填料和层析柱使用规范
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法
层析柱原理是一种常用的色谱技术，可以分离复杂混合物中的各个组分。
层析柱是一个长管状结构，内部填充有吸附剂或离子交换树脂等材料。
根据组分在填料中的亲和性差异，不同组分会以不同的速度通过填料，从而实现分离。
层析柱的使用方法如下：
1. 样品预处理：将混合物中的目标组分溶解或悬浮于合适的溶剂中，并进行必要的样品处理（如pH调整、过滤等）。
2. 建立实验条件：选择合适的填料材料、填料粒径和填充方法，并确定适当的溶剂体系和流动相条件。
3. 装填填料：将选择好的填料装入柱中。
填料的打包密度和均匀性对色谱分离效果有重要影响，因此要确保填料的均匀性和紧密度。
4. 平衡柱：用流动相预浸柱，使填料均匀吸附流动相，并达到平衡状态。
平衡时间根据填料种类和样品性质而定。
5. 注射样品：将样品以适当的体积注射到柱中，并控制注射速度和压力。
6. 运行分析：启动流动相，控制流动相速度和温度，使样品组分逐渐分离，并记录结果。
7. 数据分析：根据检测器的信号，对分离出的目标组分进行定性和定量分析。
层析柱的使用注意事项：
1. 填料选择：根据被分离组分的性质选择合适的填料。
2. 流动相选择：要确保流动相对目标组分具有足够的分离能力。
3. 注射量控制：注射量应根据柱容量和检测器灵敏度进行合理
控制。
4. 柱温控制：柱温对于某些温度敏感性样品的分离效果有重要影响，可以根据需要进行柱温控制。
5. 柱保养：正确使用和保养层析柱，避免杂质吸附和填料破碎等情况的发生。
6. 数据分析：及时记录和分析实验结果，确保实验数据的准确性和可靠性。
层析柱 操作规程
层析柱操作规程层析柱操作规程一、引言层析柱是一种广泛应用于分析化学领域的分离技术，可以用于纯化混合物、分离样品中的化合物等。
为确保层析柱操作的准确性和安全性，制定本操作规程。
二、设备准备1. 确认所需使用的层析柱类型和规格。
2. 检查层析柱的外观是否完好，检查是否有裂纹或破损。
3. 选择合适的填料，并用洗净的溶剂将其均匀填充到层析柱中。
三、试样处理1. 准备待测样品，并将其溶解于适当的溶剂中。
2. 调整样品的pH值，以便于目标化合物的分离。
3. 使用过滤器过滤样品，以去除杂质。
四、操作步骤1. 将样品注入层析柱。
注意控制进样量，以避免柱内过载。
2. 使用一定流速的溶剂将样品通过层析柱。
可以使用手动或自动进样系统实现。
3. 观察溶剂前端和尾端的流动情况，确保它们在操作过程中维持稳定。
4. 根据需要，在柱体顶端加入适当的洗脱剂，以推动样品的分离。
5. 监测柱体顶端的洗脱溶液，以确定目标化合物的出现时间。
6. 收集洗脱溶液，直到目标化合物完全洗脱出来。
五、注意事项1. 在操作过程中，避免柱体受到剧烈震动或颠倒，以免损坏填料和柱体。
2. 在柱体运行时避免样品的进样保持过久，以防止填料变形或堵塞。
3. 柱体结束后，及时清洗柱体和填料，以便下一次使用。
4. 注意操作时的个人防护，避免接触或吸入有害溶液。
六、故障处理1. 如果柱体流速变慢或停止，请检查是否柱内有堵塞现象。
2. 如果柱体出现漏液或损坏，请及时更换或修复。
七、实验数据记录1. 记录样品的进样量和溶剂流速。
2. 监测洗脱溶液的UV/Vis或其他检测方法，记录目标化合物的出现时间和峰面积。
八、实验结束1. 按照操作规程清洗柱体和填料。
2. 关闭层析柱，保持其干燥和安全。
九、附录1. 填料的种类和性质。
2. 样品的名称和来源。
以上为层析柱操作规程，希望能对层析柱操作提供相应的参考和指导。
在操作过程中请务必严格按照规程操作，以确保实验的准确性和安全性。
层析柱原理和使用方法
层析柱原理和使用方法
层析柱原理是一种物质分离和分析方法，其基本原理是通过样品溶液在静态相和动态相之间的分配行为，利用不同组分在两相之间的分配系数不同实现物质的分离和分析。
层析柱的使用方法主要包括以下几个步骤：
1. 准备样品：将需要分离和分析的样品溶解在适当的溶剂中，以得到待测物质的溶液。
2. 选择合适的层析柱：根据待测物质的化学性质和分离效果的要求，选择合适的层析柱。
层析柱可以有不同的填料，如吸附剂、离子交换剂等。
