凝血试剂应用手册(常规ddat3)
凝血酶时间(TT)操作程序 TT-SOP
不宜使用EDTA·Na2、肝素、草酸盐抗凝,应使用0.109mol/L枸橼酸钠抗凝。
【检验步骤】
打开血凝仪,等候一定时间,使仪器达到分析温度。
将TT试剂用规定体积的TT缓冲液复溶,轻摇混匀,并置于仪器试剂位。
根据血凝仪使用说明书及TT试剂使用说明书选择合适的参数,在仪器主菜单Baidu Nhomakorabea选择TT项目进行检测。
TT试剂溶解后2~8℃可保存7天,4小时内-20℃冻存,可稳定30天。复溶时请于37℃迅速融化。
注意事项
TT试剂不需37℃预温,15~25℃室温直接使用;血浆预温不宜超过5分钟。
测定温度36.5℃~38.5℃,过低或过高温度均使TT延长。
检验室
文件编号:
TT-SOP-01-01
凝血酶时间(TT)操作程序
【检验方法】
凝固法
【检验原理】
待测血浆加入适量的凝血酶溶液,纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白,测定凝固所需的时间,即为待测血浆凝血酶时间(TT)。
【检验试剂】
测定时的各组成成分
TT试剂:凝血酶、缓冲液、稳定剂、防腐剂
TT缓冲液:缓冲液、稳定剂、防腐剂
试剂稳定性与贮存
试剂2~8℃保存,可稳定至标签所示失效日期。
【方法学评价】
正常质控(混合)血浆时间:11~17秒;
重复性:重复试验的变异系数(CV)≤5%;
上海太阳凝血试剂操作方法
上海太阳凝血试剂操作方法
上海太阳凝血试剂是一种用于血液凝血功能检测的试剂,其使用方法如下:
1. 准备工作:将试剂从冷藏存放温度(一般为2-8)取出并放置于室温下,待试剂温度达到室温后方可使用。
2. 取一支试管或试剂盒,将试管或试剂盒中的凝血试剂齐全取出,并放置于工作台上。
3. 取血:使用血液采集针和采血管进行静脉采血,一般采集2-3毫升的全血,采血时应注意采集血液时的无菌操作。
4. 将采集到的全血倒入试管或试剂盒中,根据所用试剂的要求加入适量的试剂溶剂,将血液与试剂充分混合。
5. 快速制备血小板贫血的血浆:将混合液在37下静置10-15分钟,然后以3000-3500rpm的速度离心10-15分钟,将上清液(血浆)吸取出来即可。
6. 按照具体试剂的说明书进行后续操作,如添加其他试剂、加热、震荡等步骤。
7. 最后根据试剂要求进行试剂检测结果的读取和记录。
需要注意的是,上海太阳凝血试剂的具体操作方法可能会根据不同的试剂而有所差异,因此在操作前应仔细阅读试剂的使用说明书,并按照说明书上的操作步骤进行操作。
血凝试验与临床应用
组织纤溶酶原激活物(tissue piasminogen activator,t-PA),是激活纤溶系统的重要因子。
纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inbibitor,PAI-1),可灭活t-PA和u-PA, 是重要的纤溶抑制物。
凝血酶调节蛋白(thrombomodulin,TM),可 促进蛋白C的活化,对抗凝血系统有重要所用。
内皮细胞和中膜层含有丰富的组织因子 (tissue factor,TF,因子Ⅲ),是外源 凝血途径的启动因子。
5. 血小板的作用
血小板的止血功能主要通过粘附、聚集 和释放反应来实现。其中血小板粘附和 聚集反应可形成白色血栓,堵塞血管壁 的漏洞,保护毛细血管的完整性。释放 的活性物质在止血和凝血过程中起重要 作用,如血小板第3因子(PF3)等。
APTT正常
APTT异常
PT正常 因子ⅩⅢ定性
内源凝血途径缺陷
试验阳性
有出血症状:
因子ⅩⅢ缺陷症 因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺陷
(遗传性、获得性) 症(遗传性、获得性)
无出血症状:
因子Ⅻ、PK、HMWK缺陷
症(遗传性、获得性)
PT异常 外源途径缺陷
共同途径缺陷
因子Ⅶ缺陷症
因子Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、Ⅰ缺陷症
