过氧化氢(H2O2)检测试剂盒(硫酸钛微板法)

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植物过氧化氢(H2O2)说明书

植物过氧化氢（H2O2）酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞上清及相关液体样本中过氧化氢（H2O2）的含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢（H2O2）水平。用纯化的植物过氧化氢（H2O2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢（H2O2）,再与HRP标记的过氧化氢（H2O2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢（H2O2）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢（H2O2）浓度。

样本处理及要求：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上

清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心

20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程

中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/

分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备

过氧化氢（H2O2）含量检测试剂盒说明书

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过氧化氢（H 2O 2）含量检测试剂盒说明书

微量法

货号：BC3595规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格

保存条件试剂一液体100 mL×1瓶（自备）

4℃保存试剂二粉剂×1瓶4℃保存试剂三液体6 mL×1瓶4℃保存试剂四液体30 mL×1瓶4℃保存标准品

液体1 mL×1支

4℃保存

溶液的配制：

1、试剂一：丙酮自备。

2、试剂二：临用前加入3 mL 浓盐酸充分溶解备用，用不完的试剂4℃保存。

3、标准品：1 mmol/mL H 2O 2标准液。产品说明：

H 2O 2是生物体内最常见的活性氧分子，主要由SOD 和XOD 等催化产生，由CAT 和POD 等催化降解。H 2O 2不仅是重要的活性氧之一，也是活性氧相互转化的枢纽。一方面，H 2O 2可以直接或间接地氧化细胞内核酸，蛋白质等生物大分子，并使细胞膜遭受损害，从而加速细胞的衰老和解体；另一方面H 2O 2也是许多氧化应激反应中的关键调节因子。

2O 2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm 有特征吸收。技术指标：

最低检出限：0.0027 μmol/mL 线性范围：0.0195-3 μmol/mL

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、丙酮、浓盐酸、研钵/匀浆器和冰。操作步骤：

双氧水中过氧化氢含量的检测方案

双氧水（H2O2）是一种常见的化学物质，广泛应用于医疗、消毒、漂

白等领域。检测双氧水中过氧化氢（H2O2）的含量对于确保产品质量以及

确保使用安全非常重要。下面将介绍一种用于检测双氧水中过氧化氢含量

的方案。

1.原理

过氧化氢在酸性条件下可以与第一类还原物质反应，生成氧气（O2）。该反应是比较常见的，利用这个反应原理来检测双氧水中过氧化氢的含量。

2.实验步骤

1)准备试剂和仪器

-过氧化氢标准溶液：挑选适当浓度的过氧化氢标准溶液作为参比组。

-酸性还原剂：比如铁离子盐酸溶液（Fe2+）。

-p-苯二胺指示剂溶液：溶解适量的p-苯二胺于盐酸中得到的溶液。

-硫酸：为调节试剂的酸性pH值。

- 过氧化氢蓝：ph=7的溶液，可作为指示剂。

-吸光度计：用于测量试剂反应后的吸光度。

2)校准吸光度计

- 将吸光度计设置为所需的波长（通常为240-600 nm），然后进行

零点校准。

3)准备标准曲线

-取一系列含有不同过氧化氢浓度的标准溶液，进行稀释。

-将每种标准溶液分别加入酸性还原剂和p-苯二胺指示剂溶液中。

-分别测量每种标准溶液反应后的吸光度，并记录下来。

-将各标准溶液的吸光度值与其对应的过氧化氢浓度建立标准曲线。

4)检测样品

-取一定量的双氧水样品，加入酸性还原剂和p-苯二胺指示剂溶液中。

-分别测量样品反应后的吸光度，并记录下来。

5)计算样品中过氧化氢的含量

-使用标准曲线，找到样品吸光度对应的过氧化氢浓度。

-根据样品的体积和稀释倍数，计算出样品中过氧化氢的实际含量。

3.注意事项

1)试剂的浓度和比例要准确，以确保反应的可靠性和准确性。

过氧化氢酶(CAT)试剂盒说明书

一、测定原理：

过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止，剩余的H2O2与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物，在405nm 处测定其变化量，可计算出CAT 的活力。试剂一(ml)

二、试剂组成与配制：

试剂一：液体100 ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂二：底物液体10 ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂三：显色粉剂×1瓶，4℃保存6个月。加双蒸水至100 ml 溶解，4℃保存1个月。（如果底部有不溶粉末沉淀，直接取上清使用，不影响测定结果）

