石蜡组织切片技术
石蜡切片的主要步骤
石蜡切片的主要步骤石蜡切片是一种常用的制备薄片的技术，广泛应用于生物学、医学和材料科学等领域。
本文将介绍石蜡切片的主要步骤，并详细说明每个步骤的操作方法和注意事项。
1. 样品固定和处理在进行石蜡切片之前，首先需要对待切样品进行固定和处理。
固定样品的方法可以根据实验的需要选择，常用的有乙醛固定、冰醋酸固定和福尔马林固定等。
处理样品的方法也根据实验目的而定，可以包括染色、脱水、透明化等步骤，以便更好地观察和研究样品。
2. 包埋将处理好的样品包埋在石蜡中，以便进行切片。
首先，将样品放入石蜡溶液中，使其充分浸泡。
然后，将石蜡溶液转移到恒温水浴中，使其逐渐固化。
在固化过程中，要确保样品均匀分布在石蜡中，避免出现气泡和空洞。
3. 切片切片是石蜡切片过程中最关键的一步。
首先，将固化的石蜡块从模具中取出，并放置在切片机的夹持装置上。
然后，调整切片机的切片厚度和速度，根据需要选择合适的参数。
接下来，使用切片刀将石蜡块切割成薄片。
在切割过程中，要保持手稳定，避免切片厚度不均匀或出现断层。
4. 切片取片切片切割完成后，需要将切片从切片刀上取下。
首先，使用镊子将切片从切片刀上小心取下，避免损坏或弯曲切片。
然后，将切片放置在预先准备好的载玻片上。
在放置切片时，要注意避免气泡的产生，可以使用专门的工具如细管吸气来帮助排除气泡。
5. 去除石蜡和染色切片取片后，需要将切片上的石蜡去除，并进行染色处理。
首先，将切片放入去石蜡剂中，使其充分浸泡。
然后，将切片转移到浸泡染色剂中，进行染色处理。
在去石蜡和染色过程中，要注意时间控制和温度控制，以确保染色效果和切片质量。
6. 封片和封边染色完成后，需要将切片做成封片，以保护切片并便于保存。
首先，将切片用透明胶片或玻璃片覆盖。
然后，使用封片胶或封片胶带将切片和覆盖物固定在一起。
接下来，将切片的边缘进行封边处理，以避免切片脱落或污染。
7. 干燥和贴标封片完成后，需要将切片进行干燥处理，并进行贴标。
组织切片石蜡切片过程
石蜡切片过程一、石蜡包埋:1.脱水：组织水洗后便可酒精脱水，70% →80% →90% →95%→100%酒精（无水乙醇）→100%酒精，各级酒精脱水时间30-45 min。
（注意：80%酒精内组织可留之较久，当天如果来不及做完就可以暂时保存一晚上，次日再继续做下去。
70%的酒精可作为更久的保存剂。
）2.透蜡：脱水后组织：50%酒精+50%二甲苯30 - 45min.二甲苯（组织透明即可停止) 15min.50%二甲苯+50%石蜡20-30min.纯石蜡1 45min.纯石蜡2 45min.（透腊之前做好准备工作：准备腊杯，烘箱温度保持55—60℃左右，使石腊熔化，温度不宜过高，以免使组织发脆。
）3.包埋：a.折好纸盒，准备小镊子、酒精灯、解剖针、冷水等。
b.用温热吸管吸取石蜡注入纸盒。
等待底稍微凝固，温镊子夹住样品放入盒子中央，面朝底(可以将蜡一次倒入纸盒，然后待蜡表面起膜后，用温镊子夹住样品放入蜡中，待冷却即可，整个操作过程中，切勿让蜡中起气泡)。
c.两手拿着两端，入冷水一半，吹气，使表面石蜡形成移较厚腊层，然后急速全部进入冷水中3分钟。
d.修正蜡块（上下两个面一定要平行并且光滑）e.固着蜡块二、切片1.切片（切片时，可以在刀片以及刀片周围涂上一点甘油）2.贴片烤片（甘油蛋白=1/2甘油+1/2鸡蛋清）（在贴片时，用细吸管取一点点甘油蛋白（越少越好）于载玻片上，然后用手抹匀，手一定要干净。
将切片放在载玻片（光亮面朝向下），然后滴几滴冷水使切片悬于水上。
接着将载玻片放在37℃上烘烤。
常见问题分析：1.切片分离不能形成蜡带：☞室温过低，蜡过硬。
2.蜡带弯曲：☞蜡块口下面不平行，或蜡块不与刀刃平行所致。
3.切片厚薄不一: ☞切片刀或蜡块未固定紧。
4.切成片后，组织与蜡块脱离：☞脱水不干净等。
5.蜡片易粘在切片上或蜡片萎缩：☞室温太高或蜡太软或刀的角度太小。
6.切片破裂：☞浸蜡不足或浸蜡温度过高，或在脱水剂、透明剂中时间过长，引起组织发脆或有杂质，材料脱钙不完全，此种无法补救。
石蜡切片法的原理及应用
石蜡切片法的原理及应用1. 石蜡切片法的原理•石蜡切片法，也称为石蜡切片技术，是一种常用于生物组织切片和植物切片的方法。
它是将生物样本或植物材料浸泡在石蜡中，并使用切片机将其切割成薄片的技术。
石蜡切片法的原理基于石蜡的特性和切片机的工作原理。
•石蜡是一种固态蜡状物质，具有良好的可模塑性。
它的熔点较低，在55-60摄氏度范围内熔化，使得将样本浸泡在石蜡中能够快速固化和切割。
切片机通过旋转刀片和样本的移动来切割石蜡固化后的样本，从而得到薄片。
•石蜡切片法的原理包括以下几个步骤：–样本固定：将生物组织或植物材料固定在切片床上，通常通过福尔马林等化学物质进行固定。
–组织处理：将固定后的样本进行去水化和脱脂处理，以去除水分和脂肪等物质，使样本更易于渗透和固化。
–石蜡浸渍：将处理后的样本浸泡在石蜡中，使石蜡渗透到样本组织中，并使其固化。
–切片制备：将石蜡固化的样本放置在切片机上，通过旋转刀片和样本的移动来切割石蜡，得到薄片。
–切片染色：将薄片固定在载玻片上，并进行染色处理，以增强样本的可视化效果和对细胞结构的观察。
2. 石蜡切片法的应用•石蜡切片法在生物医学研究、临床医学和植物学等领域具有广泛的应用价值。
以下是石蜡切片法的一些主要应用：2.1 生物组织切片•生物组织切片是石蜡切片法最常见的应用之一。
通过石蜡切片法可以将生物组织固化并切割成薄片，用于观察和研究组织的结构和功能。