(遗传性、获得性) (遗传性、获得性)
PT,PTA,INR
PT(s)的长短受所用试剂—组织凝血 活酶(FⅢ)敏感度的影响。 结果用INR的方式来表示可克服这一缺 点。
血凝五项检测的应用及注意点
血凝五项检测的应用及注意点血凝五项检测是一种常见且重要的实验室检查方法,用于评估人体的凝血功能。它包括了凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原测定(Fib)以及D-二聚体测定(DD)。这些检测项目可以帮助医生了解患者的凝血状态,以及对于某些疾病的诊断和治疗起到了重要作用。
一、血凝五项检测的应用
1. 评估凝血功能
血凝五项检测可以提供全面的凝血功能评估。其中,凝血酶原时间可以检测凝血系统中维生素K依赖性凝血因子(如II、V、VII、X)的活性;活化部分凝血活酶时间则用于评估内源性凝血途径的功能;凝血酶时间主要用于评估凝血酶形成的过程;纤维蛋白原测定用于检测纤维蛋白原在血浆中的含量;D-二聚体测定则可以辅助诊断和监测血栓性疾病的发展。
2. 诊断凝血相关疾病
血凝五项检测在诊断凝血相关疾病方面起到了至关重要的作用。例如,凝血酶原时间延长可以提示患者可能存在维生素K缺乏或凝血因子缺乏;如果活化部分凝血活酶时间延长,则可能存在遗传性血友病或体内某些凝血因子缺乏;凝血酶时间延长可能暗示凝血酶形成异常等。
3. 监测抗凝治疗
在抗凝治疗中,血凝五项检测也被广泛应用。抗凝治疗如华法林治疗,需要密切监测患者的凝血参数以避免出现出血或血栓等意外情况。凝血酶原时间是评估华法林治疗质量的重要指标,对于调整华法林剂
量具有指导意义。
二、血凝五项检测的注意点
1. 采样技巧
血凝五项检测需要抽取静脉全血进行检测,因此在采样时需要注意
采用无菌技术,避免污染或者血液凝固。另外,要确保采集的血样量
血凝块DNA纯化试剂盒实验操作步骤说明书
血凝块DNA纯化试剂盒说明书
血凝块DNA纯化试剂盒Cat. No. 5次样品
4201005
50次制备
4201050
250次制备
4201250
核酸纯化柱
2 ml离心管
蛋白酶K贮存液Buffer SP
Buffer PL
Buffer L1
Buffer L2
Buffer WA(浓缩液)Buffer WB(浓缩液)Buffer TE
说明书5个
5个
120 µl
100 µl
1.5 ml
2 ml
2 ml
1.9 ml
1.5 ml
1.2 ml
1份
50个
50个
1.2 ml
1 ml
15 ml
20 ml
20 ml
12 ml
10 ml
12 ml
1份
250个
250个
1.2 ml×5
1 ml×5
75 ml
100 ml
100 ml
60 ml
50 ml
60 ml
1份
1.蛋白酶K贮存液和Buffer SP请于﹣20℃贮存。
2.其他试剂与物品如果储存于室温(15~25℃),可在两年内保持使用性能无明显变化;如果将产品储存于2~8℃,可延长产品的有效期至两年以上(2~8℃储存的产品使用前应先产品恢复到室温后再使用)。
技术支持
杭州新景生物试剂
产品介绍
本产品适合从300~400 mg血凝块中分离纯化总DNA。血凝块无需研磨,直接加裂解液消化。溶解后的血凝块经Buffer L2沉淀血红蛋白,上清液中的DNA结合到纯化柱上,降解的蛋白与PCR抑制物则被过滤除去,纯化柱上的DNA经Buffer WA和Buffer WB洗涤,用Buffer TE洗脱,即可用于各种分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品
1.无水乙醇
2.1.5 ml离心管和移液器及吸头(为避免样品间的污染,请选用含有滤芯的移液器吸头)3.一次性手套及防护用品和纸巾
血凝试剂简介
凝血酶原时间
PT
பைடு நூலகம்
活化部分凝血酶原时 间
APTT
凝血酶时间
TT
纤维蛋白原含量 血浆纤维蛋白降解产 物
FIB
凝血酶、咪唑缓冲液
D-Dimer
缓冲液、乳胶反应试剂
