肝内胆管癌中上皮_钙黏附素基因CDH1的甲基化研究_翟博
上皮性卵巢癌中CDH1基因突变／甲基化对上皮型钙黏附素表达的影响
Ｅｆ ｃ ｓｏ ｆ ｔ ｆＣＤＨ１ ｇ ｎ ｔ ｔ ｎ ｍｅ ｈ ｌ ｆ ｎ ｏ ｘ ｒ ｓ ｉ ｎ ｏ ｃ ｄ ｅ ｈ ｐ ｔ ｅｉ ｌ ｖ ｄａ ａ ｃｎ ｍａ ｅ ｅ ｅ ｍｕ ａ ｉ ／ ｔ ｙ ａ ｏ ｎ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆＥ－ ａ ｈ ￣ｎ ｉ ｔ ｅ ｅ ｉｈ ｌ ａ ｎ ｃ ｒ ｉ ｏ ｓ ｏ ｉ ｎ ａ ｏ
பைடு நூலகம்
Ｃ Ｈ１ 因突变在上皮性 卵巢癌少见 ，Ｄ 基因启动子区甲 Ｄ 基 Ｃ Ｈ１
关键词 ： 卵巢癌 ； Ｅ一钙黏附素 ； 甲基化 ； 免疫组织化学 ； 逆转录酶多聚酶链 反应 ； 基因突变
中图 分 类 号 ： Ｒ ３ ． １ ７ ７ ３ 文 献标 志码 ： Ａ 文 章 编 号 ： １０ ０ ７—６ １ （０ ０ ０ ０ １ ０ ６ ｌ ２ １ ）３— ２４— ５
ｅ ｐｏ ｅ ｔ ｅ ｅｆｃ ｓｏ ｅ ｏ ｘ ｒ ｓｉ ｎ ｏ ｃ ｄ ｅ ｉ ． Ｍｅｈ ｄ Ｔ ｅｍｕ ａｉ ｎａ ｄ ｔｅ ｍｅｈ ｌ ｔ ｎ ｏ ＤＨ１ ｇ ｎ ｎ８ ｒ ｒ ｐ － ｘ ｌｒ ｈ ｆ ｔ ｆ ｈ ｍ ｎ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ ｅ ｔ Ｅ— ａ ｈ ｒ ｎ ｔ ｏ ｓ ｈ ｔ ｔ ｎ ｈ ｔ ｙａｉ ｆＣ ｏ ｏ ｅ ｅｉ ０ ｐ ｍａ ｅ ｉ ｉ ｙ ｔｅ ｉ ｖ ｒ ｎ ｃ ｒ ｉ ｏ ｉｓ ｅ ｎ ８ ｎ ｒ ｌ ｖ ｒ ｎ ｔ ｓ ｅ ｅ ｅｄ ｔ ｃｅ ｙ ｃ ｒ ｍａｏ ｒ ｐ ｉ ｎ ｙ ｉ ａ ｄ ｍｅｈ ｌ ｔ ｎ ｓ ｅ ｉ ｃＰ ｈ ｌ ｏ ａ ａ ａ ｃｎ ｍａｔ ｕ ｓａ ｄ ３ ｏ ｍａ ａｉ ｓｕ ｓｗ ｒ ｅｅ ｔｄ ｂ ｈ ｏ ｔｇ ａ ｈ ｃ ａ ａ ｓｓ ｎ ｔｙ ａｉ ｐ ｃｆ ＣＲ ｌ ａ ｉ ｓ ｏ ａ ｉ ｌ ｏ ｉ
胆管癌中TWIST蛋白、Kiss-1蛋白和上皮黏附素的表达及临床意义
Ｋ ｉ ｓ ｓ 一 １和 Ｅ — ｃ ａ ｄ ｈ ｅ ｒ ｉ ｎ的表 达具 有相 关性 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） 。 结论 Ｔ ＷＩ Ｓ Ｔ、 Ｋ ｉ ｓ ｓ 一 １和 Ｅ — ｃ ａ ｄ ｈ ｅ ｉ ｆ ｎ异 常表 达 在胆 管 癌发
生 发展 中起 重 要作用 ， 三者 具有 协 同效应 ， 共 同促 进肿 瘤 的进展 。
Ｅｘ ｐｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ａ ｎｄ ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ａ ｌ ｓ ｉ ｇ ｎ ｉ ｉｃ ｆ ａ ｎ ｃ ｅ ｏ ｆ ＴＷ Ｉ ＳＴ ｐｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ，Ｋ ｉ ｓ ｓ －１ ｐｒ ｏ ｔ ｅ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ
ｅ ｐ ｉ ｔ ｈｅ ｌ ｉ ａ ｌ ａ ｄｈｅ ｓ ｉ ｎ ｉ ｎ ｃ ｈｏ ｌ ａ ｎｇ ｉ ｏ ｃ ａ ｒ ｃ ｉ ｎ ｏ ｍａ
ＡＮ Ｙ ａ ｎ ｇ Ｑ １ Ｕ Ｂ ａ ｏ ＂ ａ ｎ Ｚ Ｈ Ａ０ Ｗｅ ｎ ｃ ｈ ａ ｏ Ｄ ｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｂ ｉ ｌ ｉ ａ ｒ ｙ Ｓ ｕ ｒ ｇ ｅ ｌ ？ ￣ ， ｔ ｈ ｅ Ｎ ａ ｖ ｙ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｌ Ｈ ｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｐ ｅ ｏ ｐ ｌ ｅ Ｓ Ｌ ｉ ｂ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ Ａ ｒ ｍｙ ， Ｂ ｅ ｉ ｊ ｉ ｎ ｇ １ ０ ０ ０ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｉ ｎ ｖ ｅ ｓ ｔ ｉ ｇ ａ ｔ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｘ ｐ ｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｒ ｗＩ Ｓ Ｔ ， Ｋ ｉ ｓ ｓ － １ ａ ｎ ｄ ｅ ｐ ｉ ｔ ｈ ｅ ｌ ｉ ａ ｌ ａ ｄ ｈ ｅ ｓ ｉ ｎ （ Ｅ — ｃ ａ ｄ ｈ ｅ ｉ ｆ ｎ ） ｉ ｎ ｃ ｈ ｏ ｌ ａ ｎ —
肝胆管结石上皮Survivin及PCNA表达与肝胆管癌关系的研究
上皮型钙粘蛋白在胆管癌组织中的表达及意义
２１ ０ １年 １ １月
第 ９卷
第３ １期
Ｃ Ｎ Ｓ Ｎ Ｏ ＥＧ ＤＣ Ｌ Ｒ Ｓ Ａ Ｃ ＨＩＥ Ｅ Ａ ＤＦ Ｒ Ｉ Ｎ ＭＥ ＩＡ Ｅ Ｅ Ｒ ｜
禹疆 ｔ曩 薯｜。 一 。 誊蠢 曩 零 ｜ 譬舞｜ 善 ：
２ ２ Ｅ— ａｈ ． ｃｄ ｎ表达与 临床病理 特征 的关 系 Ｅ—Ｃ ｄ ｅｉ ａｈ ｒ ｎ的 表 达与胆管癌的组织学类型 、 分化程度 、 Ｎ Ｔ Ｍ分 期和淋 巴结转移
１１ 一般资料 ．
胆管 癌组 织芯片及 临床病理资料购 自上海芯超
均 有关 （ ０ ０ ） 而与患者 的年 龄、 别和 患病部 位无关 （ Ｐ＜ ．５ ， 性 Ｐ＞
１ 资料与方法
