烟叶有机酸的测定

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硅烷化GC-MS检测烟叶中的有机酸

硅烷化GC-MS检测烟叶中的有机酸

有机酸名称 甲酸 乙酸 丙酸 异丁酸 丁酸 2-甲基丁酸 异戊酸 戊酸 3-甲基戊酸 庚酸 苯甲酸 辛酸 壬酸 癸酸 十二酸 十三酸 十四酸 十五酸 十六酸 十七酸 亚油酸 油酸 亚麻酸 十八酸
线性回归方程 Y=2.98797X-9.71413 Y=2.27091X+7.54751 Y=1.89699X-2.29505 Y=1.37085X-1.98486 Y=1.53381X-2.08013 Y=1.08789X-1.35911 Y=1.27569X-1.35281 Y=1.21913X-1.47973 Y=0.949723X-0.847781 Y=0.891418X-0.529784 Y=3.78874X-4.96709 Y=0.887612X-0.900817 Y=0.668719X-0.368821 Y=0.643596X-0.235014 Y=0.427658X-0.465772 Y=0.342684X-0.317668 Y=0.488738X-0.855997 Y=3.79006X-0.909971 Y=0.340198X+6.46319 Y=0.271687X-0.719057 Y=0.0742686X-0.441064 Y=0.0301678X-0.399988 Y=0.0335118X-0.326350 Y=0.210720X-8.21751
2.2 衍生化试剂对烟样用量选择
衍生化试剂用量对烟样有机酸总量的影响 3400 3200 有机酸总量(ug/ /g) 3000 2800 系列1 2600 2400 2200 2000 5ul 10ul 15ul 20ul 25ul 30ul 衍生化试剂用量 35ul 40ul
2.2 衍生化试剂对烟样用量的选择
由图可知,在衍生化试剂用量8 由图可知,在衍生化试剂用量8个水平因素中, BSTFA用量对有机酸总量(µg/g烟样)的影响有 BSTFA用量对有机酸总量(µg/g烟样)的影响有 明显差异,其用量在5 20µl时,其总量呈指数般 明显差异,其用量在5-20µl时,其总量呈指数般 增加,在20µl时达到了最大值,而在20-40µl时, 增加,在20µl时达到了最大值,而在20-40µl时, 其总量变化则不明显,相对标准偏差仅为0.60%。 其总量变化则不明显,相对标准偏差仅为0.60%。 故认为20µL以上的BSTFA用量即可使得烟样中的 故认为20µL以上的BSTFA用量即可使得烟样中的 有机酸完全衍生化。另因各烟草样品的成分各有 差异,为保证各烟草样品中的有机酸都能完全硅 烷化,选用加入30µL BSTFA为最佳用量。 烷化,选用加入30µL BSTFA为最佳用量。

