芳酸类非甾体抗炎药物的分析江西大学杭太俊药物分析第七版

Aspirin片
C H 2C O O H
HO C COOH
C H 2C O O H
枸橼酸 Citric acid
HO CH
HO CH
酒石酸 Trataric acid
COOH COOH
水解产物 水杨酸SA HAc
第一步：NaOH滴定所有的酸：ASA，CA，TA，SA，HAc 第二步：水解后剩余滴定
第四节 含量测定
O
萘普生
O CH3
第一节: 结构与性质
R'
光谱特性
O
酸性
O
OH CH3 N R
吲哚乙酸类
HO CH3
O
N
H3C
Cl
O
吲哚美辛 Indometacin
光谱特性
水解
OH O
R N H N O S O CH3
苯并噻嗪甲酸类
第一节: 结构与性质
OH O
NN H N O S O CH3 吡 罗 昔 康 Piroxicam
第四节 含量测定
1.直接滴定法
C O O H
中 性 乙 醇 N a O H2 0 ℃ 以 下 O C O C H 3
乙醇作用：溶解ASA；防止ASA在水溶
液中滴定过程易水解
C O O N a H 2 O
O C O C H 3
中性乙醇：对指示剂(酚酞)而言为中性， 可消除滴定误差
Ø pKa 3~6 的药物溶于中性醇,可直接用NaOH滴定 Ø pKa 6~9 的药物要用非水溶液滴定法 Ø若SA不合格，不宜采用本法
NHCOCH3
第四节 含量测定
一、酸碱滴定法(Acid-base titration method)
苯甲酸 pKa 4.20 水杨酸 pKa 2.98 酸性较强
C OH
O OH
ü羧酸邻位-OH，吸电子基团，使酸性增加； ü分子内氢键，更增加了其极性
直接滴定 Aspirin、丙磺舒(Ch.P. BP. JP等) 苯甲酸(Ch.P等)均采用本法
二、缩合反应显色
C H 3
O
H O
O 酮 洛 芬
二苯甲酮结构
N HN H 2
N O 2
H O
+
H 2SO 4
C H 3
-H 2O
O
N O 2
O 2N NN
H
橙 红 色
N O 2
第二节: 鉴别试验
❖ 三、重氮化-偶合反应 ❖ 对乙酰氨基酚具有伯氨基，在酸性条件下反应可生成对氨基酚，再与亚硝酸钠进行重氮
O
+ OH O
COOH
COOH
HO
O
HO
O COOH
COOH
HPLC法
-O
O
+ O COOH
COOH
第三节: 特殊杂质及其检查法
其它有关物质
(CH3CO)2O
OH
+
OH COOH
OCOCH3
醋酸苯酯
OH COO
OCOCH3 COOH
+
OCOCH3 COO
HPLC法
水杨酸苯酯 乙酰水杨酸苯酯
第三节: 特殊杂质及其检查法
氯贝丁酯在226nm的波长处有最大吸收，但对氯酚等有关物质亦有吸收，干扰UV法的测定。根据氯贝丁 酯为酯结构，不能发生电离，而有关物质可发生酸性解离的性质差异，采用阴离子交换色谱分离后，采用 UV法测定。
第四节 含量测定
3.CPC-UV法(Column Partition Chromatography)
化反应，之后再与碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。
H O
N H C O C H 3 + H C l+ H 2 O H O
H O
N H 2 · H C l+ H N O 2 H O
水解反应产生 芳伯胺
N H 2 · H C l+ C H 3 C O O H
芳伯胺重氮化
N 2 C l+ 2 H 2 O
O N a CO O N a H +
O H
水杨酸
CO O H
。
C
O
4 ,70~75
CO)
2
COOH O
3
-C O 2
2 SO
(CH
H
双水杨酯
O OH
O
O C CH3 COOH
ASA
OH
副产物
第三节: 特殊杂质及其检查法
淡黄、红棕、深棕色
COOH [O]
OH
HO
COOH [O]
OH
O
COOH O
HO
深蓝色
(O)
K2Cr2O7
随即变为棕绿色
△ (四)水解反应
COOH
OCOCH3 Na2CO3
阿司匹林
黄色并产生绿色荧光
COONa
OH H2SO4
+
CH3COONa +CO2
H2SO4
COOH OH
白色水杨酸
CH3COOH
❖ 六、特征元素反应： ❖ 分子中含有氯、硫等元素可以转化为氯化物或硫化物进而进行鉴别。 七、光谱法 1、UV 2、IR
OH O N
N
S
CH3
H
N
O S O CH3
