免疫亲和色谱及其在兽药残留检测中的应用
兽药残留免疫检测技术应用进展
和 70、80 年代后的质谱( MS) 和高效液相色谱( HP LC) 立了 检测头 孢噻 呋的 Ci-ELISA 方 法, cef-68 和 cef-
以及 GC/ MS、LC/ MS 等联用技术的飞速发展大大地 116 的 IC50分别为 32 Lg/ kg 和 0. 33 Lg/ kg。其检测限
的苯并咪唑类药物、亚砜和砜等代谢产物时, 阿苯达唑 和芬苯达唑的检测限分别为 58 Lg/ kg 和 120 Lg/ kg。 单抗 对 苯 并 咪 唑 类 抗 蠕 虫药 有 很 高 的 选 择 性[ 18] 。
Holtzapple 等用碳二亚胺法, 戊二醛修饰载体法和巯基
蔡勤仁等: 兽药 残留免疫检测技术应用进展
托氟沙星 52. 5 21. 1 8. 7
9. 6
9. 8
123
恩诺沙星 8. 2 34. 0 141
154
248 3307
诺氟沙星
81
115
163
154
253
921
奈啶酸
32
300
704
625
698 1038
Duan 等制备了环丙沙星多克隆抗体, 并建立了检 测 环丙 沙星 残留 的 Ci-ELISA 方法, 检 测 限为 0. 32 ng/ mL, 标准曲线在 0. 32 ng/ mL~5000 ng/ mL 范围 内线性关系良好, 批内和批间变异系数分别为 5. 81% 和 11. 23% 。环丙沙星在猪肉, 鸡肉及牛乳中的回收率 分别为 75. 58% 、81. 2% 和 84. 50% 。抗血清与恩诺沙 星的交叉反应率为 69. 8% , 与金霉素、庆大霉素、青霉 素、新霉素、喹乙醇和磺胺等无交叉反应[ 5] 。蔡勤仁等
品检中的兽药残留检验方法
品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。
合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病,提高畜禽养殖效益。
然而,如果兽药残留超过安全标准,可能对消费者健康造成潜在风险。
因此,兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。
兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。
本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法,并讨论其原理和应用。
高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。
该方法基于高效液相色谱(HPLC)和质谱联用仪(MS),通过对样品进行分离和定性分析,可以快速、准确地检测多种兽药残留物。
HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点,适用于不同类型的兽药残留物检测。
酶联免疫吸附测定法(ELISA)是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。
该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合,形成特异性抗原-抗体复合物,并通过酶作用产生颜色反应,从而定量检测兽药残留物的含量。
ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点,适用于大规模的兽药残留检测。
气相色谱-质谱联用法(GC-MS)也是常用的兽药残留检验方法之一。
该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析,可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。
GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点,适用于多种兽药残留物的分析。
快速液相色谱法(UPLC)也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。
与传统的液相色谱相比,UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。
因此,UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。
综上所述,兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。
通过合理选择和应用适当的检验方法,可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。