Ｅ— ａｈｒ 免疫组化 产物 主要 位于 细胞 膜 ， ｃｄｅｎ ｉ 为棕 黄色 。３ 例 胆 １ 管癌组织 中有 ｌ 例 Ｅ— ａｈ ｎ ９ ｃｄ耐 低表达 ， ｃｄｅｎ 表达率为 Ｅ— ａｈｒ 低 ｉ ６ ．％ ， 例胆管炎组织 中有 １ Ｅ— ａｈｒ 低表达 ， １％ ， １３ １ ０ 例 ｃｄｅｎ ｉ 占 ０ 胆管癌组 织 中 Ｅ—ｃｄｅｎ低 表 达 率 明 显 高 于 胆 管 炎 组织 中 ａｈｒ ｉ Ｅ— ａｈｒ 低表达率 （２ ６００Ｐ＜ ．５ ， ｃｄｅｎ ｉ Ｘ ＝ ．４ ， Ｏ ０ ）见图 １ 图 ２ ， 。
匿， 早期多无明显临床症状 ， 旦出现症 状 ， 一 病情 都较 重 ， 确诊 时
已进入进展期 ， 治愈的可 能性很小 ， 后差 。胆 管癌 的发病 率 近 预 年来呈逐年上升趋势 ｕ 。研 究有关 胆管癌 的浸润 和转移 机制对
胞 总数的百分 比和染 色 的深浅 进行 ， ｃｄｅｎ低表 达为 阳性 Ｅ— ａｈｒ ｉ 细胞数 ≤８ ％ ， Ｏ 高表达为 阳性细胞数 ＞ ０ ３。 ８ ％Ｅ ３
PCNA、KI-67在肝内胆管癌及肝内胆管结石胆管中的表达及意义的开题报告
PCNA、KI-67在肝内胆管癌及肝内胆管结石胆管中
的表达及意义的开题报告
肝内胆管癌（ICC）是一种罕见但危险的恶性肿瘤，其症状早期不明显，难以诊断，且治疗效果不佳。
肝内胆管结石胆管（ICCSD）是一种常见的胆道疾病，其病因及发病机制尚不明确。
近年来，人们发现PCNA和KI-67在肝内胆管癌及肝内胆管结石胆管中有一定的表达，因此探究PCNA和KI-67在肝内胆管癌及肝内胆管结石胆管中的表达及意义具有较大的临床意义和研究价值。
PCNA是细胞增殖核抗原，广泛存在于生物体内，是细胞增殖过程中必需的蛋白质，参与DNA复制与修复。
研究发现PCNA在ICC和ICCSD 中的表达均较高，表明PCNA可能参与了肝内胆管癌和结石胆管的细胞增殖过程，并可能成为治疗和预后评估的潜在标志物。
KI-67是一种蛋白质，在细胞增殖过程中具有重要作用。
研究发现，ICC组织中KI-67的表达水平较高，而ICCSD组织中KI-67的表达水平则较低，表明KI-67可能不仅参与了ICC和ICCSD的细胞增殖过程，还可能与二者的发病机制有关。
总之，探究PCNA和KI-67在肝内胆管癌及肝内胆管结石胆管中的表达及意义对于深入了解肝内胆管癌和结石胆管的发病机制、制定个体化治疗方案以及预后评估具有一定的临床意义。
胃癌中钙黏附分子启动子甲基化与幽_省略_螺杆菌感染及肿瘤生物学特性的关系_冯宁1
甲基化情况，并回顾性地分析 CDH1 的启动子甲基化与 HP 感染、肿瘤分化、浸润、淋巴及远处转移等肿瘤生物学 特性的统计学关联。 结果 胃癌组 CDH1 基因甲基化阳性率高于对照组（P ＜ 0.05）。胃癌组中低 - 未分化肿瘤组 CDH1 基因甲基化阳性率高于高 - 中分化肿瘤组（P ＜ 0.05）；胃癌组中 HP 阳性患者的 CDH1 基因甲基化率高于 HP 阴性患者（P ＜ 0.05）；而胃癌组中 CDH1 基因甲基化阳性率与患者性别、肿瘤浸润程度、淋巴转移及远处转移 无明显关系（P ＞ 0.05）。 结论 CDH1 基因甲基化可能参与了胃癌的发展过程，并且 CDH1 基因甲基化可能导致 了肿瘤分化程度的降低。CDH1 基因甲基化与胃癌患者的 HP 感染之间可能存在密切关系，提示 HP 感染可能参与 了抑癌基因甲基化失活及肿瘤演变的发展过程。
根据查阅文献所得引物序列，通过比对基因库中 CDH1 基因启动子序列配对无误，两对引物序列及各
自扩增片段长度如下： 甲基化 DNA：正向引物：5’GGTGAATTTTTAGT
TAATTAGCGGTAC3’，反 向 引 物：5’CATAACTAA CCGAAAACGCCG3’，扩增所得 204 bp 产物；非甲基 化 DNA：正 向 引 物：5’GGTAGGTGAATTTTTAGTT AATTAGTGGTA3，反向引物：’5’ACCCATAACTAA CCAA 实验方法
华西医学 2014, 29（1） West China Medical Journal, Vol.29, No.1 Jan. 2014
43
论 著
上皮钙黏附素及β-连接素在大肠癌变中的表达及意义
见表 １ 。
２ ８例 ； 浸 润深度未 侵及 浆膜 ｌ ３例 ， 侵及浆膜 ２ ７例 ； 无淋巴
结转移的 ２ ４例 ， 有淋 巴结 转移 的 １ ６例 ； Ｄ ｕ ｋ ｅ ｓ 分 期 ： Ａ 表 １ 各组 间 Ｂ— ｃ ａ ｔ 及 Ｅ—ｃ ａ ｄ表达情况 比较 例（ ％）
＋Ｂ期 ２ ４例 ， Ｃ＋Ｄ期 ｌ ６例 ； 组织 学类 型 ， 高 一中分化 ２ ９
利ｔ 中医 ２ ０ １ ３年 ｌ ２月 第 ３ ５卷 第 １ ２期
Ｈ ｅ ｂ ｅ ｉ Ｊ Ｔ Ｃ Ｍ， Ｄ ｅ ｃ ｅ ｍ ｂ ｅ ｒ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ ｌ ３ ５ ， Ｎ ｏ ． １ ２
１ ９ １ ７
上 皮 钙 黏 附素 及 Ｉ ３一连 接 素 在 大 肠 癌 变 中的表 达 及 意 义
例， 低 一未分化 １ １ 例 。同时取 ２ Ｏ例正常大肠 黏膜作 为对
照（ 均取距肠癌标本肿 物 １ ０ ｃ ｍ 以上 的大肠黏膜 ） 。所 有
病 例全部切片均 由 ２位高年资病理医师严 格按照 ２ ０ ０ ０年 世 界卫 生组 织 （ ＷＨ Ｏ） 标 准进 行 明确 诊 断 复 核 ， 均 经 １ ０ ％甲醛溶 液固定 ， 石蜡包埋 ， ４ ｍ厚连续切片 。 １ ． ２ 试剂 鼠抗 人 Ｅ—ｃ ａ ｄ单 克 隆抗 体 、 鼠抗 人 ８一ｃ ａ ｔ 单 克隆抗体 、 免疫组化超 敏 Ｓ— Ｐ检测试剂盒及 Ｄ Ａ Ｂ酶 底 物显色试剂盒均购 自福州迈新生物技术 开发 有限公司 。 １ ． ３ 检测方法 免疫组织化学按免疫 组织 化学增强型试 剂 盒说 明书进行 ， 每批染 色均设 阴性 、 阳性对 照 ， 即以 Ｐ Ｂ Ｓ 替代一抗作为阴性试剂对照 ， 以试 剂说 明书中推荐 的组织
