反相高效液相色谱法测定沙棘油中维生素E的含量
反相高效液相色谱法测定食用植物油中维生素E的含量
反相高效液相色谱法测定食用植物油中维生素E的含量摘要:，高效液相色谱法、δ-生育酚、γ-生育酚、α-生育酚关键词:维生素E 第一章绪论1 选题的目的和意义维生素E是具有α-生育酚生物活性的生育酚和三烯生育酚及其衍生物的总称。
它们都是苯并二氢吡喃的衍生物。
2 高效液相色谱法简介3 国内外研究进展4 主要研究内容第二章高效液相色谱法色谱条件的优化引言由于维生素E结构复杂，异构体种类多，分析测定相对困难，现已知的分析方法有气相色谱法、紫外分光光度计法、电化学分析法、比色法、荧光法、。
前面几种方法大都需要较复杂的样品前处理过程，增加了试高效液相色谱法等验难度，而且测定的结果受到多种因素的影响。
高效液相色谱法是近年来发展起来的一种分析技术，用来分析维生素E能简化样品处理的步骤，相较其他方法具有色谱柱温度条件相对温和，物质组分分离速度快，灵敏度高，重复性好，干扰小等优点，明显优于其他几种检测方法，成为实际检验工作中测定VE最普遍的方法。
高效液相色谱法又分为正相色谱法及反相色谱法。
正相色谱法的流动相大多为有毒有害的且易挥发的有机溶剂，故一般采用反相色谱柱进行分析。
反相键合相色谱是在ODS(C)柱上，采用甲醇-水或者乙腈-水作流动相，分离非18极性或中等极性的化合物如同系物，稠环芳烃、药物、急速、天然产物及农药残[1]留量等。
色谱柱的稳定性比较高，保留时间短，重现性好，容易平衡等优点，而且一般以水和甲醇作为流动相，减少了有毒有害溶剂的使用。
在高效液相色谱中，影响分离效果的好坏的其中一个重要指标是色谱填料的选择，反相色谱用的填料通常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动性极性较强，通常为水、缓冲溶液与甲醇、乙腈等的混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分最先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料由:C (ODS),C(MOS),C(Butyl)、CH188465(Phenyl)等。
沙棘油理化参数及维生素E含量的测定
沙棘油理化参数及维生素E含量的测定高博闻【摘要】目的采用反相高效液相色谱法测定沙棘油的理化参数及维生素E的含量.方法:C18-BDS柱为色谱柱、甲醇-水(98:2)为流动相,流速为1.5 mL/min,检测波长:280 nm.结果:线性范围0.1-0.5μg(R2=0.999)平均回收率为99.04％,RSD为1.84％(n=9).结论:本法操作简便,准确可靠,可作为沙棘油质量控制的方法.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2018(000)004【总页数】4页(P35-38)【关键词】沙棘油;维生素E;反相高效液相色谱法;含量测定【作者】高博闻【作者单位】内蒙古科技大学包头医学院·内蒙古包头·014040【正文语种】中文胡颓子科植物沙棘Hip-pophae rhamnoides L别名醋柳、黑刺、酸刺，是一种药食同源的民族药用植物。
传统医学中，沙棘主要有滋阴升阳、利肺化瘀、止咳祛痰、消失化带、活血化瘀等等功能。
沙棘油是以沙棘的成熟干燥种子或果实为原料，通过浸取或压榨等方法制成的植物油。
现代医学研究证明，沙棘油中除含有不饱和脂肪酸等成分外，尚含有丰富的维生素E等40余种生物活性成分，具有广泛的药学应用前景[1~2]。
VE是沙棘油中天然抗氧化剂，可以防止油的酸败，延长其货架期。
含量越高，油越稳定。
作为沙棘油中的重要功效成分，可以治疗多种疾病，并有预防动脉硬化，延缓衰老，提高机体免疫力等作用[3]。
因此，VE含量的测定可用于评价沙棘油的质量。
1 实验仪器与试药仪器：分光光度计；阿贝氏折光仪；L-2000高效液相色谱仪；BIO–TEK520高压泵；BIO–TEK520紫外检测器；HL-01溶剂过滤器；真空泵；HS3120超声清洗仪；SVC-3000高精度全自动稳压电源；Anastar色谱工作站；兼容计算机；C18-BDS色谱柱；RHEODYNE77251进样阀。
试药：维生素E（中国药品生物制品检定所）；正己烷、甲醇、乙醚为分析纯。
反相高效液相色谱法测定食用植物油中维生素E的含量
无水乙醇: 检查是否含有醛类物质，方法: 加一定量的氨水于硝酸银溶液(50g/L) 中，直至生成的沉淀重新溶解，再加入几滴氢氧化钠溶液(100g/L) ，如再产生沉淀，则再加入氨水直至沉淀消失，此溶液则为银氨溶液。
吸取2ml 银氨溶液于干净试管中，加入0.5ml 乙醇，摇匀，再加入几滴氢氧化钠溶液(100g/L) ，于沸水浴上加热，放置冷却后，试管壁出现少量片状银镜，则乙醇需经过处理后使用。
脱醛方法：称取4g硝酸银溶解于少量水中，称取8g氢氧化钠溶于温热的乙醇中，然后将两者倒入1L的乙醇中，充分震摇后，放置暗处2d(期间不时摇动)，过滤后，于水浴中蒸馏，弃去初滤液，收集滤液，然后再检查。