这有助于确保畜产品的质量安全,保护消费者的健康。
未来,随着科技的进步,兽药残留检验方法还会不断发展和完善,以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。
免疫亲和色谱_HPLC_FLD法_省略_动物肝脏中10种喹诺酮类药物残留_赵思俊
37卷分析化学(FENX I HUAXU E)研究报告第3期免疫亲和色谱-HPLC-FLD法测定动物肝脏中10种喹诺酮类药物残留赵思俊1,2郑增忍*2曲志娜2江海洋1张素霞1沈建忠*11(中国农业大学动物医学院,北京100094)2(中国动物卫生与流行病学中心,农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心,青岛266032)摘要利用免疫亲和色谱净化技术建立了可同时检测动物肝脏组织中10种喹诺酮类药物(麻保沙星、环丙沙星、诺氟沙星、单诺沙星、洛美沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星、恶喹酸和氟甲喹)的高效液相色谱检测方法。
对利用喹诺酮抗体制备的免疫亲和色谱柱的性能、操作条件进行了考察和优化。
抗体的偶联量为5g/L,其对10种喹诺酮药物的柱容量为3.75~6.67L mo l/L ge l(1425~2135mg/L ge l),选用V(甲醇)BV(PBS)=7B3作为洗脱溶液,连续使用12次后,QN s的柱容量仍能达到初始柱容量的38%~45%;I AC柱重复使用20次后,药物的回收率与样品的净化效果无明显变化。
动物肝脏组织样品用PBS溶液提取,I A C柱净化,H PLC-FLD检测。
方法的线性范围为0.15~200L g/L,相关系数大于0.9989,检出限为0.05~0.15L g/kg;10种喹诺酮类药物在动物肝脏的平均回收率为74.7%~94.8%,相对标准偏差为3.9%~1211%。
关键词喹诺酮类药物,免疫亲和色谱,肝脏组织,高效液相色谱法,多残留1引言喹诺酮类药物(quino l o nes,QN s)广泛应用于畜禽养殖中感染性疾病的预防和治疗。
但若使用不当或滥用药物,容易导致QN s在食品中残留,还可造成敏感细菌产生耐药性,我国、欧盟等许多国家和组织已相继制定了多种QN s药物在动物肌肉组织中的最高残留限量[1,2]。
目前对动物性食品中QN s残留进行监测是确保食品安全和人类健康的一个重要途径。
免疫分析法在兽药残留分析中的应用
相色谱法 、 高效液相色谱法和毛细管电泳法等 。其 胶) 偶联制成 固定 相 , I C柱 。当含 待测组分 的 装 A 中 , 分析法具 有高 度 的选择 性 和灵 敏 度 、 析过 样 品通 过 I 柱 时 , 免疫 分 AC 固定 抗 体 选 择 性 地 结 合 待 测
程 简化 等优点 , 很 大的发 展前 景 , 文着 重探 讨免 有 本
疫分 析法的应用 及进 展 。
物, 其他不被 识别 的样 本 杂质 则不 受阻碍 地流 出
I AC柱 , 洗 涤 除 去 杂 质 后 将 抗 原一 体 复 合 物 解 经 抗 “ 样一 加 洗涤一 洗脱 ” 步 层 析就 可使 复 杂样 本 中痕量 一
免疫 分析 (mmu on ls ) 以扰 原 与 抗 体 的 离 , 测物被洗脱 , 品得到净化 。I c通 常只徭 i na ayi 是 s 待 样 A 特异性 、 可逆性 结 合 为基 础 的新 型 分析 技术 。抗 原
0世 纪 9 0年 代 初, 国化 学 学 会 美 性 结合 反 应 为 基 础 的 分 析 技 术 , 抗 体 为 核 疫分 析 法 。2 以
AC ) 心试剂, 具有高选择 性 、 高灵敏度 等特 点 。免 ( S 陆续 出版 了食 品 和环境 中化 学 污染物 免疫 分 析方 面 的若 干 论 文集 , 志 着 免 疫 分 析 技术 作 为 一 标 种分 析手 段正 日趋成 熟 并被 分 析化 学 界接受 。免 疫 学技 术作 为一 种 分 析手 段 , 已经 渗 透 到 兽 药残 留分 析 的各个 环 节 , 括 样 品提 取 、 化 、 离 和 检测 。 包 净 分 其高 度 的选 择 性 和 灵敏 度使 分 析过 程 简 化 , 的甚 有
维普资讯
简述:兽药残留分析检测及应用案例
兽药残留分析检测及应用案例--青岛科标生物实验室概述兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物,包括与兽药有关的杂质的残留。
兽药大致可归纳为四类:①一般疾病防治药;②传染病防治药;③体内、体外寄生虫病防治药;④(包括促生长药)。