MUC1、E-cadherin在肝门胆管癌组织中的表达及其临床意义
MUC1、E-cadherin在肝门胆管癌组织中的表达及其临床意义张勇;张炳远【摘要】目的检测黏蛋白1(MUC1)、E-钙黏附素(E-cadherin)在肝门胆管癌组织中的表达,探讨其在肝门胆管癌发生、发展过程中的作用.方法取青岛大学医学院附属医院2006年6月至2009年6月手术切除且临床随访资料完整的54例肝门胆管癌的石蜡包埋组织标本.采用免疫组化S-P法染色,检测石蜡切片中MUC1与E-cadherin的表达情况,应用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计学处理.结果(1)MUC1、E-cadlaerin在肝门胆管癌组织中高表达率分别为68.5%、33.3%,正常胆管组织中MUC1、E-cadlaerin高表达率分别为20%、80%.肝门胆管癌组织和正常胆管组织之间MUC1、E-cadherin的表达比较,差异具有显著性(P<0.05).(2)肝门胆管癌组织中MUC1、E-cadlaerin蛋白的表达均与肿瘤的侵袭转移能力、患者的生存期密切相关(P<0.05).结论 MUC1、E-cadherin可能参与肝门胆管癌的发生、发展、转移过程.【期刊名称】《青岛医药卫生》【年(卷),期】2011(043)003【总页数】3页(P166-168)【关键词】肝门胆管细胞癌;黏蛋白1;E-钙黏附素;免疫组织化学【作者】张勇;张炳远【作者单位】青岛大学医学院,266021;山东省蓬莱市人民医院;青岛大学医学院附属医院【正文语种】中文【中图分类】R735.8肝门部胆管癌是指发生在胆总管上段1/3至左右肝管分支处或累及一侧或双侧肝内胆管的胆道恶性肿瘤，约占肝外胆道肿瘤总数的58%～75%，近年来发病呈上升趋势。
大多数肝门部胆管癌F早期临床表现隐匿，因其解剖结构特殊，周围毗邻关系复杂，既往手术切除率低，加之对放化疗不敏感，导致肝门胆管癌患者预后极差。
近年来，一些新的细胞因子和酶陆续被发现(如黏蛋白1即MUC1及上皮钙黏附蛋白即E-cadherin等)，它们的作用在妇科疾病、胃肠疾病中得到证实，但在肝门胆管癌的研究鲜有报道。
上皮型钙粘蛋白在胆管癌组织中的表达及意义
上皮型钙粘蛋白在胆管癌组织中的表达及意义作者：张峰伟左云芳来源：《中外医学研究》2011年第31期【摘要】目的探讨上皮型钙粘蛋白（E-cadherin）在胆管癌组织中的表达情况及临床病理意义。
方法采用免疫组化方法，测定胆管癌及胆管良性病变组织中E-cadherin的表达，并分析E-cadherin表达与临床病理特征两者间的关系。
结果31例胆管癌组织中E-cadherin低表达为61.3%(19/31)，10例胆管炎组织中E-cadherin低表达为10%（1/10）,差异有统计学意义(χ2=6.040,P0.05)。
结论E-cadherin在胆管癌组织中的表达下降，并与肿瘤生物学行为、浸润转移相关。
【关键词】钙粘蛋白；胆管癌；免疫组织化学胆管癌是一种恶性程度较高的消化道恶性肿瘤，其起病隐匿，早期多无明显临床症状，一旦出现症状，病情都较重，确诊时已进入进展期，治愈的可能性很小，预后差。
胆管癌的发病率近年来呈逐年上升趋势［1］。
研究有关胆管癌的浸润和转移机制对理论研究和指导临床十分重要。
其肿瘤细胞的侵袭和转移过程复杂，步骤多，细胞粘附作用在这一过程的很多步骤和环节中都涉及到。
近年来，肿瘤细胞浸润和转移机制的研究热点之一是有关钙粘蛋白的研究［2］。
有研究表明，上皮型钙粘蛋白（E-cadherin）在人类多种恶性肿瘤中的表达均有降低，且研究发现肿瘤的发生、分化和浸润转移均与之有关。
而胆管癌组织中E-cadherin的表达是否减少尚不清楚，有关这方面的报道很少。
本次研究采用免疫组化方法，探讨胆管癌及胆管良性病变组织中E-cadherin的表达，并分析E-cadherin表达与临床病理特征两者间的关系，现报道如下。
1资料与方法1.1一般资料胆管癌组织芯片及临床病理资料购自上海芯超生物科技公司。
选择胆管癌患者共31例，包括5例乳头状腺癌和26例非乳头状腺癌，其中有6例患者存在淋巴结转移。
高、中分化(Ⅰ～Ⅱ级)患者17例，低分化(Ⅲ级)患者14例。
胆管癌中TWIST蛋白、Kiss—1蛋白和上皮黏附素的表达及临床意义
胆管癌中TWIST蛋白、Kiss—1蛋白和上皮黏附素的表达及临床意义目的探讨胆管癌中TWIST、Kiss-1和上皮黏附素（E-cadherin）的表达，观察三者在胆管癌发生、发展及转移中的作用，以期为临床工作提供理论帮助。
方法收集109例胆管癌标本作为观察组，收集70例正常胆管上皮组织作为对照组，应用免疫组织化学技术检测胆管癌中TWIST、Kiss-1和E-cadherin蛋白的表达，分析三者在不同临床特征中的表达差别及相关性。
结果TWIST在胆管癌组织中高表达（54.13%比15.71%），Kiss-1（31.19%比95.71%）和E-cadherin （27.52%比91.43%）（P 0.05），具有可比性。
1.2 TWIST、Kiss-1和E-cadherin蛋白表达的检测TWIST、Kiss-1和E-cadherin蛋白均购自武汉博士德生物工程有限公司，检测应用免疫组化SP法，应用二氨基联苯胺（DAB）显色，由病理科主管技师进行操作，并在显微镜下进行显色，严格质量控制，减少人为误差。
1.3 结果判定方法结果的判断均由两位病理主治医师共同阅片得出。