3. 装填填料：将选择好的填料装入层析柱中，并将填料压实以确保充填度均匀。
4. 预洗层析柱：在使用层析柱之前，通常需要使用适当的溶剂对层析柱进行预洗，以去除可能的杂质和残留物。
5. 样品加载：将准备好的样品溶液注入到层析柱中，注意控制注射的速度和样品的量，避免过载。
6. 洗脱：根据物质的亲水性或亲油性特性，通过适当的溶剂梯度洗脱层析柱中
的待测物质。
不同的组分会在不同的洗脱条件下分离出来。
7. 监测和收集：在洗脱过程中，可以使用适当的检测方法（如紫外可见光谱、荧光光谱等）监测待测物质的浓度，以确定其洗脱时间。
根据需要，可以分别收集不同组分的洗脱液。
8. 分析：收集到的洗脱液可以进行进一步的分析和鉴定，如质谱分析、气相色谱分析等。
整个层析柱的使用方法需要仔细调控各个步骤，合理选择条件，以获得准确和可重复的实验结果。
层析柱装柱流程
层析柱装柱流程层析柱是一种用于分离、纯化化合物的重要工具，它具有操作简单、分离效果好、适用范围广等优点，因此在化学、生物等领域得到了广泛的应用。
在进行层析柱操作时，正确的装柱流程是非常重要的，它直接影响到实验结果的准确性和重现性。
下面将介绍层析柱的装柱流程。
首先，准备好所需的层析柱和填料。
层析柱通常由玻璃或塑料制成，填料的选择根据需要分离的化合物而定，可以是硅胶、纸浆、聚合物凝胶等。
填料的粒径和填充量也需要根据具体实验要求进行调整。
接着，将层析柱放置在支架上，并用适当的溶剂进行预洗。
预洗的目的是去除填料中的杂质和空隙中的气体，为样品的装柱做好准备。
预洗的溶剂通常是与样品相似的极性溶剂，如甲醇、乙醇等。
然后，将填料均匀地装入层析柱中。
填料的均匀性对于分离效果至关重要，因此在装填填料时需要轻轻振动层析柱，使填料能够均匀分布，并避免出现空隙或局部堆积的情况。
接下来，将样品溶液缓慢地加入层析柱中。
在加样的过程中，需要注意控制流速，避免填料被冲洗出来或样品在填料中发生混合。
通常情况下，可以使用移液枪或注射器来进行加样，以确保流速的均匀和稳定。
装柱完成后，可以开始进行层析操作。
根据需要，可以选择使用不同的洗脱溶剂来进行洗脱，以实现对样品的分离和纯化。
在洗脱的过程中，需要注意收集不同洗脱峰的组分，并记录下各个组分的出现时间和洗脱溶剂的类型，以便后续的分析和鉴定。
最后，对层析柱进行清洗和保存。
清洗时，可以用适当的溶剂将填料中残留的样品和杂质洗净，然后用干燥剂将层析柱中的水分去除干净。
清洗完成后，将层析柱放置在干燥通风的地方保存，避免受潮和受到污染。
总之，层析柱的装柱流程是一个关键的操作步骤，它直接影响到后续层析操作的效果和实验结果的准确性。
正确的装柱流程应该包括层析柱的预洗、填料的均匀装填、样品的缓慢加样、洗脱组分的收集和记录、以及层析柱的清洗和保存等步骤。
只有严格按照流程进行操作，才能保证层析柱操作的顺利进行和实验结果的准确可靠。
层析柱 操作规程
层析柱操作规程
《层析柱操作规程》
层析柱是一种分离和纯化化合物的工具，它在实验室和工业生产中都得到广泛应用。
为了正确、高效地运用层析柱进行实验操作，必须严格按照规程进行操作。
1. 准备工作
在开始操作层析柱之前，首先需要检查仪器设备和试剂是否准备就绪。
确保层析柱、柱子和柱底都是干净的，没有杂质和残留物。
同时，检查溶剂和流动相的浓度和pH值是否符合实验要求。
2. 样品预处理
样品在进入层析柱之前，需要进行适当的预处理。
通常包括溶解、过滤或稀释等步骤，以确保样品的纯度和浓度符合层析柱的使用要求。
3. 层析条件选择
根据样品的特性和分离要求，选择合适的层析柱和流动相。
流动相的选择包括了溶剂的种类、比例和流速等参数，需要根据实验要求进行合理选择。
4. 样品加载
将经过预处理的样品通过适当的方法加载到层析柱中。
可以采用重力流动、压力注入或者其他方法，确保样品均匀地进入层析柱。
5. 层析过程监控
在样品加载后，需要监控层析过程并进行记录。
包括流出液的收集、色谱图谱的观察等，以便及时发现异常情况并进行调整。
6. 收集和分析分离物
根据层析过程中的监控数据，及时收集目标物质，并进行分析和检测。
可以通过色谱、质谱等技术进行分析，得到分离物的纯度和产率数据。
7. 层析柱的清洗和保养
在操作完毕后，及时清洗和保养层析柱。
包括流动相的冲洗、柱子和柱底的清洗以及存放，以保证下次使用时的质量。