试剂准备
液体型试剂: 从冰箱取出摇匀放置平衡至室温 冻干型试剂: PT试剂: 按瓶签标称量准确加入复溶液放置15min再轻轻混匀待 粉末充分溶解后再使用 APTT试剂:按瓶签标称量准确加入蒸馏水放置15min再轻轻混匀待粉 末充分溶解后再使用 TT试剂: 按瓶签标称量准确加入蒸馏水放置15min再轻轻混匀待粉 末充分溶解后再使用 FIB试剂: 按瓶签标称量准确加入蒸馏水放置15min再轻轻混匀待粉 末充分溶解后再使用
测试人份
6×2ml:120T 6×4ml:240T 12×2ml:240T 12×4ml:480T
贮存放置/效期
密封:2-8C°,12个月 复溶后:2-8C°,5天 复溶后:18-25C°,24h
干粉:6×2ml 6×4ml 凝血酶、复溶 液 液体:12×2ml 12×4ml
凝血试验的临床应用课件
4.PT和APTT均延长
多数是由于共同凝血途径缺陷所引起的出血性疾病,包括: ⅴ、Ⅹ、Ⅱ及纤维蛋白原(I因子) 遗传性: 继发性: 血循环中存在抗因子抗体 DIC 肝脏疾病 抗凝剂: 如肝素 维生素K缺乏: 毒物: 如蛇毒、鼠药
*
ⅶ因子缺乏(遗传性、继发性) ↑ ↑ 因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ缺乏(遗产性、继发性) 外源途径缺乏 ↑ ↑ 有出血症状 PT(A) APTT(N) 因子13缺乏症←因子13 ← PT(N) APTT(N) ↑ 定性试验阳性 PT(N) APTT(A) →→内源途径缺陷→无出血症状 ↓ PT(A)APTT(A) Ⅻ、PK、HMWK缺陷症 ↓ 共同途径缺陷 ↓ Ⅹ、Ⅴ、Ⅱ、Ⅰ因子缺陷症(遗传性、继发性)
*
凝血试验的临床应用
*
主要应用于以下几方面疾病的诊断、鉴别诊断、病情观察、疗效评价及预后判断:
血小板功能缺陷性疾病 凝血功能障碍性疾病 血栓性疾病
*
一、血小板及血管内皮细胞功能缺陷性疾病
筛选试验: 血小板计数 出血时间(BT) 根据筛选试验结果,大致分为以下4种情况:
*
根据筛选试验结果,大致分为以下5种情况:
*
血友病的表型诊断
--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 血友病A 血友病B 因子Ⅺ缺乏症 --------------------------------- ---------------------------- ------------------------ 重型 中型 轻型 亚临床型 重型 中型 轻型 亚临床型 纯合子型 杂合子型 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 筛选试验 APTT ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ ↑ 纠正试验: STGT 加正常新鲜血浆 + + + + + + + + + + 加正常吸附血浆 + + + + - - - - - - 加正常新鲜血清 - - - - + + + + + + 因子浓度测定: FⅧ: c(%) <1.0 2-5 6-25 26-45 N N N N N N FⅨ :C(%) N N N N <1 2-5 6-25 26-45 N N F Ⅺ ;C(%) N N N N N N N N ↓ ↓ 排除试验 PT、BT、VWF:AG N N N N N N N N N N
血凝的基本知识-教材
鉴别PT试剂ISI值的简单方法
用异常质控血浆鉴别PT试 剂真实ISI值的简便方法
PT的ISI值
1.0-1.2 1.2-1.4
正常质控血浆
10.5-13.5(秒) 10.5-13.5(秒)
异常质控血浆
30.0-44.0(秒) 26.0-30.0(秒)
敏感性
高 较高
1.4-1.6 1.6以上
10.5-13.5(秒) 10.5-13.5(秒)
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选择TT试剂的要点