Kiss-1和E-cadherin阳性染色均位于细胞膜和细胞质，E-cadherin蛋白阳性染色位于细胞膜，呈棕黄色为阳性细胞，合并计算高倍镜下（400×）随机选择的10个视野中阳性细胞占全部计数肿瘤细胞的百分率，平均每个视野呈阳性反应的细胞数≥10%为阳性，无明显阳性反应或阳性反应的细胞数<10%为阴性。
1.4 统计学方法数据应用SAS 6.12进行统计分析，两组间比较采用χ2检验，并进行线性相关分析，以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 TWIST、Kiss-1和E-cadherin蛋白在胆管癌及正常胆管黏膜组织中的表达TWIST在胆管癌组织中的阳性表达明显高于对照组，而Kiss-1和E-cadherin 在胆管癌组织中的阳性表达明显低于对照组。
T-钙黏蛋白基因甲基化在肺癌发生中的作用重点
ＣＶＢ，彻底混合；９２ ｏＣ孵育１０ ｒａｉｎ，然后６４℃孵育
２．５
ＣＡＣＡＣＡ．３’，引物由上海生工生物工程技术服务有限
ｈ；在样品中加６００“ｌ ＥＱＢ，彻底混合，使用分离
ｃａｎｃｅｒ ａｓ
ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ
ａｂｎｏｒｍａｌ
ｇｅｎｅ
ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｕｎｇ
ｃａｎｃｅｒ
ｗａｓ
ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ
Ｔｈｅ
ｒａｔｅ
ｏｆ ＣＤＨｌ ３ ｇｅｎｅ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｌｕｎｇ
胸外科２０１５年３月至２０１６年３月因肺结核球（５ 例）、肺脓肿（８例）、肺炎（５例）、肺错构瘤（２例）患者 手术切除的肺组织。试剂：Ｔｒｉｚｏｌ、甲基化ＤＮＡ转化试
合仪上剧烈混合直到ＣＶＢ彻底溶解，室温孵育
１０
ｍｉｎ，一２０℃保存，１个月有效。使用前涡旋混合确
剂盒、Ｔｒｉｓ碱、Ｔａｐ ＤＮＡ聚合酶等实验所需试剂均购自 上海生工生物工程技术服务有限公司。ＣＤＨｌ３甲基 化引物：上游引物：５’．ＴＣＧＣＧＧＧＧＴＴＣＧｎＴｒｌｌＣＧＣ一
通信作者：冯旭，Ｅｍａｉｌ：ｆｅｎｇ—ｘｕｄｒ＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．Ｊ．ｉｓｓｎ．１１３０１－９０３０．２０１６．０８．００３
【摘要】
目的探讨Ｔ一钙黏蛋白（ＣＤＨｌ３）基因甲基化在肺癌发生中的作用及其影响因素。方
法采用甲基化特异性聚合酶链反应（ＭＳＰ）检测ＣＤＨｌ３基因在肺癌组织中异常甲基化的水平，探 讨ＣＤＨｌ３基因在５６例肺癌组织、５６例癌旁组织标本和２０例非肺癌良性肺切除组织标本中的表达 及临床意义，研究ＣＤＨｌ３基因异常甲基化与肺癌的相关性。结果在肺癌组织中ＣＤＨｌ３基因甲基 化率明显高于癌旁组织和非肺癌良性肺切除组织，甲基化率分别为３３．９％、８．９％、５．０％，差异有统 计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＣＤＨｌ３基因异常甲基化与ＣＤＨｌ３的表达水平呈负相关（ｒ＝一０．４９０，Ｐ＜ ０．０５）。ＣＤＨｌ３基因启动子区５’端ＣｐＧ岛甲基化导致了ＣＤＨｌ３的表达下调。结论 甲基化的发生具有肿瘤特异性，并且与肺癌患者的病理生理改变密切相关。 ＣＤＨｌ３基因
上皮型钙黏蛋白1及MutL同源基因1在甲状腺癌中的表达及意义
上皮型钙黏蛋白1及MutL同源基因1在甲状腺癌中的表达及意义陈玉涛;王五俊;张鹏【摘要】目的：探讨上皮型钙黏蛋白1(CDH1)及MutL同源基因1(MLH1)在甲状腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。
方法：分析手术治疗且资料完整的61例甲状腺癌患者的临床资料，采用免疫组化法检测甲状腺癌组织及癌旁组织中CDH1及MLH1蛋白的表达情况，并与其临床病理学资料进行比较。
结果：CDH1和MLH1在甲状腺癌组织、癌旁组织中的阳性率分别为40.98%(25/61)，81.97(50/61)和54.10(33/61)，86.89%(53/61)，CDH1及MLH1在癌组织中的表达率均显著低于癌旁组织(P＜0.05)；甲状腺癌组织中CDH1的阳性表达与淋巴结转移及肿瘤分期有关(P＜0.05)，而MLH1的表达与淋巴结转移有关(P＜0.05)。
结论：CDH1和MLH1蛋白可能与甲状腺癌的发生发展有关，并可作为甲状腺癌淋巴结转移的标志物。
%Objective To investigate the CDH1 and MLH1 expression in thyroid carcinoma and their asso⁃ciation with the clincial pathological characteristics. Methods Sixty-one thyroid carcinomas that received sur⁃ger with complete clinical data were included in this study. The cancer tissue (n=61) and para-cancer tissue were examined for CDH1 and MLH1 expression by immunohistochemical method. The correlation between CDH1 and MLH1 expression in thyroid carcinomas and clincial pathology characteristics were evaluated. Results The positive rate of CDH1 in cancer tissue and