生物组织切片可用于研究疾病的病理学特征、细胞增殖和分化等过程。
2.2 病理分析•石蜡切片法在病理学方面具有重要的应用。
通过切割和染色石蜡切片，可以观察到细胞核、细胞质和细胞间质等组织成分的细微结构，实现对肿瘤、感染和其他疾病的病理分析和诊断。
2.3 细胞学研究•石蜡切片法可用于细胞学研究，通过切割和染色石蜡切片，可以观察细胞的形态、结构和功能等特征，对细胞的增殖、分化和凋亡等过程进行研究。
细胞学研究在癌症和其他疾病的研究中具有重要的意义。
石蜡切片的原理和基本步骤
石蜡切片的原理和基本步骤石蜡切片是一种常用于生物医学和生物化学实验中的技术。
通过使用石蜡作为嵌入剂，将组织标本固定在特定位置，并以薄片的形式制备，方便进一步的显微镜观察。
这篇文章将介绍石蜡切片的原理和基本步骤。
石蜡切片的原理主要涉及组织标本的固定、去水、脱脂、渗透、嵌入、切割和染色等步骤。
下面将逐步详细介绍每个步骤。
第一步是组织样本的固定。
固定是将生物组织中的蛋白质和核酸固定住，防止组织变性和腐败。
常用的固定剂包括乙酸乙酯、福尔马林和缓冲盐水。
在固定过程中，组织样本通常需要用切片器切割成较小的块。
第二步是去水。
在固定样本中，常常会有一些水分存在。
水分对之后的处理步骤会造成影响，所以需要进行去水处理。
去水可以通过渐进浓度的有机溶剂（例如乙醇）进行。
通常从浓度较低的乙醇开始，逐渐提高乙醇浓度，直至100%乙醇。
第三步是脱脂。
脱脂是为了去除溶剂和固定剂中的脂类物质。
脂类物质在之后的步骤中会妨碍切片的制备。
脱脂一般使用有机溶剂（如苯和二甲苯）进行处理。
第四步是渗透。
渗透是将脱脂样本置于石蜡中，使其被石蜡渗透。
石蜡具有良好的透明性和稳定性，可以保持组织样本的形状并方便切割。
渗透一般在60-65°C的温度下进行。
第五步是嵌入。
嵌入是将渗透好的样本放入预先制备的模具中，加热使其固化。
嵌入后的样本与石蜡牢固结合，形成坚固的石蜡块，有利于后续切割操作。
第六步是切割。
切割是将嵌入好的组织样本切割成非常薄的片。
常用的切片工具有旋转式切片机和滑动切片机。
切割时，需要将石蜡切割成5-10微米厚度的切片。
最后一步是染色。
染色是为了使细胞结构更清晰可见。
常用的染色剂有血红蛋白染剂和亚甲基蓝染剂等。
染色可以根据需要选择染色时间和染色剂。
石蜡切片的制备过程需要一定的实验技巧和仪器设备。
为了获得高质量的切片，需要注意固定、去水和渗透的处理时间和温度，以及切割的速度和厚度。
切割后的切片需要进行适当的质控，确保切片的质量并方便进一步的显微镜观察。
石蜡切片流程范文
石蜡切片流程范文石蜡切片是一种常见的组织学技术，用于制备生物组织薄片，使其可以在显微镜下观察和分析。
下面是石蜡切片制备的详细流程。
1.组织固定：首先，需要选择适当的方法将生物组织进行固定，以保持其形状和结构。
最常用的方法是使用福尔马林溶液进行组织固定。
将组织样品置于福尔马林溶液中，通常需要固定24至48小时。
2.去水：固定完毕后，需要将组织中的水分除去，以便进行后续的处理。
通过逐渐提高样品中酒精浓度（例如70％、80％、95％和100％构成的酒精梯度）来逐步去除水分，通常每次浸泡20至30分钟。
3.清洁：去水后，通常需要对样品进行清洁，以去除可能存在的污物和其他杂质。
可以用清洁的醇溶液（例如100％酒精）浸泡样品数分钟，然后用去福尔马林等溶液洗涤样品。
4.浸渍：在石蜡切片制备过程中，需要将组织样品浸泡在石蜡中，以使其渗透并得到支撑。
选择适当的石蜡类型和温度很重要。
通常使用低熔点石蜡（例如58℃石蜡），在60至65℃的恒温水浴中加热并溶解石蜡。
5.渗透：将组织样品从酒精中转移到融化的石蜡中，通常需要经历多个步骤的渗透过程。
首先将样品浸泡在75％酒精中，然后再依次转移到浓缩的酒精溶液中（例如85％、95％和100％）和石蜡中，每次浸泡时间约为1小时。
6.包埋：当样品完成渗透后，需要进行包埋，即将渗透后的组织样品放置在切片模型中，并用石蜡封住。
将切片模型倒置，将溶解的石蜡缓慢倒入模型直到完全覆盖组织样品。
然后将切片模型固定在冷却装置中，等待石蜡冷却和固化。
7.切片：当石蜡块完全固化后，可以将其切割成所需的薄片。
通常使用旋转切片机或手动切片机进行切片。
将切片机的刀片调整到所需厚度（通常为3至5微米），将石蜡块放置在切片机上，并逐渐将刀片与石蜡块接触，以制备薄片。
8.制片：将切好的石蜡薄片静置在温水中，让其自然展开，并将其转移到预涂有胶水的载玻片上。
轻轻将玻片压在石蜡薄片上，以确保两者之间有良好的接触。
然后将载片放置在恒温台上，以便胶水干燥。
石蜡切片技术
10、脱蜡复水
石蜡切片经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡各5~10min，然后放入100%、95%、90%、80%、70%等各级酒精溶液中各3~5min，再放入蒸馏水中3min。
染色液多数为水溶液，因此，染色前必须将蜡脱去，使切片中的材料由有机相进入到水相。一般采用二甲苯脱蜡，逐级复水与脱水浸蜡过程正好相反，但是，由于蜡片较薄，所需时间比脱水浸蜡要短的多。
由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。
透明注意事项
（1）使用透明剂时，要随时盖紧盖子，以免空气中的水分进入。
（2）更换每级透明剂，动作要迅速，一方面为了不使材料块干涸，另一方面能避免吸收湿气。
11、染色
