第六章 实验动物基本操作

（二）穿耳孔法
用专用耳空器在动物耳朵不同部位打一小孔或缺口 表示一定号码的方法，原则是：左耳代表十位，右耳代 表个位。实验动物：兔、犬、猪 （三）标牌法 一般挂在动物的颈部、耳朵、脚上或 实验动物：犬、猴 （四）烙印法 （五）剪毛法
第二节 实验动物的捉拿与固定
大小鼠的捉拿与固定 豚鼠的捉拿与固定 兔的捉拿与固定 犬的捉拿与固定
2、双色涂染法： 双色涂染法： 在每组动物不超过100 100只的情况下 在每组动物不超过100只的情况下 适用。 适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂： 常用染色剂： 苦味酸溶液，可染成黄色。 (1)3-5％苦味酸溶液，可染成黄色。 ——作为“个”位数。 作为“ 位数。 作为 中性红或品红溶液， (2) 0.5%中性红或品红溶液，可染 成红色。 作为“ 位数。 成红色。——作为“十”位数。 作为
二、大鼠的抓取保定： 大鼠的抓取保定：
大鼠的抓取保定： 大鼠的抓取保定： 器材： 器材：大鼠饲养盒 + 面罩 1套。 方法步骤： 方法步骤： 周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的， 4-5周内的大鼠，方法同小鼠。周龄较大的，则： 首先戴好防护手套。 1、首先戴好防护手套。 2、用右手拇指和食指抓住大鼠尾巴中部将 大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。 大鼠提起，放在大鼠饲养盒的面罩上。 左手顺势按、 3、左手顺势按、卡在大鼠躯干 背部，稍加压力向头颈部滑行。 背部，稍加压力向头颈部滑行。 4、以左手拇指和食指捏住大鼠两耳 后部的头颈皮肤， 后部的头颈皮肤，其余三指和手掌 握住大鼠背部皮肤 完成抓取保定。 握住大鼠背部皮肤，完成抓取保定。
3、翻转左手掌，以左手掌心和中指夹 小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条直线。 小鼠背部的皮肤，使小鼠整个呈一条直线。 4、用左手无名指 压住小鼠背部的 皮肤， 皮肤，小指压住 小鼠的尾巴根部。 小鼠的尾巴根部。 5、松开捏住小鼠尾 巴的右手拇指和食指。 巴的右手拇指和食指。 此法适用于肌注、腹腔注射、 此法适用于肌注、腹腔注射、灌胃等
2.皮内注射
此法用于观察皮肤血管通透性变化或皮肤反应。 注射部位：动物背部 脱毛，用针头平直进入皮内， 注射药液后，皮肤表面鼓起小泡，停片刻拔出 针头。
3.肌肉注射给药
原理：将药液注入动物的肌肉组织， 原理：将药液注入动物的肌肉组织，经毛细血管吸收 进入血液循环。 进入血液循环。 器材：1ml注射器1支、生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、 器材：1ml注射器1 生理盐水、烧杯、酒精、碘酒、 注射器 棉球。 棉球。 注射部位： 注射部位：一般选择肌肉丰富而无大血管通过的臀部 或大腿外测，回抽无血即可注射。 或大腿外测，回抽无血即可注射。
三、豚鼠的抓取保定
器材：大鼠饲养盒+ 器材：大鼠饲养盒+带面罩 l套。 方法步骤： 方法步骤： 1、先用左手轻轻扣、 先用左手轻轻扣、 按住豚鼠背部。 按住豚鼠背部。 2、顺势抓紧其肩胛上方皮肤， 顺势抓紧其肩胛上方皮肤， 拇指和食指环箍其颈部。 拇指和食指环箍其颈部。 3、用右手轻轻托住其臀部， 用右手轻轻托住其臀部， 即可将豚鼠抓取保定。 即可将豚鼠抓取保定。 抓豚鼠时，一般不要抓腰腹部位， 抓豚鼠时，一般不要抓腰腹部位， 否则易造成肝破裂而引起死亡。 否则易造成肝破裂而引起死亡。
方法步骤： 方法步骤：
(1)注射部位：颈背部、腋下、腹侧和后肢的皮下 注射部位：颈背部、腋下、 (2)常规消毒注射部位的皮肤 用注射针头取一锐 常规消毒注射部位的皮肤， (2)常规消毒注射部位的皮肤，用注射针头取一锐 角角度刺入皮下 刺入皮下. 角角度刺入皮下. (3)将针头轻轻向左右 摆动，易摆动则表示已 摆动，易摆动则表示已 刺入皮下，再轻轻抽吸 抽吸， 刺入皮下，再轻轻抽吸， 如无回血， 如无回血，可缓慢地将 药物注入皮下。 药物注入皮下。 注射量：0.01ml—0.03ml 体重。 0.03ml／ 注射量：0.01ml 0.03ml／g体重。