para-cancer tissue were 40.98%(25/61) and 81.97%(50/61). But for MLH1, 54.10%(33/61) in cancer tissues and86.89%(53/61) in para-cancer tissues. CDH1 posi⁃tive expression in cancertissue was correlated with lymph node metastasis (P<0.05), clinical stage (P<0.05), but MLH1 was not correlated with lymph nodemetastasis(P>0.05). Conclusion CDH1 and MLH1 protein may be related to the occurrence and development of thyroid carcinoma, which can be used as a marker of lymph node metastasis of thyroid carcinoma.【期刊名称】《中国中西医结合外科杂志》【年(卷),期】2016(022)004【总页数】4页(P328-331)【关键词】甲状腺癌;上皮型钙黏着蛋白1;MutL同源基因1;表达水平;临床病理特征【作者】陈玉涛;王五俊;张鹏【作者单位】天津市北辰医院外科天津 300400;天津市北辰医院外科天津300400;天津医科大学总医院普外科天津 300070【正文语种】中文【中图分类】R736.1临床研究显示，上皮型钙黏着蛋白1(cadherin-1，CDH1)及MutL同源基因1(mutL homolog 1，MLH1)在多种人体实体肿瘤组织与正常组织中存在差异性表达，并与临床病理特征和预后相关[1-2]。
肝内胆管癌中上皮-钙黏附素基因CDH1的甲基化研究
肝内胆管癌中上皮-钙黏附素基因CDH1的甲基化研究翟博;鄢和新;刘淑琴;陈磊;吴孟超;王红阳【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】2007(28)1【摘要】目的:探讨肝内胆管癌组织中上皮-钙黏附素(epithelial-cadherin,E-cadherin基因CDH1的甲基化状况。
方法:42例肝内胆管癌标本系东方肝胆外科医院术后肿瘤组织和癌旁组织的石蜡包埋及新鲜冰冻标本。
男性32例,女性10例。
分别采用MSP、RT-PCR以及EnVision方法检测42例肝内胆管癌患者术后标本中CDH1基因甲基化以及E-cadherin的mRNA及蛋白表达变化。
结果:肝内胆管癌中CDH1甲基化发生率为28.6%。
E-cadherin的mRNA及蛋白表达减低率分别为64.3%和69.1%。
CDH1基因甲基化与E-cadherin蛋白表达、mRNA表达以及胆管癌肝内转移之间存在显著相关(分别P=0.008,P=0.031和P=0.020)。
CDH1甲基化与生存预后之间无相关性,E-cadherin表达异常与患者不良生存则显著相关(P=0.002)。
结论:肝内胆管癌中常发生CDH1高甲基化及E-cadherin表达异常,表明CDH1甲基化及E-cadherin的表达异常与肝内胆管癌的发生发展密切相关。
【总页数】5页(P53-57)【关键词】胆管;肝内;胆管肿瘤;上皮-钙黏附素;CDH1;甲基化;预后【作者】翟博;鄢和新;刘淑琴;陈磊;吴孟超;王红阳【作者单位】第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究室【正文语种】中文【中图分类】R735.8【相关文献】1.结肠癌细胞CDH1基因启动子甲基化对E-上皮钙黏素和β-连接素表达的调控作用 [J], 李臣;董坚;任俊宇;洪敏;李少避;刘为青;高嫦娥;陈圣雄;周华华;陈明清2.喉鳞癌中扭曲基因、上皮型钙黏附蛋白和神经型钙黏附蛋白基因表达及相关研究[J], 朱艳艳;俞建平;赵瑞力3.上皮性卵巢癌中CDH1基因突变/甲基化对上皮型钙黏附素表达的影响 [J], 姜伶俐;辛晓燕;周洁晶;李红梅;于月成4.胆管癌组织中唾液酸化的路易斯-X抗原和E-上皮钙黏附素表达的免疫组化研究[J], 谷化平;刘艳茹;尚培中5.E-上皮钙黏附素和PTEN在胆管癌中的表达 [J], 谷化平;尚培中;冯骥良;周翠玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
DNA甲基化与肿瘤多药耐药关系的研究进展
DNA甲基化与肿瘤多药耐药关系的研究进展
顾玉兰;朱海杭;卜平
【期刊名称】《实用癌症杂志》
【年(卷),期】2004(19)6
【摘要】多药耐药(multidrug resistance，MDR)是肿瘤化疗失败的主要原因之一，现已明确由7号染色体上的mdr1编码的P-gP表达增强是MDR主要机制之一。
P-gP是依赖ATP的药物外排泵，能将细胞内化疗药物逆浓度泵至细胞外，使细胞内化疗药物达不到有效杀伤剂量而产生耐药。
目前多药耐药的研究重点放在MDR1的转录调控上。
与此同时，DNA甲基化作为1种基因外遗传信号，逐渐为人所熟知。
【总页数】3页(P666-668)
【作者】顾玉兰;朱海杭;卜平
【作者单位】225001,扬州大学医学院中医药实验室;225001,扬州大学医学院中医药实验室;225001,扬州大学医学院中医药实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R730.5
【相关文献】
1.恶性肿瘤发生及发展与DNA甲基化的关系及其检测方法研究进展 [J], 田小侠;司磊
2.多药耐药基因1与肿瘤关系的研究进展 [J], 彭荷玲(综述);李卫;刘宏涌(审校)
3.DNA甲基化异常与肿瘤间关系的研究进展 [J], 王孝恩