切片放入苏木精中染色约10~30min。染色时间应根据染色剂的成熟程度及室温高低，适当缩短或延长。室温高时促进染色，染色时间可短些，否则可适当延长时间，冬季室温低时可放入恒温箱中染色。
12、水洗
用自来水流水冲洗约15min。冲洗过程中使切片颜色发蓝（或放入碱性水中也可，但用促蓝剂对伊红可能拒染，如果时间来得及，应以流水冲洗使切片显示蓝色为宜），但要注意流水不能过大，以防切片脱落，并随时用显微镜检查见颜色变蓝为止。
包埋的操作过程
包埋时，将纸盒放在已经加热的温台上，从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，倒入包埋用的纸盒中，取出存放材料的蜡杯3，迅速轻轻地用镊子夹取材料平放于纸盒底部（注意切面朝下放置），再用温镊子轻轻拨动材料，使之排列整齐。轻轻将纸盒两侧的把手提起，慢慢地平放在面盆，并立即使它沉入水中，使盒中包埋块迅速凝固。待石蜡完全凝固（约30min）后即可取出备用。
石蜡切片技术
石蜡切片制备技术活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。
石蜡切片是组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。
教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。
石蜡切片法是将组织经过一系列药品处理，使石蜡渗入组织，包埋成蜡块，再把组织蜡块切成极薄的片子，根据不同的需要用不同的染色方法以显示不同细胞和组织的形态，以及细胞和组织中某些化学或特殊（如抗原）成份含量的变化。
一、所需器材及试剂1，器材切片刀，切片机，恒温箱，熔蜡炉，蜡杯，酒精灯，蜡铲，铺片台，冷冻台，解剖刀，镊子，台木，毛笔，染色缸，盖玻片，载玻片，中性树胶，显微镜。
2，试剂各种浓度的酒精（70%、80%、90%、95%、100%）、二甲苯、石蜡、苏木精染液，0.5%伊红酒精溶液，1%盐酸酒精溶液等。
二、石蜡切片制备过程1，取材采集病料要及时，以防组织变质发生自溶。
病理组织材料要采取病变典型突出的部分，最好选病变与健康组织的交界处，以识别和探讨病变的发生和发展。
2，固定采集样品在滤纸上吸干后迅速放入4％甲醛溶液中固定七天以上，使组织细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞原来的形态结构。
3，洗涤切取约1cm×1cm×0.3mm固定好的组织，放入带盖的网槽中用自来水冲洗过夜，调节流量使水从底部缓慢流出。
4，脱水透明组织经固定和水洗后含多量水分，水与透明剂、石蜡不能溶合，因此，在透明、浸蜡前必须进行脱水，把组织中的水份彻底驱除。
酒精为常用脱水剂，它既能与水相混合，又能与透明剂相混，为了减少组织材料的急剧收缩，应使用从低浓度到高浓度递增的顺序进行。
生物显微技术 第一章 石蜡切片制作技术
三、包埋
是把被石蜡浸透的材料连同熔化的石蜡一起 倒入一定形状的容器内，并立即投入冷水中， 使它凝固成含材料的蜡块，以备切片。
从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，倒入包埋 用的纸盒中，取出存放材料的蜡杯，用温镊 子夹取材料平放于纸盒底部，使之排列整齐。 将纸盒两侧的把手提起，慢慢地平放在面盆 的水面，待石蜡的表面凝固，将 纸盒慢慢 浸入水中，待石蜡完全凝固（约30分钟） 后即可取出备用。
包埋前应先把必需的用具（恒温箱、温台、纸盒） 准备好。 包埋用的镊子要先放在温箱中预热。
第五节 切片、展片和贴片
一、切 片 是把包埋好的材料块用切片机切成所需厚度的切片带。 实验程序 1. 切片前的准备工作 （1）整修：用单面刀片将蜡块四周修整平行。 （2 ）石蜡块的固着：先将蜡块用刀片切成方形或长
四、注意事项
1 透明的注意事项
使用透明剂时，要随时盖紧盖子，以免空气中水 分进入； 更换透明剂，动作要迅速； 材料周围 出现白色雾状，应退回纯酒精中重新脱水。
2 透蜡的注意事项
动物材料常用的石蜡熔点为52-56ºC；植物材料 为54-60ºC。 透蜡温度要恒定，不可忽高忽低；
3 包埋的注意事项
第一节 动物的选择、杀死和取材
一、动物的选择 根据实验目的选择合适的动物和组织 如：健康状况的选择 观察不同组织、器官选择不同的动物（如：
肥大细胞、肝小叶、环层小体等）
二、动物致死法 根据动物的大小、种类和观察目的不同，进
行适当的选择。 1、麻醉法 2、空气栓塞法 3、断头法 4、击头法 5、股动脉放血法 要求动作迅速、及时取材、迅速固定
石蜡切片的基本操作流程
石蜡切片的基本操作流程石蜡切片是一种常用的组织学技术，用于制备组织切片，以便进行显微镜观察和研究。
以下是石蜡切片的基本操作流程：1. 组织固定：首先，将待切片的组织标本进行固定，以保持组织结构的完整性和稳定性。
常用的固定剂包括福尔马林、酒精和乙醛等。
固定时间的长短取决于组织的大小和类型，一般为数小时至数天。
2. 组织去水化：固定后的组织需要去除固定剂并脱水，以防止切片过程中的破损和变形。
通常采用逐渐增加乙醇浓度的脱水步骤，常见的乙醇浓度为70%、80%、90%和100%。
3. 组织浸渍：脱水后，组织需要进一步浸渍到石蜡中，以增加组织的硬度和支持性。
首先将组织放入浸渍剂中，如甲醛或乙醇中的苯麻油，然后逐渐增加石蜡浓度，常见的石蜡浓度为50%、70%和100%。
4. 组织包埋：在组织浸渍后，将组织放入包埋模具中，然后倒入熔化的石蜡，使其完全包裹住组织。
包埋完成后，将模具放入冷却台或冷冻器中，使石蜡迅速固化。