1.1.3 仪器与设备Waters高效液相色谱仪e2695配2489紫外检测器美国沃特斯有限公司色谱柱 C 柱(150mm< 4.6mm 5um) 181.2 试验方法1.2.1 标准溶液的配制天然维生素 E 同系物通常为透明、淡黄色粘稠油状物，无臭无味，比重为0.950(25?) ，不溶于水，可溶于油、丙酮、乙醇、三氯甲烷和乙醚等脂溶[8] 性溶剂。
因为乙醇要进行脱醛处理，故选择甲醇配制标准溶液。
将100m①-生育酚、100m a -生育酚、25mgr -生育酚用甲醇分别定容至100ml、100ml、50ml棕色容量瓶中，将其作为1mg/ml、1mg/ml、0.5mg/ml 的储备液，放置冰箱保存;移取一定体积的三种生育酚储备液，配制成1mg/ml、10mg/ml，40ug/ml，60mg/ml，100mg/ml, 140mg/ml的浓度梯度的混合标准溶液。
1.2.2 单因素试验1.2.2(1 波长的确定试验以色谱条件为流动相：甲醇+水(V+V)=98+2,柱温:30?，流速:1.0ml/min ，，在紫外检测波长为280nm 290nm 292nm 294nm 300nm条件下进样量10uL做单因素试验。
高效液相色谱法测定油脂类保健食品中的维生素E
高效液相色谱法测定油脂类保健食品中的维生素 E
□ 王皛蕾 宁夏大学 刘敦华 宁夏食品检Байду номын сангаас中心
DOI:10.16043/ki.cfs.2016.27.096 维生素 Ｅ 为脂溶性维生素，其水 解产物为生育酚，是体内有效的抗氧 化剂，其中以 α－ 生育酚的生物效应 最高，具有促进生育、抗衰老的作用， 参与细胞 ＤＮＡ 合成的调节，可提高免 疫力和对抵抗力。维生素 Ｅ 缺乏可引 起生殖障碍，肌肉、肝脏、骨髓和脑 功能异常，红细胞溶血和胚胎发生缺 陷等。但维生素 Ｅ 在人体内不能合成， 需由食物摄人。 近年来，随着生活水平的提高，人 们保健意识不断加强，目前已有 ８ 种 具有维生素 Ｅ 活性的化合物从生物资 源中分离出来， 分别为 Ｄ－α－、 Ｄ－β－、 Ｄ－γ－ 及 δ－ 生育酚和 Ｄ－α－、 Ｄ－β－、 Ｄ－γ－ 及 δ－ 生育三烯酚。食品添加 剂天然维生素 Ｅ 的 α－ 生育酚在食品 工业中可用作营养强化剂、抗氧化剂； 混合生育酚用作抗氧化剂，因此，在 油类保健食品中一般添加混合生育酚 作抗氧化剂。反相高效液相色谱法， 综合精密度、回收率、分析时间和实 验安全性等方面考虑，本实验优化国 家标准的前处理方法，建立了反相高 效液相色谱法检测油类保健食品中的 Ｄ－α－ 生育酚，为该类保健食品制定 质量标准提供参考依据。 ℃中储存备用。 ２ 标准储备液浓度校正 精 确 移 取 Ｄ－α－ 生 育 酚 储 备 液 １５０ μＬ 注入 ３．０ ｍＬ 无水乙醇的比色 皿中，以无水乙醇为空白，入射波长 为 ２９４ ｎｍ 测定其吸光度。校正公式： Ｃ０＝Ａ／Ｅ×１００×３／Ｖ×１０－３，其中，Ｃ０ 是 维生素浓度，单位为 ｇ／ ｍＬ；Ａ 是维生 素的平均紫外吸光度；Ｅ 是某维生素 １％ 的比吸光系数；Ｖ 是加入标液的量，单 位为 μＬ。 本 实 验 中，Ｄ－α－ 生 育 酚 比 吸 光 系数为 ７１，经分光光度计校正 Ｄ－α－ 生育酚储备液浓度为 ９８７．７ μｇ／ｍＬ。 ３ 标准工作溶液配制 分别取 Ｄ－α－ 生育酚标准储备溶 液 ０．５、０．７５、１．０、１．５ ｍＬ 和 ２．０ ｍＬ 于 １０．０ ｍＬ 容 量 瓶（Ａ 级）， 加 无 水 乙醇定容到刻度，分别配制成 ４９．３９、 ７４．０８、９８．７７、１４８．１６ μｇ／ｍＬ 和 １９７．５４μｇ／ｍＬ 的标准液。 样品前处理 称取约 １．０ ｇ 样品于 ２５０ ｍＬ 三角 瓶中，称取 ０．５ ｇ 抗坏血酸于 ５０ ｍＬ 棕 色 容 量 瓶 中， 依 次 加 入 ５ ｍＬ 水，３０ ｍＬ 无水乙醇使其完全溶解，将溶解后 的抗坏血酸全部加入试样中混匀，再 加入 １０ ｍＬ 氢氧化钾溶液混匀，充入 材料与方法 氮气排除空气，盖上胶塞。放在恒温 仪器与试剂 磁力搅拌器上， 水温控制在 （５３±２） ℃， 实验仪器：安捷伦高效液相色谱 皂化 ４５ ｍｉｎ 后，取出冷却至室温。将 仪配 ＤＡＤ，分析天平。 材料：枸杞油胶丸， 试剂与对照品， 皂化液全部转入 ５００ ｍＬ 分液漏斗中， 加入 １００ ｍＬ 分析纯石油醚， 来回振摇， 无水乙醇色谱纯，抗坏血酸分析纯， 排气，室温下均匀震荡 １０ ｍｉｎ 后静置 氢氧化钾分析纯，石油醚分析纯，纯 分层，将水相转移另一分液漏斗中按 化水，Ｄ－α－ 生育酚（纯度 ９９％）。 上述方法进行重复提取。 合并有机相， 仪器条件 色 谱 柱：ＸＤＢ Ｃ１８，４．６ ｍｍ×２５０ 用清水洗至中性。有机相通过无水硫 ｍｍ，５ μｍ；流速：１．７ ｍＬ／ｍｉｎ；柱温： 酸钠过滤脱水，滤液于旋转蒸发器上 ２０ ℃； 进 样 量：２０ μＬ； 波 长：３００ 在 ４０ ℃的充氮条件下蒸发近干（不能 完全蒸干），在 ４０ ℃下氮吹仪上吹干。 ｎｍ；流动相：Ａ 为甲醇，Ｂ 为水；等度 用 ５０ ｍＬ 无水乙醇溶解定容，过有机 洗脱比例为（９８＋２）。 