试剂四：液体10 ml×1瓶，4℃保存6个月。天冷时会凝固，临用前37℃水浴至透明方可使用。

三、组织样本的检测

1、组织匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量(g)：体积(ml)=1：9的比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下，制备成10%的组织匀浆，2500转/分离心10分钟，取上清，再用生理盐水稀释成最佳取样浓度，待测(最佳取样浓度摸索减附录)。

混匀，波长405nm ，光径0.5cm ，双蒸水调零，测定各管吸光度值。

注：一般样本没有高脂等导致显著差异情况，对照管的样本更换成双蒸水，做1-2管对照即可。如需做样本自身对照，则试剂盒所测定样本数量减至48样。

3.组织中CAT 活力的计算：

（1）定义：每毫克组织蛋白每秒种分解1umol 的H2O2的量为一个活力单位。

（2）计算公式：

)ml /mgprot (601271)OD -OD ()mgprot /U (CAT *待测样本蛋白浓度取样量

值测定值对照活力组织匀浆中

工作场所空气中过氧化氢的硫酸氧钛分光光度测定法

工作场所空气中过氧化氢的硫酸氧钛分光光度测定法引言

过氧化氢（H2O2）是一种广泛应用于工业和医疗领域的化学物质，然而，高浓度的过氧化氢可能对工作人员的健康造成危害。因此，准确测定工作场所空气中过氧化氢的浓度对于控制风险和保护工作人员的健康非常重要。本文将详细介绍一种常用的方法——硫酸氧钛分光光度测定法，用于测定工作场所空气中过氧化氢的浓度。

一、原理

硫酸氧钛分光光度法利用过氧化氢与硫酸氧钛反应产生深红色的过氧钛络合物，并通过分光光度计测量络合物的吸光度来确定过氧化氢的浓度。该方法基于过氧化氢与硫酸氧钛在酸性条件下发生氧化还原反应，生成过氧钛络合物的特征吸收峰。

二、实验步骤

1.样品采集：使用合适的气体采样装置，将工作场所空气中的样品收集到样品瓶中。确保采样过程中避免样品受到其他干扰物污染。

2.样品预处理：将收集到的样品与硫酸氧钛试剂在酸性条件下进行反应，并形成红色过氧钛络合物。此时，过氧化氢的浓度与过氧钛络合物的吸光度成正比关系。

3.分光光度计测量：使用可见光或紫外-可见光分光光度计，设置波长为适当的范围（通常为510nm），并调整仪器至零吸光度。然后，将经过反应的样品溶液放

入光度池中，测量吸光度值。

4.标准曲线绘制：准备一系列不同浓度的过氧化氢标准溶液，分别进行样品预处理和分光光度计测量。根据各标准溶液的吸光度值，绘制标准曲线。

5.浓度计算：根据标准曲线，将实际样品的吸光度值转换为过氧化氢的浓度。

三、注意事项

1.保持实验环境清洁，避免其他物质的干扰。

2.使用纯净的试剂和溶剂，并校正仪器零点。

植物过氧化氢(H2O2)说明书

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植物过氧化氢(H2O2)酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒使用说明书

本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及相关液体样本中过氧化氢(H2O2)的含量。

实验原理：

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物过氧化氢(H2O2)水平。用纯化的植物过氧化氢(H2O2)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入过氧化氢(H2O2)，再与HRP标记的过氧化氢(H2O2)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的过氧化氢(H2O2)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物过氧化氢(H2O2)浓度。

试剂盒组成：

样本处理及要求：

1. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存

备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆

器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

2. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上

进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

3. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤：

1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标

过氧化氢酶(CAT)试剂盒说明书

一、测定原理：

过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止，剩余的H2O2与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物，在405nm处测定其变化量，可计算出CAT的活力。试剂一(ml)

二、试剂组成与配制：

试剂一：液体100 ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂二：底物液体10 ml×1瓶，4℃保存6个月。

