吡喹酮抗血吸虫作用的研究进展_肖树华

作者单位：中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所，世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心，上海２０００２５吡喹酮系吡嗪并异喹啉化合物，２０世纪７０年代初即用以驱除绦虫，继而又发现其具有很好的抗血吸虫作用，并于７０年代末试用于临床治疗血吸虫病［１－３］。

由于吡喹酮口服方便，疗程短至１～２ｄ，不良反应轻，疗效高，从而扩大了治疗面，故其问世后即得到广泛应用。

尽管吡喹酮是目前惟一对感染人体的５种血吸虫病均有效的药物，但对于７６个国家和地区有血吸虫病流行，感染者逾２亿和６亿人口受感染威胁的血吸虫病［４］来说是不相称的。

同时人们还担心长期和反复应用吡喹酮治疗，是否会诱导血吸虫对吡喹酮产生抗性，因此亟需研制新的抗血吸虫药物，以防止抗性的产生。

而要发展新的和更有效的药物及防止或延缓抗性的发生，就必须了解吡喹酮抗血吸虫的作用机制，并从分子水平上确定其作用的靶部位。

近３０年来，一些实验室对吡喹酮的抗血吸虫作用进行了大量研究，虽然尚未能阐明吡喹酮的确切作用机制，但已取得一些进展，积累了大量资料。

本文系对这方面的研究结果作一系统地综述。

１吡喹酮对血吸虫活动的兴奋与虫体的挛缩吡喹酮作用于血吸虫后最先出现的３个药理作用是活动兴奋、虫体挛缩和皮层损害，不仅会影响血吸虫的生理功能和生化代谢，而且因其吸盘不能附着于血管壁，故会随血流移行至肝脏，即肝移［５－７］。

血吸虫接触吡喹酮后迅即活动兴奋，引起曼氏血吸虫活动兴奋的最低浓度为０．０１μｇ／ｍｌ，浓度增加至０．５～１０μｇ／ｍｌ时，虫最初活动兴奋，继则减弱或完全被抑制［８］。

吡喹酮对日本血吸虫兴奋的最低浓度为０．００５μｇ／ｍｌ，浓度达１μｇ／ｍｌ时，虫即有短暂的活动兴奋或立即强烈挛缩，并依所用浓度，虫体可缩短１／３～１／２［９，１０］。

用描记张力的方法测定，吡喹酮０．０３μｇ／ｍｌ即可引起曼氏血吸虫张力的增加［１１］。

进一步的观察认为，在体外吡喹酮引起虫的活动减少是由于虫的纵肌进行性收缩的结果，而虫丧失吸附皿壁的能力与虫的收缩无因果关系，因为在一些条件下吡喹酮的这２种作用是不同类型的反应［１２］。

１．１神经介质及其阻断剂最初报道，４种对蠕虫神经系统有影响的美加明、潘必啶、氨甲酰胆碱和阿托品皆不能防止由吡喹酮所引起的曼氏血吸虫虫体收缩，故认为吡喹酮可能直接作用于虫的肌层［１３］。

应用（ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰａｒａｓｉｔｉｃＤｉｓｅａｓｅｓ，ＣｈｉｎｅｓｅＣｅｎｔｅｒｆｏｒＤｉｓｅａｓｅＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｒｅｖｅｎｔｉｏｎ，ＷＨＯｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｎｇＣｅｎｔｒｅｆｏｒＭａｌａｒｉａ，ＳｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓａｎｄＦｉｌａｒｉａｓｉｓ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０００２５，Ｃｈｉｎａ）【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｐｒａｚｉｑｕａｎｔｅｌｉｓｔｈｅｏｎｌｙｅｆｆｅｃｔｉｖｅｄｒｕｇｏｆｃｈｏｉｃｅａｇａｉｎｓｔｆｉｖｅｈｕａｍａｎｓｐｅｃｉｅｓｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅｓ．Ｍａｉｎａｄｖａ－ｎｔａｇｅｓｏｆｐｒａｚｉｑｕａｎｔｅｌｉｎｃｌｕｄｅｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ｈｉｇｈｓａｆｅｔｙａｎｄｅｆｆｉｃａｃｙａｓｗｅｌｌａｓｓｈｏｒｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｕｒｓｅ．Ｔｏｂｅｔｔｅｒｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎｏｆｐｒａｚｉｑａｎｔｅｌａｇａｉｎｓｔｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅｓｗｏｕｌｄｂｅｈｅｌｐｆｕｌｆｏｒｆｕｒｔｈｅｒｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｎｅｗｂｒｏａｄ－ｓｐｅｃｔｒｕｍａｎｔｈｅｌｍｉｎｔｈｉｃｓ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｓｕｍｍａｒｉｚｅｓｔｈｅ３０ｙｅａｒｓ′ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｔｈｅｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｄｒｕｇａｇａｉｎｓｔｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅｓｐｒｏｃｅｅｄｅｄｂｙｄｏｍｅｓｔｉｃａｎｄａｂｒｏａｄｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ．【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｐｒａｚｉｑｕａｎｅｌ；Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅ；Ｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎ吡喹酮抗血吸虫作用的研究进展【综述】文章编号：１０００－７４２３（２００７）－０６－０４９２－１１肖树华【提要】吡喹酮是目前惟一对人体５种血吸虫病均有效的治疗药物，其突出优点是口服方便、安全有效和疗程短。