方法步骤： 方法步骤：
1、将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量的药液。 将灌胃针连接在注射器上，吸入一定量的药液。 操作前，大致量一下从口到胃的距离， 2.操作前，大致量一下从口到胃的距离，估计灌胃针 头插入的深度。 头插入的深度。 3.左手捉持动物，使头部向上。 左手捉持动物，使头部向上。 右手持针，把灌胃针头的前端放进动物的口腔， 3、右手持针，把灌胃针头的前端放进动物的口腔，顺 着上腭部插入咽部，顺咽后壁轻轻往下推， 着上腭部插入咽部，顺咽后壁轻轻往下推，灌胃针 会顺着食管滑入动物的胃内，此时没有抵触感。 会顺着食管滑入动物的胃内，此时没有抵触感。 用右手食指将针栓慢慢往下压， 4、用右手食指将针栓慢慢往下压，将注射器中的药液 灌入动物的胃中。 灌入动物的胃中。
二、实验动物的购买
1.应购买有实验动物生产供应许可证的单位所生 产繁殖的实验动物，并应索取相应实验动物的 质量合格证明。 2.如果从外地购买的动物，应考虑运输中的各种 因素对实验动物的影响，并应查阅运输检疫证 明。 3.购买的动物需要经过3-7天的隔离检疫、观察。
Hale Waihona Puke Baidu
三、实验动物编号与标记方法
（一）染色法： ： 1、单色涂染法：在每组动物不超过l0只或一个 实验不超过40只的情况下适用。 实验动物：大鼠、小鼠。 常用染色剂：3-5％苦味酸溶液， 可染成黄色。
小鼠 大鼠 豚鼠 家兔 狗 猪 <45kg >45kg
35 50 25 50 30 40 30 40 30
IV IP IV IP IV IP IV IP IV
25 50 20 40 20 55 20 25
I.V. IP IV IP IV IP IV IV
22-44 22-44 22-44 22-44
剂量：小鼠约0.1-0.5ml／10g体重。最大体积为1.0ml/只 剂量：小鼠约0.1-0.5ml／10g体重。最大体积为1.0ml/只 体重 大鼠约1 ml／100g体重，最大体积为1.0ml/只 大鼠约1-2 ml／100g体重，最大体积为1.0ml/只 体重
注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。 注意：在灌胃过程中，避免误插入气管。
方法步骤： 方法步骤： 用两种颜色同时进行染色标记。 (1) 用两种颜色同时进行染色标记。 用苦味酸(黄色) (2) 用苦味酸(黄色)染色标记作为个位 数，个位数的染色标记方法同单色涂 染法。 染法。 用品红(红色)染色标记作为十位数， (3) 用品红(红色)染色标记作为十位数，
（4）左前肢为10号、 左前肢为10号 10 左侧腹部20 20号 左侧腹部20号、 左后肢30 30号 左后肢30号， 40号 两耳后部40号、 背部50号、 背部50号 50 60号 后肢背部60号， 右前肢70 70号 右前肢70号、 80号 右侧腹部 80号、 右后肢90 90号 右后肢90号 100号不作染色标记 号不作染色标记。 第100号不作染色标记。
实验动物的基本操作
— 熟练的技术是实验成功的基础
实验动物的基本操作
第一节 动物实验前的准备
一、动物实验室的选择 二、实验动物的购买 三、实验动物编号与标记
一、动物实验室的选择
1.根据实验目的选择合适的实验室及饲养室。 2.动物实验室要与实验动物同等级别。 3.饲养室应符合实验动物的生活习性及国家实验 动物设施各项标准。
四、兔的抓取保定： 兔的抓取保定：
方法1 (一) 方法1： 步骤： 步骤： 用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤， 1、用右手抓住兔颈部的被毛和皮肤，轻轻 把兔提起。 把兔提起。 用左手托住兔的臀部。 2、用左手托住兔的臀部。
( 二)
方法2 方法2：
器材：兔保定架1 器材：兔保定架1个。 步骤： 步骤： 打开保定架的上盖，抓取并将 并将兔放进架 1、打开保定架的上盖，抓取并将兔放进架 迅速关上保定架的上盖。 内，迅速关上保定架的上盖。 2、右手抓住兔耳朵将头部拉过保定架的卡 将兔的脖子保定。 栓，将兔的脖子保定。 如果兔挣扎， 3、如果兔挣扎，可用手 在它的背上轻轻抚摸， 在它的背上轻轻抚摸， 使其安静。 使其安静。