膜 ０．４５ μｍ，上机测定。 标准溶液的制备过程 １ 标准储备液的配制 结果与讨论 精确称取 Ｄ－α－ 生育酚标准品 ０．０５ 样品前处理方法的优化 ｇ 置于 ５０．０ ｍＬ 棕色容量瓶，用无水乙 国家标准方法采用苯并 ［ｅ］ 芘为内 醇定容， 浓度 １．０ ｍｇ／ｍＬ， 储备液于 －２０ 标，氢氧化钾溶液皂化，乙醚提取， 无水乙醇为溶剂， 测定样品的维生素 Ｅ。 但苯并 ［ｅ］ 芘接触毒性极大， 强致癌物， 因此为了实验人员的身体健康将乙醚 试剂换为石油醚，内标法定量换为外 标法定量，以国家标准方法为准并进 行了优化改进，适用于保健食品中维 生素 Ｅ 的分析。 色谱条件的选择 １ 色谱柱的选择 本实验选择了 ２５０ ｍｍ 的 Ｃ１８ 柱分 离 Ｄ－α－ 生 育 酚， 实 验 表 明 ３００ ｍｍ 的长柱有良好的分离效果，能很好地 分离 Ｄ－α－ 生育酚和杂质峰。 ２ 流动相 本方法采用甲醇、水等度洗脱， 让目标物得到有效地分离。 方法的线性范围确认 在实验条件下，对标准工作溶液 进行测定，结果表明，Ｄ－α－ 生育酚 在 ４９．３９ ～ １９７．５４ μｇ／ｍＬ 内有良好的 线性关系，ｒ ＞ ０．９９９ ７。 方法的回收率 称 取 １０ 份 样 品 ， 分 别 添 加 ３．００ ｍＬ 浓 度 为 ９８７．７ μｇ／ｍＬ 标 准 储 备 液 进 行 加 标 回 收 实 验。 本 方 法 回 收 率 ９５．８％ ～ １０１．１％，ＲＳＤ 为 ２．５３％， 说 明 该方法准确度和精密度可满足 Ｄ－α－ 生育酚的检测要求。 方法检出限 以标准溶液的色谱响应值计算， 检出限为 ９１．８ ｎｇ，色谱峰的信噪比为 ＳＮ＝５．１ ＞ ３，能满足样品的测定需求。 不确定度评定 用液相色谱法测定保健食品中 Ｄ－α－ 生 育 酚 的 含 量， 测 定 两 份 样 品 取 其 平 均 值 报 告 结 果， 其 结 果 和 扩 展 不 确 定 度 为（２７０．８６±７．５８） ｍｇ／１００ｇ，包含因子 ｋ＝２，相对扩展不 确定度为 ２．８％。
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量(2015)
高效液相色谱法测定VE胶囊中α-VE的含量一、目的要求1．了解高效液相色谱仪的基本构造和工作原理。
2．掌握高效液相色谱仪的正确操作方法。
3．学习维生素E的定量分析方法。
二、实验原理色谱法的分离原理是：溶于流动相中的各组分经过固定相时，由于与固定相发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和）的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号被检测。
高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography，HPLC)。
按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。
液液色谱法按固定相和流动相的极性不同可分为正相色谱法(NPC)和反相色谱法(RPC)。
RPC一般用非极性固定相（如C18、C8），在现代液相色谱中应用最为广泛，约占整个HPLC应用的80%左右。
维生素E又称生育酚，目前已经确认的有8种异构体，αβγδ生育酚和αβγδ生育三烯酚，天然存在的α-生育酚的维生素E活性最强。
α-生育酚醋酸酯是α-生育酚的酯化产品，常用在维生素胶囊中，具有很强的氧化稳定性。
样品以乙醇溶解，采用RPC法，以乙醇为流动相，C18色谱柱分离，紫外检测器284 nm 波长检测，外标法定量，测定维生素E胶囊中α-生育酚醋酸酯的含量。
三、仪器和试剂维生素E醋酸酯标准品、色谱纯乙醇、分析纯四氢呋喃、无水乙醇。
HPLC高效液相色谱仪（日本岛津，LC-10A 泵，SPD-20A 紫外双波长检测器）、KQ5002B型超声波清洗器、、紫外可见分光光度计。
四、实验条件色谱柱为Eclipse XDB-C18柱( 150 mm × 4. 6 mm，5 μm i. d. ) ; 流动相为乙醇，流速0.5 mL /min; 进样量20 μL; UV 检测器，检测波长为284 nm(通过紫外分光光度计扫描确定)。
反相高效液相色谱法测定维生素E胶丸的含量
反相高效液相色谱法测定维生素E胶丸的含量
周美云;王早斌
【期刊名称】《中国药业》
【年(卷),期】2008(17)11
【摘要】目的建立维生素 E胶丸中维生素 E含量测定方法.方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以甲醇-四氢呋喃(85:15)为流动相,检测波长为285 nm.结果维生素 E质量浓度在5.01～45.09 mg/mL范围与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为 99.86 %,RSD=0.28%(n=9).结论 RP-HPLC法具有准确、可靠、灵敏的特点,可用于维生素 E的质量控制.