了解其抗血吸虫的作用机制，可能有益于发展新的广谱抗蠕虫药物。

本文综述了近３０年来国、内外实验室对吡喹酮抗血吸虫作用的研究进展。

【关键词】吡喹酮；血吸虫；作用方式ＳｔｕｄｙＰｒｏｇｒｅｓｓｏｎｔｈｅＭｏｄｅｏｆＡｃｔｉｏｎｏｆＰｒａｚｉｑｕａｎｔｅｌＡｇａｉｎｓｔＳｃｈｉｓｔｏｓｏｍｅｓＸＩＡＯＳｈｕ－ｈｕａ中图分类号：Ｒ９７８．６４１．５文献标识码：Ａ有关虫体活动的神经介质及其阻断剂对吡喹酮兴奋血吸虫的作用机制进行了一些探讨。

低浓度的吡喹酮可增强５－羟色胺（５－ＨＴ）和阿托品兴奋血吸虫的作用；５－ＨＴ阻断剂肉桂硫胺可抑制吡喹酮兴奋虫体；如以５－ＨＴ的释放剂盐酸丙咪嗪使血吸虫的内源性５－ＨＴ释放，虫的活动明显减弱，加入５－ＨＴ或吡喹酮仍可兴奋虫的活动；吡喹酮可兴奋槟榔碱和敌百虫麻痹的血吸虫；无论体内或体外，吡喹酮既不增加虫的内源性５－ＨＴ，亦不增强其对外源性５－ＨＴ的摄入。

由此可见，吡喹酮兴奋虫的作用，并非通过５－ＨＴ起作用，可能是对血吸虫有类似５－ＨＴ的作用，或是５－ＨＴ受体激动剂［１４－１６］。

神经介质及有关阻断剂对吡喹酮挛缩血吸虫的作用无明显影响［１３，１４，１７］，如对血吸虫纵肌有伸长作用的儿茶酚胺（多巴胺和去甲肾上腺素）不能拮抗吡喹酮挛缩血吸虫；对血吸虫有兴奋作用的５－ＨＴ和阿托品、有麻痹和伸长血吸虫作用的槟榔碱、敌百虫和戊巴比妥钠、神经节阻断剂美加明、潘必啶和５－ＨＴ阻断剂溴代麦角酸二乙胺和肉桂硫胺均不能阻断吡喹酮挛缩血吸虫，亦不能使挛缩的血吸虫恢复。

１．２钙离子的作用在最初的试验中发现吡喹酮挛缩血吸虫的作用依赖于Ｃａ２＋的存在，并受Ｍｇ２＋的制约［１０，１３，１４，１７］，即曼氏血吸虫或日本血吸虫先在无Ｃａ２＋的享氏盐平衡溶液（ＨＢＳＳ）中培养１５～３０ｍｉｎ，血吸虫的活力减弱，加入吡喹酮不能引起虫的张力增加或挛缩。

此时将Ｃａ２＋（１．４ｍｍｏｌ／Ｌ）加至无Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ培养液中，虫立即收缩。

早期研究曼氏血吸虫的结果认为，吡喹酮可能通过改变虫体对Ｃａ２＋的渗透性，促使Ｃａ２＋内流而使虫挛缩。

血吸虫在含Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中培养３０ｍｉｎ后加入吡喹酮，４５Ｃａ２＋在虫体内迅速集聚。

吡喹酮还刺激虫对２２Ｎａ＋的摄入，抑制对４２Ｋ＋的摄入［１７］。

在含Ｃａ２＋量正常（１．４ｍｍｏｌ／Ｌ）或高Ｃａ２＋（１４ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＨＢＳＳ培养液中，吡喹酮对虫体的总Ｃａ２＋量无明显影响，但在含高Ｍｇ２＋（３０ｍｍｏｌ／Ｌ）的ＨＢＳＳ中，吡喹酮可明显增加虫体的总Ｍｇ２＋含量［１８，１９］。

在无Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中，吡喹酮使血吸虫挛缩的作用减弱。

将在含４５Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中培养４０ｍｉｎ的血吸虫移置于无Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中，４５Ｃａ２＋自虫体外流呈双相，即最初２ｍｉｎ，４５Ｃａ２＋迅速外流，而随后的４０ｍｉｎ中则缓慢。

