现代色谱技术在中药制剂多指标成分质量控制中的应用

China Pharmacy 2011 Vol. 22 No. 39 ㊃ 3733 ㊃
1 HPLC 在中药制剂多指标成分控制中的应用
HPLC 法具有分离效能高、 分析速度快、 重现性好、 流动相 选择性广、 色谱柱可反复使用等特点， 因此在中药制剂质量控 制中占有非常重要的地位。 在 HPLC 仪构成组件中， 检测器作为核心部件主要包括紫 外检测器 （UV） 、 蒸发光散射检测器 （ELSD） 、 质谱检测器 （MS） 以及荧光检测器等。二极管阵列检测器 （DAD） 也属于紫外检 测 器 。 在 中 药 制 剂 质 量 分 析 中 最 为 常 用 的 检 测 器 是 UV、 DAD、 ELSD 及 MS。徐金钟等[1]以 HPLC-UV 检测法测定清热 灵颗粒中黄芩苷 、 连翘苷 、 汉黄芩苷 、 黄芩素和汉黄芩素的含 量， 结果在 274 nm 波长处各成分线性关系良好， 准确性高。纪 晓影等 [2] 以 HPLC-UV 法测定抗感解毒颗粒中绿原酸 、 栀子苷 和葛根素含量， 结果在 238 nm 波长处各成分的平均回收率分 别为 96.6％ 、 97.9％ 、 98.4％ 。 安神补心丸 [3] 中五味子醇甲 、 五 味子酯甲、 五味子甲素、 五味子乙素和丹参酮 Ⅱ A 的含量测定
现代色谱技术在中药制剂多指标成分质量控制中的应用
# 雷利利＊， 张熙洁， 侯林中， 刘晓红（ 河北唐山市工人医院药学部， 唐山市 063000）
中图分类号
R284.1； R927
文献标识码
A文章编号Fra bibliotek1001-0408 （2011） 39-3733-03
摘 要 目的： 为促进中药制剂质量全面控制提供参考。方法： 采用文献检索方式， 对国内、 外有关中药制剂多指标成分分析方法 的研究报道进行分类总结。结果： 综述了近 5 年应用于中药制剂多指标成分测定的现代色谱分析技术， 包括高效液相色谱法、 气 相色谱法、 薄层色谱法、 毛细管电泳法等。结论： 应用现代色谱技术对中药制剂多指标成分进行分析， 更进一步保证了中药制剂的 质量。 关键词 中药复方制剂； 现代分析技术； 多指标； 含量测定 中药制剂是以中药材为原料， 以中医药理论为指导， 按照 一定的处方和制备工艺加工而成的制剂 ， 因其在疑难杂症方 面疗效独特、 毒副作用少， 越来越受到医药界的广泛关注。由 于中药制剂成分复杂， 药效学研究滞后， 《中国药典》 （一部） 收 载的中药含量测定的成分， 一种是活性有效成分； 一种是指标 成分， 即可能是活性成分， 也可能是非活性成分。为了落实科 技部和国家食品药品监督管理局对药品 “安全、 有效和质量可 控” 的发展战略 ， 全国的药学工作者经过几十年不断努力 ， 使 现代色谱技术成为中药质量控制的主要分析手段。从 1985 年 版 《中国药典》 开始引入色谱技术到 2010 年版 《中国药典》 ， 在 短短的 25 年时间内， 现代色谱技术在中药质量控制方面得到 突飞猛进的发展。2005 年版 《中国药典》 （一部） 中收载 564 种 中药制剂 ， 其含量测定项中有 32 种采用薄层色谱 （TLC） 法， 338 种采用 HPLC 法 ， 23 种采用气相色谱 （GC） 法 。 而 2010 年 版 《中国药典》 （一部） 收载中药制剂有 1 063 种， 其含量测定项 中 709 种采用 HPLC 法， 24 种采用 GC 法， 12 种采用薄层扫描色 谱 （TLC-CS） 法 。 