试剂三：显色粉剂×1瓶，4℃保存6个月。加双蒸水至100 ml溶解，4℃保存1个月。（如果底部有不溶粉末沉淀，直接取上清使用，不影响测定结果）

试剂四：液体10 ml×1瓶，4℃保存6个月。天冷时会凝固，临用前37℃水浴至透明方可使用。

三、组织样本的检测

2、操作表：

混匀，波长405nm ，光径0.5cm ，双蒸水调零，测定各管吸光度值。

3.组织中CAT 活力的计算：

（1）定义：每毫克组织蛋白每秒种分解1umol 的H2O2的量为一个活力单位。（2）计算公式： )

ml /mgprot (601

271)OD -OD ()mgprot /U (CAT *待测样本蛋白浓度取样量

过氧化氢分光光度法测定钛量

引言：

过氧化氢分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定各种物质的含量。本文将以过氧化氢分光光度法测定钛量为例，介绍该方法的原理、仪器设备和操作步骤，并对其优缺点进行分析。

一、原理：

过氧化氢分光光度法是基于物质吸收光的比例与其浓度成正比的原理。钛离子在适当的条件下与过氧化氢发生氧化反应生成过氧钛酸，过氧钛酸与铁离子在酸性溶液中形成紫色络合物，该络合物在紫外-可见光区域有特征性的吸收峰。根据吸光度与溶液中钛离子浓度的关系，可以测定钛量。

二、仪器设备：

1. 分光光度计：用于测量溶液的吸光度。

2. 试剂：包括过氧化氢、铁离子和其他辅助试剂。

三、操作步骤：

1. 样品制备：将待测样品溶解于适当的溶剂中，使得溶液中钛离子的浓度在分析范围内。

2. 标准曲线的绘制：取一系列不同浓度的钛标准溶液，分别加入适量的过氧化氢和铁离子，制备出一系列含有过氧钛酸络合物的溶液，并测定其吸光度。根据吸光度与浓度的关系，绘制标准曲线。

3. 测定样品的吸光度：将待测样品按照相同的方法处理，并测定其吸光度。

4. 计算样品中钛的浓度：根据标准曲线，确定待测样品中钛的浓度。

四、优缺点分析：

1. 优点：过氧化氢分光光度法测定钛量简单、快速，结果准确可靠。该方法具有较高的灵敏度和选择性，适用于各种样品类型的分析。

2. 缺点：该方法对样品的前处理要求较高，需要将钛离子与过氧化氢和铁离子反应生成络合物，因此可能会受到其他物质的干扰。此外，过氧化氢的稳定性较差，容易分解，因此需要在实验过程中保持其稳定性。

过氧化氢(双氧水)快速检测卡说明书

过氧化氢（双氧水）快速检测卡说明书

【产品名称】

产品名称：过氧化氢（双氧水）快速检测卡

英文名称：Hydrogen peroxide（H2O2）Rapid Test Card

【产品简介】

过氧化氢具有强烈刺激性，会损害消化道黏膜，还存在致癌、致畸、致突变风险。有些不法商贩在食品加工中为了漂白食品以次充好而使用含有有毒物质的工业用过氧化氢，危害消费者健康。国家标准已经禁止过氧化氢作为食品添加剂和食品加工助剂使用。

本产品为快速检测牛奶、饮料、豆腐干、鸡翅鸡爪、水产品和水发产品中过氧化氢残留量的试纸卡，检测过程只需3分钟左右，适用于家庭、超市、食堂、食品企业及检测机构的快速筛查。

【包装规格】10次/盒。

【产品组成】过氧化氢快速检测卡（10条）；干燥剂（1袋）；标准色卡（1张）。

【检测原理】食品中的过氧化氢与本试纸卡上的试剂发生显色反应，颜色深浅反映了过氧化氢含量的高低。

【检测限】

本产品检出限为0.5mg/L。

根据《食品添加剂使用标准GB 2760-2011》过氧化氢在食品中不得检出，即食品中过氧化氢含量高于提供的检测方法能够检测出的最低量，该食品就不合格。

【使用方法】

1、准备好少量待测液（牛奶、豆腐干或水发水产品浸泡液）。

2、从试纸筒中取出一条试纸卡，将试纸卡白色反应区在待测液中浸润2秒钟后取出。

3、室温环境反应半分钟后与标准色卡比较定量。

【注意事项】

1、取出试纸卡后请及时盖好筒盖；未使用的试纸卡需放回筒内，盖好筒盖。

2、固态样品检测需要浸泡或溶解；粘稠或深色样品检测需要适当稀释。

3、本试纸卡为一次性产品，请勿重复使用。

过氧化氢酶试剂盒使用说明

微量法

货号:BC0205规格:100T/96S 产品内容：

提取液：100mL×1瓶，4℃保存；工作液：24mL×1瓶，4℃保存；产品简介：

CAT(EC 1.11.1.6)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是最主要的H 2O 2清除酶，在活性氧清除系统中具有重要作用。