高效液相色谱法测定烟草中有机酸

高效液相色谱法测定烟草中有机酸

高效液相色谱法测定烟草中有机酸李银科;李海燕;何顺琴;薛景娇;曹靖丽;杨光宇;胡秋芬【摘要】A HPLC method for the determination of organic acids in tobacco was proposed. The sample was extracted with 0. 1 mol · L-1 NaOH solution by high-speed homogenization, and the extract obtained was purified on MCI-GEL reversed phase resin SPE column. The organic acids were separated by gradient elution with mixed solutions of 0. 01 mol · L-1NaH2PO4 of pH 2. 98 and acetonitrile (98+2) in different ratios on ZORBAX Stable Bound column (4. 6 mm× 150 mm, 1.8 μm), and determined at the wavelength of 210 nm with diode array detector (DAD). The main organic acids in tobacco were successfully separated within 12 min, giving values of recovery in the range of 95. 0%-103. 0% and RSD's (n=7) in the range of 1.8%-2. 8%.%提出了高效液相色谱法测定烟草中有机酸含量的方法.烟草样品经0.1mol·L-1氢氧化钠溶液高速匀浆提取,提取液通过装有MCI-GEI,反相树脂固相萃取小柱净化,以ZORBAX Stable Bound色谱柱(4.6mm×150mm,1.8μm)为固定相,0.01mol·L-1磷酸二氢钠溶液(pH2.98)和乙腈(98+2)溶液为流动相梯度洗脱,用二极管阵列检测器于210 nm波长处检测.烟草中主要的有机酸均在12 min内达到基线分离,方法加标回收率在95.0%~103.0%之间,相对标准偏差(n=7)在1.8%~2.8%之间.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2011(047)001【总页数】4页(P62-64,67)【关键词】高效液相色谱法;高速匀浆;有机酸;烟草【作者】李银科;李海燕;何顺琴;薛景娇;曹靖丽;杨光宇;胡秋芬【作者单位】云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学化学与生物技术学院,昆明,650031;云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南省烟草质量监督检测站,昆明,650106;云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学化学与生物技术学院,昆明,650031;云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学化学与生物技术学院,昆明,650031;云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学化学与生物技术学院,昆明,650031;云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南省烟草化学重点实验室,云南烟草科学研究院,昆明,650106;云南民族大学化学与生物技术学院,昆明,650031【正文语种】中文【中图分类】O657.7Abstract:A HPLC method for the determination of organic acids in tobacco was proposed.The sample was extracted with 0.1 mol·L-1NaOH solution by high2speed homogenization,and the extract obtained was purified on MCI2GEL reversed phase resin SPE column.The organic acids were separated by gradient elution with mixed solutions of 0.01 mol·L-1NaH2PO4of p H 2.98 and acetonitrile(98+2)in different ratios on ZORBAX Stable Bound column(4.6 mm×150 mm,1.8μm),and determined at the wavelength of 210 nm with diode array detector(DAD).The main organicacids in tobacco were successfully separated within 12 min,giving values of recovery in the range of 95.0%-103.0%and RSD′s(n=7)in the range of1.8%-2.8%.Keywords:HPLC;High2speed homogenization;Organic acids;Tobacco有机酸是烟草中重要组成成分,以乳酸、柠檬酸、苹果酸、草酸和琥珀酸含量最多,约占烟叶有机酸总量的70%以上。

基质固相分散-高效液相色谱法同时测定烟草中的有机酸

基质固相分散-高效液相色谱法同时测定烟草中的有机酸

D t r n t no i o g nc a is i t b c o b ih p r r n e l ud ee miai fsx r a i cd o a c y hg - e f ma c i i o n o q c r ma o r p y b s d o tx s l h s ip rin h o t g a h a e n ma r oi p a e ds e so i d
p ywt 2 m tao (ot nn .1 o LN H P 4 u e, H 29 )a m b ep a t o t o 20m / nad h h % e n l cn ii 0 0 l a EO f r p .8 s oi h ea a wr e f . L m i h a g m / b l s f a l i n dt t t ae nt 1 m. h rai ai ee ea t na O B X S l B ud( . 5 m, . e c da w vl g o 20a T e o n c s r spr e o R A t e on 4 6× 0m 18 ee e hf 6 g c dw ad Z b a m)
C E hn-u’,M A igmn K N i og , A G G agy U Qn.e H N Z agy I O M n. ig , O G We sn Y N un .u,S igd .
1 l o aoy o e sr ,Yu n n Ac d my o o a c ce c ab rtr fCh mit y n a a e fT b c o S in e,Ku m n 5 1 6,Chn n i g6 0 0 ia; 2 S h o fCh m sr & Mae a ce c c o lo e t i y tr lS in e,Chn s iest fS in ea d T c n lg i ie e Unv ri o ce c n e h oo y, Hee 3 0 6,Chn y fi2 0 2 ia

有机酸(草酸,苹果酸,柠檬酸和高级脂肪酸类物质)测定

有机酸(草酸,苹果酸,柠檬酸和高级脂肪酸类物质)测定

烟草中草酸、苹果酸、柠檬酸和高级脂肪酸类物质的测定方法1.原理利用在酸性条件下的酯化反应和置换反应,使有机酸全部转变成甲酯类化合物,然后用二氯甲烷萃取、离心分离,利用GC/FID进行定量分析检测其中7种有机酸的含量。

