红霉素发酵工艺

红霉素的发酵工艺

产生菌：Streptomyces erythreus 2-9#

一．摇瓶部分培养基：

1．琼脂（斜面或平板）培养基（%）：

淀粉 1.0 , 玉米浆0.5 , 蛋白胨0.3 , (NH4)2SO4 0.3 , NaCL 0.2 ,

CaCO3 0.3 , pH 7.0 , 琼脂 2.2 .

培养条件：

37ºC 8±1天。

2．种子培养基（%）：

淀粉 1.0 , 糊精 2.0 , 葡萄糖 1.0 , (NH4)2SO4 0.25 , 蛋白胨0.3 ,

酵母粉0.3 , 黄豆饼粉 2.5 , NaCL 0.3 , MgSO40.025 , KH2PO40.025 ,

CaCO30.6 , pH自然(6.7) .

装量：25ml/250ml三角瓶

培养条件：

28ºC 46±2小时，转速220-240 rpm.

3．发酵培养基（%）：

淀粉 4.0 , 糊精 2.0 , 葡萄糖 3.0 , 黄豆饼粉 3.0 ，

(NH4)2SO4 0.15 , NaCL 0.2 , MgSO40.02 , KH2PO40.02 , CaCO30.6 ,

pH自然（7.0）.

接种量：10%

装量：25ml/250ml三角瓶

培养条件：

28ºC 7天, 转速220-240 rpm.

前体物的添加：

基础料中加入正丙醇0.4%, 第二天长浓后,每天24小时补加0.2%,补至144小时.

效价在4500-5000 u/ml 以上。

4．生物效价的测定：

培养基（%）：

蛋白胨 1.0 , 牛肉膏0.3 , 酵母膏0.4 , 葡萄糖0.3 , NaCL 0.5 , 琼脂

2.2 (蛋白胨、牛肉膏、酵母膏用热水溶解)，pH7.3±0.1。

检定菌：短小芽孢杆菌。

二．标准曲线的制作：

剂比：1:0.849

精密称取红霉素标准品0.0563g，加1ml乙醇溶解，定容于500ml容量瓶中（用灭菌水）。（1000u/ml）

1．精密吸取0.283，0.333，0.392，0.461，0.5425，0.638，0.7505，0.883，0.50ml于50ml 容量瓶中，用缓冲液定容，各瓶单位为P k，按序编号。

2．以10 u/ml为中心浓度，用微生物检定一剂量法，测定各瓶抑菌圈直径D。

3．将各直径D减去标准中心浓度直径，记为∆D k。

4．以∆D k为横坐标，lgP k为纵坐标，做标准曲线，应通过中心浓度，且70%点在曲线上。

_____________摘自《抗生素药品检验》张治铁等