4.营养与肿瘤表观遗传学关系的研究进展——DNA甲基化机制 [J], 腾丽娟;张长松;李克
5.DNA甲基化与卵巢癌多药耐药关系的研究进展 [J], 侯凡;田显敏;王留利;徐丽媛;王海琳
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上皮性钙粘附蛋白和β-连环素的表达与胆囊腺癌预后的关系
上皮性钙粘附蛋白和β-连环素的表达与胆囊腺癌预后的关系臧长海;李新燕;姚宏;石立群【期刊名称】《中国药物与临床》【年(卷),期】2003(003)003【摘要】目的探讨上皮性钙粘附蛋白(E-cad)及β-连环素(β-cat)在胆囊腺癌中的表达及其与分化、转移、临床分期和预后的关系.方法免疫组织化学法(SP法)和原位杂交法.结果免疫组织化学法:60例胆囊腺癌中E-cad 及β-cat的阳性率分别为40%和45%,异常表达率分别为58.3%和63.3%.E-cad和β-cat的异常表达率与胆囊腺癌的分化程度有相关性(P＜0.05),在有淋巴结转移病例中E-cad及β-cat的异常表达率明显高于无转移病例,随着临床分期由Ⅰ期到Ⅳ期,E-cad及β-cat异常表达率明显增高(P＜0.05).E-cad和β-cat异常表达病例的平均生存时间和5年生存率明显低于正常表达病例.原位杂交法:胆囊腺癌中E-cad和β-cat mRNA的阳性率分别为60%和40%,与蛋白正常表达一致率分别为78.8%和82.4%.结论检测β-cat或E-cad和β-cat的共同表达是指导临床治疗及估计预后有意义的指标,可应用临床预后的综合评估.【总页数】4页(P210-213)【作者】臧长海;李新燕;姚宏;石立群【作者单位】中华风湿病学杂志社,030013;太原市人民医院病理科;太原市人民医院病理科;南京军区南京总医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.钙粘附素及连环素表达与乳腺癌转移及预后的关系 [J], 马忠良;张志谦;王占民;柯杨;林仲翔2.p120连环素与上皮性钙粘附蛋白在基底细胞样乳腺癌中表达的临床意义 [J], 李明雷;焦艳;赵长燕;才秋敏;赵静3.上皮性钙粘附素、β-连环素在上皮性卵巢癌及其转移灶的表达及意义 [J], 陈一结;赵志光;朱雪琼;吕杰强4.上皮钙粘附蛋白和连环蛋白的表达与大肠癌生物学特性的关系 [J], 崔泉;李继坤;郑淼5.上皮钙粘附素/连环素复合体在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义 [J], 刘鸣;汤春生;张水红;穆玉兰;马金龙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
上皮型钙黏蛋白在胰腺癌中的表达和作用
上皮型钙黏蛋白在胰腺癌中的表达和作用周晓晖;徐彬;王单松;楼文晖;靳大勇【期刊名称】《外科理论与实践》【年(卷),期】2007(12)3【摘要】目的:研究上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)在胰腺导管腺癌中的表达及临床意义。
方法:收集我院2001年1月至2006年6月间手术切除的60例胰腺导管腺癌石蜡标本,制成组织芯片,应用EnVision免疫组化技术检测上皮型钙黏蛋白的表达,结合临床病理资料进行分析。
结果:正常胰腺组织细胞膜上皮型钙黏蛋白染色强阳性,癌细胞膜染色降低或缺失,上皮型钙黏蛋白表达在正常组织和癌组织中有显著差异(P<0.01)。
37例(61.7%)胰腺癌上皮型钙黏蛋白表达降低,上皮型钙黏蛋白表达降低与肿瘤转移、组织分化程度、TNM分期和预后密切相关(P<0.05)。
结论:上皮型钙黏蛋白表达降低可能是评判胰腺癌恶性程度、转移和预后的较好指标。
【总页数】3页(P246-248)【关键词】胰腺肿瘤;钙黏着糖蛋白类;免疫组织化学【作者】周晓晖;徐彬;王单松;楼文晖;靳大勇【作者单位】复旦大学附属中山医院普外科胰腺肿瘤组【正文语种】中文【中图分类】R735.9【相关文献】1.上皮型钙黏素E和β-连环蛋白在胰腺癌中的表达情况 [J], 徐志强;鲍民生2.异黏蛋白、Bcl-2和上皮型钙黏蛋白在鼻黏膜恶性黑色素瘤中的表达及意义 [J], 邹冰清;王纾宜3.胰腺癌组织中Smad4、上皮型钙黏蛋白及β-连环蛋白的表达及临床意义 [J], 肖蔚;焦霞;赵燕;周彤敏;窦荣荣;于鸿4.上皮型钙黏蛋白、神经型钙黏蛋白及p63在宫颈癌组织中的表达及其与临床病理因素关系研究 [J], 孙新超;秦旭;王金海;潘云清5.上皮钙黏蛋白和基质金属蛋白酶-7在乳腺癌基底细胞样型和Her-2高表达型中的表达及其意义 [J], 高雪;关宏伟;蔡欣;孙志刚;陈丹;陈丽菊因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
组学前沿：从胆结石、异常增生到胆囊癌过程中甲基化变化的全表观组分析｜文献科普
组学前沿：从胆结石、异常增生到胆囊癌过程中甲基化变化的全表观组分析｜文献科普易点评胆囊癌（GBC）是一种高度侵袭性的胆道恶性肿瘤，对GBC的研究长期以来一直有限，为了弥补GBC研究上的不足，本文专门针对胆囊癌发生发展过程的表观遗传学变化进行了研究。
作者建立了胆结石→异常增生→胆囊癌为代表模型样本，使用Illumina Infinium MethylationEPIC BeadChips技术进行全表观组甲基化分析，识别了差异甲基化位点、区域和途径以及拷贝数变异(CNV)的变化，从而证实了表观遗传学改变的数量和程度随着疾病的发展而增加这一结果。
这篇文章告诉我们，胆囊癌的发生包括三个主要的甲基化阶段：早期(胆结石和低度异常增生)、中期(重度异常增生)和晚期(GBC)。
甲基化和CNV的逐渐变化有助于加深对这种侵袭性疾病潜在机制的理解，并最终达到改善治疗和早期诊断GBC的目的。