2.实验2.1.试剂和仪器(1)试剂浓硫酸(分析纯),甲醇(分析纯),二氯甲烷(分析纯)。

(2)仪器12ml试管(带旋盖);气相色谱仪(带FID检测器);旋转震荡仪;离心机(3000转/分钟);分析天平(感量0.1mg)。

(3)标准品己二酸(内标),草酸,苹果酸,柠檬酸,棕榈酸甲酯,亚油酸甲酯,油酸甲酯,硬脂酸甲酯。

注:15ml玻璃试管应配备相适应的盖子,同时盖子应垫上表层有聚四氟乙烯的橡胶垫。

当橡胶垫有损坏、拱起的情况时,应及时更换新的橡胶垫。

2.2实验方法2.2.1溶液配制(1)10%硫酸-甲醇溶液在冰冷却和搅拌条件下,将50ml浓硫酸缓慢加入450ml甲醇中,摇匀。

(2)己二酸内标液准确称取1.000g己二酸,加入100ml容量瓶中,用甲醇定容至刻度。

(3)标准溶液按下表所示准确称取标样于100ml容量瓶中,用甲醇定容至刻度。

标准溶液组成(单位:mg)注:在计算过程中按分子式及其相应的相对物质的量由高级脂肪酸甲酯的值换算成高级脂肪酸的实际值。

分别取25、50、100、200、500μL标准溶液加入15ml试管中,按2.2.2所述甲酯化程序对其进行甲酯化后,进行GC/FID分析。

根据保留时间定性、内标法定量原理得到各种酸的回归方程。

2.2.2 样品处理准确称取100mg烟末置于15ml试管中,加入2ml 10%硫酸-甲醇溶液和100μL己二酸内标液,旋紧旋盖,震荡5min,室温放置过夜(24h±2h),进行甲酯化反应。

然后加入4ml 去离子水,4ml二氯甲烷,旋紧旋盖,震振荡萃取5min后离心(3000转/分钟,离心5min),取下层清夜进行GC分析。

每个样品应平行测定两次。

烟叶有机酸的测定

烟叶有机酸的测定

烟叶有机酸存在特点及其测定意义一、存在特点:烤烟中有机酸总量为3-4%,C10以下的总挥发性有机酸含量不到1%;含量较多的有机酸是苹果酸,柠檬酸和草酸等多元酸。

有机酸在叶片中以游离态和结合态形式存在,主要是和K Na Ca Mg 生物碱结合成盐,可以用热水将烟叶中的游离态和结合态有机酸提取出来。

二、测定意义:1. 有机酸可以增加烟气酸性,使烟气变得甜润舒适2. 如果烟叶中挥发性含量过高,对喉部会产生刺激性。

烟叶中有机酸总量的测定烟叶中有机酸总量的测定方法有酸碱中和滴定法和自动电位滴定法。

一、酸碱中和滴定法1、原理:用热水将样品中的有机酸全部提取出来,并用标准NaOH溶液滴定,根据样品消耗的NaOH的量,计算出样品中有机酸含量。

以酚酞为指示剂,溶液呈现为红色即为滴定终点。

2、操作步骤:15-20g样品,于250mL容量瓶中,加150mL蒸馏水,75-80℃水浴加热0.5h,冷却,定容。

―――用干燥滤纸过虑,―――汲取滤液50mL于三角瓶内,加酚酞指示剂3-5D,用0.1M的NaOH标准溶液滴定至溶液出现为红色为止。

同时作空白对照,并滴定空白对照。

3、结果计算:总酸%=(V-V0) MNaOH*K*酚取倍数/[W(1-含水量)V:滴定待测液消耗的NaOH的mL数V0:滴定空白对照消耗的NaOHmL数K:换算为适当的酸的系数乳酸:0.09,苹果酸:0.067;醋酸:0.06:酒石酸:0.075;柠檬酸:0.07例:0.067:1mmolNaOH标准溶液相当于苹果酸的克数,其余类推。

