兴奋性氨基酸受体阻断剂

兴奋性氨基酸（Excitatory amino acid，EAA）是广泛存在于哺乳类动物中枢神经系统的正常兴奋性神经递质，参与突触兴奋传递，学习记忆形成以及与多种神经变性疾病有关。

缺血、缺氧、创伤、中毒等因素能触发中枢神经系统的EAA过度兴奋，在能量代谢失衡的基础上，异常堆积，产生神经毒性作用。

急性颅脑损伤后脑内EAA的浓度变化与脑损伤的程度有关。

本文综述了EAA的生物学基础、毒理作用机制、影响因素，及对神经系统的损伤机制和近年来国内外的研究现状。

1 兴奋性氨基酸及其受体
兴奋性氨基酸是广泛存在于哺乳类动物中枢神经系统的正常兴奋性神经递质，参与突触兴奋传递，学习记忆形成以及与多种神经变性疾病有关。

在胚胎时期海马神经上皮中即存在向海马结构中分化的兴奋性氨基酸前体细胞，随着其层次结构出现，这些前体细胞不断分化、迁移并定居于各层之间，尤以锥体层和颗粒层最多。

EAA包括谷氨酸（Glu）、天冬氨酸（Asp）、N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）、亮氨酸等。

其中谷氨酸（Glu）是中枢神经系统内含量最高的一种氨基酸，Glu在中枢神经系统的分布不均，以大脑皮层、小脑、纹状体的含量最高，脑干、下丘脑次之。

脊髓中含量明显低于脑干，但有其特异分布，背根含量高于腹根，背侧灰质含量高于腹侧灰质。

因此，有人推测Glu为初级感觉传入纤维的兴奋性递质。

NMDA是通过改变Asp
的结构而合成的EAA，兴奋作用可达Glu的100倍。

目前已知的EAA受体可分为两大类:NMDA受体和非NMDA受体。

非NMDA受体包括AMPA（α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异唑丙酸）受体、KA（海人藻酸）受体、QA（使君子酸）受体、代谢型受体和L-AP4受体等。

NMDA和AMPA为离子型受体，主要作用于Ca 2+ 、Na + 通道。

NMDA受体对Ca 2+ 通道的开放受甘氨酸的抑制性调节，并可被Mg 2+ 以电压依赖方式阻断。

KA、QA受体开放单价离子通道，允许Na + 、Cl - 、H 2 O进入细胞内，促使神经元肿胀坏死。

代谢型受体通过G - 蛋白偶联，调节细胞膜离子通道和酶活性，与神经元的异常放电有关。

有研究发现［9］，NMDA受体主要介导皮肤的伤害性传入，非NMDA受体主要介导肌肉和内脏的伤害性传入。

皮肤和肌肉的伤害性传入分别诱发释放更多的门冬氨酸和谷氨酸可能是这种差别的主要原因之一。

NMDA受体的不同调节位点在伤害性信息传递中有密切的协同作用。

2 兴奋性氨基酸的毒理作用机制
正常情况下，EAA主要存在于神经末梢的突触囊泡内，末梢去极化时释放到突触间隙，作用于突触后膜的特异受体，完成兴奋性突触传递及其它生理作用。

释放入突触间隙的EAA除刺激突触后膜的EA A受体发挥生理效应外，绝大部分可经EAA能神经末梢重摄取而回收，少部分可被胶质细胞所摄取。

EAA的重摄取主要依靠突触前膜上的EAA转运体来完成，此转运体是Na + 依赖性的，即转运过程必须依赖细胞外的Na + 。

缺血、缺氧、创伤、中毒等因素触发中枢神经系统的EAA过度兴奋，在能量代谢失衡的基础上，异常堆积，促
进具有细胞毒性的反应性氮中间产物（RNI）、反应性氧中间产物（R OI）形成，促使细胞外的Ca 2+ 大量内流，激活磷酸酯酶、蛋白酶、一氧化氮合酶等，引起神经细胞的坏死或凋亡。

EAAs造成神经毒性作用主要有两个过程，一是作用于非NMDA受体，引起Na + 、Cl - 、H 2 O的内流，造成神经元急性水肿为特征的急性损伤过程，此过程在刺激因素去除后可以恢复。

二是通过激兴奋NMDA受体，直接或间接启动电压依赖性通道，Ca 2+ 大量内流，造成迟发性的神经元变性坏死的迟发过程，该过程为不可逆。

3 兴奋性氨基酸导致的神经系统的损伤
Castillo等在128例急性缺血性卒中患者的EAA检测中，发现血浆Glu、Asp含量在急性期明显升高，并与脑梗死体积和病情轻重正相关。

