血培养的意义及操作程序

培养瓶的选择
成年人的常规血培养应该用一对瓶 需氧瓶 + 厌氧瓶
对已经使用 抗菌药物治 疗的患者 用含活性炭 的抗菌药物 吸附瓶 FA FN
对未使用 抗菌药物 治疗的患 者 用标准血 培养瓶
SA
SN
应用厌氧瓶的原因
保证足够的采血量 便于解释血培养结果是污染还是真正感染 保证兼性厌氧菌的生长 保证厌氧菌的培养
解读注意事项
4、对葡萄球菌一代比三代头孢治疗效果好。 5、有些药物不适用于单独使用，仅用于联 合用药，如利福平。 6、因为是体外药敏试验，有些药体外试验 敏感，可能临床治疗无效。 7、同一菌株可能出现亚种，导致连续药敏 结果不吻合。
与临床沟通中常见问题
1、我们想用的药物在药敏试验中没 有做？
阴性报告结果的解读
阴性报告提示以下可能 非感染性疾病 感染已治愈 感染未治愈，但各种原因导致病原体未检测出来 采样运送不当:标本采集、送检、保存不当，导致 病原菌死亡，污染菌大量增殖； 抗生素影响：经抗菌治疗，标本中含大量抗生素， 病原菌受到伤害，不能正常生长； 苛养菌：如嗜血杆菌、淋球菌等因标本采集、送检、 保存不当，导致漏检。
与临床沟通中常见问题
6、选择药敏报告敏感的药物，为什么临床治疗无效？
体外药敏试验只能预测体内治疗效果，并不等同； 一般来说，耐药＝治疗无效； 敏感≠治疗有效。 • 可能不是真正的致病菌（污染或定植菌） • 细菌本身因素（如诱导耐药，生物被膜） • 感染部位与药代动力学因素 • 细菌的MIC，给药剂量和用药方式 • 药敏试验药物中有些药物单独使用无效，但可以与其他 药物联合用药 • 药物剂型及生物利用度（纯品、商品）
血培养的意义及操作规范
共同学习的三部分内容
血培养的意义及操作规范 细菌药敏解读 与临床沟通的相关问题
明确血培养的临床意义
血培养对诊断以下疾病非常重要： 菌血症 感染性心内膜炎 临床不明原因感染 脉管导管相关性菌血症 化脓性关节炎 肺炎
败血症(SEPSIS)
PANCREATITIS 胰腺炎 TRAUMA 外伤 SEPSIS 败血症 SIRS 炎性反应 BURNS 烧伤
血培养标本的储存和运输
血培养瓶应在短时间内送至实验室，延迟上 机会延缓甚至阻碍病原菌生长，造成假阴性。 如不能及时上瓶，培养瓶可在室温保存，但 仅能存放数小时。切忌将培养瓶冷藏或冷冻， 冷藏或冷冻会导致部分病原菌死亡。也不建 议把培养瓶放入培养箱中。
血培养报阳时间
当前推荐的连续血培养检测系统的标准培养时间为5天 大部分有临床意义的致病菌都在培养的前3天检出 在培养的前2天，检出率为94% 布氏杆菌报阳时间一般为4-5天
对于成人，通常推荐在短时间内(一般为1小时内) 连续采血，做2套至3套(1瓶需氧+1瓶厌氧/套) 血培养。 对于儿童则在短时间内，在不同位置，抽两瓶（需 氧）。 当怀疑感染性心内膜炎或其它的血管内感染(导管 相关性)菌血症和真菌血症时，则间隔采血(例如每 隔1-2小时采血一次)，2套至3套(2瓶/套)血培 养。
BACTEREMIA 菌血症
INFECTION FUNGEMIA 感染 真菌血症
PARASITEMIA 寄生虫血症
VIREMIA 病毒血症 OTHER 其它
OTHER 其它
败血症的检测
血培养是检测菌血症和真菌血症的最简单、 最准确和最常用的一种方法，是确认机体血 流感染的病原学基础。 尽早做血培养检测和早期正确抗菌治疗是控 制败血症的首要措施。
5、培养阳性的细菌都需要用抗菌药物治疗吗？ • 不一定 • 培养阳性≠感染，可能为污染（血培养），可能 为定植（痰培养） • 任何结果必须结合临床情况进行评价（很重要） • 感染部位的清创、引流、换药比使用抗菌药物 更加重要 • 改善患者全身情况：器官功能支持，纠正酸碱 平衡，电解质紊乱，低蛋白血症，高血糖等
10、今天的培养结果怎么与前天的 不一样？
取材是否规范。 痰标本，有时选优势菌做，就可能导致 两次不一样。
与临床沟通中常见问题
12.明显稀便，培养结果为何正常？
大便普通培养，通常只能鉴定志贺菌、沙门 菌感染。 怀疑霍乱时，需开霍乱弧菌培养。 可能病毒感染(轮状病毒)。 抗生素相关性腹泻