4、注意事项:①如果滤液颜色过深,可以在滴定前往三角瓶中加入约同体积的蒸馏水稀释②滴定用去的0.1M NaOH标液不得少于3mL,否则误差太大③所用的蒸馏水必须无CO2,因此全部过程所用蒸馏水都需要先煮沸5-10min,并冷却后再用。

④不可以用活性炭脱色,否则大部分的有机酸都被活性炭吸附,使测定结果明显偏低,大概只能测出30%左右的有机酸。

气相-质谱法测定烟草薄片中多元有机酸

气相-质谱法测定烟草薄片中多元有机酸
a c i d s i n t o b a c c o s h e e t . Ke y wo r d s : To b a c c o s h e e t ; P 0 l y b a s i c a c i d s ; P— t o l u e n e s u l f o n i c a c i d; Ga s c h r o ma t o g r a p h y ma s s s p e c t r o me t y r
p o l y b a s i c a c i d s we r e o p t i mi z e d, p o l y b a s i c a c i d s c o n t e n t s i n t o b a c c o s h e e t we r e d e t e r mi n e d b y g a s c h r o ma t o g r a p h y ma s s s p e c t r o me t y r me t h o d . T h e r e s u l t s s h o we d t h e me t h o d h a d g o o d r e p r o d u c i b i l i t y a n d a c c u r a c y. t h 2 3 0 0 0 )

要: 该研 究以对甲苯磺酸为甲酯化催化剂 , 对甲酯化 的各种条件进行优化, 采用气相/ 质谱 法对烟草薄片
中的 多元有机酸含 量进行 测定。试验 结果表 明 , 采用该方法法重复测定的变异 系数较 小, 平均回收率在
9 6 . 2 6 %~ 1 0 3 . 3 7 %, 具有较好的重现性和准确性 , 适用于烟草薄片中多元有机酸含量的测定。 关键词: 烟草薄片; 多元酸; 对甲苯磺酸; 气相 色谱/ 质谱联 用法

烟叶中有机酸总量的微波测定法

烟叶中有机酸总量的微波测定法

作者: 夏秀花;小楷;卢泽
作者机构: [1]开封电大;[2]河南电大;[3]河南省医药学校
出版物刊名: 河南广播电视大学学报
页码: 6-8页
主题词: 微波加热 有机酸总量 烟叶 浸提
摘要: 利用微波加热技术,在密闭容器内通过压力浸提试样,能大大加快分析速度。

本文介绍了一种利用微波浸提快速测定烟叶有机酸总量的新方法,讨论了微波功率、时间等因素对分析结果的影响,并与标准分析方法相对照,经F-检验法及t-检验法检验,没有显著性差异,结果的相对标准偏差≤4.2%,较令人满意。

该法具有省时、省力、经济、不污染环境、宜于批量分析、便于普及推广等优点,为烟叶中有机酸总量的测定,提供了一种快速、准确、简便易行的分析方法.。

再造烟叶烟气中29种有机酸的定量测定

再造烟叶烟气中29种有机酸的定量测定

再造烟叶烟气中29种有机酸的定量测定
李伟雪;顾丽莉;杨发容;刘洋;蔡洁云;王惠平
【期刊名称】《烟草科技》
【年(卷),期】2024(57)1
【摘要】为考察不同种类再造烟叶烟气中有机酸质量分数的差异,搭建了管式烟气捕集装置,建立了再造烟叶烟气中29种有机酸的定量分析方法,并采用硅烷化衍生联合GC-MS/MS技术测定不同条件下烟气中有机酸的释放量,对不同类型初烤烟叶及由其制成的再造烟叶中有机酸的质量分数进行了比较研究。

结果表明:(1)29种有机酸的检出限为0.83~17.57 ng/g,不同添加水平的加标回收率在
85.68%~108.32%范围内,RSD值在1.19%~7.66%之间,该方法适用于烟草中有机酸的定量检测。

(2)利用该方法在不同温度和环境氛围下对初烤烟叶和再造烟叶进行检测,发现再造烟叶中的有机酸总质量分数均大于初烤烟叶;有氧氛围有利于有机酸的释放,且加热温度为250~300℃时有机酸的释放量最大。