缺血性脑卒中的发病过程中，在能量耗竭的缺血中心，EAA的毒性引起神经元坏死;在能量相对缺乏的半暗带区，则导致神经细胞凋亡。

线粒体功能的损伤程度决定了神经元的死亡方式。

李燕珍等用高效液相色谱法测定42例出血性脑血管病患者血清证实Glu、Asp含量在急性期（1～5天）显著高于对照组，且与出血量呈正比。

用流体冲击装置制作中度颅脑损伤模型的大鼠，发现脑损伤后脑血流明显下降，脑组织内Glu、Asp明显升高。

原因可能是局部缺血，能量耗竭，膜通透性改变导致K + 外流，引起神经去极化和神经兴奋冲动发放，促使Glu和Asp释放［11］。

脑缺血时，胞外Glu浓度变化强烈地影响着缺血神经细胞损伤，脑缺血引起神经细胞损伤易发部位与EAA 在脑内的分布一致，给予NMDA受体拮抗剂可减少神经细胞损伤。

急
性颅脑损伤后脑内兴奋性氨基酸的浓度变化与脑损伤的程度有关，损伤（根据格拉斯哥昏迷分级计分）越重，升高越明显。

赵宝东等通过实验证实给离体培养的大鼠小脑神经元培养液中添加EAA后24h，可以引起细胞的急性损伤作用，导致细胞的贴壁能力下降，突起减少;
台盼兰染色见死亡细胞明显增多，与对照组存在显著差异。

黄文等向生长良好的体外培养神经元添加Glu后，发现神经元逐渐退化，胞体肿胀，突起断裂，神经元崩解。

4 影响兴奋性氨基酸作用的因素
EAA对神经细胞的毒性作用受多种因素的影响。

赵宝东等证实N GF能降低急性全脑缺血再灌注期间兴奋性氨基酸的释放。

邱小鹰等发现脑缺血时，轻度高温（38.8～39.4℃）组Glu、Asp含量明显高于常温（36.5～37℃）组或假手术组（P<0.01）;亚低温（32～32.5℃）组明显低于常温组或轻度高温组（P<0.01）;再灌注后3h内，各脑温组Glu、Asp均有不同程度下降，说明脑温对EAA的释放具有一定的调控作用。

脑温变化也可改变缺血神经细胞的损伤结局，高温可加重缺血神经细胞损伤、加快缺血“半暗带”区向梗死区演化、增加脑梗死体积;亚低温可减轻缺血神经细胞损伤、抑制缺血“半暗带”区向梗死区演化、减少脑梗死体积，且可能与脑温对脑缺血后胞外Glu浓度的影响有关。

腹侧压迫损伤法造成大鼠脊髓中度损伤，伤后立即灌注非特异性腺苷受体激动剂2-氯腺苷（2-CADO，0.1mmol/L）。

发现2-CA DO可显著抑制Glu，Asp的升高（P<0.01）。

应用硫酸镁治疗脑梗塞后EAA含量明显降低，表明硫酸镁可作为EAA的阻断剂，能降低
EAA的神经毒性反应。

其作用机制可能为:（1）阻断电压依赖性NM DA离子通道;（2）阻断钙离子内流，防止细胞内钙超载;（3）硫酸镁有保护细胞膜的功能。

实验证实:外源性Glu迅速激活了脊髓组织一氧化氮合酶（NOS）的活性，而抑制NOS活性则明显降低了伤段脊髓组织Glu的浓度。

由此可见脊髓伤后脊髓组织中NOS与EAA的释放相互促进，因而在继发性脊髓损伤中形成级联放大的神经毒性因子释放。

研究发现654-2可明显减轻缺血缺氧新生鼠脑组织Glu的过度产生，表明654-2对缺血缺氧新生大鼠脑损伤有一定的保护作用。

电刺激丘脑底核后，改善了帕金森病大鼠的旋转行为，纹状体中Glu含量明显减少（P<0.01），Asp则无明显改变（P>0.05），可见高频电刺激丘脑底核抑制了同侧谷氨酸的释放。

用放射免疫法和高效液相色谱电化学检测器分别测定了SAMP8小鼠血浆、大脑皮层、海马、下丘脑皮质酮（corticosterone，CORT）水平和大脑皮层、海马EAA含量。

结果显示，SAMP8小鼠血浆CORT水平均显著高于其同龄正常对照小鼠SAMR1（P<0.05，或P<0.01）。

SAMP8小鼠8月和12月龄大脑皮层和海马CORT水平也明显高于同龄正常对照SAMR1小鼠（P<0.05，或P<0.01）。

同时，SAMP8小鼠大脑皮层和海马Glu 含量有上升趋势，谷氨酰胺（Gln）含量则明显高于SAMR1小鼠。

S AMP8小鼠切除肾上腺后，大脑皮层和海马Glu含量呈下降趋势，而Gln含量则显著降低。

给切除肾上腺的SAMP8小鼠补充CORT（ip，10mg/kg），大脑皮层和海马Glu和Gln水平均明显升高（P<0.05，或P<0.01），而Asp含量始终没有变化。

结果提示，SAMP8小鼠大
脑皮层和海马Glu和Gln水平升高是肾上腺依赖的。

SAMP8小鼠大脑皮层和海马Glu和Gln含量升高可能与其大脑皮层和海马CORT 水平升高有关。

5 存在问题及展望
（1）目前对EAA的研究对象局限于脑出血、脑缺血以及癫痫的机体，除裴发光等对儿童氟乙酰胺中毒所致的EAA变化外，对其他中毒条件下造成的神经损伤研究甚少。

故对中毒机体的EAAS变化的研究成为毒理工作者的当务之急。

（2）目前对EAA的研究基本局限于在体动物研究，由于受血流状态影响以及神经体液的调节作用，其结果尚不能说明特定神经元的特征性改变。

故应通过体外细胞（组织）培养的方法，研究EAA对特定细胞（核团）的作用机制。