【总页数】1页(P33)
【作者】周美云;王早斌
【作者单位】江苏省宿迁市药品检验所,江苏,宿迁,223800;江苏省宿迁市药品检验所,江苏,宿迁,223800
【正文语种】中文
【中图分类】R927.2;R977.2+5
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1.阳离子表面活性剂增敏碳糊电极电化学测定维生素E胶丸中维生素E的含量 [J], 顾玲;王军;庄凰龙
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5.旋光法测定维生素E胶丸中维生素E含量 [J], 张新芹
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沙棘籽油中VE含量测定方法
（ 西省林业科学研究 院 ， 山 山西 太原 ０ ０１） ３ ０ ２
摘 要 ：用 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 沙 棘 籽 油 中 Ｖ 含 量 ， 对 方 法 进 行 了 考 查 。 波 长 ２ ２ｎ 处 ， 进 样 浓 度 在 并 ９ ｍ Ｖ
０ ３ｍｇ ｍＬ￣ １ ０ｍｇ ｍＬ 范 围 内， 现 良好 线 性 ， 关 系 数ｒ Ｏ ９ ９９ 回 收 率 ９ ． ７ ， 对偏 差 ２ ２ ， 明检 ． ／ ． ／ 呈 相 — ． ９ ， ７４ 相 －２ 表 测方法准确 ， 果可靠。 结 关 键 词 ：沙 棘 籽 油 ； 含 量 ；测 定 方 法 Ｖ 中 图 分 类 号 ： ７３ ６ ￥ ９ ． 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ７７ ６ ２０ ）４０ １ －２ １ ０ — ２ Ｘ（ ０ ７ ０ — ０ ５ ０
Ｔｈｅ Ｍ ａ ｉ ｇ ｏ ｔ ｒ ｉ ｔｏ ｅ ｈ ｄ ｏ ｋ ｎ ｆ Ｄｅ ｅ ｍ ｎａ ｉ ｎ Ｍ ｔ ｏ ｆ ＶＥ
Ｃｏ ｅ ｎ Ｓ ａ ｃ ｈ ｒ ｅ ｄ ０ｉ ｎｔ ｎｔ ｉ ｅ ｂｕ ｋｔ ０ ｎ Ｓ ｅ ｌ
ＺＨ ＡＮＧ ｕ— ａ Ｓ ｈｕ
沙棘 种子 油 中的 Ｖ 含 量 最 为 丰 富 。Ｖ 是 一 种
率 达到 良好 。
较 强 的生物 活 性 物 质 ， 有 增 强 皮肤 毛细 血 管 新 陈 具 代谢 和延 缓衰 老 的功能 。 对沙 棘籽 油 的稳定 性具 Ｖ 有重 要作用 。沙棘 中 Ｖ 与 ｐ胡萝 卜素组合 在 一起 ， 一 具有 很强 的 防癌 、 癌作 用 ， 抗 它可 以阻 断亚 硝酸 盐在 人体 合成致 癌物 质亚 硝胺 。Ｖ 含量 的准 确 测定 ， 对 于沙棘 籽油 提取 工艺 的确 立具 有 重要 的意 义 。 沙棘 籽 油 可 按 ＨＢ ＱＳ ０ ２ ９ ／ ０ — ４要 求 测 定 ， 过 通 测 定ａ 生育 酚含量 计算 出Ｖ 含量 。 一 本方 法采 用 的高 效 液 相色 谱 型号 、 色谱 柱 条 件 、 准样 品 、 标 流动 相 与 ＨＢ ＱＳ ０ ２ ９ ／ ０ —４不 同 ， 测 量 方法 进行 了考 查 ， 查 对 考 项 目有线 性 、 精密 度 、 定性 、 复性 及 回收 率 。 稳 重 为此 我们 制定 了Ｖ 含量 测定 方法 。
高效液相色谱法同时测定食用油中维生素A和维生素E的方法
高效液相色谱法同时测定食用油中维生素A和维生素E的方法杜杰;林春兰;郑绣蒨;刘昌树【期刊名称】《中国粮油学报》【年(卷),期】2022(37)10【摘要】本文建立了高效液相色谱法同时测定食用油中维生素A和4种维生素E 的方法。
利用维生素A醋酸酯和维生素E分别在325 nm和294 nm的波长下的吸收特性。
以液相色谱紫外检测器双波长的方式,考察研究处理方式并开发同时检测食用油中维生素A和维生素E的方法。
通过该方法结果表明:维生素A的精密度RSD为0.84%~1.39%,回收率范围在95.8%~104.4%;维生素E各组分精密度RSD为2.01%~4.14%,回收率范围在96.2%~112%。
本方法也可应用于测定不同食用油中维生素A和维生素E且有效可靠。
测得葵花籽油维生素A含量(735.58±3.86)μg/100 g,维生素E的含量为(54.33±2.92)mg/100 g;玉米油维生素A含量(676.75±2.15)μg/100 g,维生素E的含量为(24.78±1.36)mg/100 g。
通过方法验证,确认液相色谱同时检测维生素A和维生素E的方法用于食用油中有效可靠。
【总页数】6页(P258-263)【作者】杜杰;林春兰;郑绣蒨;刘昌树【作者单位】佳格投资(中国)有限公司【正文语种】中文【中图分类】TS227【相关文献】1.高效液相色谱法同时测定牙膏中的维生素B2、维生素B3和维生素B62.正相高效液相色谱法同时测定奶粉中维生素A醋酸酯、维生素A棕榈酸酯、维生素E醋酸酯及α-生育酚3.高效液相色谱法测定化妆品中维生素A,维生素A醋酸酯,维生素A棕榈酸酯4.高效液相色谱法测定鱼样中的维生素A、维生素D3和维生素E5.高效液相色谱法测定食品中维生素K1和维生素K2的含量因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效液相色谱法测定各种植物油中维生素E含量
高效液相色谱法测定各种植物油中维生素E含量
王瑞英;汤静;张丽静;王强
【期刊名称】《新疆大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2003(020)004
【摘要】利用高效液相色谱法(HPLC)测定植物油中的维生素E(VE)含量.以甲醇:水=98:2为流动相,流速为0.8mL/min.用荧光检测仪在λexc=295nm,λem=325nm 处检测,VE浓度在12.10～96.80 ng/μL范围内线性关系良好(r=0.9998,n=3),此方法操简便,分离效果满意,重现性好.