在实验操作层析柱时，严格按照规程进行操作，能够确保实验的准确性和重复性，同时也保证了仪器设备的长久使用。
层析柱操作规程
层析柱操作规程
《层析柱操作规程》
一、前言
层析柱操作是化学分离和纯化技术中常用的一种手段，它能够对混合物中的成分进行有效的分离。
为了确保操作过程的顺利进行和分离效果的最大化，需要制定一套严格的操作规程。
二、设备准备
1. 确认层析柱和相关设备是否完好，无污染；
2. 准备好使用的溶剂，保证纯度和新鲜度；
3. 根据实验需求，准备好实验所需的各种样品和标准物质；
4. 准备好密封垫和管接头等辅助器材。
三、操作步骤
1. 将层析柱连接至固定相泵；
2. 实验前先进行层析柱的扫表，观察并记录基础数据；
3. 使用实验样品进行预洗柱操作，确保固定相表面无污染；
4. 将样品溶解于溶剂中，装入进样瓶，连接至固定相泵；
5. 开始进行层析分离操作，收集分离出的目标成分，并记录各分离组分的流出时间；
6. 根据实验需求，对分离得到的目标物质进行进一步的纯化操作；
7. 实验结束后，对层析柱进行清洗消毒，保持设备的卫生和使用寿命。
四、实验注意事项
1. 操作过程中要随时检查设备状态，及时处理出现的故障和异常；
2. 严格遵守操作规程，不得随意更改操作步骤；
3. 对固定相、流动相、样品等各项实验条件进行严格控制，确保实验的准确性和可重复性；
4. 清洗消毒后的层析柱应储存于干燥通风的地方，避免细菌污染。
五、结语
层析柱操作规程的制定和执行对于保证实验的顺利进行和分离效果的最大化具有重要意义。
实验人员在操作过程中需严格遵守规程，不得有过失。
同时，定期检查和维护层析柱设备，确保设备处于良好状态，也是保证实验顺利进行的重要环节。
层析柱(色谱柱)填料介质的装载及洗脱操作规程
层析柱（色谱柱）填料介质的装载及洗脱操作规程工业制备层析柱（色谱柱）的填料装载充填和洗脱操作的规范直接影响色谱分离纯化工艺过程的效率，迈思通公司经过多年的实践经验和该行业专家的指导，编写了关于《层析柱（色谱柱）吸附介质的充填及洗脱规程》的方法，供广大用户和科研者参考。
一、柱头安装是否合适及是否严密的检查1、检查下柱头是否按图纸要求安装?（要求按图纸要求安装）2、检查下柱头内，是否安装了防止吸附剂（例如硅胶）漏出的滤布（或滤网）。
3、所用滤布（滤网）的材质要求能耐所用溶剂的腐蚀，而且孔径很小，一般要求使用500目以上孔径大小的滤布（网）。
4、下柱头安好，紧固后，从柱上端（开口）加入所用洗脱剂中极性较小的一种溶剂（例如已烷、石油醚、甲苯等），使溶剂液面比下柱头上部分离出20-30厘米，仔细观察下柱头是否漏溶剂。
如果漏，则必须坚固（或重装），直至不漏为止。
5、检查确实不漏后，放出柱内溶剂，准备装吸附剂（例如硅胶等）。
二、充填吸附剂以充填（或称装填）硅胶为例，作如下说明：1、干法装柱①、取吸附剂（例如硅胶）记下硅胶的量，（等装完柱后，检查剩余硅胶量，就可以知道装入柱中的硅胶量了）。
②、工作人员戴上口罩，准备好木槌，有人从柱上端倒入一定时的硅胶，柱下边有人用木槌敲击柱外壁，振实硅胶；一边加硅胶，一边敲击柱；最好硅胶加到什么高度，就在此高度敲击；且向上下移动敲击。
如此，直至硅胶装满时为止；再上下移动敲击一阵子；至硅胶上平面不再下沉，而且硅胶面很实时为止。
③、如果体系中没有设预柱，层析柱中上端硅胶不把装满，留出空间待“上样”用。
④、如果有预柱的体系，层析柱应装满硅胶。
⑤、干法装柱，粉尘大，且敲击声大，柱外表易变成不光亮，但不耗溶剂。
2、湿法装柱①、同上，准备一定时的硅胶，且记录下硅胶量。
②、准备一只30-50升的耐溶剂腐蚀的塑料桶，例入极性小的且配洗脱剂时需用的溶剂（例如已烷，石油醚、甲苯等），再例入硅胶，搅拌混合。
层析树脂和填料操作手册
北京慧德易科技有限责任公司
-7– 电话：010-51528296/97/98
树脂和填料操作手册
重要。
ೋɺ 过滤 过滤是在进行低压、中压及高压液相色谱分离前最简单易行的样品制备手段。通过滤纸
或烧结玻璃漏斗的过滤，可除去颗粒状物质及不溶物质。 此外，也可通过装有硅胶、活性炭或其他填料的短柱进行过滤，去除其中具有强吸附力
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树脂和填料操作手册
样品前处理