开平后的稳定型 长岛液体TT试剂,37℃稳定30天以上
建议使用长岛液体试剂, 无需复溶,使用方便,测值稳定
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TT检测的结果评估
没有国际标准 生产厂家根据自己的试剂给出一个正常范围 值 检测时,试剂与血浆的比例,不同厂家,所 加比例有所不同,正常值范围也不同,应以 说明书为准
精密度(CV%)
批内变异 同一天 批间变异 <2 <3
天间变异
<4
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APTT检测临床应用(2)
监控静脉滴注肝素抗凝治疗的病人的凝血功能 临床上对静脉滴注肝素抗凝治疗的病人必须进行 APTT检测以便监控。 APTT的值应控制在1.5-2.5 x基础秒数 基础秒数---肝素治疗前的APTT秒数; 不同的APTT试剂,对肝素敏感性不同,建议使用 对肝素敏感的APTT—白陶土试剂。
沃芬血凝试剂使用方法
1 mL水复溶。盖上盖子轻轻混匀。15~25℃平衡至少30 原瓶2~8℃24h;仪器15
分钟,用前颠倒混匀。勿用力振摇
℃24h
dRVVT 筛选/确认
R3-R6
2 mL水复溶。盖上盖子缓慢蜗旋混匀。15~25℃平衡至 原瓶2~8℃24h;-20°C 3
少30分钟,用前颠倒混匀。勿用力振摇
Hale Waihona Puke Baidu
使用之前,轻倒置几次混合完全,请勿震摇以免产生泡 原瓶2~8℃2月;仪器15
沫
℃36h
显色底物 因子Xa试剂
R1-R3 使用前颠倒混匀
R4-R6
原瓶2~8℃30天;仪器15 ℃7天
备注:因子稀释液D1/D2; Clean B(共3瓶):R1/R2、R5/R6和D1/D2分别至少1瓶; 稀释Clean B(1份Clean B+7份水):R1-R3 和R4-R6分别至少1瓶
℃5天
乏蛋白S血 浆
D3/R1/R2
2mL水复溶。盖上盖子轻轻旋转混匀。15~25℃平衡至 仪器15℃6h 少30分钟,用前颠倒混匀。勿用力振摇
蛋白S 试剂 R1-R3
原 瓶 2~8 ℃ 24h ; 仪 器 15
钙离子试剂 R4-R6 使用前颠倒混匀
℃8h
乳胶试剂 稳定剂 络合剂
R1-R3 R1-R3 R4-R6
A3 凝血常规分析操作规程
A3 凝血常规分析操作规程A3.1首页凝血常规分析操作规程(ACL-9000全自动凝血分析仪)A3.2检测原理 ACL-9000全自动凝血分析仪,采用凝固法原理测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、用PT衍算法计算纤维蛋白原的含量。A3.3 检测项目 ACL-9000全自动凝血分析仪提供的检测项目分别为:凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原及各种凝血因子。A3.4 标本的采集及处理A3.4.1 静脉血采集 除非是卧床病人,一般在采血时取坐位,体位影响水分在血管内外的分布,因此影响血红素、白细胞计数、红细胞计数、红细胞比积等的试验分析。一般从肘静脉取血,婴幼儿可从颈静脉、股静脉取血。使用止血带时间不超过1分钟,穿刺成功后立即松开止血带,当需要重新使用止血带时应选用另一上臂。A3.4.2 采血注意事项(1) 穿刺要一针见血,避免淤血、气泡、溶血和组织液污染。(2) 如果使用真空采样管,以第二或第三管样品为佳。(3) 如果从导管取样,则需要用生理盐水冲洗管道,前面5 ml血不能使用。(4) 采血后立即与抗凝剂充分混合,尽快送到实验室。(5) 采血量必须准确,如果不足计划量的90%,则不能使用。(6) 不能在静脉穿刺部位或附近部位采样。A3.4.3 标本处理(1) 使用109 mmol/L枸橼酸钠溶液作为抗凝剂。(2) 血样与抗凝剂的比例为9:1,如果血球压积<20%或>55%,则需要调整这个比例,方法是0.00185×血液毫升数×(100-压积)=抗凝剂毫升数。