普罗布考促进细胞胆固醇流出及体内胆固醇逆转运

（Ｐ＜０．０５），但０．５％与１％普罗布考组间无显著性差异。
４．
各普罗布考干预组（０．１％，Ｏ．５％，１％）小鼠肝
４－０．０５，１．５７
４－
与１００肛ｍｏｌ／Ｌ两组之间无显著性差异。
９．
脏中３Ｈ的含量较对照组减少（１．６５
０．０３。１．５６ ４－０．０２ ＶＳ
不同浓度普罗布考对巨噬细胞ｓＲ—ＢＩ，ＡＢ—
４－０．０２，
４－０．０４）的表达与对照组（ｏ．４５±０．０２）
普罗布考剂量依赖性地促进小鼠体内巨噬 普罗布考促进小鼠体内胆固醇逆转运可能
比较，亦呈剂量依赖性地增加Ｏ）＜０．０５）；普罗布考干预 后小肠ＡＢＣＧ５ ｍＲＮＡ与蛋白的表达均剂量依赖性 增多（Ｐ＜ｏ．０５）；０．５％与ｌ％普罗布考两组之间差异无 统计学意义。
流出；分别以ＲＴ—ＰＣＲ，Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ方法检测肝组织
ＳＲ—ＢＩ，胆固醇７ａ羟化酶，肝脏和小肠ＡＢＣＧ５，巨噬
细胞ＡＢＣＡｌ，ＡＢＣＧｌ／：ｓＲ—ＢＩ的基因及蛋白表达。 结果
１．
流出，而不利于胆固醇的逆转运。然而，这些结果大 多来自体外研究，只能从单独的环节解释普罗布考 影响ＲＣＴ。最近的研究发现，转运子ＡＢＣＧｌ、 ＡＢＣＧ５，ＡＢＣＧ８对ＲＣＴ具有重要作用，但普罗布考影 响ＲＣＴ的机制是否与之有关尚未有报道。巨噬细胞
０．０３，１．１９
４－０．０４ ｖｓ ０．４９±０．０４）的表达量，并加速血清
１．０５ ４－０．０１．１．１９ ４－０．０１。１．１７ ４－０．０１ ＶＳ ０．９４
诱导的胆固醇流出率（２５ ４－０．０６％，２９．１±０．０４％，
３４．１±０．０４％，３４．９ ４－０．０８％ｖｓ ２０ ４－Ｏ．０３％）（Ｐ＜Ｏ．０５），５０
５．
的巨噬细胞后分别检测小鼠血清、肝Βιβλιοθήκη Baidu织、粪便中
，Ｈ一胆固醇的含量，是一种直接检测小鼠体内巨噬细 胞ＲＣＴ的可行方法。
２．
不同剂量普罗布考（ｏ．１％，０．５％，ｌ％）干预后
４－０．０１，０．９６
４－
肝脏胆固醇７ Ｏｒ．羟化酶ｍＲＮＡ（０．６８
０．０２，０．９８
４－０．０４）的表达与对照组（０．５１ ４－０．０２）比较，
１．８６±０．０１。Ｐ＜Ｏ．０５）；粪便中３Ｈ
４－０．０４，３．７５ ４－０．０３，３．７９
４－
ＣＡｌ基因及蛋白表达无明显影响。 结论：
１．
的总含量显著增多（２．８１
０．０７ ＶＳ １．３７
４－０．０４，Ｐ＜０．０１）；Ｏ．５％与１％普罗布考两
经腹腔注射Ａｅ—ＬＤＬ及３Ｈ一胆固醇处理过
组之间差异无统计学意义。
节胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ）、卵磷脂胆固醇酰基转 移酶、载脂蛋白Ｅ和Ｂ族Ｉ型清道夫受体（ｓａ—ＢＩ）等 的表达与功能，增加胆固醇从外周细胞的流出及转 运。但是也有相反的报道，观察到普罗布考可抑制三 磷酸腺苷结合盒转运子（ＡＢＣ）ＡＩ介导的细胞胆固醇
布考干预的ＲＡＷ２６４．７巨噬细胞，测定细胞胆固醇
其中可能机制。
（ＨＤＬ－Ｃ，０．９４－ｔ－０．１６，０．７１±０．１４，０．７０
ＶＳ
１．６０－ｔ－Ｏ。ｌｏ）口＜０．０１），也降低低密度脂蛋白胆固醇
（ＬＤＬ－Ｃ，０．３７±０，０８，０．３２±０．０８，０．３１±０．０７ ＶＳ ０．４７土０．０６）及甘油三酯ｆｒＧ，０．９１－ｔ－Ｏ．１２．０．８２±０．０７。
２．
普罗布考（０．１％，０．５％，ｌ％）呈剂量依赖性地
降低血清总胆固醇（ｒｃ，１．７８±０．２２，１．４３±０．２０，
１．４２±０．１５ ＶＳ
２．７１－ｔ－Ｏ．４３）、高密度脂蛋白胆固醇
４－０．１０
的发展起着最为关键的作用。普罗布考对体内巨噬 细胞ＲＣＴ效果如何？由于缺乏测定体内ＲＣＴ的方 法，至今没有直接证据。本课题参考Ｒａｄｅｒ实验室的 方法建立一种测定体内巨噬细胞ＲＣＴ的方法。观察 普罗布考对巨噬细胞ＲＣＴ的体内、体外影响，并探讨