样品的制备对于复杂的分离与纯化非常重要。恰当的样品预处理可以免去后续操作中许多麻 烦，使得分离纯化变得更为容易。
Ұɺ 提取 合理的选择单一或混合溶剂进行提取是保证正确的样品制备的第一步。中草药成分在溶
作为一种初步的纯化方法，沉淀经常被用于皂苷的研究中。将含有皂苷的提取物（如经 过丁醇－水分配之后）的浓缩甲醇液倾入大量的乙醚中，利用过滤或离心的方法收集沉淀的 皂苷。反复利用这种沉淀法可达到更好的效果。
排阻极限45kd与所用溶剂有关吸附模式取决于所需分辩率分子量大小小于总体积的20正相分配小于总体积的1胶粒形状球形多孔颗粒大小干18111um直径颗粒大小中间值干70um直径颗粒大小甲醇27163um直径颗粒大小中间值甲醇103um直径最大线性流速720cmmin参考线性流速60cmminph的稳定性操作中211清洗中213化学稳定性在许多水溶液及有机溶剂系统中都稳定
分辨率：
tR(1)
tR(2)
RS＝
2(t R 2－t R1 tW 1＋tW 2
)
进样
W1/2(1)
W1/2(2)
tW1
tW2
4. 分离度 K1和 K3 HPLC的目的和要求是：峰要尽可能窄（W1/2小），峰的间距尽可能大（tR相差大）。 ⑴基线分离度 K1 ：
工艺层析柱填料的使用比例
工艺层析柱填料的使用比例在层析柱中，填料起着关键的作用，它为样品在柱中的运移提供了一个固定相的环境。
填料的选择会直接影响到层析的分离效果和纯化能力。
常见的填料类型包括吸附树脂、凝胶、离子交换树脂等。
不同种类的填料在层析柱中的使用比例需要根据具体的分离需求和试验条件来确定。
以下是几种常见的填料使用比例示例：1.吸附树脂：吸附树脂是一种常用的填料，其使用比例通常为层析柱总体积的30%-50%。
吸附树脂在分离中起到吸附目标物质的作用，且在解吸过程中可以通过改变pH、盐浓度等条件来实现洗脱。
2.凝胶：凝胶也是常用的填料，其使用比例通常为层析柱总体积的40%-60%。
凝胶在分离中通过孔隙作用来实现目标物质的分离。
凝胶的选择需要考虑其孔径、孔隙分布等因素。
3.离子交换树脂：离子交换树脂是一种常见的用于离子或离子组的分离和纯化的填料。
其使用比例通常为层析柱总体积的30%-50%。
离子交换树脂可以选择阳离子交换树脂或阴离子交换树脂，具体选择取决于目标物质的性质。
除了填料类型的选择，填料颗粒的大小和均匀度也对层析柱的分离效果有重要影响。
一般来说，填料颗粒越小，表面积越大，分离效果越好。
因此，在使用填料时，需要根据分离需求和层析柱的规格来选择适当的填料颗粒大小。
此外，填料的堆积方式也会影响层析的分离效果。
常见的堆积方式包括蒸汽堆积、离心堆积、静态堆积等。
不同的堆积方式适用于不同的填料类型和分离目标。
综上所述，工艺层析柱填料的使用比例需要根据实际需求和试验条件来确定，选择适当的填料类型、尺寸、堆积方式等因素进行调整，以实现有效的物质分离和纯化。
亲和层析填料安全操作及保养规程
亲和层析填料安全操作及保养规程亲和层析填料是生命科学领域中常用的一种分离纯化技术，具有高效、快速、灵敏、选择性好等优点，广泛应用于蛋白质、抗体、核酸等生物大分子的生产纯化中。
本文主要介绍亲和层析填料的安全操作及保养规程，以确保填料的使用效果和使用寿命，保障实验室人员的安全。
1. 亲和层析填料的安全操作1.1. 穿戴防护用具在使用亲和层析填料时，应根据实验室安全要求和填料生产商的建议佩戴相关的防护用具，例如手套、口罩、护目镜等。
同时应保持实验室的通风良好，避免吸入空气中的有毒有害物质。
1.2. 操作规范使用亲和层析填料前，应仔细阅读填料的产品说明书，并按照说明书的要求进行操作。
在填充柱子或操作离子交换层析设备时，应注意不要使填料受到过度挤压，以避免填料破碎或变形的情况。
在使用亲和层析柱进行制备操作时，应注意流速的控制。
超过填料的最大工作流速可能会造成填料压力过大，从而导致填料流失或柱子破裂的现象。
在柱子使用前后，应仔细检查柱子和填料的状态，确保无破损或损坏。
1.3. 废弃物的处理在亲和层析填料的使用过程中，为避免填料、试剂等对环境造成的影响，应正确处理废弃物。
将废弃物放入特定的废液罐中，或按照当地政府的规定进行处理。
2. 亲和层析填料的保养规程2.1. 储存在储存亲和层析填料时，应将其放置在干燥、不受阳光直射的地方。