5. 石蜡切片：将冷却固化的石蜡块从模具中取出，使用切片机将其切割成薄片。
切片机通常配有刀片、切片夹和切片盒等工具，切片时需要注意切片的方向和角度，以获取最佳的切片效果。
6. 切片染色：切片完成后，可以对切片进行染色，以便更好地观察和分析组织结构和细胞形态。
常用的染色方法包括血液染色、组织染色和免疫组化染色等。
7. 切片封片：染色后，将切片放置在载玻片上，并使用透明的封片剂将其覆盖。
封片剂可以保护切片，防止切片脱落和变形，并提高显微镜观察的清晰度。
8. 切片观察：最后，将封片的切片放置在显微镜下进行观察和分析。
可以使用不同的显微镜镜头和放大倍数来观察组织细节和细胞结构，同时可以使用图像分析软件对切片图像进行处理和测量。
总体而言，石蜡切片的基本操作流程包括组织固定、去水化、浸渍、包埋、切片、染色、封片和观察等步骤。
每个步骤都需要严格控制条件和操作技巧，以确保获得高质量的组织切片用于研究和诊断。
《病理检验技术》课件——石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
7.若天气太冷，切片时组织蜡片容易碎裂，对着组织蜡块面 呵一口气后进行切片，可改善组织蜡片容易碎裂的情况，但 所切出的第一、二张组织蜡片厚度会比原来设定的切片厚度 稍厚一些，因此，前一、二张切出的组织蜡片不要。
石蜡包埋组织切片
6.调节切片刀的切片角度：切片机刀座上都有标 示切片刀切片角度的刻度，切片前需调节切片刀 至合适的切片角度，才能切好片。通常切片机上 刀座刻度范围为0°～10°，一般设定切片刀的 角度在8°左右为宜。但真正的切片角度是余隙 角。 所谓余隙角是指切片刀下刀锋倾斜面与组织蜡块 面的夹角。余隙角避免了切片时切片刀往返过程 中刀与组织蜡块面之间的摩擦。最理想的余隙角 是2°～4°，太大或太小都不能切好片。
3.如用金属框包埋组织蜡块，必须把四边修整平行，否 则在切片时会切出弯曲的组织蜡片带。
4.切片用毛笔应选用松软毛的水彩画笔，清扫切片刀上 的蜡屑时应顺着刀背往刀锋扫，避免刀锋切割笔毛，损 坏刀锋。
石蜡包埋组织切片
5.切片时转动切片手轮或推拉切片刀的动作要轻， 用力均匀。若用力太猛和速度太快，将会引起切片 压缩，也易导致轮转式切片机齿轮的磨损。
病理检验技术
石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
组织石蜡切片 石蜡包埋组织切片
石蜡包埋组织切片
送检组织经过固定、 脱水、透明、浸蜡和 石蜡包埋制成组织蜡 块后即可马上进行切 片，称石蜡包埋组织 切片，简称石蜡切片。
石蜡包埋组织切片
一、石蜡切片操作过程
1.组织蜡块排序、冷冻：按病理号排序，先切在 前；蜡块组织面朝下放在一盘平整的冰块或冷冻 台上冷冻（-4～0℃）几分种后开始切片。
石蜡切片技术
（6）透明：纯酒精/二甲苯＝1∕1浸渍2小时，再转入纯的二甲苯中二 次，每次1小时，至大体呈明亮感即可。
（7）浸蜡：将组织留在透明剂中，轻轻倒上等体积已熔化的石蜡， 放入40℃的温箱10小时(过夜)，再加入熔化的石蜡至3/4体积，调 节温箱至48℃，透蜡3小时，再经3次纯蜡，温度56℃，每次约1 小时，直至透明剂完全排出。
3.脱水
材料洗涤后，其中含水，水与石蜡不能混合，必须除去。去水 用酒精，材料由水入酒精中，不能操之过急，须由低度酒精渐 至高度酒精。通常由30％、50％、70％、80％、90％、100％， 每次须经半小时或更长时间，材料大的，时间须延长。若暂时 不能埋蜡、材料可放在70％酒精中保存，经久不坏。在高度酒 精中，不能过久．因酒精能使材料硬化，过久则材料由硬而脆， 切时易于粉碎。
石蜡切片技术
植物组织石蜡切片技术
石蜡切片法是显微技术上最重要、最常用的一种 方法。它是把材料封埋在石蜡里面，用旋转切片 机切出很薄（6～8微米）的切片用于显微观察。
石蜡切片的一般步骤：
1．固定 2．洗涤 3．脱水 4．透明 2．封埋 6．切片 7．粘片 8．脱蜡 9．染色 10．脱水 11. 透明 12．封片
水稻幼穗组织爱氏苏木精整染法
（1） FAA固定液固定幼穗组织24小时以上。 （2） 50％酒精洗涤2~3次，每次1小时。 （3）爱氏苏木精稀释液中整染2天 。 （4）水洗，返蓝，换水2～3次，水洗1天。 （5） 脱水及复染 ：经20％，40％，60％，75%（过夜），85%
各级酒精，每级约2小时，0.5％伊红酒精（95％）染液4～6小 时，无水酒精脱水2次，每次1.5小时。
材料透明后，要进行浸蜡，才能进行埋蜡。浸蜡也宜于渐次进行，一般 先用石蜡和二甲苯的混合液（50%级和70%级）浸蜡，再用纯石蜡换三 次，每次的时间，视材料大小而定，通常每次半小时，材料大，时间必 须加长。在浸蜡的过程中，须注意温度，不能超过石蜡熔点2℃以上 。
石蜡切片流程
石蜡切片流程一、引言石蜡切片是生物学、医学和材料科学等领域中常用的一种实验技术，用于制备样品的薄片，以便进行显微观察和分析。
本文将介绍石蜡切片的流程及其关键步骤。
二、材料准备1. 石蜡：选择适合的石蜡材料，常见的有硬质石蜡和软质石蜡。
2. 样品：根据需要选择合适的样品，可以是生物组织、细胞、材料等。
3. 切片刀：选择切割尖锐且锋利的切片刀，常见的有玻璃刀片和钢刀片。
4. 切片机：使用专业的切片机设备，保证切片的精准度。
三、石蜡切片流程1. 固定样品：将样品进行固定处理，常用的方法有福尔马林固定、乙醛固定、冷冻固定等。
固定的目的是保持样品的形态结构和生物活性。