【总页数】3页(P393-395)
【作者】王瑞英;汤静;张丽静;王强
【作者单位】新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046;新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046;新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046;新疆大学,理化测试中心,新疆,乌鲁术齐,830046
【正文语种】中文
【中图分类】O652.63
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实验报告-高效液相色谱法测定VE含量
实验四高效液相色谱法测定V E含量1 实验目的1.1了解高效液相色谱仪的基本操作；1.2了解高效液相色谱仪测定V E的原理。
2 实验原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。
储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附—解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
V E（维生素E）又名生育酚或产妊酚，在食油、水果、蔬菜及粮食中均存在。
有抗氧化作用，能增强皮肤毛细血管抵抗力，并维持正常通透性；有改善血液循环及调整生育功能、抗衰老作用等。
V E通过高效液相色谱柱进行分离，PDA检测器检测，外标法定量。
3实验器材3.1 实验样品V E样品溶液3.2 实验试剂浓度为50µg/ml的V E标样3.3 实验仪器高效液相色谱仪附PDA检测器4 色谱条件色谱柱：C18柱；流动相速度：0.3ml/min；进样量：5µl；柱温：30℃。
5 实验结果与讨论5.1实验结果本次实验采用的是单点法测定。
实验结果见表1。
表1. 液相色谱仪测定苹果的VE含量样品中VE的浓度=乙烯标样的总量×苹果的峰面积/乙烯标样的峰面积=5µl×50μg/mL×17369/（5µl×42217）=20.57μg/mL5.2实验讨论本次实验中，测定标样溶液V E含量时，在指定的保留时间内并未出峰。
讨论分析原因：样品溶液在上周实验后，一直置于离心管中，未避光低温保存，导致样品中V E氧化，液相测定时没有在相应的时间出峰。
本次实验时间较短，且主要目的是了解高效液相色谱仪的基本操作，以及液相色谱仪测定V E的原理，故结合前组同学对V E含量的测定数据进行讨论与分析。
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中αVE的含量
高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量一、实验目的本实验旨在采用高效液相色谱法（HPLC）测定维生素E胶囊中α-生育酚（α-VE）的含量，为药品质量控制提供依据。
二、实验原理高效液相色谱法是一种分离和分析技术，利用色谱柱将样品中的各组分进行分离，然后通过检测器对分离后的组分进行检测和定量。
本实验采用C18色谱柱，以甲醇-水为流动相，荧光检测器检测维生素E。
维生素E在流动相中的分配系数不同，因此各组分在色谱柱上的保留时间也不同，从而实现分离。
三、实验步骤1.试剂与仪器准备：甲醇（色谱纯）、维生素E标准品、维生素E胶囊样品、C18色谱柱、荧光检测器、高效液相色谱仪。
2.标准溶液制备：精确称取适量维生素E标准品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的标准溶液。
3.样品溶液制备：取适量维生素E胶囊样品，破碎后混合均匀，精确称取适量样品，用甲醇溶解并定容至刻度，制成一定浓度的样品溶液。
4.色谱条件：色谱柱为C18柱，流动相为甲醇-水（90:10，v/v），流速为1.0mL/min，荧光检测器激发波长为295nm，发射波长为330nm。
柱温为室温。
5.标准曲线绘制：分别精密吸取不同浓度的标准溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
6.样品测定：精密吸取样品溶液，按上述色谱条件进样测定，记录峰面积。
根据标准曲线计算样品中α-VE的含量。
7.数据处理与分析：将实验数据录入表格，进行数据处理与分析，得出实验结果。
四、实验结果与讨论1.实验结果：通过高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，得到如下数据：标准曲线方程：y = ax + b相关系数：r样品中α-VE的含量：X μg/粒回收率：Y%相对标准偏差（RSD）：Z%2.实验讨论：本实验采用高效液相色谱法测定维生素E胶囊中α-VE的含量，方法简便、准确、重现性好。
高效液相色谱法分析(维生素E)原始记录1
结果
（mg/100g）
平均值
（mg/100g）
相对偏差
（%）
备注
试验允差要求：≤10%
仪器使用情况使用前：使用后：检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（维生素E）原始记录
受理号：第1页，共页
检测项目
维生素E
检测开始时间
年月日
检测依据
GB 5009.82-2016第一法
检测结束时间
年月日
检测方法
高效液相色谱法
温度及相对湿度
℃％
仪器名称及型号
Waters2695高效液相色谱仪
仪器编号
××/××-
FA2004电子天平
××/××-074
f--换算因子（维生素E：f—0.001）
100--试样中量以每100克计算的换算系数。
计算结果保留三位有效数字。
质控（自控）
情况
样品总数
平行样个数
质控样个数
仪器使用情况使用前：使用后：
检验人：复核人：审核人：
高效液相色谱法分析（ 维生素E）原始记录第页，共页
样品编号
试样质量
(g)
定容体积
（ml）
样品浓度
样品处理情况
按照GB 5009.82-2016第一法对样品进行处理。
标准物质名称及浓度
维生素E标准溶液：1.0mg/mL
仪器
检测条件
