/kg体重。灌胃 给予受试药1 h或腹腔注射给药30min后，按上述方法 引咳,评受试药的止咳效果。
[模型评价与注意事项] 1.豚鼠对化学性刺激物很敏感,刺激后能诱发咳嗽,动 物容易得到。二氧化硫引咳法、氨水引咳法和枸橼酸 引咳法是研究止咳药的三种常用方法，前二者系用小 鼠，费用较低廉，适合于研究止咳药效果的初筛，确 定效果后，再用豚鼠作进一步研究。
呼吸系统疾病 动物模型
2010342062 石晓征
呼吸系统疾病是一种常见病、多发病， 主要病变在气管、支气管、肺部及胸腔， 病变轻者多咳嗽、胸痛、呼吸受影响，重 者呼吸困难、缺氧，甚至呼吸衰竭而致死。 在城市的死亡率占第３位，而在农村则占 首位。更应重视的是由于大气污染、吸烟、 人口老龄化及其他因素，使国内外的慢性 阻塞性肺病（简称慢阻肺，包括慢性支气 管炎、肺气肿、肺心病）、支气管哮喘、 肺癌、肺部弥散性间质纤维化，以及肺部 感染等疾病的发病率、死亡率有增无减。
一、小鼠氨水引咳法
[造模原理] 浓氨水是一种较强的化学刺激物，动物吸入氨 水气雾后，刺激呼吸道感受器，引起咳嗽。 [动物和主要器材] 成年小鼠,性别不拘。500ml玻璃罩; 空气压缩 机(或脚踏风箱)。
2.豚鼠的咳嗽声响亮，应以能听到声音为咳嗽。 3.实验前1日豚鼠应预先挑选，喷雾后5 min内咳嗽 次数少于10次者应予以淘汰。
第二节
支气管哮喘动物模型
支气管哮喘(bronchial asthma)简称哮喘，是 气道的一种慢性变态反应性炎症性疾病。哮喘是 由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎 症细胞参与的慢性气道炎症，由此导致患者的气 道高反应性（气道对各种刺激因素出现过强或过 早的收缩反应），造成气道缩窄，气流受阻。
[模型评价与注意事项] 1.氨水诱发小鼠咳嗽反应变异性较大,可在初筛止咳药 时应用。 2.咳嗽潜伏期是指从喷入氨水开始至发生咳嗽所需的 时间(秒数)。小鼠咳嗽以腹肌收缩(缩胸)，同时张大嘴 为准，有时可有咳嗽声，观察必须仔细，也可用听诊器 听咳嗽声。 3.避免腹腔注射给予受试药,以免干扰动物的咳嗽反 应。
咳嗽动物模型 支气管哮喘动物模型
慢性支气管炎模型 肺气肿和肺心病动物模型
肺水肿动物模型 肺纤维化动物模型 肺结核病动物模型 肺硅沉着症动物模型
第一节
咳嗽动物模型
咳嗽是呼吸系统多种疾病的常见症状。确定受试 药物的镇咳作用,可采用小鼠氨水或二氧化硫引咳 法及豚鼠枸橼酸引咳法两种模型加以确定, 并与阳 性药物进行同步观察。
速发相阶段:肥大细胞是主要效应细胞，致敏抗 原与肥大细胞表面IgE抗体结合。当相同抗原再次 进入机体后，引发肥大细胞脱颗粒，释放组胺、 5-羟色胺等炎症介质，导致支气管痉挛、气管粘 膜微血管通透性增加、气管粘膜水肿和粘液分泌 亢进。
临床上表现为反复发作性喘息、呼气性呼吸困 难和胸闷等症状。哮喘是一种常见疾病，全球约 有1亿5千万，我国约有1千5百万哮喘病人，已成 为严重威胁人类健康的疾病之一。
哮喘的发病机制尚不完全清楚，有许多因素参 与。过去认为哮喘是IgE介导的I型超敏反应性疾 病，目前认识到哮喘是以气道高反应性为主要特 征的慢性气道炎症性疾病。哮喘发病分为速发相 和迟发相两个阶段。
二、小鼠二氧化硫引咳法
[造模原理] 二氧化硫是一种强的化学刺激物质,动物吸入 其气雾后刺激呼吸道感受器,反射性引起咳嗽。 无水亚硫酸钠与硫酸反应生成SO2。
