高中生物选修一专题二课题2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》 课件(共19张PPT)(完美版课件)
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在同样的稀释度下只选择出大约50个菌落。 其他同学认为A同学的结果有问题。他们分析可
能是A同学的培养基被杂菌污染了，或者培养基中混 入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也 能在该培养基上生长。
但是，A同学确信自己的实验操作准确无误，与
其他同学其的他结果同之学所用以A同不学相一同，样是的因土为壤自进己行所实选验用的
注明培养基种类、培养日期、平板上培养 样品的稀释度等。
样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图
图中还应增设一组_空__白__对__照___组。
三、分解尿素菌的鉴定
（P26）
CO(NH2)2 + H2O 细菌脲酶 CO2 + 2NH3
氨→碱性增强→PH升高
以尿素为唯一氮源的培 养基中加入酚红指示剂，培 养某种细菌后，如果PH升高 ，指示剂将变红，说明该细 菌能够分解尿素。
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水 定容到1000mL
（二）统计菌落数目
课本P22“实验分析”： 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样
品中的细菌数。在对应至稀少释要倍涂数3为个1平06板的培养基中， 得到以下两种统计结果。
1.第一位同学在该浓度下涂布了一个平板， 统计的菌落数为230。
5、下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操
作的叙述，其中错误的是（D ）
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、 高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各 0.1ml，分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养 24-48小时
D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上 的实验组平板进行计数
取样时要铲去表层土
3、培养基：选择培养基 尿素应是唯一的氮源、为固体培养基
4、接种：稀释涂布平板法 每个稀释浓度至少要涂3个平板。 还需空白对照。
5、观察计数：选菌落数在30-300的平板计数。
同种微生物一定的条件下，表现出稳定的菌 落特征（形状、大小、隆起程度和颜色等）。
6、无菌操作
7、做好标记 目的：避免混淆。
平板（上与的实菌际落活数菌的数平相均比值偏是_2低_3_4_，）那么，那么每毫
（升1样）品每中个菌稀落释数浓是度（至涂少布要平涂板3个时平所板用。稀释液的体
（积2为）0选.1菌m落L）数在（30-B300）的平板进行计数。
（A3.）2.每34克×(1毫08升)B样.2品.3中4×的1菌09株数C.：234 D.23.4
3、重复的目的（意义）： 避免实验过程中_偶__然__因__素__对实验结果的干扰。
二、实验设计Biblioteka Baidu操作提示
1、实验流程：
土壤取样→梯度稀释 制备培养基
→接种→培养→观察计数
2、土壤取样（P23）：
土壤是“微生物的天然培养基” 。70∼90％ 是细菌。微生物主要生活在富含有机质的表层土 壤（距地表约3∼8cm）。
平板中平均菌落数 涂布的体积
×稀释倍数
2、显微镜直接计数： 借助于细菌计数板（或血细胞计数板）
（不能区分死菌和活菌）
（三）设置对照、设置重复
课本P23“实验分析”：
在做本课题的实验可时通，过A空同白学对从照对应（1对0未6倍接稀种释 的培养基中筛选出大约的1培50养个基菌进落行。培但养是，）其来它说同明学
练习：
1、分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求
是( B )
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加
琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦
B.①③⑤⑧
C.②④⑥⑧
D.①④⑥⑦
2、下列能选择出分解尿素细菌的培养基是( A )
A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿 素、琼脂、水
分解尿素菌的寻找： 到富含_尿__素___的环境中寻找。
2、目的菌株的筛选：用选择培养基进行筛选
选择培养基(P22)：允许特定种类的微生物生长， 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
分解尿素菌的筛选： 培养基中_尿__素___应是唯一的氮源。
本课题使用的培养基配方
（课本P22）
KH2PO4 NaHPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖
B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼 脂、水
C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、 水
D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋 白胨、琼脂、水
3、用来判断选择培养基是否起到了选择作用需
要设置的对照是(D )
土壤样品不同。但又拿不出令同学们信服的证据。 你能通过设置对照，帮助A同学排除上述两个可
能影响实验结果的因素吗？
（三）设置对照、设置重复
1、对照实验（P23）： 指除了被测试的条件以外，其他条件都相
同的实验。 自变量：人为加以改变。 无关变量：相同且适宜。
2、对照的目的（意义）： 排除_非__测__试__因__素__(_无__关__变__量_对) 实验结果的影响。
课题2 土壤中分解尿素的 细菌的分离与计数
CO(NH2)2 + H2O 细菌脲酶 CO2 + 2NH3
PCR技术(DNA多聚酶链式反应)： 需要耐高温的DNA聚合酶。 1966年：热泉→耐热细菌Taq菌
→耐高温的TaqDNA聚合酶。
一、研究思路
（一）筛选菌株
1、目的菌株的寻找：根据对生存环境的要求， 到相应的环境中寻找。
2.第二位同学在该浓度下涂布了三个平板， 统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以 这三个平板菌落数的平均值163作为统计结果。 这两你位认同为学哪的位实同验学需的操要结作改果过进更程吗接中？近可如真能果实出需值现要？了，你错如认误何为 改进？
（二）统计菌落数目
1、稀释涂布平板法计数： 用例样、品某中同的学菌在落稀数释，倍代数表为活10菌6的数培。养基上测得
A.未接种的选择培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C.接种了的选择培养基 D.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
4、在本课题的实验中，下列关于土壤取样的叙
述，错误的是（ C ）