检测器：荧光检测器
色谱柱：C18反相柱
激发波长
294nm
发射波长
328nm
柱温：20.0℃
流速：0.8mL/min
进样量：μL
流动相：甲醇+水梯度洗脱
标准曲线
沙棘有效成分研究进展
倍，柑桔的６倍，苹果的２００倍，西红柿的８０倍。 由于沙棘果中不含抗坏血酸氧化酶成分，因此维 生素Ｃ非常稳定。 维生素Ａ在沙棘中的含量极其丰富１８ Ｊ。据 报道沙棘果实中胡萝卜素类含量为１００ ｍｓ／ｋｇ，高 于黑穗醋栗、苹果。国内采用高效液相色谱法测 出每１００ ｇ沙棘种子油含ｐ．胡萝卜素４８４．５ ｍｇ，果
１００
１６３
素，它是天然抗氧化剂，价格昂贵。沙棘籽被认为 是很好的原花青素的来源，它的提取物含有更多 的二聚体、三聚体，而二聚体和三聚体较单体和多 聚体具有更强的抗氧化性。沙棘叶中黄酮类化合 物含量比果实中高１１２．５５％。 高锦明等ｕ５ Ｊ对沙棘果实中的黄酮成分进行 了研究，分离得到了黄酮醇糖苷类物质。王军宪 等［１６］通过试验测得沙棘果泥中黄酮含量较高，其 次为叶、果渣。刘朵花等１１７Ｊ利用色谱仪测得沙棘 的根、茎、叶、花和果实中均含有黄酮类化合物。 刘朵花等人用高效液相色谱测定发现沙棘种子中 含有１６种儿茶酸类１１８ Ｊ。沙棘果实和叶中已经鉴 定的黄酮类成分有槲皮素、异鼠李素、山奈酚、芹 菜素及其苷类等【１９－２０］。 黄酮类有抗脑缺血、抗心肌缺血、抗心律失 常、抗自由基、镇痛、保肝护肝、抑制溃疡发生、抗 病毒抗肿瘤、降血压、降血脂、抑制血小板凝集等 多种药理作用［２１ Ｊ。 沙棘总黄酮（ＴＦＨ）在医药领域中应用广 泛１２２Ｊ。沙棘黄酮类中自花青素的抗肿瘤作用最 强。有人在研究沙棘总黄酮对活性氧自由基的作 用时发现，沙棘总黄酮显著抑制十四酰佛波乙酸 酯（ＰＭＡ）刺激人多形核白细胞产生的化学发光， 对ＰＭＡ刺激人多形核细胞产生呼吸爆发时捕获 的活性氧自由基有明显的清除作用，对嘌呤氧化 酶体系产生的超氧自由基也有明显的清除作 用…。 １．３三萜、甾体类化合物 沙棘叶和果中可分离出熊果酸、齐墩果酸、谷 甾醇、豆甾醇、洋地黄苷、香树精等化合物，这些化 合物主要存在于沙棘油不皂化物中＂．８Ｊ。李玉珑 等［２３］对沙棘种子油不皂化物进行了分离和分析， 将不皂化物分为甾醇、４一甲基甾醇、三萜醇和烃 类。据研究，熊果酸在沙棘不同部位含量不同，其 中根皮为０．１７％一０．２２％，叶为０．２９％～０．３０％， 果实为１．３４％～１．６０％，种子为０．４７％一０．６８％， 而且含量与采摘时间有关Ｈ Ｊ。熊果酸还有抗艾滋 病、抗糖尿病、抗对精子的毒性作用和抗疟、抗肿 瘤（抗突变、抗促癌、抗氧化、抗细胞毒、抗癌细胞 分化、抗细胞凋亡）作用旧Ｊ。有人用沙棘籽油对 大鼠胃溃疡模型进行治疗，发现其有良好的促进 胃溃疡愈合作用，对籽油进一步提取与分离，发现 ｐ．谷甾醇．口．Ｄ葡萄糖苷是沙棘油中抗胃溃疡的有
维生素E含量的高效液相色谱检测方法[发明专利]
![维生素E含量的高效液相色谱检测方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/05dd5f24876fb84ae45c3b3567ec102de2bddf8d.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910604125.8(22)申请日 2019.07.05(71)申请人 浙江艾兰得生物科技有限公司地址 314400 浙江省嘉兴市海宁市长安镇城南路399号(72)发明人 于西华 张燕 吕磊 包亚君 薛春霞 刘刚 (74)专利代理机构 杭州永航联科专利代理有限公司 33304代理人 侯兰玉(51)Int.Cl.G01N 30/02(2006.01)(54)发明名称维生素E含量的高效液相色谱检测方法(57)摘要本发明涉及一种检测方法，特别涉及一种维生素E含量的高效液相色谱检测方法，属于分析化学技术领域。
本发明通过运用高效液相色谱法(HPLC)测定维生素E含量的方法，通过对样品处理过程以及色谱条件的选择，最终达到简便而准确地对单一组分以及复杂组分样品中维生素E含量的测定。
本发明方法能够代替传统的GC法来测定VE含量，而且简便、快速、准确。
权利要求书1页 说明书5页 附图2页CN 110220995 A 2019.09.10C N 110220995A1.一种维生素E含量的高效液相色谱检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：（1）对照品溶液的配制：标准品溶液：分别精密称取100.0mg维生素E对照品于100mL容量瓶中，加50mL四氢呋喃/甲醇混合液，超声使之溶解，再用四氢呋喃/甲醇混合液稀释至刻度，平行制备两份；（2）样品处理：样品用溶剂配制成样品溶液，样品溶液在超声水浴机中进行超声分散处理，温度为60±2℃，时间为25±2分钟，再用溶剂稀释成与标准品浓度相当的溶液；（3）液相色谱检测：分别吸取标准品溶液、样品溶液注入高效液相色谱系统中进行检测，液相色谱检测的条件是：①色谱柱：C 18柱,250×4.0mm，5μm；②流速：2.0mL/min，③检测波长：280nm；④进样量：20μL；⑤柱温：30℃。
药用沙棘籽油质量标准研究
药用沙棘籽油质量标准研究赵荣;李闻涛;董彬厂;陈萍【摘要】目的：研究药用沙棘籽油的质量标准控制方法。
方法（1）采用系列薄层色谱法（TLC）对药用沙棘籽油进行鉴别。
（2）采用 HPLC 法测定药用沙棘籽油中的维生素 E。
色谱柱：Kromasil-C18（250 mm ×4．6 mm，5μm）；流动相：甲醇-乙腈（78∶22）；柱温：30℃；检测波长：280 nm；流速：1．0 mL·min －1。
结果（1）采用系列 TLC 法对药用沙棘籽油进行鉴别具有较好的专属性。
（2）维生素 E 在0．1972～1．972 mg·L －1的范围内线性关系良好（r ＝0．9997），平均回收率为99．6％（RSD ＝0．92％，n ＝6）。
结论所建立的标准科学合理，可用于药用沙棘籽油的质量控制。