同时也需要注意填料锁定密封，避免受到污染和高温的影响。
2.2. 清洗在使用亲和层析填料后，应及时对填料进行清洗。
填料清洗可以采用纯水、去离子水、甲醇等多种方式，具体的清洗方法需要根据填料的种类和使用情况进行选择。
2.3. 保养亲和层析填料的保养可以延长填料的使用寿命和分离效率。
在填料长时间不使用时，可以与专门的符合填料特性的保养液或缓冲液进行浸泡，使其不致变干或出现微生物污染。
在每次使用前，也应检查填料的状态和完整性，确保其没有发生变形、破损等问题。
3. 总结本文简单介绍了亲和层析填料的安全操作及保养规程，这些措施能够有效预防实验室人员受伤和填料的损坏，增加实验室的安全性和生产效率。
层析柱使用方法
层析柱使用方法
哇塞，层析柱可是个很重要的实验工具呢！它在很多领域都有着广泛的应用。
那咱就来好好说说层析柱的使用方法哈。
首先得准备好层析柱，检查是否完好无损。
然后就是装柱啦，这可是关键步骤哦！要将填料慢慢倒入柱中，同时用适当的溶剂冲洗，注意不能有气泡产生呀，这就好比盖房子得根基牢固一样重要呢！接着就是上样啦，把样品小心地加到柱子上，可别弄撒了哦。
再进行洗脱，控制好洗脱液的流速，就像把握好节奏一样重要呢。
在整个过程中，要注意保持操作环境的清洁，不然杂质混入可就麻烦啦！还有呀，使用的溶剂要合适，不然也达不到好的效果呀。
在使用层析柱的过程中，安全性和稳定性那也是相当重要的呀！就像走钢丝一样，稍有不慎可能就前功尽弃啦。
要确保实验装置的稳固，避免倒塌啥的危险情况发生。
同时呢，操作过程要规范，可不能马虎大意，这是对自己和实验结果负责呀！只有这样，才能保证实验的顺利进行，得到可靠的结果呢。
层析柱的应用场景那可多了去了呀！在生物化学、制药、食品等领域都能看到它的身影呢。
它的优势也很明显呀，比如能高效分离混合物，让我们更清楚地看到各种成分呢。
这就好像是在一堆混乱中找出秩序一样神奇呀！而且它还可以重复使用，多经济实惠呀！
给你们讲个实际案例哈。
有一次在一个生物实验中，我们就是用层析柱来分离蛋白质的。
哇，效果那叫一个好呀！很清晰地就把不同的蛋白质分离开了，为后续的研究提供了重要的数据支持呢。
这就充分说明了层析柱在实际应用中的强大呀！
总之呢，层析柱真的是个超棒的实验工具呀，只要我们正确使用它，就能发挥出它巨大的作用呀！。
玻璃中压层析柱安全操作及保养规程
玻璃中压层析柱安全操作及保养规程一、前言玻璃中压层析是一种常用的分离及纯化技术，其操作过程需要注意安全操作及保养，才能保证实验的准确性和实验人员的身体健康。
本文将介绍玻璃中压层析柱的安全操作以及保养规程。
二、玻璃中压层析柱的安全操作1. 装填操作1.1 预先备好所需物料，检查所有设备是否完好，确保能够正常工作。
1.2 在进行装填操作前，需将玻璃中压层析柱内部洗净并干燥。
1.3 添加样品时，一定要注意溶液的浓度及体积，最好在安全柜下进行操作。
1.4 在添加样品时，避免喷溅操作，以免对身体造成伤害。
2. 装卸柱操作2.1 在装卸柱操作时，应按照操作步骤进行，不得随意更换设备。
如有必要更换或调整设备，需在实验室管理人员的指导下进行。
2.2 装卸柱操作时，要轻拿轻放，避免碰撞损坏。
2.3 装卸柱时，要戴好手套和护目镜，以免对身体造成伤害。
3. 洗涤操作3.1 在进行洗涤操作时，应按照操作步骤进行。
3.2 在进行洗涤操作时，要戴好手套和护目镜，以免对身体造成伤害。
3.3 在进行洗涤操作之前，需将设备内部进行彻底清洗，并在操作前确认洗涤液的浓度，避免在洗涤过程中误操作。
4. 流体操作4.1 在进行流体操作时，应按照操作步骤进行，不得进行随意更改或使用。
4.2 在进行流体操作时，要戴好手套和护目镜，防止药品溅到身体造成伤害。
4.3 在进行离心操作时，需确保设备的离心机转速、时间及离心管的容量等符合操作要求。
5. 清洗操作5.1 在进行清洗操作时，应按照操作步骤进行，不得随意更改。
5.2 在进行清洗操作时，要戴好手套和护目镜，以免对身体造成伤害。
5.3 在进行清洗操作时，需先将设备内的药品清除，再进行清洗。
清洗时需注意浓度，以避免浓度太高影响清洗效果。
三、玻璃中压层析柱的保养规程1. 日常检查1.1 每次使用前，需检查设备是否完好，是否有破损、裂缝等情况，以确保设备的正常使用。