与临床沟通中常见问题
7、涂片镜检结果与培养结果不吻合？
涂片镜检是报告所有检见的细菌，而培 养的目的是检出致病菌。 一些苛氧菌需在特殊的环境或培养基上 才能生长。 涂片看到的阴性杆菌也有可能是厌氧菌， 所以培养未见阴性杆菌。
与临床沟通中常见问题
8、取的明显就是脓液标本，为何鉴 定报告为无菌生长？
• 可能是天然耐药 • 可能是药物的敏感性被其他药物所预
报
与临床沟通中常见问题
2.为什么有的菌报告很多种药物， 有的仅报告几种药物？ • 报告的药物种类根据细菌种类的不同
而有所不同，如铜绿假单胞菌报告的 药物较多，而嗜麦芽窄食单胞菌报告 的药敏较少
与临床沟通中常见问题
3、是否能将所用的药都做药敏试验? • 没有必要：通过耐药机制和标志性药
血培养瓶的接种顺序
如果用注射器及针采血，应先接种厌氧瓶避 免空气进入。 如果用蝶形针采血，应先接种需氧瓶，以免 装置里的空气传送到厌氧瓶中。 如果抽取的血液量少于推荐量，血液应先足 量接种需氧瓶，剩余的血液应该接种到厌氧 瓶中。
标本采集的要点
每一对瓶血培养应该从身体的不同部位采取 用来培养的血应该是静脉血而不是动脉血 根据推荐，应该避免从静脉或动脉导管抽血， 因为通常这些装置污染率较高 采集标本前的皮肤消毒非常重要 尽可能快地(最好在2小时内)将标本送到临床 微生物实验室，进行培养。如果有任何耽搁， 应暂时在室温下保存 所有的血培养瓶上都应标明患者的情况(包括日 期，时间，采样位置和诊断)
•
物可以预测其他抗菌药物的敏感性 没有可能：不是所用药物都可以做药 敏试验（需要药物在体外稳定，需要 有操作标准和解释标准）
与临床沟通中常见问题
4、在药敏试验报告中直径越大的抗 菌药物效果越好吗？
• 感染菌对同一种药物的直径越大，效果越 •
好 不同种抗菌药物之间抑菌环无可比性
与临床沟通中常见问题
血培养采血量
对于成人，每瓶血培养需要5-10ml血液。
对于儿童，每瓶需要2-4ml血液。
对于婴幼儿，采血量1-2ml血液。
血培养采集套数及血量
CLSI要求每次采集2-3套标本,每套应包括一个需氧培 养瓶,一个厌氧培养瓶 成年病人不能只采1瓶血培养标本，采血量不足和只做 1套血培养所得结果是很难正确解释的 Cockrill2004年报告:163位病人的血培养 采血套数及血量 1套(20ml) 2套(40ml) 3套(60ml) 检出率 65% 80% 96%
污染菌和感染菌的确认
主要依据检测出的细菌种类及阳性瓶的数量
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染(CRBSI)的血培养
CRBSI是血流感染最常见的原因 美国每年有25万病人发生 死亡率12-35%
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
中心静脉导管、静脉留置口 (VAP ）可疑有 CRBSI的患者推荐的培养方法： 至少2套血培养 经外周静脉穿刺 采血≥1套 从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套 二者的采血时间应该接近（建议 ≤ 5分钟）
血培养标本采集的时机
使用抗菌药物之前采血 当可疑临床症状出现后，应尽快采集血培养。在应 用抗菌药物之前采血培养是最理想的。如果患者已 经开始应用抗菌药物进行治疗，则应该在下一次用 药前采血培养。 患者寒颤发热前1小时，在此期间，应同时（或间 隔30-60 min）采集2-3套血培养。
血培养采集套数
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
培养结果解释之 2：
若两套阳性血培养是阴性 只有导管采血的血培养是阳性 ， 不能定为CRBSI， 提示可能是导管的定植菌或采血过程中污 染所致。
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断方法之一
培养结果解释之3：
