急性胰腺炎动物模型的具体方法及步骤

急性胰腺炎动物模型的具体方法及步骤原型物种人

来源雨蛙肽导致急性重症胰腺炎

模式动物品系SPF级C57BL/6小鼠，雄性，周龄为8w-10w，体重为20g-25g。

实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期4-6 weeks

建模方法A组：较轻症状的胰腺炎模型：

每周中的一天注射腹腔注射雨蛙肽7次，50 µg/kg（1.25µg/只），每次注射间隔1小时。共注射6周。

B组：重症胰腺炎模型：

每周：1d~3d腹腔注射2次33%乙醇150ul，3g/kg。2次腹腔间隔12小时。第4d腹腔注射7次雨蛙肽，50 µg/kg（1.25µg/只），每次注射间隔1小时。

5d~7d腹腔注射2次33%乙醇150ul，3g/kg（每只动物75mg）。2次腹腔间隔12小时。

以上建模方式持续6周。

C组：正常组。

应用急性胰腺炎模型

在建模第6周时，处死各组动物，取新鲜胰腺组织。固定于4%多聚甲醛24h 以上。将组织从固定液取出在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整，将修切好的组织和对应的标签放于脱水盒内，随后进行脱水，固定，包埋和切片。进行HE和masson染色，判断胰腺纤维化程度。

HE染色结果：A组为轻微胰腺炎组，B组为严重胰腺炎组，C组为正常组。B 组跟C组相比胰岛细胞脂肪样空泡变性，部分腺泡细胞疏松水肿，部分腺泡细胞鹰眼样巨细胞病变。A组跟C组相比胰岛无明显病变，血管有增生。严重程度不及B组。

Masson染色结果：A组为轻微胰腺炎组，B组为严重胰腺炎组，C组为正常组。B组与C组相比胰腺血管周边和胰岛纤维化，胰岛细胞脂肪样空泡变性，腺泡细胞也发生淀粉样变性。A组与C组相比只有血管周边有轻微的纤维化，胰岛和腺泡细胞无明显病变。

取各组实验动物血清，对血淀粉酶，尿淀粉酶，血脂肪酶，谷丙转氨酶、血肌酐及乳酸脱氢酶等生化检测指标联合检测可以评估急性胰腺炎模型。