美洛昔康 Meloxicam
OO
S
HN
CH3
O
光谱特性
NO2 尼 美 利 舒 N im esu lid e
第一节: 结构与性质
其它非甾体类抗炎药 水解
H N CH3
O HO 对乙酰胺基酚 Paracetamol
❖ 依据药物理化性质，可展开一系列鉴别方法
第四节 含量测定
滴定度
待测物反应 系数
滴定液物摩 尔质量
T=0 .5× 1× 1 8 0 .1 6= 4 5 .0 4(m g /m l)
2 滴定液物反
滴定度浓度
应系数
含 量 % =
( V 0-V ) × F × T × 100%
W
样品测定消
空白反应体
耗体积
积
样品称重量
第四节 含量测定
3.两步滴定法(Two-step titration)
芳酸类非甾体抗炎药物的分析江西大学杭太俊药物分析第七版
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第一节 典型芳酸类非甾体抗炎药物的结构与性质
❖ 一、典型药物与结构特点
(A sp irin ) O OH
O
CH3
O
(阿 司 匹 林 )
(S alsalate) O OH
O O OH
(双 水 杨 酯 )
O OH O R
R' (水 杨 酸 类 )
O + FeC l3
对 乙 酰 胺 基 酚 Paracetam ol
Fe1/3O
H N C H 3
+H C l O
蓝 紫 色
OH O
NN H N O S O CH3 吡 罗 昔 康 Piroxicam
显玫瑰红色
OH O N
N
S
CH3
H
N
O S O CH3
美洛昔康 Meloxicam
显淡紫色
第二节: 鉴别试验
取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于阿司匹林0.3g)，置锥形瓶中，加中性乙醇(对酚酞 指示剂显中性)20ml，振摇使ASA溶解，加酚酞指示液3滴，滴加NaOH液(0.1mol/L)至显粉红色，再精密加 NaOH液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15min，并时时振摇，迅速放冷至室温，用H2SO4液(0.05mol/L)滴 定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4
MeO 6-甲氧基-2-萘乙酮
杂质限量
OH COOH CH3 催化氢化
MeO 2-羟基-2-(6-甲氧基-2-萘基)丙酸
MeO
萘普生
CH3 COOH
第三节: 特殊杂质及其检查法 二、对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙酰胺
HPLC
Cl HO
水解
NO2
HO
NH2 酰化 HO
NO2 还原 NHCOCH3
Cl
C O O H O C O C H 3 2N aO H
C O O N a O H C H 3C O O N aH 2O
2 N a O H H 2 S O 4 N a 2 S O 4 2 H 2 O
USP32-NF27
取本品约1.5g，精密称定，准确加NaOH液(0.5mol/L)50.0ml，缓缓煮沸10min，放冷，以酚酞为指示剂，用 H2SO4液(0.25mol/L)滴定剩余的NaOH，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的NaOH液(0.5ml/L)相当于 45.04mg的C9H9O4
O
光谱特性
H N
R
邻氨基苯乙酸类
酸性
D iclofenac S odium O
N aO
Cl
H
N
基团特性
Cl 双氯芬酸钠
酸性
CH3
HO
R'
O R
芳基丙酸类
Ketoprofen
CH3
O
HO
O 酮洛芬
第一节: 结构与性质
Ibuprofen CH3 HO
O
布洛芬
CH3 CH3
Naproxen CH3 HO
烯醇式结构: 酸性
OH O N
N
S
CH3
H
N
O S O CH3
美洛昔康 Meloxicam
第四节 含量测定
为什么氢氧化钠能 溶解之？
本品在甲醇、乙醇及水中极微溶或者几乎不溶，在丙酮中微溶。所以CHP使用 定量过量的氢氧化钠滴定液溶解后，再用盐酸滴定液回滴剩余的氢氧化钠。
Hale Waihona Puke Baidu
第四节 含量测定
2.水解后剩余滴定法(Residual titration after hydrolysis)