A.土壤取样时应选取肥沃、湿润的土壤 B.先铲去表层土3cm左右，再取样 C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D.应在火焰旁边称取土壤
能是A同学的培养基被杂菌污染了，或者培养基中混 入了其他含氮物质，因而导致不能分解尿素的细菌也 能在该培养基上生长。
但是，A同学确信自己的实验操作准确无误，与
其他同学其的他结果同之学所用以A同不学相一同，样是的因土为壤自进己行所实选验用的
注明培养基种类、培养日期、平板上培养 样品的稀释度等。
样品的稀释和稀释液的取样培养流程示意图
图中还应增设一组_空__白__对__照___组。
三、分解尿素菌的鉴定
（P26）
CO(NH2)2 + H2O 细菌脲酶 CO2 + 2NH3
氨→碱性增强→PH升高
以尿素为唯一氮源的培 养基中加入酚红指示剂，培 养某种细菌后，如果PH升高 ，指示剂将变红，说明该细 菌能够分解尿素。
1.4g 2.1g 0.2g 10.0g
尿素
1.0g
琼脂
15.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水 定容到1000mL
（二）统计菌落数目
课本P22“实验分析”： 两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样
品中的细菌数。在对应至稀少释要倍涂数3为个1平06板的培养基中， 得到以下两种统计结果。
1.第一位同学在该浓度下涂布了一个平板， 统计的菌落数为230。
5、下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操
作的叙述，其中错误的是（D ）
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、 高压灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各 0.1ml，分别涂布于各组平板上
C.将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养 24-48小时
D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上 的实验组平板进行计数
取样时要铲去表层土
3、培养基：选择培养基 尿素应是唯一的氮源、为固体培养基
4、接种：稀释涂布平板法 每个稀释浓度至少要涂3个平板。 还需空白对照。
5、观察计数：选菌落数在30-300的平板计数。
同种微生物一定的条件下，表现出稳定的菌 落特征（形状、大小、隆起程度和颜色等）。
6、无菌操作
7、做好标记 目的：避免混淆。
平板（上与的实菌际落活数菌的数平相均比值偏是_2低_3_4_，）那么，那么每毫
（升1样）品每中个菌稀落释数浓是度（至涂少布要平涂板3个时平所板用。稀释液的体
（积2为）0选.1菌m落L）数在（30-B300）的平板进行计数。
（A3.）2.每34克×(1毫08升)B样.2品.3中4×的1菌09株数C.：234 D.23.4
3、重复的目的（意义）： 避免实验过程中_偶__然__因__素__对实验结果的干扰。
二、实验设计Biblioteka Baidu操作提示
1、实验流程：
土壤取样→梯度稀释 制备培养基
→接种→培养→观察计数
2、土壤取样（P23）：
土壤是“微生物的天然培养基” 。70∼90％ 是细菌。微生物主要生活在富含有机质的表层土 壤（距地表约3∼8cm）。
平板中平均菌落数 涂布的体积
×稀释倍数
2、显微镜直接计数： 借助于细菌计数板（或血细胞计数板）
（不能区分死菌和活菌）
（三）设置对照、设置重复
课本P23“实验分析”：
在做本课题的实验可时通，过A空同白学对从照对应（1对0未6倍接稀种释 的培养基中筛选出大约的1培50养个基菌进落行。培但养是，）其来它说同明学
练习：
1、分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求
是( B )
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加
琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A.①③⑤⑦
B.①③⑤⑧
C.②④⑥⑧
D.①④⑥⑦
2、下列能选择出分解尿素细菌的培养基是( A )
A. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、尿 素、琼脂、水
分解尿素菌的寻找： 到富含_尿__素___的环境中寻找。
2、目的菌株的筛选：用选择培养基进行筛选
选择培养基(P22)：允许特定种类的微生物生长， 同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。
分解尿素菌的筛选： 培养基中_尿__素___应是唯一的氮源。
本课题使用的培养基配方
（课本P22）
KH2PO4 NaHPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖
B. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、葡萄糖、琼 脂、水
C. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、尿素、琼脂、 水
D. KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4.7H2O、牛肉膏、蛋 白胨、琼脂、水
3、用来判断选择培养基是否起到了选择作用需
要设置的对照是(D )
土壤样品不同。但又拿不出令同学们信服的证据。 你能通过设置对照，帮助A同学排除上述两个可
能影响实验结果的因素吗？
（三）设置对照、设置重复
1、对照实验（P23）： 指除了被测试的条件以外，其他条件都相
同的实验。 自变量：人为加以改变。 无关变量：相同且适宜。
2、对照的目的（意义）： 排除_非__测__试__因__素__(_无__关__变__量_对) 实验结果的影响。
课题2 土壤中分解尿素的 细菌的分离与计数
CO(NH2)2 + H2O 细菌脲酶 CO2 + 2NH3
PCR技术(DNA多聚酶链式反应)： 需要耐高温的DNA聚合酶。 1966年：热泉→耐热细菌Taq菌
→耐高温的TaqDNA聚合酶。
一、研究思路
（一）筛选菌株
1、目的菌株的寻找：根据对生存环境的要求， 到相应的环境中寻找。
2.第二位同学在该浓度下涂布了三个平板， 统计的菌落数分别为21、212和256，该同学以 这三个平板菌落数的平均值163作为统计结果。 这两你位认同为学哪的位实同验学需的操要结作改果过进更程吗接中？近可如真能果实出需值现要？了，你错如认误何为 改进？
（二）统计菌落数目
1、稀释涂布平板法计数： 用例样、品某中同的学菌在落稀数释，倍代数表为活10菌6的数培。养基上测得
A.未接种的选择培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C.接种了的选择培养基 D.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
4、在本课题的实验中，下列关于土壤取样的叙
述，错误的是（ C ）
A.土壤取样时应选取肥沃、湿润的土壤 B.先铲去表层土3cm左右，再取样 C.取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌 D.应在火焰旁边称取土壤