H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，CAT 能够分解H 2O 2，使反应溶液240nm 下的吸光度随反应时间而下降，根据吸光度的变化率可计算出CAT 活性。操作步骤：一、粗酶液提取：

1、细菌、细胞或组织样品的制备

收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1ML 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率20%或200W，超声3秒，间隔10秒。重复30次）；8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

称取约0.1g 组织，加入1mL 提取液进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10分钟，取上清，置冰上待测。

2、血清（浆）样品：直接检测。二、操作步骤

1、分光光度计或酶标仪预热30min，调节波长到240nm，蒸馏水调零。

2、测定前将CAT 检测工作液37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴10min。

3、加入10μL 样本和190μL 工作液，混匀5s 或者在酶标仪上振动5s 并立即计时，记录240nm 下的初始吸光值A1和1min 后的吸光值A2。计算ΔA=A1-A2三、CAT 活性计算（用石英比色皿）：

1、血清（浆）CAT 活力的计算:

单位的定义：每毫升血清（浆）在反应体系中每分钟催化1nmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。

过氧化氢的硫酸钛分光光度法

过氧化氢为无色、无气味的液体，具有苦涩味、易分解为水和氧气，是一种强氧化剂。劳动

场所多使用过氧化氢剂杀菌消毒，工业中多用于淀粉增白，或者作为强氧化剂用于食品或者

食品包装消毒杀菌，还可以用于液体燃料推进剂等。毒理学研究证实，一定量的过氧化氢对

人体黏膜有强烈的刺激损伤作用。因而对作业场所空气中过氧化氢的检测意义重大。

目前检测作业场所空气中过氧化氢的标准方法为四氯化钛分光光度法（GBZ/T 160.32－2004）[１]，该方法中显色剂四氯化钛具遇水产生而反应不易保存，实验中制备的钛试剂有效浓度