[操作步骤] 用一带侧口的三角烧瓶,侧口通过橡皮管与
球囊连接,烧瓶内盛有无水亚硫酸钠,烧瓶塞上装一 滴定管,内灌硫酸，打开滴定管的活塞使硫酸滴到 亚硫酸钠上，在烧瓶内产生SO2气体，气体储存 于球囊内，用血管钳夹紧，应用时用注射器吸取 4~10ml，注入放置实验小鼠的广口瓶内。
×100%
模型组咳嗽潜伏期
[注意事项] 1.烧杯内SO2的浓度要求在1:50000，该浓度足以引 起咳嗽，如浓度过高(如1:10000)易造成动物中毒死亡。 2.实验中SO2产生的多少与实验室温度、无水亚硫酸 钠的量关系密切，故无水亚硫酸钠的称量应准确。
3.SO2引咳的个体差异较大,实验时应尽量减少各方面 误差。
3.观察药物的止咳作用 小鼠按体重均分3组，给药组灌 胃给予受试药，模型组灌胃给予等体积生理盐水，阳性对 照药组腹腔注射磷酸可待因30 mg/kg体重。灌胃给予受 试药1 h或腹腔注射给药30 min后，将小鼠置于充满SO2 的烧杯内，观察咳嗽潜伏期，按下式计算药物止咳率：
给药组咳嗽潜伏期
药物止咳率（%）＝
三、豚鼠枸橼酸引咳法
[造模原理] 豚鼠吸入枸橼酸溶液喷雾后，刺激呼吸道粘膜感受器， 反射性引起咳嗽。 [动物和主要器材] 体重200~250g豚鼠。 2~4L玻璃罩; 空气压缩机。
豚鼠体型短粗而圆，头较大，眼大而圆还 明亮，耳圆，上唇分裂，耳朵短小；四肢 短，前脚具4趾，后脚3趾，无外尾。
[操作步骤] 1.将豚鼠置于玻璃干燥器内,用超声雾化器喷入17.5%枸 橼酸雾化气5~10s，观察、记录豚鼠咳嗽潜伏期或记录 5min内豚鼠的咳嗽次数。
[操作步骤] 1.小鼠置玻璃罩内→空气压缩机以400mmHg 恒压将氨水喷入罩内→喷雾5s→记录动物咳嗽潜 伏期和2min内咳嗽次数。也可用引起一半小鼠咳 嗽的喷雾时间(FDT50)为指标。 2.观察药物的止咳作用 小鼠按体重均分3组，每 组至少15只小鼠。给药组灌服受试药，模型组灌服 等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待 因30mg/kg体重。灌胃给予受试药1 h后、腹腔注 射给予受试药30min后开始喷雾。喷雾一定时间， 终止喷雾，观察咳嗽反应。
2.观察药物的止咳作用 将豚鼠按体重随机分为3组,给 药组灌胃给予受试药,模型组灌胃给予等体积生理盐水, 阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因5mg/kg体重。灌胃 给予受试药1 h或腹腔注射给药30min后，按上述方法 引咳,评受试药的止咳效果。
[模型评价与注意事项] 1.豚鼠对化学性刺激物很敏感,刺激后能诱发咳嗽,动 物容易得到。二氧化硫引咳法、氨水引咳法和枸橼酸 引咳法是研究止咳药的三种常用方法，前二者系用小 鼠，费用较低廉，适合于研究止咳药效果的初筛，确 定效果后，再用豚鼠作进一步研究。
呼吸系统疾病 动物模型
2010342062 石晓征
呼吸系统疾病是一种常见病、多发病， 主要病变在气管、支气管、肺部及胸腔， 病变轻者多咳嗽、胸痛、呼吸受影响，重 者呼吸困难、缺氧，甚至呼吸衰竭而致死。 在城市的死亡率占第３位，而在农村则占 首位。更应重视的是由于大气污染、吸烟、 人口老龄化及其他因素，使国内外的慢性 阻塞性肺病（简称慢阻肺，包括慢性支气 管炎、肺气肿、肺心病）、支气管哮喘、 肺癌、肺部弥散性间质纤维化，以及肺部 感染等疾病的发病率、死亡率有增无减。