由于虫在ＨＢＳＳ中培养１ｈ后的总Ｃａ２＋量为（３．９±０．５）ｍｍｏｌ／ｋｇ虫湿重，在无Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中培养１ｈ后的为（２．７±０．４）ｍｍｏｌ／ｋｇ虫湿重，表明虫体内约有３０％的Ｃａ２＋外流，可能是吡喹酮使虫体挛缩作用减弱的主要原因。

值得注意的是，Ｃａ２＋内流抑制剂Ｄ６００不能阻断吡喹酮引起的虫肌张力增加，对吡喹酮促进曼氏血吸虫摄Ｃａ２＋量的增加亦无影响；用能抑制Ｃａ２＋结合和通过生物膜的钴（ＣＯ２＋）和镧（Ｌａ３＋）作试验，发现吡喹酮促进虫摄入４５Ｃａ２＋的作用可为Ｌａ３＋阻断。

离子载体Ｘ５３７２和Ａ２３１８７虽能使血吸虫张力增加，但未发现吡喹酮有将Ｎａ＋和Ｃａ２＋从水相转移至有机相的离子载体作用［１７］；吡喹酮对Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋的络合作用很弱，不能将其络合物转移至虫体内，也不影响Ｃａ２＋和Ｍｇ２＋对膜的渗透。

对日本血吸虫观察的结果表明，日本血吸虫雄虫无论是先在含４５Ｃａ２＋的培养液中培养１０～３０ｍｉｎ，然后加入吡喹酮，还是同时加入吡喹酮与４５Ｃａ２＋，虫的４５Ｃａ２＋摄入量只在最初的１～３０ｍｉｎ内有明显增加，其后则与相应对照组相仿。

这一结果与用曼氏血吸虫观察时，吡喹酮促使虫的摄Ｃａ２＋量持续增加有所不同。

这可能是在曼氏血吸虫的试验中，未设与加药各组培养相同时间的对照组的缘故。

由于在３７℃时，吡喹酮可引起日本血吸虫皮层损害的最低浓度为０．１μｇ／ｍｌ，并不明显增加虫对４５Ｃａ２＋的摄入，而在４℃的培养液中，吡喹酮虽可使虫摄入４５Ｃａ２＋的量持续增加，但不引起虫的肌肉挛缩和皮层损害。

因此，在较大浓度吡喹酮作用下，Ｃａ２＋在虫体内短时间地积聚，尚难以说明药物使虫体挛缩和损害血吸虫皮层的原因［２０，２１］。

吡喹酮引起血吸虫肌肉挛缩和皮层损害均有赖于Ｃａ２＋的存在［９，１７，２２，２３］。

但吡喹酮究竟如何通过Ｃａ２＋起作用尚无一致看法［２１］。

由于吡喹酮可使曼氏血吸虫摄入４５Ｃａ２＋量持续增加，但不影响虫的总Ｃａ２＋量［１７，２２］，而用日本血吸虫雄虫观察，则吡喹酮仅在短时间内增加虫对４５Ｃａ２＋的摄入量，即使将药物的作用时间延长至２ｈ，亦未见有明显变化，故认为吡喹酮可能不是通过虫的总Ｃａ２＋量增加引起虫体挛缩和损害虫的皮层。

因而又考虑是否吡喹酮通过改变Ｃａ２＋在虫体内的分布而起作用。

实验证明，在３７℃的含４５Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中，日本血吸虫雄虫经吡喹酮１μｇ／ｍｌ作用５～６０ｍｉｎ，皮层表膜的４５Ｃａ２＋含量占总放射量的１．４％～２．８％，与相应对照组的１．７％～２．３％相仿，差别不显著。

在上述时间内，皮层胞质４５Ｃａ２＋含量为６６．８％～７９．８％。

均明显低于相应对照组的７３．８％％～８４．３％，而体肌的４５Ｃａ２＋量则由对照组的１３．８％～２４．５％增至１７．４％～３１．０％，差别显著。

在４℃的ＨＢＳＳ中，雄虫经吡喹酮作用５～３０ｍｉｎ后，４５Ｃａ２＋在皮层表膜和虫体肌肉的分布与各相应对照组的相仿。

此外，在无Ｃａ２＋的ＨＢＳＳ中，血吸虫雄虫经吡喹酮作用１０～６０ｍｉｎ后，虫的皮层表膜、皮层胞质和虫体肌肉的４５Ｃａ２＋含量所占的百分比未见有明显变化。

结果表明虫体内Ｃａ２＋分布的变化可能与吡喹酮使虫体挛缩和损害虫的皮层有关［２４］。

此外，用提取自日本血吸虫成虫的钙调蛋白制备成二甲基氨基萘磺酰氯（ＤＮＳ－Ｃｌ）－虫钙调蛋白进行观察，发现在钙离子存在的情况下，吡喹酮可与虫钙调蛋白相结合，使其立体空间构象被固定，丧失调控能力而引起虫的一系列代谢失衡［２５］．除Ｃａ２＋外，曼氏血吸虫经吡喹酮作用１０ｍｉｎ后，虫的Ｎａ＋和Ｋ＋含量无明显变化［１８］。