过低导致测量结果偏差较大，重现性不好。另外四氯化钛为需进口，费用昂贵货期长，钛试

剂制备过程中由于在相对较小封闭空间内（容量瓶里）迅速剧烈反应产生大量的气体和热量

容易引发安全事故，因而对于操作者的操作要求很高而限制了实际应用。针对这问题，通过

查找资料制定检测方案[２]，应用硫酸钛为显色剂，并实际应用对比，得到了良好的效果。1.1仪器

4.2.1大型气泡吸收管。

4.2.2空气采样器，0～3L/min。

4.2.3刻度试管，10ml。

4.2.4分光光度计。

1.2试剂

实验用水为蒸馏水。

4.3.1硫酸，ρ20＝1.84g/ml，优级纯。

4.3.2盐酸，ρ20＝1.18g/ml。

4.3.3盐酸溶液：100ml盐酸加入到900ml水中。

4.3.4钛试剂：在100 ml高脚烧杯中，加入10ml硫酸溶液，称量后，加入约42g硫酸钛，搅

拌溶解，如未溶解完全加入适量硫酸溶液；再用硫酸溶液稀释定容成1ml含50mg钛的溶液。

体外测过氧化氢的方法

测定体外过氧化氢（H2O2）含量的方法有很多种。下面将介绍几种常

见的方法，包括化学法、电化学法和光谱法等。

1.化学法

化学法是一种常见且简便的测定H2O2浓度的方法。其中一个典型的

方法是使用二氧化钛作为催化剂，将H2O2与酚红反应生成带正电荷的单

氧根离子（O2-），通过测定溶液颜色的可见光吸收进行定量分析。

另一个常用的化学法是使用酶催化反应。常见的是使用过氧化物酶

（如过氧化氢酶或葡萄糖氧化酶）将H2O2催化分解为氧气和水，然后通

过检测氧气的释放量或者使用指示剂进行定量分析。

2.电化学法

电化学法是利用电化学技术测定H2O2含量的方法。常用的是利用电

流或电势变化与测定物质浓度之间的关系进行定量分析。

一种典型的电化学法是使用电化学传感器，如以金属电极为基础的氧

气传感器或有机导电聚合物修饰电极。这些传感器通过测定H2O2氧化还

原反应所带来的电流或电势变化，来间接测定H2O2的含量。

3.光谱法

光谱法是利用吸收、荧光或散射等光学性质来测定H2O2浓度的方法。

一种常见的光谱法是紫外可见分光光度法。该方法基于H2O2对紫外

或可见光的吸收，通过测定溶液的吸光度来定量分析。

另一种常见的光谱法是荧光分析法。该方法基于H2O2对一些荧光试剂的荧光强度的影响，通过测定荧光信号的强度变化来定量分析。

除了上述的方法，还有很多其他的方法可以用于测定H2O2含量，如化学发光法、高效液相色谱法等，每种方法都有其优缺点和适用范围。选择合适的方法应根据具体需要、实验条件和测量灵敏度来决定。

总之，测定体外H2O2含量的方法有很多种，包括化学法、电化学法和光谱法等。每种方法都有其独特的优势和适用范围，在选择方法时需要综合考虑实验条件、测量灵敏度和样品特性等因素。

过氧化氢含量测定

一、实验原理

过氧化氢与硫酸钛反应生成过氧化物-钛复合物黄色沉淀，可被硫酸溶解后，在415nm波长下比色测定。在一定范围内，其颜色深浅与过氧化氢浓度呈线性关系。

二、仪器与试剂

仪器和用具：研钵；移液管0.2ml×2支，5ml×1支；容量瓶10ml×7个，离心管5ml ×8支；离心机；分光光度计。

试剂：100μmol/L H2O2丙酮试剂：取30%分析纯H2O2 57μl，溶于100ml，再稀释100倍；2mol/L硫酸；5%（W/V）硫酸钛；丙酮；浓氨水。

三、实验方法

1，制作标准曲线：取10ml离心管，编号

试剂 1 2 3 4 5 6 7 100umol/L H2O2 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

4℃下预冷丙酮 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 0 5%硫酸钛 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

浓氨水 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1

4000r/min 离心5min，弃上清液留沉淀，然后再向每管中加2mol硫酸 5ml，摇匀，待沉淀溶解后，在415nm波长下比色，测其吸光值，绘制标准曲线。

2，样品提取与测定

（1）称取小麦叶片1g左右，剪碎加2ml预冷丙酮和少量石英砂，研磨成匀浆后，转入离心管中，再用5ml预冷丙酮洗研钵，加入离心管中，4000r/min 离心5min，弃上清液即为样品提取液。

（2）取样品提取液1ml，弃上清液，沉淀用丙酮反复洗（去除绿色），3-5次，然后加入硫酸钛和浓氨水，待沉淀形成后4000r/min 离心5min，弃上清液留沉淀，加入5ml硫酸，摇匀，待沉淀溶解后在415nm波长下比色，测其吸光值。

过氧化氢含量的测定

看来过氧化氢在生物体内确实发挥重要作用呢，所以过氧化氢含量的测定就有重要的意义。我们下面简单介绍几种常用的测定过氧化氢的方法：

一、二甲酚橙（xylenol orange）法

这种方法在国内应用比较广泛，有明显的优势。

原理：过氧化氢氧化二价铁离子产生三价铁离子，二甲酚橙（xy lenol orange）高选择性的结合三价铁离子形成有色（紫色）产物，可用比色法在580nm处测定。从而实现对过氧化氢浓度的测定。

由于二甲酚橙（xylenol orange）作为一种金属离子络合指示剂，与三价铁离子的结合有很高的选择性，也就是该方法有很好的特异性。同时该反应需要在酸性条件下进行，可以消除很多物质的干扰。

二、硫酸钛比色法

这也是国内一种比较常见的方法。

原理：H2O2与硫酸钛生成黄色的过氧化钛复合物，在415nm 有特征吸收。

该方法原理简单易懂，但样本处理需要自备丙酮用来破碎细胞、匀浆组织和稀释液体样本。丙酮易挥发，而且易燃有毒，给操作带来一定困难，需要做好防护措施。

三、探针法

这是目前国外一种常用的测定过氧化氢含量的方法。

原理：在辣根过氧化物酶（HRP）存在的条件下，特异的探针与过氧化氢反应，生成有色产物在570nm有最大光吸收，也可产生红色荧光（Ex/Em=535/587 nm）。比色法与荧光法灵敏度不同，需要配制不同的标准曲线。

