小鼠神经功能评分

小鼠神经功能评分

1.神经行为评分

在梗死后24 h,按照Masao Shmi izu-Sasamata得方法[3]对所有大鼠进行神经行为评分,评分标准包括:①自主活动得程度,②左前肢偏瘫,③提尾时左前肢伸不直,④抗侧推能力,⑤向左倾斜度,⑥向左环行度,⑦对触须得反应。以上指标无异常为0分,中等异常为1分,严重异常为2分,将各项评分相加,总分为0~14分。

2.动物行为学评定

①0分:无神经损伤症状;

②1分:不能完全伸展对侧前爪;

③2分:向瘫痪侧转圈;

④3分:向对侧倾倒;

⑤4分:不能自发行走,意识丧失。

3.大鼠神经损伤严重缺损评分(Neurological Severity Scores,NSS):

0分:神经功能正常;

1分:轻度神经功能缺损(提尾时左前肢屈曲);

2分:中度神经功能缺损(行走时向左侧转圈);

3分:中度神经功能缺损(向左侧倾斜);

4分:无自发行走,意识减退;

5分:与缺血有关得死亡。

4、平衡木试验(Beam Balance Test, BBT):

把大鼠置于一宽1、5cm得木条上。木条一端悬空,另一端固定于一块40x40cm得平板中心,以防止大鼠从木条上爬到桌面上使实验失败。木条下备有软垫以防大鼠掉下时跌伤。根据2分钟内大鼠得平衡能力行神经学评分。正常大鼠得平衡能力在1-2分钟。

平衡试验评分标准:

1在木条上站稳,无摇晃,持续2分钟

2在木条上站稳,左右摇晃,未滑下,持续2分钟

3在木条上站立,下滑至一侧,未掉下,持续2分钟

4在木条上站立不到2分钟即从木条上掉下

5试图在木条上站稳、但在数秒钟即掉下

6无任何站立能力

5、抬高身体摇摆试验(Elevated Body Swing Test, EBST):

用于测量运动不对称,EBST测量时首先用手提起大鼠得尾根部,大鼠头部悬垂距平面5cm左右,这时大鼠头部会向左侧或右侧旋转,向单测旋转得角度大于100时为计数得标准,记录旋转得方向与角度,一次试验后让大鼠休息1min,再进行下一次实验,重复试验20次,记录总得次数与方向。

6、一次性被动回避平台试验(Step-down Passive Avoidance Test, SDPAT)就是一种用于研究记忆得简单行为模型,主要适用于研究记忆得巩固( memory consolidation)与记忆得保持

(memory retention)。该模型含有一定得空间记忆成份,试验箱就是一个长方形得封闭空间,高为

60cm,箱内有一较小得平台9 cm X 9 cm, 高出底面约2 cm,动物只能不十分舒服地坚持在平台上,如跑下平台(铜棒,通电,30 V)即遭到电击。训练过程就是这样得:首先把动物放在平台上,大鼠一般在平台

上只能停留几分钟,就会跑下来,但由于底面得金属条就是通电得,大鼠在寻找一段时间后,能够找回平台。这时第一次试验结束,24 h后,再次把大鼠放在平台上,这时底面得金属条并不通电,记录大鼠在平台上滞留得时间,根据测试间隔时间得长短与在平台上滞留时间得多少来判定大鼠对上次电击得记忆保持能力。

7、水迷宫试验(Water Maze Test, WMT):

用于测量大鼠空间学习能力。每组于移植后得第7周进行。在相同室温(25±2)0C与象限条件下,将3组动物连续训练4d,2 次/d,每次限定时间为120s,超过120s 仍找不到平台者记为未找到平台,2 次间隔为10min,第5天测试。

Bederson评分四个功能等级:

0分:无神经损伤症状

1分:悬尾实验不能完全伸展对侧前爪

2分:前肢抵抗对侧推力能力下降？

3分:向对侧转圈

小鼠脑缺血神经功能障碍行为学评价得研究进展

缺血性脑卒中就是一种高发病率、高致残率及高致死率得疾病。在脑缺血及脑缺血再灌注损伤得研究中,最常使用大鼠或者小鼠得可逆性大脑中动脉阻塞(ｍｉｄｄｌｅｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｙｏｃｃｌｕｓｉｏｎ,ＭＣＡＯ) ,因此小鼠ＭＣＡＯ模型在研究脑缺血及再灌注损伤病理生理变化及基因表达方面有着更大得优势脑梗死体积与神经功能缺损得行为学评价就是判定脑缺血严重程度得重要指标,许多研究报告对大鼠得行为学评价进行了阐述,而对小鼠得研究较少,其评价指标大多移植于大鼠得评价体系,至今为止,还没有对这一系列得综合性评价达成共识,不仅有许多

不同得测试在使用,而且所应用测试得数量与频率也没有统一得标准。本文对小鼠脑缺血神经功能损伤评价方法包括感觉功能、运动功能、学习能力以及综合性评价做一综述。

1、感觉功能评价

小鼠ＭＣＡＯ模型中,感觉功能得缺失就是对其神经功能判定得一个可靠得指标目前最常用得就是墙角试验(ｃｏｒｎｅｒｔｅｓｔ),最先由Ｓｃｈａｌｌｅｒｔ改良,具体操作就是将两个尺寸为３０ｃｍ２０ｃｍｃｍ得纸板呈３０夹角放置,将小鼠置于夹角之间,进入夹角深部,双侧得触须受到刺激后会站立并转身面向夹角得开口端。正常小鼠从右面或左面转身得概率基本相等,而一侧脑损伤小鼠会优先向脑损伤侧转身。墙角试验可以准侧检测出感觉功能障碍,甚至９０后得轻度局灶性脑缺血,特别就是在纹状体发生缺血时。此实验简单易行,应用广泛,但Ｌｉ认为墙角试验对感觉功能恢复程度得检测不敏感,可能就是因为这项试验就是对感觉与运动功能得综合评价,需要两种功能都较好得恢复后才能检测出来,而且不能准确反映单侧肢体得运动功能变化。

粘签试验(ｓｔｉｃｋｙｄｏｔｔｅｓｔ又称感觉不对称试验,用来确定皮肤敏感性与感觉功能得整合性。缺血发生在大脑皮层得感觉区、皮质脊髓束与纹状体时,感觉功能发生明显缺失。具体方法就是将直径ｍｍ得圆形背胶标签贴附在小鼠相对无毛得手腕处,当回到饲养笼时,一个正常得小鼠会用牙齿迅速除掉每个圆形标签,而发生脑缺血得小鼠首先除掉附着在正常前肢得标签,然后就是病变得一侧,并需要花费更多得时间,缺血性病变导致了感觉功能得不对称性此外,时间得延迟还表明运动功能得缺失,嘴与前肢运动障碍导致去除粘性标签相对困难。后续得测试可以通过逐步增加患侧所粘标签得大小并减小健侧得标签大小,直到患侧肢体所受得得刺激变得比健侧得更突出,小鼠就开始首先从患侧得肢体消除刺激〔１０〕该方法主要用于对多种病因导致得前肢感觉、皮质运动区损伤后得功能评价,与人类顶叶受损后对侧肢体得忽视症状类似。