(3) 血浆分离(如果不能立即测试,应尽快分离血浆)。(4) 采样后60分钟内进行离心,速度为3000 r/min,时间10~15分钟。(5) 盛血浆容器应加塞,防止pH改变。(6) 血浆存放时间不宜太久,存放温度及时间情况见下表。温 度 有效时间 室 温 ≤2 h 2~8℃ ≤4 h -20℃ ≤2 w -70℃ ≤6月 (7)低温保存的样品,要在37℃迅速解冻,减低凝血因子的消耗,并立即测试。(8)与样品接触的所有器材(注射器,样品管,检测杯等)必须采用塑料或硅化玻璃材料。(9)全部器材均不得含有去污剂或清洗剂。A3.5 试剂试剂来源:由美国库尔特公司提供。A3.5.1凝血酶原时间(Prothrombin Time,PT)试剂配量:PT干粉试剂每瓶加蒸馏水8ml,盖好盖子,轻轻旋转大约15秒,确定完全复溶。使试剂在15℃-25℃放置30min,在使用前颠倒混匀,切勿摇动。 (1) 注意事项:保证干粉完全溶解;避免剧烈震荡;复溶后,室温放置30分钟后方可使用;复溶后试剂不可再冰冻;测试前试剂应预温
血凝的基本知识
?剂量增加或减少,会引起出血或凝血;
?口服抗凝药治疗病人的治疗剂量,治疗时间 由PT检测决定,一般要控制在INR2.0-3.0之 间。
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INR -国际标准化比值
INR=( ?正常人血浆PT平均值—每一实验室取20个以
上正常人血浆测得的PT秒数平均值。
敏感性 高 较高
中 低
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选择PT 试剂的要点(1)
※(敏感度)(ISI值):
?ISI=1.0-1.2 最好
?ISI=1.2-1.4 一般
?ISI>1.6
建议不予使用
※对枸橼酸浓度不敏感(3.2%或3.8%)
※对凝血因子的敏感
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选择PT 试剂的要点(2)
◆试剂的成分来源: ? 重组组织因子(基因工程方法)最好 ? 如长岛液体PT试剂、Dade Behring PT 试剂(Inovin) ? 人胚胎组织:如Dade Behring PT试剂 ? 新鲜兔脑粉:如库尔特PT试剂、StagoPT试剂 ? 陈旧兔脑粉:大多数国产的PT冻干试剂(ISI>1.6)
? Thrombin Time (TT)测定原理
? 原理
TT试剂(凝血酶)
(TT )
凝血试剂应用手册(20104)
PT 凝血酶原时间
一、名称:PT凝血酶原时间。
二、原理:在受检血浆中加入过量的因子 III(人胎盘的浸出液)和 Ca2+,使凝血酶
原转变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,血浆凝固所需要的时间即为
PT。它是外源性凝血系统常用筛选试验之一。
三、试剂:Thromborel S 试剂,为人胎盘浸出液和Ca2+的混合试剂,试剂说明书中包
含本试剂用在不同型号、不同方法学的仪器上的国际敏感度指数(ISI)。试剂溶解
时分别按包装用10ML 或4.0ML 的蒸馏水复溶。
四、仪器品牌:日本进口SYSMEX公司的CA550、CA1500、CA7000型全自动血凝仪。
五、操作步骤:SYSMEX 的CA 系列血凝仪采用的是散射光比浊,百分比检测,监测
样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化,50%凝集时所对应的时间即为凝血
酶原时间。
1、将PT 的试剂按照说明溶解好以后,放到确定的位置上。
2、将样本离心准备好以后,放到样本架上,样本架放到自动进样器上。
3、在屏幕上进入WORK LIST 菜单,设好ID 号,及要检测的项目,一切准备好便可
按START 开始。
六、参考值:PT 9-13 秒
七、临床意义:PT 延长:先天性见于因子II、V、VII、X 缺乏和无(或)低纤维蛋白