该方法需要用到特异性的荧光探针，反应原理较前面2种复杂，但灵敏度很高，在荧光法中灵敏度可达40 nM。

四、过氧化物酶底物法

原理：用一种独特的过氧化物酶底物测定溶液和细胞提取物中的过氧化氢，在辣根过氧化物酶（HRP）存在的条件下，过氧化氢氧化无色的过氧化物酶底物，产生强烈的蓝色。在650nm有特征吸收。

过氧化氢试剂盒说明书

过氧化氢试剂盒是一种用于检测过氧化氢（H2O2）浓度的化学试

剂盒。过氧化氢是一种强氧化剂，广泛应用于医疗、环境保护、食品

加工等领域。本试剂盒提供了一种简便、快速、准确的检测方法，适

用于实验室和生产现场。

使用过氧化氢试剂盒前，首先要准备好实验器材和试剂。试剂盒

包含有氢过氧化物和某种指示剂，可以购买商家提供的成套试剂盒，

也可以单独购买所需试剂。同时还需要一些实验仪器，如移液枪、比

色计等。

实验操作的步骤如下：

1. 取适量样品，并将其转移到试剂容器中。样品可以是液体、固

体或气体。

2. 使用移液枪向试剂容器中加入适量的试剂。试剂中的某种成分

将与过氧化氢发生反应，并可视化表现出颜色变化。

3. 摇匀试剂容器，使试剂与样品充分混合。注意避免气泡的产生。

4. 静置适当的时间，让反应充分进行。具体的反应时间根据试剂

盒的说明进行调整。

5. 观察试剂容器中的颜色变化，可以使用比色计进行精确测量。

6. 根据试剂盒的说明书，将颜色变化与过氧化氢浓度进行对应。

一般来说，颜色的深浅与过氧化氢浓度成正比关系。

7. 根据测得的结果，进行相应的数据处理和分析。可以参考相关

文献了解检测指标的单位和范围。

使用过氧化氢试剂盒时，需要注意以下几点：

1. 严格按照试剂盒的说明书操作，确保实验的准确性和可重复性。

2. 注意安全操作，避免试剂接触皮肤和眼睛，避免吸入试剂蒸汽。

3. 试剂喷洒或泼溅到衣物或实验室周围时，应及时用大量水冲洗。

4. 使用过程中，注意对试剂进行正确、干燥、防潮密封保存，避

免受潮和降解。

总结起来，过氧化氢试剂盒是一种非常实用的化学试剂盒，可以

紫外分光光度法-过氧化氢含量的测定

过氧化氢含量的测定

【原理】

H2O2与硫酸钛（或氯化钛）生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀，可被H２SO4溶解后，在415nm波长下比色测定。在一定范围内，其颜色深浅与H2O2浓度呈线性关系。

【仪器和用具】

研钵；移液枪0.2ml和枪头，5ml×1支；容量瓶10ml×7个，离心管5ml×8支；离心机；分光光度计。

【试剂】

100μmol/L H2O2试剂；2mol/L硫酸；5%（W/V）硫酸钛；丙酮；浓氨水。

30%H2O2指的是过氧化氢溶液的质量比,其密度为 1.1g/cm3,而过氧化氢的分子量是34.02,通过这些参数，我们可以推算出30%的过氧化氢的摩尔浓度为9.7mol/L.

【方法】

1.制作标准曲线：取10ml离心管7支，顺序编号，并按表40-1加入试剂。

待沉淀完全溶解后，将其小心转入10ml容量瓶中，并用蒸馏水少量多次冲洗离心管，将洗涤液合并后定容至10ml刻度，415nm波长下比色。

2.样品提取和测定：(1)称取新鲜植物组织2~5g（视H2O2含量多少而定），按材料与提取剂1∶1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后，转入离心管3000 r/min下离心10min，弃去残渣，上清液即为样品提取液。(2)用移液管吸取样品提取液1ml，按表35-1加入5%硫酸钛和浓氨水，待沉淀形成后3000rpm/min离心10min，弃去上清液。沉淀用丙酮反复洗涤3～5次，直到去除植物色素。(3)向洗涤后的沉淀中加入2mol硫酸5ml，待完全溶解后，与标准曲线同样的方法定容并比色。

3.结果计算：