普罗布考（畅躺促进细胞胆固醇流出
及体内胆固醇逆转运
中南大学湘雅二医院心内科 倪占玲赵水平
胞内胆固醇流出是动脉粥样硬化斑块消退的关 键环节。胆固醇逆转运（ＲＣＴ）是指过多的胆固醇从外 周细胞包括巨噬细胞转运至肝脏，进而以胆酸的形
机制。 方法
以Ｃ５７Ｂ圳小鼠为动物模型，给予腹腔注射经
乙酰化低密度脂蛋白（Ａｃ—ＬＯＬ）荷脂与氚（３Ｈ）标一胆
６．
细胞的胆固醇逆转运。
４．
是通过上调肝脏胆固醇７ ａ羟化酶、肝脏和小肠 ＡＢＣＧ５的表达而实现的。
５．
普罗布考干预后肝脏ＳＲ—ＢＩ的ｍＲＮＡ与蛋
普罗布考促进小鼠体内胆固醇逆转运可能 普罗布考干预后的小鼠血清显著促进巨噬
白表达没有明显变化（Ｐ＞Ｏ．０５）。
７．
与肝脏ＳＲ—ＢＩ的表达量无关。
６．
普罗布考干预４周后小鼠血清（３８±０．０３％）
过度荷脂产生的泡沫细胞沉积于动脉壁形成了早期 的粥样斑块，因此巨噬细胞的ＲＣＴ对动脉粥样硬化
腹腔注射经Ａｅ—ＬＤＬ荷脂及３Ｈ一胆固醇标
记的ＲＡＷ２６４．７细胞悬液后小鼠血清、肝脏和粪便
中均可检测到３Ｈ的放射活性，分别占注射总量的百 分比为（２．８１±０．０６，０．６８±０．０３，０．６９－ｔ－Ｏ．０３）。
０．８４－ｔ－Ｏ．１２ ＶＳ １．１６±０．Ｚ１）（Ｐ＜Ｏ．０５），但０．５％与ｌ％酱
罗布考组问无明显差异。
本研究旨在建立一种直接测定动物活体内巨噬
细胞ＲＣＴ的方法；研究普罗布考干预对小鼠体内巨 噬细胞ＲＣＴ的影响，再观察普罗布考干预对体外巨
各普罗布考干预组（０．１％，０．５％，１％ｙｈ鼠血 清３Ｈ一胆固醇的含量较对照组剂量依赖性地显著增
３．
多，占注射总量的百分比分别为（６ｈ：１．２７－ｔ－Ｏ．０ｌ，
１．４２－ｔ－Ｏ．０１，１．４３土０．０２ ＶＳ
噬细胞胆固醇流出的影响，分别探讨其中可能作用
１．０８±０．０２），（２４ｈ：１．８６－ｔ－
・８４・
０．０３，２．５２ ４－０．０２，２．５４ ４－０．０２ ＶＳ １．４１
４－０．０２）和（４８ｈ： ４－０．０３），
血清、肝组织、粪便中３Ｈ一胆固醇的含量；以不同剂
量普罗布考（ｏ，０．１％，０．５％，ｌ％ｗ册干预４周的
Ｃ５７ＢＬ．，６Ｊ小鼠为动物模型，分别腹腔注射上述标记 细胞悬液，测定血清、肝组织、粪便中３Ｈ一胆固醇的 含量；收集０．５％普罗布考组血清孵育不同剂量普罗
体作用机制未明。以往的研究报道，普罗布考通过调
普罗布考剂量依赖性地降低小鼠血清总胆
呈剂量依赖性地增多（Ｐ＜０．０５）；ＡＢＣＧ５ｍＲＮＡ（０．６４．４－
０．０２，０．８６ ４－０．０４，０．８５ Ｏ．９５ ４－０．０３，０．９６
固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和 甘油三酯，０．５％普罗布考组达最大效应。
３．
４－０．０３）及其蛋白（０．６ １
ｖ８
普罗布考促进巨噬细胞胆固醇流出的机制
因（０．７５
０．５２
可能与细胞膜ＳＲ—ＢＩ、ＡＢＣＡｌ的表达量无关。
４－０．０４）及蛋白（０．６８
４－０．０３，０．８５ ４－０．０５，１．１７．４－
・８５・
式被分泌到体外的过程。ＲＣＴ是机体排出多余胆固 醇的最主要途径，也是机体抗动脉粥样硬化的重要
机制之一。普罗布考是目前所知唯一能消退家族性 高胆固醇血症患者黄色瘤的调脂药。动物实验发现， 普罗布考可以抑制甚至消退动脉粥样硬化斑块。推 测其中重要机制是普罗布考促进体内的ＲＣＴ，但具
固醇标记的ＲＡＷ２６４．７细胞悬液，用液闪计数仪测定
较对照组（２０ ４－０．０３％）明显促进体外培养巨噬细胞的 胆固醇流出（Ｐ＜０．０１）。
８．
ｖｓ
细胞胆固醇流出。
７．
普罗布考可能是通过增加ＡＢＣＧｌ的表达
不同浓度普罗布考（１０，２０，５０，１００斗ｍｏｌ／Ｌ
而促进巨噬细胞胆同醇流出的。
８。
ＯｔＬ
ｔｏｏｌ／Ｌ）剂量依赖性地增加巨噬细胞ＡＢＣＧＩ基
４－０．０３，０．９４ ４－０．０３，１．１８ ４－０．０２，１．２２ ４－Ｏ．０４