1.2 需要保持设备的清洁和干燥，可以用设备专用的维护液定期清洗，不要用反应试剂清洗，避免损坏设备。
层析柱装柱操作规范
层析柱装柱操作规范(总2页) -CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1-CAL-本页仅作为文档封面，使用请直接删除层析柱装柱流程装柱材料层析柱：BXK层析柱装柱仪器：ÄKTA装柱器装柱溶液20%乙醇匀浆的准备精确计算所需介质的量（这对固定柱高的层析柱尤其重要）。
1L填充柱所需的介质量大约是1.15L自然沉淀匀浆的量，于干净烧杯中，取 100%沉降胶（静止放置一天以上，倾去20%乙醇后的胶为100%沉降胶）与等体积20%乙醇混合备用。
安装层析柱1.检测层析柱的各个部件，确保干净、完整，拧上下端堵头，拧紧膨胀圈，然后将层析柱垂直固定在铁架台上。
2.将装柱器安装在层析柱上端。
3.往层析柱中加入适量的20%乙醇，打开下端口，重力流，排除下筛网中滞留的气泡，在液面低至1-2cm高度时关闭层析柱下端出口。
装柱1.用玻璃棒紧靠柱子内壁引流，将摇匀的介质加入到层析柱中，这可以减少气泡的产生。
迅速用20%乙醇填满柱子和装柱器，装上装柱器盖子，连接到ÄKTA上。
2.打开层析柱下端，开始以30cm/h流速装柱，直至柱床界面平稳。
停止装柱。
3.打开装柱器盖子，用虹吸法去除界面上端的液体，去掉装柱器，然后小心的用20%乙醇封满柱子剩余部分。
4.将上端转接头一端连上ÄKTA，打开机器，以装柱流速用装柱液排出转接头管路中及筛板中残留的气泡，然后将转接头另一端装到层析柱上，使转接头下端刚好接触胶界面。
(装柱流速约为70-100%的最大流速）5.拧紧膨胀圈，继续用装柱流速压柱，至少保持3个柱体积，以界面不变为主，在界面处做上记号。
6.关闭泵，并关闭柱子下端出口，使层析柱上端和泵断开（转接器上接口是打开的），略拧松膨胀圈，缓慢向下转动调节杆，到记号处停止，然后再拧紧膨胀圈，关闭上接口。
7. 检测柱效3。
工艺层析柱填料的使用比例
工艺层析柱填料的使用比例工艺层析柱是一种常用于分离和纯化化学物质的设备，它的填料对于柱内物质的分离效果至关重要。
在选择填料时，需要考虑填料的种类、粒度和使用比例等因素。
其中，填料的使用比例是影响柱内分离效果的重要因素之一。
填料的使用比例指的是在工艺层析柱内填充的填料与柱内总体积的比值。
这个比例的大小直接影响到柱内物质分离的效果和速度。
一般来说，填料的使用比例越大，柱内的分离效果越好，但也会增加柱内液流阻力，影响操作效率。
在实际应用中，填料的使用比例需要根据具体的实验要求和分离物质的特性来确定。
首先，需要考虑填料的种类。
常见的填料包括硅胶、葡聚糖、聚乙烯醇等。
不同种类的填料具有不同的物理化学性质，对于不同的物质分离有着各自的适用性。
因此，在选择填料时需要根据物质的性质来确定使用比例。
填料的粒度也会影响填料的使用比例。
填料的粒度越小，填料颗粒之间的接触面积越大，分离效果越好。
但是，过小的填料粒度也会增加柱内液流阻力，降低操作效率。
因此，在选择填料粒度时，需要综合考虑分离效果和操作效率的平衡，确定合适的使用比例。
填料的使用比例还需要考虑到柱子的大小和形状。
填料的填充程度会影响柱内液流的通道和分布，进而影响分离效果。
一般来说，填料的使用比例在30%至70%之间比较常见。
在实际操作中，可以根据分离物质的性质和分离要求，逐步调整填料的使用比例，以获得最佳的分离效果。
在柱内填料的使用比例确定后，还需要注意填料的均匀性。
填料的均匀性对于分离效果同样重要。
如果填料的分布不均匀，会导致柱内液流通道的不对称，从而影响分离效果。
因此，在填充填料时，需要注意均匀填充，并采取相应的措施来保证填料的均匀性。
填料的使用比例是影响工艺层析柱分离效果的重要因素之一。
在选择填料时，需要综合考虑填料的种类、粒度和使用比例等因素，并根据具体的实验要求和分离物质的特性来确定最佳的使用比例。
通过合理调整填料的使用比例，可以提高分离效果，并达到预期的纯化效果。
玻璃层析柱使用方法
玻璃层析柱使用方法玻璃层析柱是一种常用的分离和纯化技术工具，广泛应用于生物化学、药物研发、环境监测等领域。
它的使用方法相对简单，但需要掌握一定的实验技巧和注意事项。
首先，在使用玻璃层析柱之前，需要选择合适的柱子尺寸和填料材料。