2. 除去水分：将固定后的样品通过醇溶液逐渐去除水分，一般采用浓度逐渐降低的醇溶液，如75%乙醇、50%乙醇、30%乙醇等。
3. 渗透石蜡：将去水后的样品用石蜡进行渗透处理。
首先将样品置于较低融点的石蜡中，然后逐渐转移到较高融点的石蜡中，这样可以保证样品逐渐与石蜡融合。
4. 包埋：将渗透后的样品放入石蜡模具中，待石蜡凝固后，取出石蜡块。
5. 切片：使用切片机将石蜡块切割成薄片，切片的厚度根据需要进行调整，一般为4-10微米。
6. 切片处理：将切好的薄片浸泡在温水中，使其展平，并将薄片转移到载玻片上。
7. 固定薄片：将载玻片放入烘箱中，以适当的温度和时间使薄片与载玻片充分固定。
四、注意事项1. 操作环境：保持实验室的清洁和安静，避免灰尘和噪音对实验结果的影响。
2. 刀片处理：在使用切片刀前，先将其清洗干净并消毒，以防止样品污染。
3. 温度控制：石蜡切片的各个步骤中，温度的控制非常重要，可以根据不同的样品选择适当的温度。
4. 切片厚度：不同的样品需要不同的切片厚度，要根据实验需要进行调整。
5. 质量控制：在每个步骤结束后，要对样品的质量进行严格检查，确保切片的质量。
6. 保存条件：切好的石蜡切片应妥善保存，防止受潮或受到外界环境的污染。
五、总结石蜡切片是一种常用的实验技术，通过固定、去水、渗透石蜡、切片等步骤，可以制备出精细的样品薄片，用于显微观察和分析。
石蜡切片免疫荧光技巧
石蜡切片免疫荧光技巧
石蜡切片免疫荧光技术是一种常用的免疫组织化学方法，用于检测或定位特定抗原在组织样本中的分布情况。
以下是石蜡切片免疫荧光技术的步骤：
1. 组织固定和包埋：将组织样本固定在含有4%的缓冲甲醛中，以保持其形态和结构。
之后，将组织样本包埋在去离子石蜡中，以增加其硬度和切片的稳定性。
2. 去除蜡并切片：用刀片将固定和包埋的组织样本切割成薄片，通常为4-10微米厚。
3. 抗原解蜡：将蜡切片浸泡在去蜡溶液中，以去除蜡，并将其进行再水化，以恢复组织的水合状态。
4. 抗原检测：用适当的抗体与特定的抗原结合。
首先，用一种可以结合到抗原的初级抗体处理组织切片。
然后，使用荧光标记的二级抗体结合到初级抗体上，从而使标记可见。
5. 荧光显微镜观察：使用荧光显微镜观察组织切片，并通过选择合适的滤光片来检测和分析特定抗原的荧光信号。
不同的荧光染料可用于标记不同的抗原，以实现多重标记和多抗体检测。
石蜡切片免疫荧光技术具有高度的灵敏性和特异性，可用于检测和研究生物标志物在各种疾病和组织中的分布和表达水平。
石蜡组织切片技术简介
石蜡切片制作过程
二、固定
1、单纯固定液： 、单纯固定液： 1.8：铬酸（三氧化铬）： ：铬酸（三氧化铬）： 为强氧化剂。慢，硬化中 等，收缩明显。组织块固定后要避光保存，充分冲洗。 收缩明显。组织块固定后要避光保存，充分冲洗。 1.9：丙酮 ： 穿透力强，能使组织强烈收缩，对核染色差， 穿透力强，能使组织强烈收缩，对核染色差，与酒精的作 用基本相同。 用基本相同。 1.9：三氯醋酸 ： 与醋酸的作用相似，也可以膨胀组织块，很少单独使用， 与醋酸的作用相似，也可以膨胀组织块，很少单独使用，还 是一种优良的脱钙剂。 是一种优良的脱钙剂。
石蜡切片制作过程
二、固定
1、单纯固定液： 、单纯固定液： 1.3：升汞（氯化汞）： ：升汞（氯化汞）： 是一种剧毒白色粉末。常用饱和水溶液，可以固定蛋白质， 是一种剧毒白色粉末。常用饱和水溶液，可以固定蛋白质， 但不能固定类脂、碳水化合物。 但不能固定类脂、碳水化合物。 升汞的渗透力强，固定均匀，有一定的收缩，大多与醋酸、 升汞的渗透力强，固定均匀，有一定的收缩，大多与醋酸、 铬酸盐及甲醛等混合使用。对核的染色较好，胞质染色也较好。 铬酸盐及甲醛等混合使用。对核的染色较好，胞质染色也较好。 用升汞固定的组织需要脱汞处理，否则影响染色。 用升汞固定的组织需要脱汞处理，否则影响染色。 脱汞处理可以组织块脱汞法、切片脱汞法。 脱汞处理可以组织块脱汞法、切片脱汞法。
石蜡切片制作过程
二、固定
1、单纯固定液： 、单纯固定液： 1.5：苦味酸（三硝基苯酚）： ：苦味酸（三硝基苯酚）： 姜黄色结晶，干燥时极易燃烧，剧烈震动可能爆炸。一般 姜黄色结晶，干燥时极易燃烧，剧烈震动可能爆炸。 以饱和水溶液保存。可以和许多固定剂混合。 以饱和水溶液保存。可以和许多固定剂混合。除固定外还可用作 染色剂。 染色剂。 可以固定蛋白质，但不能固定脂肪、类脂。 可以固定蛋白质，但不能固定脂肪、类脂。 苦味酸的渗透力很弱，一般不单独使用，固定后可以使组 苦味酸的渗透力很弱，一般不单独使用， 织明显收缩，同时可以使组织块软化。常用于皮肤和肌腱的固定。 织明显收缩，同时可以使组织块软化。常用于皮肤和肌腱的固定。 苦味酸固定组织块不宜超过24小时，否则对苏木精染色不 苦味酸固定组织块不宜超过 小时， 小时 有时需要用酒精脱去其黄色。 利。有时需要用酒精脱去其黄色。
石蜡切片的原理
石蜡切片的原理
石蜡切片是组织学中常用的一种制备技术，用于观察和研究生物组织的微观结构。
其原理可以分为以下几个步骤：
1. 组织采集：首先，需要将待观察的生物组织（例如动物、植物的器官或细胞等）进行采集和收集。
采集可以通过活体取材或者组织固定的方式进行。
2. 组织固定：为了保持组织的形态和结构不受损失，采集到的生物组织需要进行固定处理。
常用的固定方法包括用福尔马林（formalin）进行固定、液氮冷冻等。
3. 组织处理：固定后的生物组织需要进行一系列的处理步骤，以便使其能够被切割成薄片。
处理步骤包括去水化、透明化和浸渍。
