体外受精-胚胎移植中精子顶体完整率与受精的关系
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VY 统计学方法*采用 0?003=Y=统计软件#进行 计 量 资 料;检 验 )
二 &结 果 3Y 各组卵细胞质量受精 率 及 精 子 顶 体 完 整 率* L 组 间 卵 细 胞 质 量 无 显 著 性 差 异 "!#=Y=>$#但 其 精 子顶体完整率有显著性差 异"!"=Y=3$) 精 子 顶 体 完整率和受精率显著相关":V=Y4V#!"=Y=>$) 正 常组精子顶体完整 率 和 3 组 无 显 著 性 差 异#与 其 他 各组间有显 著 性 差 异)3&5 与 L 组 相 比#精 子 顶 体 完 整 率 有 显 著 差 异 "!"=Y=3$"表 3$) 5Y 各组精子密度及活力 率 与 精 子 顶 体 完 整 率*
!参 ! 考 ! 文 ! 献 "
#3$!世界卫生组织编Y 人 类 精 液 及 精 子Q宫 颈 粘 液 相 互 作 用 实 验 室检验手册#0$Y 第8版Y 北京%科学出版社!3444Y8Q38Y
常规精液分析是判断生育力强弱的重要指标% 但临床许多常规 精 液 分 析 正 常 的 不 育 患 者%在M6@ 过程中出现不受精 或 受 精 率 低 下 的 问 题%因 此 不 能 把常规分析作为惟一的方法(我们检测的精液标本 常 规 分 析 虽 正 常 %但 因 精 子 顶 体 完 整 率 不 同 %其 受 精 率之间存在显著性 差 异%说 明 精 子 形 态 学 检 测 在 男 性不育诊断中也是 主 要 的 方 法 之 一%近 年 来 备 受 重 视(
! ! 长 期 以 来#临 床 上 主 要 依 据 世 界 卫 生 组 织 "[IZ$标 准 进 行 精 子 计 数&各 级 精 子 活 力 和 正 常 形态比率等分析判断男性生育能力’3()这些方 法 对 全 面 了 解 精 子 生 育 力 尚 存 不 足’5(#尤 其 是 在 体 外 受 精Q胚胎移植"M6@Q*T$中精液常规分 析 正 常 的 患 者 出现低受精率或 不 受 精 的 情 况#影 响 妊 娠 结 局) 精 子顶体完整性直接 影 响 精 子 的 授 精 情 况#通 过 特 殊 染色确定精子顶体的完整情况是判断精子生育力很
一 &资 料 和 方 法 3Y 资料采集*5==5 年 5 月 至 5==L 年 5 月 在 我 中心接受M6@Q*T 的不育女性患者33<例)男 方精 液常 规 分 析 基 本 正 常) 女 方 年 龄 5>"L4 岁#平 均 "L3Y5_LYL$岁) 不 育 年 限 5"38 年#平 均 "VY5_ LY5$年) 其 中 输 卵 管 因 素 K< 例#多 囊 卵 巢 综 合 征 55 例 #子 宫 内 膜 异 位 症 3< 例 ) 5Y 卵细胞采集及分级*当 ! 超监 测3 个 优 势卵 泡直径 达 3< ## 或 L 个 达 3V ## 时#停 用 促 性 腺 激素#当晚5=*== 肌 注 人 绒 毛 膜 促 性 腺 激 素 "’AO# 0.2$%$#瑞士$3====MG#LV’ 后 在 ! 超"00NQ33== 型#探 头 频 率 > HIb#:\Z^:#日 本$引 导 下 经 阴 道取卵#穿刺针"^QZ?0NQ3VL>Q!Q*T 型#AZZ^#澳 大 利 亚 $长 L>C##3V 号 ) 根 据 卵Q冠Q丘 复 合 物 "ZAQ AA$进 行 卵 细 胞 分 级*. 级*放 射 冠 致 密#卵 丘 细 胞 密集#卵细胞内无生 殖 泡&无 第 一 极 体 "不 成 熟 卵$% MM级*放射冠呈放射状排列#卵丘大&松散#见第 一极 体#可以直 接 受 精 "成 熟 卵 $%MMM级*卵 细 胞 充 分 暴 露#放射冠万散方落数#据卵 丘 充 分 延 伸 或 解 体#受 精 能 力 低
例数
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组!别
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MMM
受精率 "‘ #
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38
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下 "过 度 成 熟 卵 $) LY 精液收集*男 方 在 采 精 前 禁 欲 >"K/#取 卵
后 在 室 温 5>"L>f 下 #手 淫 采 集 ) 8Y 精子顶体完整率测定*"3$精 子 染 色*改 良 巴