原血症;获得性见于弥散性血管内凝血、原发性纤溶症、维生素 K 缺乏症、肝脏疾
病;血循环中有抗凝物质,如肝素、FDP、以及抗因子II、V、VII、X 的抗体存在等情况。PT 缩短:见于因子V 增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。口服抗凝剂的监测:凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常用指标,中国人 INR 在1.5~2.5 用药较为安全和有效。
血凝的基本知识 教材
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PT检测的结果评估
美国 CLIA-88 提出 PT指标的允许误差
? 有国际标准,以INR表示;
? 不同厂家根据自己的试剂给 出一个正常范围,一般正常 范围为:10.5-14.5秒;
?最后使凝血酶原形成凝血酶,凝血酶可使血浆中的 纤维蛋白原转变成纤维蛋白。
?纤维蛋白的交联,聚合成凝胶状态;
?血浆从流动状态变成凝固状态这个过程短时间内完 成,可用仪器检测。这段时间即为凝血酶原时间 PT, 一般以秒表示。
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PT检测临床应用( 2)
监控口服抗凝药病人的凝血功能
?口服抗凝药治疗时间比较长,治疗过程需要 监控;
维蛋白凝块。
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血凝试剂的基本原理及临床应用
?凝血功能的一些检测手段
? 常规筛选检测(检测凝血功能是否正常) ? PT——凝血酶原时间测定。 ? APTT——活化部分凝血活酶时间测定。 ? TT——凝血酶时间测定。 ●特殊物质检测(检测引起凝血功能异常的原因) ? 纤维蛋白原测定 ? 纤维蛋白降解产物 ? D-二聚体 ? 凝血因子检测 ? 发色底物测定(如蛋白C,蛋白S,等)
凝血项的临床应用课件
凝血项的临床应用
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TT检测反应原理
过量凝血酶
血浆中的可溶性纤维蛋白原
纤维蛋白(不溶性)
凝血项的临床应用
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TT检测的临床意义
1.是反映血浆内纤维蛋白原水平及血浆中肝素样物质多少的指标。 纤维蛋白原转化为纤维蛋白是凝血途径的最后通路,肝素可抑 制凝血酶催化的纤维蛋白形成,纤维蛋白原减少或使用肝素,TT 延长。
延长。 ② 先天性外源性凝血因子Ⅱ、V、Ⅶ、X减少及纤维蛋白原的缺乏。 ③ 获得性凝血因子缺乏,如:急性DIC消耗性低凝期,凝血因子因大量消耗而减少;原发
性纤溶亢进时,由于纤维蛋白被溶解,血栓形成障碍,导致PT延长;维生素K缺乏,Ⅱ、 Ⅶ、X因子合成障碍,PT延长; ④ 血循环中有抗凝物质存在:如服用口服香豆素抗凝剂,拮抗了维生素K的转化,7-羧化 酶的活性受到抑制,继而抑制了含有谷氨酸残基的Ⅱ、Ⅶ、X等凝血因子的羧基化,使 其处于无活性状态;其他抗凝剂如:肝素、FDP的应用。
凝血项的临床应用
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国际标准化比值----INR(1)
• INR:是指患者凝血酶原时间(PT)与正常对照凝血酶原时间之比的ISI次方 即 INR=(患者PT/正常对照PT平均值)ISI。 ISI:国际敏感度指数。 国际敏感指数(ISI)表示凝血活酶的敏感性。WHO提出以人脑凝血活酶67/40批号作为 标准品, 即其ISI定为1.0, ISI表示各种制剂与67/40之间的相互关系。 各厂家凝血活酶因来源不同,制备方法不同,其凝血活酶的敏感性不同,导致PT结果 在不同实验室中存在很大差异,但测得的INR值却相同,为了使测得的结果具有可比性,应 使用国际标准化比值(INR)作为口服抗凝剂监测的指标。