柱子的尺寸应根据待分离物质的大小和样品量来确定，一般较小的分子可选用较小的柱子，而大分子或大样品量则需要较大的柱子。
填料材料的选择应根据待分离物质的性质和分离需求，常见的填料材料有硅胶、脱水硅胶、脱水硅胶凝胶等。
其次，在使用玻璃层析柱时，需要将填料均匀地填充到柱子里。
填料的使用量应根据柱子的尺寸和需要分离的物质量来确定，一般填充到柱子的1/4至1/2处即可。
填料的填充应均匀、紧密，避免出现空隙和结块的情况。
接下来，将待分离的混合物溶液加载到柱子上。
首先，将混合物溶液注入到柱子顶部，并让其缓慢地渗透到填料中。
为了保持分离效果，应避免过快地注入溶液，以免造成溶液通道的形成。
可以通过使用滴液漏斗、加压泵等工具来控制注液速度。
在加载完溶液后，可以根据需要选择不同的洗脱溶剂进行分离。
洗脱溶剂的选择应根据待分离物质的性质和亲疏水性来确定，常用的洗脱溶剂有水、乙酸乙酯、甲醇等。
在洗脱过程中，可以根据需要逐渐改变溶剂的组成和浓度，以实现对不同成分的分离和纯化。
最后，根据洗脱的结果，可以收集不同组分的溶液，并进一步进行分析或后续处理。
收集时应注意避免交叉污染和混杂，可以使用不同的收集容器或提前标记好。
需要注意的是，玻璃层析柱在使用过程中需要注意安全，避免剧烈震动和碰撞，以免柱子破裂。
同时，在填充和洗脱过程中应注意避免气泡的产生，可以使用气泡去除器或震荡装置来辅助去除。
总之，玻璃层析柱是一种方便、有效的分离和纯化工具，掌握其使用方法和技巧能够帮助实验人员更好地进行分离和纯化操作。
通过合理的选择柱子尺寸和填料材料，并注意实验细节和安全事项，可以获得高效的分离纯化效果。
BPG 层析柱实用标准装柱流程的要求规范
操 作 标 准目的：为了使BPG300层析柱装柱过程可重复，并能够得到较好的柱效，故建立此操作规范。
范围：配合ÄKTA process 系统进行有效的蛋白质纯化操作。
责任人：层析工序操作人员标准操作程序：1 基本术语概念填料因子（Packing Factor, PF ）：指在在装柱过程中，用低流速（如60cm/h ）对填料进行沉降压缩得到的调料高度和最后装柱完成时填料高度（柱高）的比值，GEHC 生产的各种常见填料的PF 参见《GEHC AxiChrom 300-1000 columns User Manual 28-9562-89 Edition AA 》；线性流速（linear flow rate ）：单位时间内液体流经的直线距离，常用cm/h 表示；体积流速（volume flow rate ）：单位时间内液体流经的空间容积，常用ml/min 表示；换算：2 准备工作2.1 检查层析柱的完整性，所带配件，是否水平（用水平仪矫正），是否清洁（如有污染应进行清洗）。
2.2 确定所用填料及其特性、浓度等以DEAE Sepharose Fast Flow填料为例，其填料因子（PF）为1.15，新填料（slurry）浓度为75%（保存于20%乙醇中），耐压3bar。
2.3 确定放大后的工艺参数以XX生化制药股份有限公司的放大工艺为例，中试工艺参数：柱高h=10cm；体积流速v1=3ml/min；柱内径d=1.6cm.即，线性流速v2=v1/s柱=3/(3.14×0.82) cm/min=1.5 cm/min；样品与填料接触时间t=h/v2=10/1.5min=6.67min；在工艺的线性放大中h、v2和t均不变，则可保证样品出峰的位置（洗脱时间）和形状不变。
使用BPG300层析柱进行放大的工艺参数：装柱体积V柱= S柱h=3.14×1.52×1L=7L；装柱需要slurry体积Vslurry =V柱×PF/Cslurry以DEAE Sepharose Fast Flow为填料，则，Vslurry=7×1.15/0.75L=10.73L；装入柱中的slurry高度Lslurry =Vslurry/S柱=10.73/(3.14×1.52)dm=1.52dm=15.2cm.3管路安装3.1 层析柱管道和配件安装3.1.1卸下柱子顶部和底部的盲堵垫圈，旋松密封调节器，用纯水或20%乙醇充分浸润柱内壁和柱头O型圈；3.1.2 用扳手对称卸下支持杆连接到法兰的螺丝，并通过旋转高度调节手柄将柱头旋至最高处，在柱头顶部依次安装压力表和四路二通阀，在柱底安装四路二通阀；3.1.3在顶部四路二通阀上横向连接一根细管，另一端连至ÄKTA process 上端连接口COLUMN TOP ，同时从柱底四路二通阀横向接出一根细管至ÄKTA process 的下端连接口COLUMN BOTTOM 。