背景胆囊癌(GBC)是一种高度侵袭性的恶性肿瘤，每年影响全球超过17.5万人。
胆囊癌在美国和西欧相对罕见，但在东南亚和南美洲的几个国家非常常见。
因胆囊癌导致死亡的病例大多数发生在低收入和中等收入国家，因此对这种疾病的研究长期以来一直很有限。
流行病学研究已经确定了几个GBC风险因素，包括胆结石(GSD)、炎症、毒素、种族和遗传背景等。
其中GSD使GBC的风险大大增加，胆结石和胆囊癌之间的联系被认为是由于胆囊上皮的持续刺激，导致炎症和细胞再生，最终触发上皮细胞通过异常增生引发原位癌的出现，在这种癌中，细胞积累了大量基因组和表观基因组的改变，可能在5-15年内导致侵袭性胆囊癌的发生。
深入了解伴随疾病进展的分子变化对于改善GBC的早期发现和治疗至关重要。
然而，此前对GBC的大规模分子研究没有考虑癌前异常增生病变，或者没有研究整个表观基因组的甲基化变化。
为了弥补这一缺陷，作者收集了受GSD、低度异型增生、重度异型增生和GBC影响的智利患者的胆囊组织样本，用Illumina Infinium MethylationEPIC BeadChips进行甲基化分析。
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第二军医大学学报Acad J Sec M il M ed Univ2007Jan ;28(1) 53 论 著肝内胆管癌中上皮-钙黏附素基因CDH1的甲基化研究翟 博,鄢和新,刘淑琴,陈 磊,吴孟超,王红阳*(第二军医大学东方肝胆外科医院国际合作信号转导研究室,上海200438)[摘要] 目的:探讨肝内胆管癌组织中上皮-钙黏附素(epithelial -cadherin ,E -cadherin 基因CD H1的甲基化状况。
方法:42例肝内胆管癌标本系东方肝胆外科医院术后肿瘤组织和癌旁组织的石蜡包埋及新鲜冰冻标本。
男性32例,女性10例。
分别采用M SP 、RT -P CR 以及EnVision 方法检测42例肝内胆管癌患者术后标本中CDH 1基因甲基化以及E -cadherin 的mRN A 及蛋白表达变化。
结果:肝内胆管癌中CDH1甲基化发生率为28.6%。
E -cadherin 的m RN A 及蛋白表达减低率分别为64.3%和69.1%。
CD H1基因甲基化与E -cadherin 蛋白表达、m RN A 表达以及胆管癌肝内转移之间存在显著相关(分别P =0.008,P =0.031和P =0.020)。
CD H1甲基化与生存预后之间无相关性,E -cadherin 表达异常与患者不良生存则显著相关(P =0.002)。
结论:肝内胆管癌中常发生CDH 1高甲基化及E -cadherin 表达异常,表明CD H1甲基化及E -cadhe rin 的表达异常与肝内胆管癌的发生发展密切相关。
[关键词] 胆管,肝内;胆管肿瘤;上皮-钙黏附素;CDH1;甲基化;预后[中图分类号] R 735.8 [文献标识码] A [文章编号] 0258-879X (2007)01-0053-05C DH1methylation of E -cadherin gene in human intrahepatic cholangiocarcinomas :correlation between clinico -pathologic parameters and patients ’survivalZ HA I Bo ,Y AN He -x in ,L IU Shu -qin ,CHEN Lei ,W U M eng -chao ,W A NG Ho ng -yang *(Inter national Co operatio n L abo ra to -ry o n Sig nal T ransductio n ,Ea ster n H epa to biliary Sur gery Ho spital ,Seco nd M ilitar y M edical Univ ersity ,Shang hai 200438,China )[ABSTRACT ] Objective :T o inve stigate CD H1methylatio n of epithelial -cadherin (E -cadherin )gene in intrahepatic cholang io -car cino mas (ICCs ).Metho ds :F or ty -tw o liver samples w ere obtained fro m ICC pa tient s (32males a nd 10females )dur ing surgi -cal resection in Easte rn Hepatobiliary Surg ery Ho spital.T he ICC tissue samples and the adjacent tissue samples w ere paraffin -embedded and fresh ice -f rozen.A methylatio n -specific po ly merase chain reactio n (M SP )w as used fo r analy zing the methylatio n of CDH1gene ;E -cadherin protein and m RNA ex pr essio n w as detected by immunohistochemical method and RT -PC R analy sis ,respectively.Results :T he me thy la tion rate o f CDH 1was 28.6%in ICC patie nts.T he e xpression