氏染色法 ) ’3( "5$观察指标*根据顶体外形和损 伤 情 况将精子顶体分 为 四 种 类 型)M型*顶 体 完 整#精 子 外型正常#着 色 均 匀#顶 体 边 缘 整 齐)MM型*顶 体 轻 微肿胀#质膜"顶体膜$疏松膨 大)MMM型*顶 体破坏# 精子质 膜 严 重 膨 胀 破 损#着 色 浅 边 缘 不 整 齐)M6 型*顶 体 全 部 脱 落#精 子 核 裸 露)M&MM视 为 顶 体 完 整%MMM&M6 型视 为 顶 体 不 完 整) 精 子 顶 体 完 整 率 计 算*精子顶体完 整 率 c 顶 体 完 整 精 子 数+ 精 子 总 数 d3==‘
精子 顶 体 内 富 含 多 糖 及 各 种 水 解 酶%可 水 解 卵 细 胞 周 围 的 放 射 冠 和 透 明 带 %是 精 卵 融 合 的 关 键 %与 受精过程万密方切数相据关 ( )8* 顶体酶活性是判断精子 生 育
力一项很有价值的指标 ( )>* 但此酶活力测定技 术 复 杂 %试 剂 昂 贵 %难 以 推 广 ( 不 少 研 究 结 果 表 明 精 子 顶 体完整率 与 顶 体 内 酶 的 含 量 及 活 力 明 显 相 关 ( )V%K* O,22.&&等 在 )<* M6@ 过 程 中%通 过 对 已 与 透 明 带 结 合的精子进行形态 分 析%发 现 精 子 头 部 形 态 尤 其 是 顶体区面积与精子结合透明带的能力有关(没有顶 体的精子不能与卵 子 结 合%结 合 到 卵 透 明 带 上 的 精 子应是顶体完整的%顶体完整 率 与M6@ 受 精 率 密 切 相 关 ( )4%3=*
体外 培 养 条 件 下%影 响 受 精 的 因 素 主 要 有 L 方 面$"3#卵细胞本身 的 因 素&"5#环 境 因 素%操 作 培 养 条件和培 养 基 的 稳 定 也 是 人 胚 体 外 发 育 正 常 的 关 键 &"L#精 子 因 素 %如 精 子 顶 体 功 能 缺 陷 %不 能 进 行 正 常 的 顶 体 反 应 %从 而 不 能 分 散 卵 子 周 围 的 卵 丘 细 胞 % 穿过透明带(本结果发现精子顶体完整率与受精率 呈显著正相关%正常 生 育 组 与 受 精 率 低 下 组 顶 体 完 整率之间有显著性 差 异%而 与 不 育 正 常 受 精 组 之 间 无差异(
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精子顶体完整率 "‘ #
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组!别
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例数 (
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,收 稿 日 期 -!5==>Q=3Q38%! ,修 回 日 期 -!5==>Q=LQ53 ,作者简介-!闻 姬 "34V8" $#女#山 东 济 南 人#学 士#副 主 任 医 师 #生 殖 内 分 泌 专 业Y
生 殖 医 学 杂 志 5==> 年 < 月 第 38 卷 第 8 期
表 R! 各 组 卵 细 胞 质 量 !受 精 率 与 精 子 顶 体 完 整 率 "1%M5#
精子 头 部 和 尾 部 具 有 不 同 的 功 能%头 部 形 态 功 能 与 精 卵 融 合 密 切 相 关 &而 尾 部 是 精 子 的 运 动 器 官 % 尾部功能的好坏直接影响精子的活动率及活力(有 研 究 表 明 %通 过 透 视 电 镜 观 察 精 子 的 超 微 结 构 %不 育 患者的顶体受损率!膜 结 构 受 损 率 及 精 子 尾 部 的 胞 质残体 的 数 量%都 高 于 正 常 生 育 组)33*( 本 结 果 显 示 %精 子 顶 体 完 整 率 和 精 子 的 密 度 !活 力 及 存 活 率 无 显著相关性(L 组 间 精 子 密 度!活 力 及 存 活 率 无 显
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将所有标本精子顶体完整率测定的结果和其常规分
析 的 精 子 密 度 !活 力 率 进 行 相 关 分 析 %发 现 精 子 顶 体 完整率与密度无 显 著 相 关 性 ":V=Y3>%!#=Y=>#% 与精 子 活 力 率 亦 无 显 著 相 关 性 ":V=Y=5%! # =Y=>#(L组精子密度!活力率与 正 常 组 间 无 显 著 性 差 异 "表 5#( ! ! 三 !讨 论
! 5L8 !