色谱柱填料安全操作及保养规程
色谱柱填料安全操作及保养规程1. 前言色谱柱是色谱分析中最为关键的部分，填料是其灵魂。
本文将详细介绍色谱柱填料的安全操作及保养规程，以确保分析结果的准确性和实验安全。
2. 填料的特性色谱柱填料是载体和分离剂的组合，用于分离复杂混合物的成分。
填料的特性直接影响柱子的分离效果和实验结果。
1.毛细管内径。
毛细管内径是影响分离效果的重要因素之一。
填料的粒径应考虑毛细管内径的大小，以防堵塞和影响分离效果。
2.物理与化学性质。
填料的物理化学特性是其性能差异的基础。
硅胶、C18、C8等材料的亲水性和疏水性不同，不同材料适合不同的实验目的和样品性质。
3.质量保证。
填料的质量对实验结果至关重要。
不同品牌、不同批次的填料差异较大，使用原厂商品保证实验结果的准确性。
3. 操作注意事项1.安装和拆卸在安装或拆卸色谱柱时，需要关闭高压阀门并等待海绵塞取内压力缓慢降低，避免剧烈泄压带来的安全隐患。
2.使用前准备使用前需要检查柱子是否密封良好。
使用新柱前应先进行简单的预治疗，以达到最佳性能。
3.清洗柱子清洗是整个分析过程中十分重要的步骤。
在更换样品或分析浓度较高的样品时，需要清洗柱子以避免残留的干扰。
4.注意防护不同填料具有不同的特性，一些材料具有毒性和腐蚀性，应使用不锈钢才能避免腐蚀。
4. 保养与维护1.清洁保养色谱柱是长期使用的；无法保证样品完全干净，颗粒会附着在柱中，使得柱的淤塞。
适当的清洁是避免柱淤塞的重要措施。
使用前要检查柱子是否有微小裂缝，确保柱子安全。
2.贮存风险。
长期存储色谱柱、填料贸然被细菌污染会导致其性能的下降。
因此，柱子、包装袋和填料应存放于干燥、通风的环境中。
3.周期测试尽管厂商已经检查柱子和填料的质量，但仍有些问题可能会在实验期间突然浮现。
经常性的柱子测点和移动平均值是解决这些问题最有效、最经济的方法。
5. 总结色谱柱填料的分类和使用特性是色谱分析的重要组成部分，维护操作好坏直接影响实验结果的准确性和实验的安全性。
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层析柱和填料使用规范
原理凝胶层析是生物化学中一种常用的分离手段，广泛用于蛋白质、核酸、多糖等生物大分子的分离纯化、分子量的测定、脱盐、浓缩等。
本实验室主要有排阻层析和离子交换层析两种。
排阻层析利用生物大分子的相对分子质量差异进行层析分离。
层析介质内部具有立体网状结构，形成孔穴，较大的分子完全被排阻在孔外，只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，流程短，首先流出；较小的分子则完全渗透进入凝胶颗粒内部，流程长，所以最后流出。
离子交换层析将具有交换能力的离子基团在固定相球形介质表面，这些离子基团可以与流动相中的离子发生可逆性离子交换反应而进行分离。
操作规程层析柱和凝胶填料是我们实验室的宝贵财富，为了方便大家使用和规范实验室操作，现将使用规范规定如下，请各位老师和同学务必严格按照操作规程。
1 使用前首先明确自己的分离目的，即要做哪一方面的分离，从而选择合适的凝胶填料，请大家务必查阅文献或者询问老师，同时根据自己的分离要求，选择合适长度和直径的层析柱；
2 征得老师或者负责同学同意后方可进行操作（外室人员务必征求老师同意）；
3 选择好层析柱和填料以后，严格按照填料的要求来操作，包括填料的溶胀、脱气、装柱，期间务必严格按照说明书操作；
4 适当控制上样量,上样以前务必要过0.22µm滤膜；
5 选择合适的流动相，根据胶的性质决定能否用泵加压；
6 使用完毕后，请将层析柱做好处理（离子交换柱请用高浓度氯化钠溶液冲洗，最后用水冲洗），最后将层析柱堵好，以防干胶或者进气泡，同时请做好试验纪录，以便下一位同学用时方便查询使用情况；
7 试验过程中所有用水或者溶液必须经过抽滤和脱气，严防气泡；
8 若在使用过程中发生意外情况，请及时向负责同学反应，及时解决。
本规范解释权归本实验室，疑难问题请咨询老师或负责同学。
负责人：杨波刘斌
2004-12-15。