4. 包埋：将处理后的组织用石蜡进行包埋，即将其浸入熔化的石蜡中。
石蜡可以提供支持和保护组织的结构，使得组织在切割过程中不会受损。
5. 切片：经过包埋的生物组织在石蜡硬化后，需要使用显微切片机进行切割。
切片机能够将包埋的生物组织切割成极薄的切片，常见的厚度约为4-6微米。
6. 染色：切片完成后，需要进行染色以增强对组织结构的观察。
常用的染色方法包括常规染色（如血液染色）和免疫组织化学染色等。
7. 观察和分析：最后，将染色后的切片放置在显微镜下观察，并使用显微镜和其他相关设备进行分析和研究。
通过石蜡切片技术，可以观察和研究生物组织的细胞结构、组织类型、细胞分化、病理变化等重要信息，对于医学诊断、疾病研究和药物开发等领域具有重要意义。
石蜡切片的操作方法
石蜡切片的操作方法石蜡切片是一种常用的组织切片制备方法，用于细胞学和组织学的研究。
下面是石蜡切片的操作方法：1. 收集样本：选择要制备切片的组织样本或细胞样本。
样本可以是动物组织、植物组织或细胞培养物。
2. 选择合适的浸渍剂：石蜡切片需要将样本浸渍在石蜡之中，以固定和保护样本。
常用的浸渍剂包括甲醇、乙醇和二甲苯。
3. 固定样本：将样本固定在固定剂（如甲醛）中，以保持其形态结构。
固定时间根据样本的类型和大小而定，一般在4C下静置数小时或过夜。
4. 脱水：在一系列浓度逐渐增加的乙醇溶液中，将固定的样本从水中脱水，使其逐渐转移到纯度较高的乙醇中。
5. 渗透：将脱水的样本浸渍在二甲苯或其他有机溶剂中，使其渗透并置换乙醇。
浸渍时间根据样本的大小和组织特性而定，一般在一到数小时之间。
6. 包埋：将渗透后的样本置于石蜡中，使其完全浸润。
石蜡块可以预先加热至液态，然后将样本放入其中，或者将样本以及适量的石蜡放入模具中，然后通过加热使其固化。
7. 切片：将制备好的石蜡块放入石蜡切片机中，使用旋转切片刀将其切成薄片。
切片厚度一般为4-10微米。
8. 取片：用切片刀或镊子将切好的石蜡切片取出，并放置在清洁的显微镜载玻片或切片架上。
9. 脱脂：将石蜡切片置于加热的二甲苯或其他脱蜡剂中，使其脱去石蜡。
10. 染色：根据需要，可对石蜡切片进行染色，例如常用的血液和组织标本染色方法如伊红染色(H&E染色)。
11. 干燥：将染色的切片在室温下晾干或在加热台上加热至干燥。
最后，将切片用显微镜载玻片覆盖，并封口保存。
以上就是石蜡切片的一般操作方法，每个实验室可能会根据具体需求进行微调。
在操作过程中要注意安全，避免接触有毒溶剂和使用锋利的刀片时的切割操作。
石蜡组织切片技术
石蜡组织切片制作方法1 材料与方法1．1 试验材料1.1.1 试验动物1.1.2 试剂二甲苯、正丁醇、苏木精-伊红(HE)、磷酸缓冲液(PH= 7.4) 、2.5%戊二醛溶液、1%锇酸溶液、梯度丙酮、各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%、加了CuSO4的100%）、盐酸酒精（1ml浓盐酸，99ml 70％酒精）、醋酸异戊酯、Epon812环氧树脂、醋酸铀、柠檬酸铅，Bouin氏液、卡诺（Carnoy）固定液，埃利希苏木精染液，0.5％曙红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，二甲苯，中性福尔马林溶液，中性树胶，无Ca2+、Mg2+的磷酸盐缓冲液（phosphated buffer solution ，PBS）。
1.1.3试剂配法：(1) 中性福尔马林溶液固定液甲醛10mLNaH2PO4·2H2O 0.45gNa2HPO4 ·12H2O 0.65g蒸馏水90mL(2) Harris氏苏木精的配制：甲液：苏木精0.5 g95％酒精 5.0 ml乙液：硫酸铝钾10g蒸馏水100 ml氧化汞0.25g冰醋酸几滴先将甲液溶解，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中，并加热使溶解，然后将两液混合煮沸，离开火焰后缓缓加入氧化汞。
冷却后过滤，加入几滴冰醋酸即成。
(3) 卡诺氏固定液：100%酒精3份冰醋酸1份或：100%酒精6份氯仿3份冰醋酸1份(4) 埃利希苏木精染液的配法：苏木精 1 g纯酒精50 ml冰醋酸 5 ml甘油50 ml钾矾（硫酸铝钾）约5 g（饱和量）蒸馏水50 ml脱水、透明及包埋50%酒精（1.5小时）→70%酒精(过夜) →80%酒精(1小时) →90%酒精(1小时) →95% 酒精Ⅰ(1小时) →95% 酒精Ⅱ(1小时) →100%酒精Ⅰ(1小时) →100%酒精Ⅱ(1小时) →（1/2 100%酒精+1/2二甲苯）(30分钟) →二甲苯Ⅰ(15分钟) →二甲苯Ⅱ(15分钟)→纯蜡Ⅰ(20分钟) →纯蜡Ⅱ(20分钟) →包埋在透明过程中，如果材料周围出现白色雾状，说明材料中的水未被脱净，应退回纯酒精中重新脱水，然后再透明。
石蜡切片的相关介绍
石蜡切片的相关介绍石蜡切片是一种常用的组织学研究技术，可以将生物样品切成极薄的切片，便于显微镜观察。
本文将介绍石蜡切片的原理、方法和应用。
原理石蜡切片的制作原理是将生物样品固定在石蜡中进行包埋，形成石蜡组织块，然后用微型切片机将石蜡组织块切成极薄的切片，并将切片染色，以便观察。
方法标本制备1.样品采集：根据需要采集样品，可以是动物组织、植物组织或其他生物体的某一部分，根据不同采集要求决定。
2.固定样品：将采集的样品放入一定体积的固定液中固定，常用的固定液包括福尔马林、戊二醛等。
3.脱水：将固定后的样品放入一定体积的酒精容器中进行脱水处理，分别使用不同浓度的酒精依次脱水。