【总页数】10页(P13-21)
【作者】李伟雪;顾丽莉;杨发容;刘洋;蔡洁云;王惠平
【作者单位】昆明理工大学化学工程学院;云南省烟草质量监督检测站
【正文语种】中文
【中图分类】TS411.2
【相关文献】
1.近红外光谱法同时测定卷烟配方中膨胀烟梗颗粒和再造烟叶的研究
2.基于X射线法无损测定再造烟叶基片的定量
3.在线固相萃取-离子色谱法测定再造烟叶浆料中的17种有机酸
4.再造烟叶烟梗及烟末原料含水率测定
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烟草中非挥发性有机酸及高级脂肪酸的快速分析方法概要

烟草中非挥发性有机酸及高级脂肪酸的快速分析方法概要

烟草中非挥发性有机酸及高级脂肪酸的快速分析方法沈轶刘百战王瑾孙凯健[上海烟草(集团)公司]摘要烟草中的有机酸及相关衍生物是影响烟草香味的主要化学成分,对于其中非挥发性有机酸及高级脂肪酸的分析一直存在着样品处理复杂、稳定性差等不足。

本文利用对烟草制品进行连续甲酯衍生化、三氯甲烷萃取等步骤,利用GC/FID对其中的非挥发性有机酸及高级脂肪酸进行定量分析,结果表明,该方法重复性、回收率等良好,具有一定的应用价值。

关键词甲酯衍生化非挥发性有机酸高级脂肪酸植物中存在多种有机酸,烟草也不例外。

作为影响烟草香味的主要化学成分,对其的研究对提高烟草品质显得十分重要[1]。

一般认为,烟叶中有机酸可分为挥发性和非挥发性(除氨基酸外)以及部分高级脂肪酸,相对含量较高的多为非挥发性有机酸中的二元酸和三元酸,以苹果酸、柠檬酸、草酸和丙二酸的含量相对较高(在烤烟中约占5%~18%)[2]。

以往研究表明,一般情况下,这些非挥发性有机酸的含量高意味着香烟灰份含量大,吃味差,即与燃吸品质呈反关系。

而对于高级脂肪酸,饱和高级脂肪酸及其甲酯类能使烟气柔滑,但不饱和高级脂肪酸及其甲酯在抽吸时会产生己醛、己烯醛等青杂气物质。

故对于烟草中非挥发性有机酸、高级脂肪酸及其衍生物的测定已逐渐成为国内外烟草行业的质量控制内容。

对于非挥发性有机酸的分析检测,一般可以采用高效液相色谱、离子色谱色谱、毛细管电泳等液相分离分析技术进行分析检测,但由于烟草中的化学成分过于复杂,采用液相分离和分析技术要求较高,前处理的条件和过程并不简易[2~6]。

另外,由于烟叶中有机酸部分是游离存在的,大部分是以碱金属盐或有机碱盐的形式存在,采用衍生化处理,再进行气相色谱分离分析的方法可以使检测的准确性更高,且采用此技术还可以对烟草中的高级脂肪酸进行分离分析。

现阶段的对于非挥发有机酸和高级脂肪酸的衍生化方法主要分为硅烷化、甲酯化两大类,可采用的衍生化试剂也相对较多,但都存在前处理过程复杂、衍生化试剂不稳定、试剂耗用大等不足之处[7~11]。

