布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验的比较

布鲁氏菌病虎红平板凝集试验和试管凝集试验的比较

[摘要]目的：对比虎红平板凝集试验和试管凝集试验对布鲁氏菌病检验的敏感性和特异度。方法：总结我院收集的825份血清样品，先经过虎红平板凝集试验，再进行试管凝集试验，别统计虎红平板凝集试验和试管凝集试验中一个“+”和两个“+”的案例数并计算两种实验的阳性符合率情况。结果：820例待检血清的中，虎红平板凝聚试验中结果为一个“+”者10例，两个“+”及以上者52例，试管凝聚试验中结果为一个“+”者9例，两个“+”及以上者51例，另外，1:50凝聚阳性的有9,人1:100有23人，1:200有28人，两种布鲁氏菌病检验方法的总阳性符合率为96.8%。结论：虎红平板凝集试验可能会出现假阳性结果，试验结果为阳性的需经试管凝集试验检验后才可确诊。

[关键词]布鲁氏菌病，虎红平板凝集试验，试管凝集试验

布鲁氏菌病属于一种人兽传染性疾病，该类疾病主要是由于布鲁氏菌感染引起的，可分为两大类，即动物间传播的布鲁氏菌病和人之间传播的布鲁氏菌病，而后者的感染源一般是动物[1]。布鲁氏菌病一旦在人群中开始传播，就会引发重大公共卫生问题，造成严重的后果，而快速的布鲁氏菌病阳性检验方法对于预防和治疗疾病具有重要的现实意义[2]，为此，笔者总结了两种布鲁氏菌病阳性检验方法并加以比较，旨在为布鲁氏菌病的检验提供一定的理论依据，现报道如下：

1资料与方法

1.1一般资料研究对象为2012年3月-2014年4月期间我院收集的825份血清样品，血清供试者中包括男性400例和女性425例，年龄范围为20岁-49岁，平均年龄为（35.6±15.4）岁。试验过程中用到的布鲁氏菌病阴性血清诊断试剂与布鲁氏菌病阳性血清诊断试剂均由山东省微生物学研究所提供，布鲁氏菌病的试管凝聚抗原和虎红平板凝聚抗原均由中国预防医学科学院提供。

1.2试验方法所有受试者均先采集静脉血，经离心处理获得血清后进行试验，先进行虎红平板凝聚试验，试验结果阳性者再进行试管凝聚试验，均为阳性者即可确诊。

1.2.1虎红平板凝聚试验严格按照GB/T18646-2002标准中虎红平板凝聚试验步

骤进行操作，按要求设置阳性对照和阴性对照，取洁净的玻璃板置于高压蒸汽灭菌锅中灭菌后，用移液器分别吸取待检血清30uL和虎红平板凝聚抗原30uL充分混合均匀进行结果判定：待检血清在室温条件下四分钟内出现明显的凝集现象者视为阳性，反之判为阴性（一般出现均匀的粉红色现象）。

1.2.2试管凝聚试验严格按照GB/T18646-2002标准中试管凝聚试验步骤进行操作，按要求设置阳性对照、阴性对照和抗原对照，首先将待检血清进行稀释，稀释度分别为1:50、1:100和1:200，配置比浊管，将全部比浊管、对照管和试验试管全部放入37℃的恒温箱中保存20小时左右，取出静置两个小时后进行观察并判断结果：根据是否出现凝聚反应和凝聚反应的强度进行判断，如果有50%以上出现凝固（可参照比浊管的清凉度）即可判断试验结果为阳性。

1.3统计指标分别统计虎红平板凝集试验和试管凝集试验中一个“+”和两个“+”的案例数并计算两种实验的阳性符合率情况。

2结果

820例待检血清的中，虎红平板凝聚阳性者62例（其中一个“+”者10例，两个“+”及以上者52例），试管凝聚阳性的有60人（其中一个“+”者9例，两个“+”及以上者51例），1:50凝聚阳性的有9,人1:100有23人，1:200有28人，两种布鲁氏菌病检验方法的总阳性符合率为96.8%（60例/62例）。

3讨论

当前我国的布鲁氏菌病正处于历史的高发时期，而从根本上预防和治疗布鲁氏菌病的方法就是彻底捕杀被感染的动物，从传染源上遏制疾病的传播和感染，因此，探讨具有高度灵敏性和特异性、能够准确、快速的检验布鲁氏菌病的方法对于疫情的控制具有重要的意义。蒋轶文,王清,赵若欣等[3]在文献研究中指出对布鲁氏菌病的有效检验途径是血清抗体检测，常用的方法包括虎红平板凝集试验和试管凝集试验两种，由本研究数据统计结果可以看出：虎红平板凝集试验检验的结果经过试管凝集试验复检后，发现两实验结果的阳性符合情况并非完全一致（本组研究中两试验的总阳性符合率为96.8%），由试验结果可以推断出虎红平板凝集试验可能会出现假阳性结果，试验结果为阳性的需经试管凝集试验检验后才可确诊。

在两种试验方法的可操作性方面，虎红平板凝集试验相对简单，用时最短，

能够在最短的时间内对布鲁氏菌病的感染情况作出定性的判断，相比之下，试管凝集试验耗时较长，完成试验需要24小时左右的时间，因此，虎红平板凝集试验可以用于布鲁氏菌病的大范围快速初步筛查[4]（由本研究实验结果可以看出：虽然虎红平板凝集试验可能出现假阳性结果，但是假阳性发生率并不高），而对少数出现阳性结果的案例需要进一步进行试管凝集试验进行确诊。

参考文献

[1]崔步云.中国布鲁氏菌病疫情监测与控制[J].疾病监测,2007,22(10):649-651.

[2]王真,王双山,吕艳丽等.布鲁氏菌病疫苗S2产品效力检验程序优化[C].//中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会论文集.2013:1127-1131.

[3]蒋轶文,王清,赵若欣等.职业性布鲁氏菌病175例临床分析[J].中华劳动卫生职业病杂志,2013,31(11):861-863.DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-9391.2013.11.020. [4]夏淑婷.布鲁氏菌病血清学诊断靶点的研究进展[J].中国人兽共患病学报,2014,30(3):324-328.