4.渗透：将脱水后的样品放入一定体积的作用剂中进行渗透处理，作用剂包括丙烯酰胺、丙烯酰酸等。
5.包埋：将渗透后的样品放入一定体积的石蜡容器中进行包埋处理。
切片1.切片机设置：将切片机的温度、刀片、厚度等参数进行设置。
2.切片：将包埋好的样品放入切片机中进行切片，切片厚度一般为2~10微米。
3.切片传递：将切片沉淀在蒸馏水中，使用玻璃刀将切片转移到载玻片上去。
4.切片染色：使用不同染色剂（如血红蛋白染色剂、伊红染色剂等）对切片进行染色，便于观察。
应用石蜡切片是常用的组织学实验技术，广泛应用于医学领域和基础研究中，主要应用于以下几个方面：1.病理学诊断：通过切片对肿瘤、疾病等样本进行组织学分析，帮助医生判断疾病的类型和程度。
2.细胞学研究：通过切片对不同类型的细胞进行观察和分析，了解细胞结构和功能。
3.生物学研究：通过切片对生物体的不同部位进行观察和分析，了解生物组织和器官的结构和功能。
总之，石蜡切片是一项非常重要的生物组织学实验技术，为医学研究和诊断提供重要的手段。
石蜡切片实验原理
石蜡切片实验原理石蜡切片实验是一种常用的组织学实验方法，通过将组织样本制成切片，以便在显微镜下观察细胞和组织的形态结构。
石蜡切片实验的主要原理包括以下几个步骤：1. 取材：根据实验需求，选择合适的材料来源和部位。
例如，观察植物细胞有丝分裂时，常选择洋葱根尖作为材料，因为此处细胞分裂速度快且便于切取。
确保材料新鲜，避免长时间放置导致蛋白质分解、细胞自溶和细菌滋生，以保证观察到的组织结构能反映活体时的形态。
2. 固定：将切好的新鲜组织小块浸入适当浓度的固定液中，如中性甲醛固定液。
固定液可以迅速凝固或沉淀细胞和组织中的物质成分，终止细胞的一切代谢过程，防止细胞自溶或组织变化，尽可能保持其活体时的结构。
3. 洗涤和脱水：固定后，将组织样本用磷酸缓冲液洗涤，去除多余的固定液和杂质。
然后进行脱水，通常使用系列梯度酒精（如70%、95%和100%）进行脱水。
4. 透明：将脱水后的组织样本放入透明剂中，如二甲苯，使组织透明，便于切片。
5. 浸蜡：将透明后的组织样本放入蜡液中，如石蜡，进行浸蜡。
石蜡可以填充组织间隙，使切片更加完整。
6. 包埋：将浸蜡后的组织样本放入包埋盒中，固定并密封。
7. 切片：将包埋好的组织样本放入切片机中，切成薄片（通常厚度为4-6微米）。
8. 贴片：将切好的切片粘附在载玻片上，可用甘油蛋白贴片剂辅助。
9. 脱蜡：将贴片后的切片放入二甲苯中，脱去多余的石蜡。
10. 染色：采用适当的染色方法，如苏木素与伊红对比染色法（简称H.E.对染法），对切片进行染色。
这种方法适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色，可以长期保存。
11. 脱水、透明、封片：染色后，将切片依次放入系列梯度酒精、磷酸缓冲液、甘油中进行脱水、透明。
最后，用封片胶封片，完成石蜡切片制作。
石蜡切片实验原理就是这样啦。
这种方法不仅适用于观察正常细胞和组织，还广泛应用于病理学和法医学等领域，以研究、观察和判断细胞和组织的形态变化。
石蜡切片原理
石蜡切片原理石蜡切片是一种常用的组织学技术，它可以将组织样本切割成极薄的切片，以便于显微镜观察。
在生物医学研究和临床诊断中，石蜡切片技术被广泛应用于病理学、组织学和细胞学领域。
本文将介绍石蜡切片的原理及其相关知识。
首先，让我们来了解一下石蜡切片的原理。
石蜡切片的制备过程主要包括组织固定、脱水、透明化、浸渍和包埋、切片、脱脂和染色、封片等步骤。
其中，组织固定是将组织样本固定在载玻片上，以保持其形态和结构不变。
脱水是通过逐渐浸泡在酒精溶液中，将组织中的水分逐渐脱除，使组织逐渐硬化。
透明化是将脱水后的组织样本浸泡在透明质料中，以使组织透明，便于观察。
浸渍和包埋是将透明化后的组织样本浸渍在熔化的石蜡中，然后进行包埋，使组织样本固定在石蜡中。
切片是将包埋好的组织样本切割成极薄的切片，通常为4-6微米厚。
脱脂和染色是将切片脱除石蜡并进行染色处理，以便于显微观察。
最后，将染色后的切片放置在载玻片上，并进行封片处理，以便于保存和观察。
石蜡切片的原理是基于石蜡的特性和组织样本的结构。
石蜡具有较好的渗透性和包埋性，可以使组织样本固定在其中，并且能够保持组织的形态和结构。
而组织样本经过脱水、透明化和浸渍后，可以使组织样本透明、坚硬并固定在石蜡中。
切片后，经过脱脂和染色处理，可以清晰地显示组织的形态和结构，以便于显微镜观察和分析。
除了石蜡切片的原理，我们还需要了解一些相关的知识。
首先是石蜡的选择。
石蜡通常有不同的软化点，根据不同的样本类型和切片要求，需要选择适当软化点的石蜡。
其次是切片机的选择和使用。
切片机的性能和切片刀的锋利度对切片质量有重要影响，因此需要选择适合的切片机和切片刀，并进行正确的使用和维护。
另外，脱脂和染色的过程也需要严格控制，以保证切片的质量和染色效果。
总之，石蜡切片是一种重要的组织学技术，它在生物医学研究和临床诊断中有着广泛的应用。
通过了解石蜡切片的原理和相关知识，可以更好地掌握这一技术，提高切片质量，为科研和临床工作提供可靠的数据和依据。
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石蜡组织切片制作方法
1 材料与方法
1．1 试验材料
1.1.1 试验动物
1.1.2 试剂
二甲苯、正丁醇、苏木精-伊红(HE)、磷酸缓冲液(PH= 7.4) 、2.5%戊二醛溶液、