烟草及烟草制品棕榈酸亚油酸亚麻酸及硬脂酸的测定气相色谱火焰离子化检测器法标准编制说明

烟草及烟草制品棕榈酸亚油酸亚麻酸及硬脂酸的测定气相色谱火焰离子化检测器法标准编制说明

烟草及烟草制品棕榈酸亚油酸亚麻酸及硬脂酸的测定气相色谱火焰离子化检测器法标准编制说明《烟草及烟草制品棕榈酸、亚油酸、亚麻酸及硬脂酸的测定气相色谱-火焰离子化检测器法》标准编制说明贵州省烟草科学研究院2017年5月目录一、编制的目的和意义...................................................................... .................. 2 二、任务来源及编制工作过程...................................................................... ...... 2 三、标准制定原则...................................................................... .......................... 3 四、标准的构架和主要内容及指标确定的依据 (4)(一)标准的构架...................................................................... (4)(二)标准的适用范围...................................................................... . (4)(三)标准的研制内容...................................................................... . (4)(1)前言...................................................................... .. (4)(2)材料与试剂...................................................................... .. (5)(3)前处理方法...................................................................... .. (5)(4)色谱检测方法...................................................................... . (6)(5)前处理条件优化...................................................................... (6)(6)衍生化产物稳定性研究......................................................................8(四)指标确定的依据...................................................................... . (8)(1)定量参数验证...................................................................... . (8)(2)标准应用...................................................................... ...................... 10 五、与现行相关法律、法规、规章及相关标准,特别是强制性标准的协调性.................................................................... (12)六、专利及涉及知识产权...................................................................... ............ 12 七、分歧意见的处理经过...................................................................... ............ 13 八、标准作为强制性或推荐性标准的建议...................................................... 13 九、贯彻标准的要求和措施建议......................................................................13 十、废止现行有关标准的建议...................................................................... .... 13 十一、其他应予说明的事项...................................................................... ........ 13 十二、推广应用的预期效果...................................................................... ........ 14 十三、标准水平分析...................................................................... .. (14)1一、编制的目的和意义有机酸是一类含有羧基的化学物质,具有抑菌、抗病毒、增加冠脉流量、抑制脑组织脂质过氧化物生成、消炎、抗突变、抗癌、软化血管,促进钙、铁元素的吸收、帮助胃液消化脂肪和蛋白质等生理功能,对许多食品的风味口感和营养价值都有重大的影响,因此一直备受关注。

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烟叶有机酸存在特点及其测定意义
一、存在特点:
烤烟中有机酸总量为3-4%,C10以下的总挥发性有机酸含量不到1%;含量较多的有机酸是苹果酸,柠檬酸和草酸等多元酸。

有机酸在叶片中以游离态和结合态形式存在,主要是和K Na Ca Mg 生物碱结合成盐,可以用热水将烟叶中的游离态和结合态有机酸提取出来。

二、测定意义:
1. 有机酸可以增加烟气酸性,使烟气变得甜润舒适
2. 如果烟叶中挥发性含量过高,对喉部会产生刺激性。

烟叶中有机酸总量的测定
烟叶中有机酸总量的测定方法有酸碱中和滴定法和自动电位滴定法。

一、酸碱中和滴定法
1、原理:用热水将样品中的有机酸全部提取出来,并用标准NaOH溶液滴定,根据样品消耗的NaOH的量,计算出样品中有机酸含量。

以酚酞为指示剂,溶液呈现为红色即为滴定终点。

2、操作步骤:15-20g样品,于250mL容量瓶中,加150mL蒸馏水,75-80℃水浴加热0.5h,冷却,定容。

―――用干燥滤纸过虑,―――汲取滤液50mL于三角瓶内,加酚酞指示剂3-5D,用0.1M的NaOH标准溶液滴定至溶液出现为红色为止。

同时作空白对照,并滴定空白对照。

3、结果计算:
总酸%=(V-V0) MNaOH*K*酚取倍数/[W(1-含水量)
V:滴定待测液消耗的NaOH的mL数
V0:滴定空白对照消耗的NaOHmL数
K:换算为适当的酸的系数
乳酸:0.09,苹果酸:0.067;醋酸:0.06:酒石酸:0.075;柠檬酸:0.07
例:0.067:1mmolNaOH标准溶液相当于苹果酸的克数,其余类推。

4、注意事项:
①如果滤液颜色过深,可以在滴定前往三角瓶中加入约同体积的蒸馏水稀释
②滴定用去的0.1M NaOH标液不得少于3mL,否则误差太大
③所用的蒸馏水必须无CO2,因此全部过程所用蒸馏水都需要先煮沸5-10min,并冷却后再用。

