紫外可见分光光度计原理使用与维护PPT讲稿

•
吸收池
• c、严重的污染需要用超声波清洗。
主要部件
• 清洗注意事项：
• 1）、不能用金属棒或硬的木棒(如牙签等)重擦比色皿，否则，
也会损坏比色皿的通光面，特别强调：比色皿的通光面不能损 坏！
• 2）、不能用带易掉毛的工具(如劣质纸、劣质棉花等) 擦拭比
色皿的受光面，不要用洗洁精之类的清洁剂。以免影响测量。
光谱名称
波长范围
跃迁类型
分析方法
远紫外光 近紫外光 可见光 近红外光
10～200nm 200～380nm 380～780nm 0.78～2.5um
中层电子
真空紫外光度法
价电子
紫外光光度法
价电子
比色及可见光度法
分子振动
近红外光谱法
3、吸收光度法的理论基础和适用范围
1）吸收光度法的理论基础： 朗伯比尔定律：A=kbc， 朗伯定律是说明光的吸光度与吸收层厚度成正
四、紫外可见分光光度计主要部件介绍 光源：
• 紫外可见分光光度计的辐射源有两类：热辐射光
源和气体放电光源。
• 热辐射光源如钨灯和卤钨灯，可用于可见光区；
气体放电光源如如氢灯和氘灯，主要用于紫外光 区。
主要 部件
光源
• 绝大多数紫外分光光度计主要使用钨灯和氘灯作为辐射光源，
钨灯的波长范围在350～2500nm，主要用于可见光区的光源；
• 用参比溶液调节分光光度计的吸光度为0，然
后测定试样溶液或者标准溶液的吸光度值， 参比溶液的作用除了消除吸收池壁对入射光 的放射和散射等影响外，合理选用时还可以 消除其他干扰，使测得的吸光度正确反映被 测物的浓度，提高测定的准确性。
• 4、测定条件的选择
• 1）吸收波长；一般选择最大吸收波长处。 • 2）吸光度范围，一般来说，吸光度在0.2～0.8时，浓度测量
1）比色皿沾污会直接严重影响分析测试的结果！这个非常重要，在日常的分 析工作中，往往不大重视比色皿的沾污问题。
2）、污染清洗方法： a、如果肉眼观察有污点，就应清除掉；可用高级擦镜纸、软的黄鼠狼毛笔等
柔软的物质擦洗；
b、也可用洗液清洗；常用洗液：盐酸-水-甲醇（1:3：4体积比）或者铬酸洗 液，彻底清洗吸收池或者其他玻璃器皿。了解内容：铬酸洗液的配制方法： 20g的K2Cr2O7，溶于40mL水中,将浓H2SO4 360mL徐徐加入K2Cr2O7 溶液中。
仪器展示
• 3、 普及型 - 紫外可见分光光度计 T6系列
T6 紫外可见分光光度计
五、紫外分光光度计测样不稳定和不准确的原因
• 1）市电不稳 • 如：大功率用电器的启停(空调、烘箱、大型电机、电炉等) • 2）比色皿的原因 • 如：紫外区错用玻璃比色皿；脏污；比色皿质量差； • 3）操作原因 • 如：参数设置不当；样池架设置不当；比色皿放置倾斜、晃
费用少，分析速度快； b、灵敏度高； c、选择性好，有最大吸收波长。 d、精密度和准确度较高; e、用途广泛。
2、结构
1）光源（氘灯、钨灯）→2）单色器 （光栅）→3）吸收池→4）检测器→
↑样品 5）信号显示系统
三、分光光度法测定时需要考虑 的因素
1、反应条件的选择
1)显色剂的用量； 2)溶液酸度； 3)溶液温度； 4)显色时间； 5)溶剂，比如有机溶剂常能降低有色化合物的分离度，从而
• 氘灯的波长范围在180～460nm之间，主要用于紫外光区的
光源。
• 如果测定波长在180～400nm之间，应选择氘灯作为辐射光
源，如果波长在400nm以上应选择钨灯作为辐射光源，关闭 不用的光源。
主要部件
吸收池
• 吸收池材质：吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分
• 为玻璃吸收池和石英吸收池。
•
的误差最小，这ห้องสมุดไป่ตู้是适宜的吸光度范围，解决办法：a 调节 溶液浓度如减少或者增加取样量，改变稀释倍数；b 使用厚 度不同的吸收池比如提高或者减少吸收池的厚度，需要重新 作校正曲线；
• 3）狭缝宽度的选择，狭缝宽度直接影响测定的灵敏度和工作
曲线的线性范围，狭缝宽度太大，灵敏度下降，工作曲线线 性范围变窄，反之，相反。
比；比尔定律说明光的吸光度与溶液浓度成 正比。 2）朗伯比尔定律适用范围：朗伯定律对于各种 有色溶液都适用，比尔定律只有在一定浓度 范围内使用，吸光度A和浓度才成直线关系， 它只适用于浓度小于0.01mol/L的稀溶液。
二、分光光度计的特点及结构
1、特点： a、与其它光谱分析方法相比，其仪器设备和操作都比较简单，
检测器
主要部件
检测器的作用是检测光信号，并将光信
号转变为电信号。现今使用的分光光度计
大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
仪器展示
• 1、高档 - 紫外可见分光光度计 19系列
TU-1901/1900 紫外可见分光光度计
• 2、中档 - 紫外可见分光光度计
仪器展示
18系列
岛津UV-1800双光束
提高显色反应的灵敏度。
• 2、显色反应时应注意共存离子的干扰
• 消除办法： • 1)、控制溶液酸度； • 2)、加入掩蔽剂； • 3)、选择适当的参比溶液； • 4)、选择适当的波长； • 5)、利用氧化还原反应； • 6)、采用适当的分离方法； • 7)、利用导数光谱法、双波长等新技术。
• 3、参比溶液的选择
紫外可见分光光度计原理使用 与维护课件
一、吸收光光度法概述
1、吸收光度法概念：基于物质对光的选择性吸收而建立的分析 方法称为吸收光度法。
吸收光度法
紫外可见分光光度法 200—780nm
红外光谱法 2.5—1000um
紫外可见分光光度法 200—400nm
可见分光光度法 400—780nm
2、吸收光谱的分类
切记：玻璃比色皿不能用于紫外区！
•
区分方法:可用仪器实测紫外区200nm波长处的吸光
度值。
主要部件
吸收池 因比色皿的使用不当易导致数据重复性差。 原因：角度、位置变化、表面洁净度、污染程度 注意：粘接的比色皿不适合装浓硫酸、不适合用高 于25瓦的超声波机清洗。
吸收池
主要部件
吸收池的污染和清洗 ：
动；取放比色皿时方向不竖直，用力过大使样池架挪位等。
• 4）样品自身的问题
• 如：空白值过大、样品浓度过高，超出动态线性范围；试
剂等被污染或纯度不高；有气泡；样品显色在变化，未稳定；
有悬浮或沉淀物；见光分解；挥发、溶剂使用不当等。
• 5）环境影响
• 如：温度、湿度、粉尘、电场、磁场、振动等影响