%Objective To establish the quality standard for Seeds Oil of Hippophae rhamnaides L.Methods The Seeds Oil of Hippo-phae rhamnaides L.was identified by a series of TLC methods.HPLC was adopted to determine the content of Vitamin E in the seeds oil of Hippophae rhamnaides L.Kromasil-C18 column(250 mm ×4.6 mm,5 μm)was used with methanol-acetonitrile(78∶22)as the mo-bile phase.The column temperature was set at 30 ℃ with a detection wavelength of 280 nm and a flow rate at 1.0 mL·min -1 .Results A series of TLC methods for the identification of the seeds oil of Hippophae rhamnaides L.showed good specificity.For Vitamin E,there was a good linear relationship within the range of 0.197 2 ~1.972 mg·L -1 (r =0.999 5).The average recovery was 99.6%(RSD =0.92%,n =6).Conclusions The standard can be use for the quality control of Seeds Oil of Hippophae rhamnaides L.【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2016(020)008【总页数】4页(P1479-1482)【关键词】沙棘/标准;色谱法,薄层;维生素E【作者】赵荣;李闻涛;董彬厂;陈萍【作者单位】陕西海天制药有限公司，陕西咸阳 712000;陕西省医疗器械检测中心，陕西西安 710075;陕西海天制药有限公司，陕西咸阳 712000;陕西省中医研究院，陕西西安 710045【正文语种】中文沙棘具有悠久的药用历史，古代中国藏医、蒙医都将沙棘列为重要的药用植物。
沙棘油中脂溶性维生素E的测定及精制中含量的变化
沙棘油中脂溶性维生素E的测定及精制中含量的变化
姜紫荣
【期刊名称】《林产化学与工业》
【年(卷),期】1991(11)3
【摘要】本文采用气相色谱法对我国山西、新疆、陕西、辽宁等地沙棘果油中的维生素E(V_E,下同)进行了定量分析。
样品经前处理(皂化、提取、浓缩),得不皂化物;再经气相色谱分离测定、外标法定量。
同时对样品的回收率,测量的精密度以及沙棘油精制过程中V_E含量的变化也分别作了分析测定,均得到良好的结果。
【总页数】6页(P241-246)
【作者】姜紫荣
【作者单位】无
【正文语种】中文
【中图分类】TQ645.1
【相关文献】
1.反相高效液相色谱法测定沙棘油中维生素E的含量 [J], 吴虹;吴健
2.高效液相色谱法测定沙棘油乳剂精华素中维生素E的含量 [J], 杨官娥;张忠鹏;张素花;师春平
3.HPLC法测定脂溶性维生素注射液中维生素D2及维生素E的含量 [J], 陈光
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高效液相色谱法测定维生素E乳中维生素E的含量
高效液相色谱法测定维生素E乳中维生素E的含量目的建立测定维生素E乳中维生素E含量测定的方法。
方法采用SHISEIDO CAPCELL PAK MGⅡC18色谱柱，以甲醇为流动相；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm。
结果维生素E在浓度在0.133～0.931 mg/ml内与峰面积具有良好的线性关系，平均回收率为100.5%，RSD = 1.0%。
结论本方法测定维生素E乳中维生素E含量简便、快速、准确。
标签：维生素E乳；高效液相色谱法；含量测定市售的维生素E乳由维生素E和其他基质组成，具有治疗皮肤干燥及因季节变化所引起的皮肤瘙痒的作用。
原标准中维生素E的含量测定分别采用紫外分光光度法和气相色谱的方法。
为了更有效地控制该药品的质量，本研究采用了反相高效液相色谱法测定维生素E乳中維生素E的含量，方法准确、简便。
1 仪器与试药1.1 仪器岛津高效液相色谱仪（SPD-10Avp检测器，岛津LC-10ATvp泵，LC-Solution 色谱数据工作站）；XS105型电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）。
1.2 试药维生素 E 标准品（中国药品生物制品检定所，批号：100062-201008），维生素E乳（北京吉康利通医药科技有限公司自制，批号：20110302，20110303，20110304）。
甲醇为色谱纯，水为纯化水，无水乙醇为分析纯。
2 方法与结果2.1 色谱条件与系统适用性试验色谱柱：SHISEIDO CAPCELL PAK MGⅡC18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱温：室温；流动相：甲醇；流速：1.0 ml/min；检测波长：285 nm；进样量：20.0 μl。
理论塔板数按维生素E峰计算应大于2400。
2.2 供试品溶液的制备精密量取本品5 ml（样品标示量为10 mg/ml），置100 ml量瓶中，加入无水乙醇至刻度，振摇使充分溶解后过0.45 μm有机滤膜滤过，作为供试品溶液。
实验六 维生素E的含量测定-液相色谱
实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。
2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。