可见 ， 2010 年版与 2005 年版 《中国药典》 相 比， 定量分析项中色谱技术的应用明显增加。因此， 本文就目 前色谱技术在中药制剂多指标成分定量分析方面的应用综述 如下。 的反相 （RP） -HPLC-UV 检测法的建立， 也使该制剂质量得到有 效控制。此外， HPLC-UV 法还可用于肠安康颗粒[4]、 退热解毒 [5] [6] [7] 注射液 、 通舒口爽胶囊 、 银黄颗粒 、 桂枝茯芩胶囊 [8]等制 剂中多指标成分的含量测定。DAD 具有快速提供待测物的三 维图谱等特点 ， 近几年也逐渐用于中药制剂中多指标成分分 析。鲁艳柳等[9]采用 HPLC-DAD 法在 276 nm 波长处分析了定 清肝活血方中葛根素 、 黄芩苷 、 黄芩素和汉黄芩素含量 ， 结果 各指标成分平均回收率均在 99.64％～100.83％之间。抗感胶 囊中绿原酸 、 咖啡酸 、 芍药苷 、 木犀草苷和芦丁同时测定的 HPLC-DAD 法的建立 ， 也为该制剂质量的综合评价提供了参 考[10]。综上所述， HPLC-UV 或 HPLC-DAD 法为中药制剂质量 的有效控制提供了可靠的依据和保证。 UV 作为专属型检测器， 只针对有紫外吸收的成分进行检 测， 而对于紫外吸收弱的化合物成分， 往往采用 ELSD 分析， 不 但避免了其他紫外吸收成分的干扰 ， 且提高了灵敏度 。 段瑞 等 [11] 用 HPLC-ELSD 法测定红药片中三七皂苷 R1 及人参皂苷 Rg1、 Re、 Rb1 的含量， 与该制剂用 RP-HPLC 法分析比较， 前者准 确、 分离效果好、 无干扰， 且节省了分析时间。李春英等[12]建立 了四君子丸中党参炔苷 、 茯苓酸 、 甘草酸 、 苍术内酯Ⅲ和白术 内酯Ⅰ含量分析的 HPLC-ELSD 法， 结果待测组分质量浓度的 对数值与色谱峰面积的对数值有良好的线性关系。此外， Wei YJ 等 [13] 采用 HPLC-DAD-ELSD 法测定复方丹参制剂中的酚 酸、 皂苷和二萜醌类成分的含量 ， 方法新颖 。 2010 年版 《中国 药典》 （一部） 中采用 HPLC-ELSD 法测定品种已达到 41 种， 可 见 HPLC-ELSD 法将成为中药制剂的主要分析手段。 HPLC-MS 法则是将 HPLC 的高分离效能和 MS 的高灵敏 度、 高专属性及较强的结构解析能力相结合， 成为中药制剂复 杂系统质量研究的有力手段。许海棠等[14]采用 HPLC-MS 法， 选择电喷雾 （ESI） 为电离源， 通过待测组分的保留时间和质谱 信息 ， 对桂林西瓜霜喷剂中苦参碱 、 小檗碱 、 黄芩苷和靛玉红 等有效成分同时进行了快速灵敏的定性定量分析。 HPLC-MS/MS 联用技术是根据特征碎片离子 （子离子） 的峰面 积进行定量 ， 专一性强 ， 不要求各成分色谱峰完全分离 ， 分析 快速 。 张新峰等 [15] 采用 HPLC-MS/MS 法 ， 在 11 min 内完成了 左金丸和香莲丸中药根碱、 黄连碱、 巴马汀、 小檗碱、 吴茱萸碱 和吴茱萸次碱的含量测定 ， 且 6 种成分的最低定量浓度为 0.5 ng ㊃ mL-1。 HPLC-MS （MS/MS） 的联用还可用于四物汤 [16] 中有 机酸类和内酯类成分等检测 。 此外 ， MS 与其他检测器联用 （如 HPLC-DAD-MS/MS[17]） 还可用于分析制剂中糖类、 萜类及 苷类化合物。