一、与三氯化铁反应显色
O
OH + FeCl3+H2O
OH
阿司匹林：紫堇色 双水杨酯：紫色 二氟尼柳：深紫色 均通过产生水杨酸与三氯化铁反应显色
第二节: 鉴别试验
水杨酸反应
O O Fe +3HCl
O OH 紫 堇 色
第二节: 鉴别试验
❖ 对乙酰胺基酚与三氯化铁显蓝紫色
酚羟基反应
H N C H 3
H O
HO
N2Cl +
偶合反应
OH +NaOH
NN OH
OH
红 色 偶 氮 化 合 物
第二节 鉴 别
重氮化-偶合反应
OCOCH3
COO
贝诺酯
NHCOCH3
HO
+3H2O HCl
+
NH2 HCl
OH COOH
HO
NaNO2,2HCl
OH
N2+Cl-
NaOH
OH
NN
OH
橙红色
第二节 鉴 别
(三)氧化反应
甲芬那酸＋H2SO4
压榨 棒 21mm
350mm
第四节 含量测定
b.ASA测定 供试液制备 洗脱 5,25mlCHCl3 相继洗脱，弃去CHCl3 洗脱 10ml冰HAc-CHCl3(1→50)**；85ml冰HAc-CHCl3(1→100)，并稀释至100ml
①NaHCO3使ASA和SA成盐保留于柱上 用CHCl3洗脱的目的：去除中性或碱性杂质
片剂规格
滴定度
第四节 含量测定
直接滴定水解后剩余滴定
法
法
两步滴定法
优点 操作简便
水杨酸干扰少
结果准确，避免游 离SA及片剂中稳定
缺点 游 时离 结S果 A偏 偏高 高不能完全排出干扰
二、非水溶液滴定法
吡罗昔康
第四节 含量测定
四、UV 1.直接UV法
2.离子交换-UV法
标 示 量 % =A s× C R× D× W× 100% A R× W × 标 示 量
F
F
Cu
F
NH2 +
偶联 F
F
F
F 水解 OH-/H+ F
氧化 COCH3 H2O2 F F
羧化
OH
F
CO2,CH3ONa
TLC
乙酰化 (CH3CO)2O,AlCl3
OCOCH3
F
COOH
OH
HPLC
第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
萘普生的有关物质检查
色谱条件
MeO 2-萘甲醚
O
酰化
CH3 羧化
F
(S a lic y lic A c id )
O
OH
OH
(水 杨 酸 )
(Difunisal) O
F
OH
OH
(二 氟 尼 柳 )
第一节: 结构与性质
酸性
光谱特性
O OH H N R
邻氨基苯甲酸类
酸性
M efenam ic A cid
O OH
H
CH3
N
CH3
甲芬那酸
第一节: 结构与性质
酸性
O R'
ü利用固定相酸碱性的不同进行分离 ü利用药物和固定相起化学反应而进行分离 ü利用生成离子对进行层析分离 ü单纯靠选择流动相进行分离
22mm
担体：硅藻土(Celite 545) 固定相：一定pH的缓冲水溶液 流动相：与水不相混溶的有机溶剂(洗脱前必须先用水饱和)
层析 柱 玻 棉
4mm
60mm
200~300mm
C O O N a N a O H
O C O C H 3
C O O N a
N a A c H 2 O O H
2 N a O H H 2 S O 4 N a 2 S O 4 2 H 2 O
第四节 含量测定
空白消耗
样测消耗
校正因数
标 示 量 % =(V 0-V )× F× T× W × 100% W × 标 示 量
②冰HAc酸化的目的：使ASA游离，易被 CHCl3洗脱
测定：280nm 空白：CHCl3
谢谢！
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二、甲芬那酸中2,3二甲基苯胺的检查
C O O H H 3C C l +
C H 3 N H 2 C u
GC法
C O O H N H H 3C C H 3
甲芬那酸
第三节: 特殊杂质及其检查法
相同药物,不同浓度,相互比 较,主点限量
三、二氟尼柳中有关物质的检查
所谓物质A和物质B的检查是采用自 身对照法进行检查的
第二节: 鉴别试验
第二节 鉴 别 (七) IR：阿司匹林
-COOH -OH
-COOH
Ph-C
邻位取代Ph
第二节 鉴 别
N-H
O-H
N-H Ph:C=C
芳胺
酚
❖ 八、色谱法 供试品保留时间
第二节: 鉴别试验 对照品保留时间
第三节: 特殊杂质及其检查法
一、阿司匹林和双水杨酯
生产工艺
O N a
CO 2 加 压 ，