④不可以用活性炭脱色,否则大部分的有机酸都被活性炭吸附,使测定结果明显偏低,大概只能测出30%左右的有机酸。

缺点:待测液带颜色,指示剂确定滴定终点很困难。

因此改用电位滴定法。

电位滴定法是一种用电位法确定滴定终点的滴定分析方法。

电位滴定包括手动电位滴定和自动电位滴定。

二、自动电位滴定
1、原理:待测液的电动势E随滴定溶液(NaOH)的加入而改变,通过对电动势的测量求得滴定终点时所用滴定溶液的量,并进一步计算出待测液中有机酸含量
2、操作步骤:
①待测液提取(同酸碱滴定法)
②测定:取一定量的待测液,边用电磁搅拌边滴加NaOH溶液,同时连续检测溶液的pH值,在滴定终点附近,每次滴加NaOH量不超过0.1mL。

以滴定用NaOH量为横坐标,pH为纵坐标,作成中和滴定曲线。

根据(1)E-V曲线法或(2)一级微商法或(3)二级微商法求出确定滴定终点,并求出终点对应的NaOH溶液体积。

3、计算公式:同酸碱滴定法
4、注意事项:
①溶液pH变化和电动势变化之间有一确定的关系,故可以用pH代替E作纵坐标
②对于烟草中有机酸的电位滴定来说,pH=8.2即为滴定终点
③以上滴定过程如果在自动电位滴定仪上进行,则不需自己计算判断滴定终点,机器会在终点时自动停止滴定,并给出对应的NaOH用量
④如果没有自动电位滴定仪,可以用酸度计(pH计),测量滴定体系的pH值,在pH8.2时停止滴定,并记录消耗的NaOH体积即可。

烟叶中总挥发性有机酸测定
总挥发性有机酸测定方法有直接法和间接法。

直接法:通过水蒸气蒸馏或溶剂萃取把挥发性酸分离出来,然后用标准碱滴定。

间接法:将挥发性酸蒸馏出去,然后直接滴定不挥发性酸,根据:总酸-不挥发性酸=挥发性酸。

直接法测定挥发性酸
1、原理:在磷酸介质中将挥发性酸蒸发出来,用标准NaOH溶液滴定,根据标准NaOH用量,计算出样品中的挥发性酸含量。

2、操作步骤:
①总挥发性有机酸提取:5-10g烟样,于250mL圆底烧瓶中,加50mL水,3mL磷酸(10%),使结合态的挥发酸析出。

接通蒸汽发生装置,开始蒸馏,流出液用500mL三角瓶承接,流出液达到300mL左右时停止蒸馏。

另作一空白对照。

②滴定:流出液中加3-4D酚酞指示剂(此时为无色),加热到60-65℃左右时,用0.01M 的标准NaOH滴定,边滴定边搅拌,溶液出现微红色0.5min内不退色,就达到滴定终点。

记录NaOH用量V1,同时滴定空白对照,并记录NaOH用量V2。

3、结果计算
总挥发酸含量%=(V1-V2)*MNaOH*0.06*100/[W(1-含水量)]
0.06:1mmol醋酸相当于0.06g
V1:滴定待测液用NaOH体积
V2空白滴定用NaOH体积
注意事项:
①蒸汽发生装置气密性要好,不能漏气,蒸汽流要稳定,一批样品间的蒸汽流速要一致。

要求所用电炉可调。

整个蒸馏过程大约40min
②滴定温度不能超过65℃,否则易造成酸的挥发。

③挥发性有机酸是弱酸,即使加热到60℃,酸碱滴定也难以瞬间完成
④滴定终点颜色变化很不敏锐。

⑤所用蒸馏水全部为无CO2的蒸馏水。

改进:用0.1M的NaOH溶液5mL,加水50mL,承接流出液,然后用标准HCl返滴定多于的NaOH。

指示剂改为1-萘酚酞-酚酞指示剂,终点颜色为浅绿色。

改进的方法中需要两种标准溶液:0.1M NaOH和0.1M HCl溶液。

优点是强酸和强碱中和滴定反应速度快,终点变化较为明显。

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