二、原理1. 高效液相色谱的特点高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。
2. 高效液相色谱仪(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。
(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。
(3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。
(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。
3. 高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。
(2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。
(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。
(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。
(5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。
(6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。
4. 实验原理反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。
但目前多是采用化学反应的方法将非极性或弱极性的有机物分子键合到载体表面，制成键合相的固定相，所以也称键合相色谱。
这种色谱的分离机理比较复杂，一般认为是液—固吸附和液—液分配并存。
在反向HPLC中常用的键合相有十八烷基硅烷(Ｃ18）、辛基硅烷(Ｃ8)氰基硅烷、氨基硅烷等。
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１ 中国科学技术 大学 １系
旨在建立反相高教液相色谱法测定沙棘油中维生素
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沙 棘 （ ｐ ｏ ｈ ｅｒａ ｏｄｓＬ． 为 胡颓 子 科沙 Ｈｉｐ ｐ ａ ｈ ｍｎ ｉｅ ）
状液体 ， 临床 用于治疗 心 血管 系统 疾 病 、 伤 、 烧 营养 不 良、 皮溃 疡 、 表 胃及 十二 指 肠 溃疡 、 科 病 等 。 维 妇 生素 Ｅ是 沙 棘 油 中天 然 抗 氧 剂 ． 量 越 高 ， 越 稳 含 油 定， 作为 沙 棘 油 中 的 重 要 有 效 成分 ， 治 疗 多 种 疾 可 病， 并有 预 防动 脉硬 化 ， 延缓 衰 老 ． 高 机体 耐 力 等 提 作 用 。已有 文 献 报 道 沙 棘 油 中 有 效 成 分 的 鉴 定 分 析口 ． 】定性 分析含 有 ： 肪 酸 、 脂 Ｂ族 维 生 素 、 生 素 维 ｃ 维生 素 Ｅ、 胡萝 素、 、 类 多种 微量 元素等 。本研 究
ｂ ｄ ｒｅ ｐｙｎ ， ｌｓ ｔｉ ｎ ｇ ａ ｎ ／ ｔｒｃ ｍｐｅ ｈｄ ｅ ｍ ｔｉｇ ｐａｍａｍｏｉｎ ａ ｄｍｉｒ ｔ ｇｒｏｏ ｏ ｌｘ ｌ ｉ ｌ
ｉ ｎ ［ＪＡ ｔ Ｐ ｙｉ— ａｄ １９ ，３ （ ）５ ． ｎｍａ Ｊ ｃａ ｈ ｓ ｌｃｎ ． ９ ０ １９ １ ：５ ｏｓ ［］ ｅ ｎＭＪ ｃ ａ ｇ ｔ ｅｅｔｒ［ ］ ＳａｄＪＧ ｓ ４ Ｌ ｗｉ ．￣ｃ ｔ ｔ ｉ ｒｃｐｏｓ Ｊ ｎｏ ａｎ ｅａ ａ．
腭 （ｒ＝０ ９ ９８ ， ９ ） 平均 回收率 为９ ．７ ＲＳ 为１４ ％（ ＝５ 。 ９ １ ％， Ｄ ．８ ） 结论 ： 本法操作 简便 ， 准确 可 靠。 关 键词 ： 沙棘 油 ； 生素 Ｅ； 维 反相 高效液相 色谱 法； 量 测定 含
中囝 分 娄号 ： ２ ． 文 献标 识码 ： 文 章编 号 ：０ｏ一２ １（０２０ —０ ４ ０ Ｒ９７２ Ａ １０ ２９ ２０ １ ０７— ２ Ｊ
ｍｏ ｉ ｎ ｏ ａ ｔｉ ｅ ｔｉ ｇ ｉ Ｂ 曲 ｂ ｔ ｉｂ ｔ ａ ｔｏ ａ ｅ ｔｉ ｎ ｇ ｓ ｃ ｍｐ ｙ ｎ ｐ ］ ｒ ｎ ｗｉ ｄ ａ ｅ ｅｇ ａ ｐ ｒ 一 ｈ ｒ
［ Ｃ ｒｔｆ ｅ ＮＤ Ｍｏｉ Ｍ ］ Ｉ ： ｔＨ ｒ ｏ ｅ ２］ ｈｉｏｉ ｚ ｓ ｄ ｔｉ ］ ｎ［ ｎ Ｇｕ ｏｍ ｎｓ
棘属 植物 ，９７年 版 （ １７ 中华人 民共 和国 药典 ） 一 部 ） （ 已收载ｕＪ （ 中药 大 辞 典 ） 。 中记 载 沙 棘 果 的 药 性 是
“ 温． 性 味酸 涩 ， 入肝 、 大 肠 、 肠 经” 具 有 活血 胃、 小 而
化 瘀 、 脾 健 胃 、 津 止 咳 的功 效 ］ 从 沙 棘 籽 或 补 生 。 果 肉 中提 取分离 得到 抄棘 油 ， 它是 一种棕黄 澄 清油
吴 虹， 吴 健
２０ ３ ） ３０ ８ （ 安徽 中 医学 院药 学系 ， 安徽 合肥
摘要 ： 目的 ： 采用矗 相 高效液 相 色谱 法 测定沙 棘油 中维生 素 Ｅ的含 量。 法： ｜ Ｏ Ｓ柱 为 色谱 方 ｃ８ Ｄ ．
柱 、 醇 一 （ ８ ２ 为 流 动 相 ， 速 为 １ ５ｍｌｒｉ， 检 测 波 长 ：２ ｎ 结 果 ： 线 性 范 围 ０ ９ ６ ０ 甲 水 ９ ：） 流 ． ／ ｎ ａ 踟 ｍ。 ． ～ ．
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第２卷 ｌ
第１ 期
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中
医 学
院
学
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Ｖ０ １ Ｎｏ １ １ ２
２０ ０ ２年 ２月
Ｊ ＯＵＲ Ａ ＦＡＮ Ｕ１ Ｍ ＯＬ Ｅ Ｎ ＬＯ Ｈ ＴＣ Ｃ Ｌ ＧＥ
Ｅｅ ０ ２ ｂ２ ０
・
方药研究 ・
反相高 效液 相色谱法测定沙棘油 中维生素 Ｅ的含量