高脂高糖脑缺血模型

1材料

1.1实验动物

Wistar雄性大鼠50只, 体重在220±20

2模型

2．1分组

将Wistar大鼠随机分为:(1)空白对照组8只,余42只大鼠模型复制后通过检测筛选合格大鼠。具体做法是:TC小于2.6 mmol/L的动物被剔除,血糖小于16.7 mmol/L的被剔除。(2)取造模合格大鼠30只,再随机分为模型组、qkl组、jz组。其中正常组喂养普通饲料,其他组均喂养高脂饲料。

2．2复制

①高脂血症的模型复制

大鼠饲料基本配方为:1~4%胆固醇,10%猪油,0·2%甲基硫氧嘧啶,86%~89%基础饲料(其中面粉20%,米粉10%,玉米20%,麸皮25%,豆粉20%,骨粉2%,鱼粉2%)。因为大鼠对高脂肪、高胆固醇有耐受性,对外源性胆固醇的吸收率为40%,较难形成斑块,所以饲料中除胆固醇外,另又加入了甲基硫氧嘧啶。15~20g/只·d,持续4周后检测证实,大鼠血胆固醇是否明显升高。

②复合高糖血症的模型复制

在高脂血症即将形成的第4周复制高糖血症模型,即使用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射形成高糖血症,使两种模型同时成功复制。临用前配制0·1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。再向此溶液加

入柠檬酸钠,配制成0·5%溶液,其pH值为。

另有：大鼠术前30分钟按39/kg腹腔注射50%葡萄糖，对照组大鼠注射等容积复方氯化钠溶液，分别在葡萄糖注射前、缺血30分钟、再灌注24小时用微量血糖分析仪测量鼠尾血血糖浓度。

③方法大鼠40只(实验前测血糖、尿糖均正常)按随机数字表法随机分为5组。按体重标准50mg/kg次性腹腔注射0·5%链脲佐菌素溶液,正常对照组同样按照体重标准50mg/kg予0·9%生理盐水腹腔注射。注射5h后,予以25%葡萄糖水灌胃,每只2mL,防止造模早期大鼠出现严重的低血糖反应。正常对照组予以2mL/只蒸馏水灌胃。72h 从大鼠眼眶球后静脉丛取血测定空腹血糖水平。将血糖值≥16mmol/L者确定为高糖血症模型大鼠,再随机分为3组。灌胃给药或同体积蒸馏水,每天1次,连续10天。末次给药后腹腔注射麻醉,腹主动脉取血,离心分离血清按试剂盒方法测定vWF。

3 脑缺血模型

0.1M柠檬酸-柠檬酸三钠配置：

0.1M柠檬酸母液:2.1g柠檬酸(FW:210.14)溶于100ml ddH2O

0.1M柠檬酸三钠液母液:2.94g柠檬酸三钠(FW:294.10)溶于100ml ddH2O

然后将0.1M柠檬酸母液和0.1M柠檬酸三钠母液按1:1.32配制

造模时配制1％的stz的溶液。是每次配30只老鼠的量左右。0.5g

的stz加入50ml的柠檬酸钠缓冲液。混合均匀没有固体沉淀后，用锡纸包住stz溶液的瓶子就可以注射了。按照65mg/kg的量注射的。1只200g的老鼠注入1％stz溶液的量是1.3ml