!短篇论著!
生 殖 医 学 杂 志 5==> 年 < 月 第 38 卷 第 8 期
体外受精Q胚胎移植中精子顶体完整率与受精的关系
闻 姬 !秦 英 慧 !刘 晓 蓓
"济 南 铁 路 中 心 医 院 #济 南 !5>===3$
! ! !关 键 词 "! 精 子 %! 顶 体 %! 体 外 受 精 !中 图 分 类 号 "DL53QLL! !文 献 标 识 码 "!! !文 章 编 号 "3==8QL<8>#5==>$=8Q=5L8Q=L
顶体完整率 "‘ #
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84Y34_>Y> >3YL4_VY3 >=YKV_>Y4 >KY34_KY>
检查精子顶体完整性常用的染色法有凝聚素亲
和荧光 技 术%普 通 光 镜 染 色 和 免 疫 化 学 染 色 技 术 等 ( )L* 我们采 用 了 常 用 的 改 良 巴 氏 "?,1,%"C$(,$7# 染色技术%可以清晰 显 示 精 子 头 部 的 顶 体 区 和 顶 体 后区!中段和尾 部( 巴 氏 染 色 精 子 头 部 顶 体 区 呈 淡 蓝色%顶体后区呈深蓝色%中段 为淡 红 色( [IZ 优 先推荐改良巴氏染 色 法 用 于 人 类 精 子 染 色%目 前 该 法在国际上普遍采用(
- 5LV -
生 殖 医 学 杂 志 5==> 年 < 月 第 38 卷 第 8 期
著 性 差 异 !而 受 精 率 显 著 不 同 !说 明 影 响 精 子 受 精 能 力的诸多因素中精子顶体完整率是一重要因素"表 明即使常规分析活力正常的精子其顶体也可能是不 完整或有缺陷的"因此!我们用 简便 易 行的 精 子 染 色测定精子顶体完 整 率 代 替 顶 体 酶 活 力 测 定!检 测 精 子 顶 体 完 整 率 和 授 精 能 力 的 关 系 !预 测 受 精 结 局 ! 减 少 患 者 不 必 要 的 花 费 !给 患 者 作 出 合 理 解 释 !如 实 施卵胞浆内单精子注射"仅仅依靠精液常规分析不 能对精子的授精能 力 作 出 正 确 评 价!但 男 性 不 育 原 因 复 杂 !有 待 更 深 入 的 研 究 "
>Y 病例分组*根据精子和 卵 细 胞 受 精 情 况 分 为 L 组*3 组 受 精 率 $<=‘&KV 例%5 组 受 精 率 在 >=‘"<=‘之 间&L5 例%L 组 受 精 率 )>=‘&3= 例) 正常组其配偶已生育或 妊 娠#精 子 计 数 8=d3=V+#( 以 上 #活 动 率 大 于 V=‘ )
有价值的一种方 法) 为 此#我 们 随 机 抽 取 主 诉 女 方 不育)而男方 精 液 常 规 分 析 正 常 的 行M6@ 不 育 患 者33<例#观察男方 精 液 的 精 子 顶 体 完 整 率 与 受 精 率 之 间 的 关 系 #并 与 38 例 正 常 生 育 组 男 性 的 顶 体 完 整率进行比较)
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