血凝仪检测原理及应用解析
(2)
0.2
0.00185×(100-56.2)
计算后应抽血2.5ml,结果(正确)为:
PT 13.9s,PT-INR 1.30,APTT36.2s,
Fib-C 1.70g/L,TT 19.7s,与临床相符。
(二) 离心问题
1. 血栓试验使用的血浆为PPP; 2. 一般要求2000~2500g/min(3000r/min ),离 心时间为10min左右,转速N(转/分)与“g”的 转换关系:g=11.18×10-7×半径(mm)×N(转/ 分);
PT、APTT、TT 联合分析一
PT、APTT、TT 联合分析二
OAT
PT、APTT、TT 联合分析三
凝血因子FVIII或IX或XI或XII缺陷
纤溶过程(纤溶系统)
FIB (纤维蛋白原)
纤维蛋白 (血栓)
激活剂
纤溶酶
抑制物 纤溶酶原
抑制物 (抗纤溶酶)
FDPs
FSPs (包括D-D)
(统称)FDP
Intrinsic System
Activator
Ellagic acid
PL
Phospholipid
CaCl2 XII
IV
Calcium(Ca2+)
XI
IX
Ca2+, PL
VIII
37℃
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血栓/止血试剂(Dade® Behring)
使用手册
PT凝血酶原时间
一、原理:在受检血浆中加入过量的因子III(人胎盘的浸出液)和Ca2+,使凝血酶
原转变为凝血酶,后者使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,血浆凝固所需要的时间即为
PT。它是外源性凝血系统常用筛选试验之一。
二、试剂:Thromborel S试剂,为人胎盘浸出液和Ca2+的混合试剂,试剂说明书中包
含本试剂用在不同型号、不同方法学的仪器上的国际敏感度指数(ISI)。试剂溶解
时分别按包装用10ML或4.0ML的蒸馏水复溶。
三、标本制备:9份静脉血加一份3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝,立即混匀,1000xg
离心10分钟,血浆可在15-25℃保存4小时,在-20℃至少可以保存24小时。
四、操作步骤:SYSMEX的CA系列血凝仪采用的是散射光比浊,百分比检测,监测
样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化,50%凝集时所对应的时间即为凝血
酶原时间。
1、将PT的试剂按照说明溶解好以后,放到确定的位置上。
2、将样本离心准备好以后,放到样本架上,样本架放到自动进样器上。
3、在屏幕上进入WORK LIST菜单,设好ID号,及要检测的项目,一切准备好便可
按START开始。
五、注意事项:试剂溶解后,可在15℃放置8小时,2-8℃可保存5天。复溶要充分,
溶解后的试剂最好不要在低温冷冻保存。
六、参考值:PT 9-13秒
七、临床意义:
PT延长:先天性见于因子II、V、VII、X缺乏和无(或)低纤维蛋白原血症;获
得性见于弥散性血管内凝血、原发性纤溶症、维生素K缺乏症、肝脏疾病;血循
环中有抗凝物质,如肝素、FDP、以及抗因子II、V、VII、X的抗体存在等情况。
PT缩短:见于因子V增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。
口服抗凝剂的监测:凝血酶原时间是监测口服抗凝剂的常用指标,中国人INR在
1.5~
2.5用药较为安全和有效。
八、订货信息:
Thromborel S凝血酶原 OUHP49 10*10ML
Thromborel S凝血酶原 OUHP29 10*4.0ML
APTT部分凝血活酶时间
原理:在37℃下,以鞣花酸为激活剂活化凝血因子XII和XI,以脑磷脂(部分凝血活酶)代替血小板提供凝血的催化表面,在Ca2+的参与下,观察贫血小板血浆凝固所需要的时间。APTT测定是内源性凝血系统较为敏感、简便和常用的筛选试验。