若只有外周血的血培养是阳性 但分离菌为金葡菌或念珠菌 且没有任何其它部位感染的证据，提示高 度可 疑CRBSI。
怀疑患者有血流感染的症状和情况有：
不明原因的发烧(＞38℃)或体温过低(＜36℃) 严重的局部感染，如脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹 部术后感染等 侵入性处置，如静脉导管留置、导尿管留置、机械通气等 白细胞增多，粒细胞减少，血小板减少 休克，寒颤，僵直 多器官衰竭 心率异常加快 低血压或高血压 呼吸频率加快
方法和操作步骤
短期外周导管的方法
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有第2种方法
用静脉采血法采集 2 套外 周血作血培养， 用Maki半定量培养法对导 管尖进行培养（即查导管 表面的定植菌引起的感染）
方法和操作步骤
导管相关性的血流感染(CRBSI) 现有第2种方法
结果解释：
血培养 1或2 套阳性 1或2 套阳性 2套阴性 2套阴性 导管Maki法 培养 菌落数≥15 菌落数≤15 不论多少 金葡、念珠菌
方法和操作步骤 导管相关性的血流感染诊断第一种方法
培养结果解释之 1：
若两套阳性血培养是同一菌（依细菌鉴定和药敏谱确认） 又没有任何其它部位感染的证据，提示为CRBSI。 1A： 若两套阳性血培养是同一菌 从导管采血血培养报阳性的时间比上一套1B： 若两套阳性血培养是同一菌（经鉴定及药敏谱也相同） 若确定阳性的时间比上一套早不足120分钟 CRBSI仍然是可能的
血培养的作用
证实感染性病原体 做进一步的鉴定和药敏试验 指导正确的抗菌药物使用
血培养操作规范
何种情况下需要做血培养 血培养标本采集的时机 血培养采集的量及套数 规范的皮肤消毒及培养瓶的准备 血培养标本的储存和运输 血培养报阳时间及阳性标本的处理
何种情况下需要血培养
血培养采集套数及血量
也有人统计：血培养组合的累积检出率， 随采样次数增加而增加 1对 73.2 % 2对93.9 % 3对96.9%
血培养采集套数及血量
由于多数病例中，细菌和真菌均一过性存在于血液 中，单次血培养检测的敏感性有限 取两对以上血培养是必要的 污染通常只出现在一个血培养瓶中，对于真正的血 流感染，多个血培养瓶都会呈阳性
药敏试验的目的： 使用体外试验的方法检测细菌的耐药 性，预测抗菌药物的临床治疗效果，并 为临床医生针对某一特定的临床感染问 题选用药物提供依据----实施个体化治 疗。
解读注意事项
1、药敏试验是参照美国的CLSI推荐的标准 制定的。 2、某些细菌对某类抗生素天然耐药，则不 需要做药敏试验。 3、试验的药物代表一类药，而不是一种药。
*导管尖片段MAKI法
是否CRBSI？ 是 否 否 金葡、念珠菌不能否认 导管定置菌 再作血培养 注解
血培养的危急值报告制度
1.血培养瓶报警,阳性血培养涂片 革兰染色报告临床革兰染色结果。 2.接种鉴定平板肠道显色培养基 18-24h报告细菌名称。 3.最终报告鉴定结果和药敏结果。
药敏试验结果的解读
血培养采集套数及血量
报告时间提前 出现阳性时间： 需氧瓶有9%比厌氧瓶早1天报告结果 厌氧瓶有5%比需氧瓶早1天报告结果
血培养采集套数及血量
总结：
如果血培养只做需氧瓶培养，漏检的不 仅是严格厌氧菌，也会影响兼性厌氧菌的阳 性结果报告时间
规范的皮肤消毒及培养瓶的准备
在血培养过程中，标本采集是决定性的步骤。在整 个操作过程中必须采取标准的严格的无菌措施。 一份被正确地采集而不被污染的标本是提供准确、 可靠结果的关键。 血培养标本应该由医务人员采集(医生，护士或技 术人员)，他们接受过训练并取得采血资格。
我们做的是有氧培养，脓液可能为厌氧 菌感染。 可能细菌被大量的中性粒细胞吞噬。
与临床沟通中常见问题
9、一般培养不是三天出结果吗，今 天第四天了怎么还没出来？
一般培养经48小时后，即第三天出报 告，若需分离致病菌的则第四天出报告。 某些微生物生长缓慢：真菌、分支杆菌、 布氏杆菌等
与临床沟通中常见问题