一、小鼠的抓取保定： 小鼠的抓取保定： 器材：小鼠饲养盒+面罩1 器材：小鼠饲养盒+面罩1套。 方法步骤： 方法步骤： 1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部将小鼠提 放在饲养合的面罩上。 起，放在饲养合的面罩上。 用左手拇指和食指迅速、 2、用左手拇指和食指迅速、 准确地捏住小鼠的两耳后及 颈背部的皮肤，将小鼠提起。 颈背部的皮肤，将小鼠提起。
灌胃量： 灌胃量： 80-150ml ml／ 80-150ml／只／次。 在灌胃过程中， 注 意：在灌胃过程中， 避免误插入气管。 避免误插入气管。
（二）注射给药 1、皮下注射给药： 皮下注射给药： 原理：将药液注入皮下结缔组织， 原理：将药液注入皮下结缔组织，经 毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。 毛细血管、淋巴管吸收进入血液循环。 器材：1m1注射器 注射器1 生理盐水、 器材：1m1注射器1支、生理盐水、烧 酒精、碘酒、棉球。 杯、酒精、碘酒、棉球。
IM IM IM
30-20 15
IV IV
10-9 5
IV IV
10-15 10-15
IM IM
麻醉注意事项
麻醉前应禁食8h以上 麻醉前应准确称体重 注意麻醉剂量 麻醉过程中注意观察动物的反应情况 注意保温 静脉注射时必须缓慢， 在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平
第四节 给药方法
实验动物常用的给药方法有口服、注射、吸入 等 一、经口给药 1.自动口服给药： 2.灌胃给药:是借器械将药物直接灌入动物胃内的 方法。此法可以准确控制给药量，但如果操作 不当易造成动物死亡。 ＊（1）大小鼠灌胃：
五、犬的抓取与固定
用特制的长柄狗头钳夹住狗颈部，将其按在地， 由助手用绳子将其四肢及嘴固定好。扎口时注 意松紧，保证动物正常呼吸。
第三节
实验动物的麻醉
动物麻醉是消除动物手术疼痛，便于实验操作，保证 动物安全，为手术创造良好的条件。 动物全身麻醉分四期： 1.第一期：随意兴奋期，出现运动与运动失调； 2.第二期：不随意兴奋期，由意识完全丧失至规则的自 动呼吸开始时止。 3.第三期：外科麻醉期， 4.第四期：延髓麻醉期，进入此期，麻醉已严重过量。
麻醉方法与麻醉药
麻醉方法：全身麻醉和局部麻醉，通过吸入、 注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔）、口服、灌 胃等方法使动物麻醉。 常用麻醉药物：乙醚（吸入），戊巴比妥钠、 硫贲妥钠、氯胺酮（静脉），普鲁卡因、利多 卡因（局麻），
常用麻醉药的剂量及注射途径
种类 戊巴比妥 mg/kg 途径 硫贲妥钠 mg/kg 途径 盐酸氯胺酮 mg/kg 途径 水合氯醛 mg/k g 400 300 200300 途 径 IP IP IP 乌拉坦 mg/k g 0.75 1.5 1.0 125 IV 1.0 IP IP IV IP IV
（2）兔灌胃
原理：将药液直接注入兔的胃内。 原理：将药液直接注入兔的胃内。 器材：兔开口器、14号胃管、注射器1 器材：兔开口器、14号胃管、注射器1支、生理 号胃管 盐水、烧杯、石蜡油。 盐水、烧杯、石蜡油。
步骤： 步骤：
1、将兔放进保定架内，助手用手轻轻压住兔的背部，避 免兔的挣扎。 2、灌胃者用左手拇指和中指挤压兔两颊，将下颌挤开使 兔被动张口。 3、右手将开口器从一侧口角插入口腔并固定。 4、用泡在石蜡油中的胃管，经开口器的孔插入，向前推 进约15cm，可达胃内。 5、在插管时应将胃管另一端泡在水中确认没有冒气泡， 即可用注射器经胃管注入药液。
方法步骤： 方法步骤： 涂染原则：从左到右、从上到下。 (1)涂染原则：从左到右、从上到下。 左前肢为l 左侧腹部2 (2)左前肢为l号、左侧腹部2号、 左后肢3 左后肢3号。 两耳后部4 背中部5 (3)两耳后部4号、背中部5号、 后肢背部6号。 后肢背部6 右前肢7 (4)右前肢7号、 右侧腹部8 右侧腹部8号、 右后肢9 右后肢9号。 (5)尾巴根为10号 尾巴根为10 (5)尾巴根为10号。 额部为20 20号 （6）额部为20号