一、试剂:Actin试剂(鞣花酸做为激活剂,磷脂为兔脑粉),及CaCl2试剂,试剂为
液体不需复溶。2-8℃可保存到效期。
二、标本制备:9份静脉血加一份3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝,立即混匀,1000xg
离心10分钟,血浆可在15-25℃保存4小时,在-20℃至少可以保存24小时。
三、操作步骤:SYSMEX的CA系列血凝仪采用的是散射光比浊,百分比检测,监测
样品凝集开始到凝集完全的散射光强度的变化,50%凝集时所对应的时间即为凝血
酶原时间。
a) 将APTT的试剂和CaCl2放到确定的位置上。
b) 将样本离心准备好以后,放到样本架上,样本架放到自动进样器上。
c) 在屏幕上进入WORK LIST菜单,设好ID号,及要检测的项目,一切准备好便可
按START开始。
四、注意事项:APTT试剂为液体试剂无需复溶,需要在2-8℃下保存,切勿冻存。
五、参考值:APTT 20-40秒
六、临床意义:
APTT延长:
1、因子VIII、IX和XI血浆中水平减低,如血友病A、B及凝血因子XI缺乏症;因
子VIII减少还见于部分血管性血友病患者;
2、严重的凝血酶原、因子V、因子X和纤维蛋白原缺乏,如肝脏疾病、阻塞性黄疸、
新生儿出血症、肠道灭菌综合症、吸收不良综合征、口服抗凝剂、应用肝素以及纤
维蛋白原缺乏血症等;
3、纤溶活性增强,如继发性、原发性纤溶亢进及循环血液中有纤维蛋白(原)降解产
物(FDP);
4、血循环中有抗凝物质,如抗因子VIII或IX抗体,狼疮抗凝物质等。
APTT缩短:
5、高凝状态,如弥散性血管内凝血的高凝期、促凝物质进入血流以及凝血因子的活性
增高等;
6、血栓性疾病,如心肌梗死、不稳定性心绞痛、脑血管病变、糖尿病伴血管病变、肺
梗死、深静脉血栓形成、妊娠高血压综合征和肾病综合征以及严重的灼伤等。
七、订货信息
Actin活化部分凝血活酶 B4218-210*10ML
Actin活化部分凝血活酶 B4218-110*2.0ML
CaCl2氯化钙 ORHO3710*15ML
FBG纤维蛋白原测定
一.原理:采用Clauss凝固法原理,根据纤维蛋白原与凝血酶作用最终形成纤维蛋白的原理。以国际标准品为参比血浆制作标准曲线,用过量的凝血酶来测定血浆凝固时间,所得凝固时间与血浆中纤维蛋白原浓度呈负相关,从而得到纤维蛋白原的含量。
二.试剂:Thrombin试剂(凝血酶冻干品),1ml的蒸馏水复溶。
标准血浆,1ml的蒸馏水复溶。
Owen’s Buffer缓冲液,注意试剂是否结晶会影响结果。
三.标本制备:9份静脉血加一份3.8g/dl(109mmol/L)枸橼酸钠抗凝,立即混匀,1000xg 离心10分钟,血浆可在15-25℃保存4小时,在-20℃至少可以保存24小时。
四.操作步骤:SYSMEX的CA系列血凝仪采用的是散色光比浊,百分比检测,监测样品凝集完全的散射光强度的变化,50%凝集时所对应的时间即为凝血酶时间。
1.将FBG试剂按照说明溶解好以后,放到确定的位置上。
2.将样本离心准备好后,放到样本架上,样本架放到自动进样器上。
3.在屏幕上进入WORK LIST菜单,设好ID号,以及要检测的项目,一切准备好后
可按START开始。
五.注意事项:试剂溶解后,可在15℃放置10小时,2-8℃可放7天。复溶要充分,复溶好的试剂可冷冻分装保存。
六.参考值:FBG:2-4g/l
七.临床意义:
FBG含量增高:见于糖尿病及其酸中毒,动脉粥样硬化,急性传染病,急性肾炎尿毒症,骨髓瘤,休克,外科术后及轻,度肝炎等。
FBG含量减低:见于DIC,原发性纤溶症,重症肝炎,肝硬化等。
八.订货信息:
纤维蛋白原试剂盒 B4233-15
纤维蛋白原试剂(100NIH)B4233-25 10*1.0ML
纤维蛋白原试剂(500NIH)B4233-27 10*5.0ML
缓冲液B4234-25 10*15ML
标准品ORKL13 6*1.0ML