1%锇酸溶液、梯度丙酮、各级酒精（30%、50%、70%、80%、90%、95%、100%、加了CuSO4的100%）、盐酸酒精（1ml浓盐酸，99ml 70％酒精）、醋酸异戊酯、Epon812环氧树脂、醋酸铀、柠檬酸铅，Bouin氏液、卡诺（Carnoy）固定液，埃利希苏木精染液，0.5％曙红酒精溶液，1%盐酸乙醇液，二甲苯，中性福尔马林溶液，中性树胶，无Ca2+、Mg2+的磷酸盐缓冲液（phosphated buffer solution ，PBS）。
1.1.3试剂配法：
(1) 中性福尔马林溶液固定液
甲醛10mL
NaH2PO4·2H2O 0.45g
Na2HPO4 ·12H2O 0.65g
蒸馏水90mL
(2) Harris氏苏木精的配制：
甲液：苏木精0.5 g
95％酒精 5.0 ml
乙液：硫酸铝钾10g
蒸馏水100 ml
氧化汞0.25g
冰醋酸几滴
先将甲液溶解，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中，并加热使溶解，然后将两液混合煮沸，离开火焰后缓缓加入氧化汞。
冷却后过滤，加入几滴冰醋酸即成。
(3) 卡诺氏固定液：
100%酒精3份冰醋酸1份
或：100%酒精6份氯仿3份冰醋酸1份
(4) 埃利希苏木精染液的配法：
苏木精 1 g
纯酒精50 ml
冰醋酸 5 ml
甘油50 ml
钾矾（硫酸铝钾）约5 g（饱和量）
蒸馏水50 ml
脱水、透明及包埋
50%酒精（1.5小时）→70%酒精(过夜) →80%酒精(1小时) →90%酒精(1小时) →95% 酒精Ⅰ(1小时) →95% 酒精Ⅱ(1小时) →100%酒精Ⅰ(1小时) →100%酒精Ⅱ(1小时) →（1/2 100%酒精+1/2二甲苯）(30分钟) →二甲苯Ⅰ(15分钟) →二甲苯Ⅱ(15分钟)→纯蜡Ⅰ(20分钟) →纯蜡Ⅱ(20分钟) →包埋
在透明过程中，如果材料周围出现白色雾状，说明材料中的水未被脱净，应退回纯酒精中重新脱水，然后再透明。
透明时间的把握很重要，若时间过长的话组织容易变脆，若时间过短的话组织透明可能会不彻底，这将影响试验效果和结果。
包埋
调整好包埋架的位置，使蜡块的大小适当。
将熔化的石蜡倒入包埋架，再将组织块置于石蜡中摆正位置，若位置有偏移，应尽快调整。
待石蜡表面凝固后将蜡块放入凉水中，使其加速冷凝，蜡条完全冷凝后去掉包埋架，由于标本较多，所以每包埋完一个标本，用解剖针在蜡块上面刻上标本编号并置于4℃冰箱内冷凝备用。
修整蜡块
取出蜡块，用刀片将其削成长方形整齐的小块，使组织横截面离蜡块表面约0.5cm。
再用熔蜡将休整后的蜡块固定在蜡棒上。
切片
用AO手摇切片机切片，厚度为5微米。
在37℃水浴锅中充分展片后，用涂抹了Mayer氏蛋白贴剂（蛋清、甘油、麝香草酚，其中前两者的比值是1：1）的载玻片贴片。
将贴好的切片放在40℃烘箱中烘干，最少4小时，一般的要一天以上。
注意事项：
将修整后的蜡块固定在安装有刀片的切片机上，调整好刀片的位置，将切片的厚度设置为5μm，摇动切片机进行横切。
切片时要用毛笔做好引导，将连续的石蜡切片引导到准备好的蜡纸上平铺，将平滑的一面统一朝下。
选取切片完好、没组织缺失的连续石蜡切片带，用刀片将其截断成含3-4片的小段。
制做完横切片后，重复修整蜡块和切片的方法对标本进行纵向切片。
ⅰ、摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。
ⅱ、调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成15度左右。
ⅲ、调整厚度调节器到所需的切片厚度，一般为4～10微米。
ⅳ、一切调整好后方可以开始切片。
此时右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以40～50r/min。
ⅴ、切成的蜡带到20～30cm长时，右手用另一支毛笔轻轻将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带保存。
展片和粘片
将洗净、烘干的玻片排列放置在玻片架上，将明胶放入70℃的水浴加热溶解，再将放有玻片的玻片架放入明胶内蘸浸片刻，取出放在室温待干备用。
将切好断开的石蜡切片置于40℃的恒温水浴锅里，让其充分伸展。
然后粘贴蜡片，再用载玻片捞取尽可能伸展较好的石蜡切片，调整好切片在玻片上的位置，每个标本横切、纵切各制作3～4个片。
最后贴上标签，放入35℃的烘箱中烘干，使玻片的水分完全蒸发，蜡片紧贴玻片。
H.E染色
脱蜡：二甲苯Ⅰ(10分钟) →二甲苯Ⅱ(10分钟) →1/2100%酒精+1/2二甲苯(5分钟) →100%酒精Ⅰ(2-3分钟) →100%酒精Ⅱ(2-3分钟)→95%酒精Ⅰ(1-2分钟)→95%酒精Ⅱ(1-2分钟)→90%酒精(1-2分钟) →80%酒精(1-2分钟) →70%酒精(1-2分钟) →蒸馏水(1-2分钟)
染色：苏木精(10-15分钟) →自来水冲洗3分钟以上→盐酸酒精(8秒) →自来水冲冼(20分钟) →蒸馏水(2分钟) →70%酒精(1-2分钟) →80%酒精(1-2分钟) →90%酒精(1-2分钟) →0.5%伊红酒精溶液(3-5分钟) →95%酒精Ⅰ(30秒) →95%酒精Ⅱ(1-2分钟) →100%酒精Ⅰ(2分钟) →100%酒精Ⅱ(2分钟)→二甲苯Ⅰ(2分钟) →二甲苯Ⅱ(2分钟)
封片：用中性树胶封片，置于阴凉处风干。
染色结果：细胞核被苏木素染成蓝色，细胞质被伊红染色呈粉红色。