o f E -cadherin m RN A a nd pro -tein w as decreased in 64.3%and 69.1%o f the sample s ,respectively.T he methy latio n o f CD H1gene was co rrelated with the e xpressio n of E -cadherin protein and m RNA and me ta stasis of ICCs (P =0.008,P =0.031,and P =0.020,respectiv ely ),but no t with the pro gno sis o f ICC.T he abno rmal ex pression of E -cadherin w as sig nificantly cor rela ted with the survival o f pa tients (P =0.002).C onclusion :The methy la tion of CD H1gene and dow n -regulation of E -cadherin are fr eque ntly seen in ICC pa -tients ,indica ting that they may be clo se ly rela ted to the develo pment and pro g ression of ICCs.[KEY WORDS ] bile ducts ,intr ahepatic ;bile duct neoplasms ;epithelial -cadherin ;CDH1;me thy lation ;pro gnosis[Acad J Sec M il M ed U niv ,2007,28(01):53-57][基金项目] 青岛市自然科学基金(032jz12).S upported by Natu ral S cience Foundation of Qingdao (032jz12).[作者简介] 翟 博,博士,主治医师.*Corres ponding autho r.E -mail :hyw angk @online.s h.sn 上皮-钙黏附素(epithelial -cadherin ,E -cadhe r -in )在钙离子的辅助下介导上皮细胞间的黏附,其表达受到CDH 1基因的调控。
在多种人体肿瘤中存在CDH 1基因CpG 小岛异常甲基化,造成基因静默、转录停止,并且与肿瘤的组织学特征等临床病理指标存在不同程度的相关性。
近年来在肝内胆管癌(intrahepa tic cholang iocarcinom a ,ICC )中也发现某些肿瘤抑制基因发生不同程度的CpG 小岛甲基化。
本研究采用激光捕获微切系统(LCM )在42例肝内胆管癌术后标本上分离切割纯净的胆管上皮细胞和肿瘤细胞,应用甲基化特异PC R (MSP )方法检测正常胆管上皮细胞和肝内胆管癌中CDH 1基因CpG 小岛的甲基化状况,并探讨甲基化与患者临床病理学特征、侵袭转移以及生存预后间的关系,为建立判断ICC 进展和结局的新的生物学指标提供理论上的支持。
54 第二军医大学学报 2007年1月,第28卷1 材料和方法1.1 标本及一般临床资料 42例肝内胆管癌标本取自第二军医大学东方肝胆外科医院1997年10月到2004年3月间的术后患者。
其中男性32例,女性10例。
年龄27～73岁,中位年龄51岁。
术后标本均包括肿瘤组织和癌旁组织的石蜡包埋和新鲜冰冻标本。
另取10例肝内胆管结石患者的术后标本。
42例患者中伴发肝硬化者13例(30.9%),伴发慢性肝炎者15例(35.7%)。
临床病理指标包括性别、年龄、组织学分级、pTNM分期、肿瘤大小、包膜和血管侵袭与否、有无卫星结节、肝内转移、周围淋巴结浸润以及患者的复发生存状况。
根据日本肝癌协会[1]标准,ICC的组织学分级包括高、中、低3种程度。
根据国际抗癌联盟UICC进行pTNM分期[2]。
1.2 试剂和材料 试剂盒Wizard DNA Clean-up Sy stem和Puregene DNA Purification System均为Pro mega公司产品,First-S trand cDNA Sy nthesis Using SuperScriptⅡRT和TRIzo l Reagent均为Invitrog en公司产品,EnVision TM Kit为DAKO公司产品。
兔抗人E-cadherin IgG多抗和羊抗兔生物素化二抗均为Santa C rutz公司产品。
CDH1基因甲基化序列正义链:TTA GGT TAG AGG G T T ATC GCG T;反义链:TAA CTA AAA A TT CAC C TA CCG AC。
CDH1基因非甲基化序列正义链:TAA T T T TAG GRR AGA GGG TTA TTGT;反义链:CAC A AC CAA TCA ACA ACA CA。
用于RT-PCR的E-cadhe rin基因上游引物:GG T TAT TCC TCC CAT CAG C T;下游引物:CAG TGT CCG GA T TAA TCT CC。
1.3 肝内胆管癌组织和正常胆管上皮组织的分离切割 按照LCM步骤对肝内胆管癌及正常胆管上皮组织的新鲜冰冻标本切片进行切割。
1.4 DNA的抽提与纯化、MSP检测CDH1基因甲基化 应用DNA purification Sy stem纯化、抽提DNA;DNA Clean-up Sy stem进行DNA亚硫酸氢盐修饰。
PCR产物扩增设置:95℃5min变性。
95℃30s,58℃30s,72℃45s,共33个循环。
72℃4min终止反应。
2%琼脂糖凝胶电泳2h。
溴化乙啶染色,UV灯观察。