范围畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物等;兽药中,常用的为安乃近、阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋、土霉素、金霉素、杆菌肽、盐霉素、莫能霉素、粘菌素等20多种。
类别项目β-激动剂类盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、特步他林硝基呋喃类呋喃唑酮、呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因四环素类四环素、金霉素、土霉素、强力霉素、差向金霉素、去甲基金霉素、差向四环素、二甲胺四环素、差向土霉素、甲稀土霉素喹诺酮类西诺沙星、环丙沙星、达氟沙星、二氟沙星、伊诺沙星、恩诺沙星、氟甲喹、洛美沙星、麻保沙星、萘啶酮酸、诺氟沙星、氧氟沙星、奥比沙星、恶喹酸、培氟沙星、吡哌酸、沙拉沙星、弗洛沙星、司帕沙星磺胺类磺胺苯酰、磺胺醋酰、磺胺喹恶啉、磺胺氯哒嗪、磺胺嘧啶、磺胺地索辛、磺胺多辛、磺胺胍、磺胺甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺甲恶唑、磺胺甲氧嗪、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺二甲唑、磺胺硝苯、磺胺苯吡唑、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺索嘧啶、磺胺二甲异恶唑、磺胺氯吡嗪、甲氧苄啶大环内酯类林可霉素、红霉素、替米考星、泰乐菌素、克林霉素、螺旋霉素、吉它霉素、交沙霉素青霉素类阿莫西林、氨苄青霉素、青霉素G、青霉素V、苯唑西林、邻氯西林、萘夫西林、双氯西林、甲氧西林、阿洛西林氨基糖苷类链霉素,潮霉素B,双氢链霉素,壮观霉素,丁胺卡那霉素,卡那霉素,安普霉素,新霉素,妥布霉素,庆大霉素硝基咪唑类4-硝基咪唑、异丙硝唑、2-甲硝咪唑、洛硝哒唑、甲硝唑、氯甲硝咪唑、地美硝唑、苯硝咪唑、羟基甲硝唑、羟甲基甲硝咪唑其他氯霉素、氟苯尼考、甲砜霉素、孔雀石绿、无色孔雀石绿、结晶紫、无色结晶紫、氨苯砜、喹乙醇、金刚烷胺、地塞米松、利巴韦林、甲基睾丸酮、己烯雌酚、双烯雌酚、玉米赤霉酮、玉米赤霉醇、氯羟吡啶、尼卡巴嗪。
兽药残留检测样品前处理技术概要
三、分子印迹技术( MIT )
MIT在兽药残留分析领域已开始起步, 已成为该领域的一个新发展方向。 分子印迹聚合物( MIP) 对印迹分子具有高度选择性。研究者以氯霉素为模
板分子, 甲基丙烯酰胺为功能单体, 乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂, 采
用分子印迹技术, 通过光引发聚合制备了氯霉素分子印迹聚合物。结果表 明, 印迹聚合物较相应的非印迹聚合物对氯霉素的吸附速度更快, 吸附富 集性能更高, 光聚合较热聚合更好, 该分子印迹聚合物有望开发为新型固 相萃取材料, 可用于复杂生物样品中残留氯霉素的选择性富集净化过程。
免乳化现象并可实现自动动物性产品兽药残留样本处理过程大为简化, 自动化SPE 的使用真正实现了 样本残留的在线分析。随着SPE 技术逐步成熟, 其在动物性产品兽药残留检测 样本处理技术中将处于主要地位。
二、免疫亲和色谱(IAC)
IAC是利用连接有特异性抗体的基质做填料的一种固相萃取技术。 IAC的高选择性和高效性无疑使样本前处理大大简化,通常一次层析 即可使待测物得到高度净化和富集,并提供了待测物的定性信息; IAC可以与高效液相色谱法、气相色谱法等联合应用,使得更为高效、 灵敏和准确。
样本分离纯化技术
样品纯化是将待测物与提取液中的样本干扰杂质分离。前处理中纯
化的工作量最大, 但一个具有强大分离效能或高选择性检测能力的测定
体系可大大提高纯化的能力。兽药残留分析中常用的净化方法除经典的 液-液分配外, 还有固相萃取、免疫亲和色谱技术和分子印迹技术。
一、固相萃取( SPE)
SPE为近年发展起来的一种微量样品处理技术,主要用于复杂样品中微量或 痕量目标化合物的分离、纯化和浓缩。与传统的液-液萃取相比,它能显著减少 溶剂用量,减少样品预处理过程,加快样品处理速度, 消除某些干扰杂质,避
标记免疫分析在兽药残留检测中的应用
[ 关键 词] 标记 免 疫分析
农兽 产 品
药残 留
食 品安全
近年 来 ,随着 人 们 生活 水平 的提 高 ,人 们 对食 品安 全 的关 注 度 越 来 越高 。而农 产 品 以及 环 境 中 的农 药 、兽 药 残 留成 分 通常 会 成 为影 响人 们 身 体健 康 的重 要 危 害 ,是 食 品安 全 中 的一 项 重要 危 害 因素 。当 下对 农 兽 药 残 留 的监 测 手 段较 多 ,但 实 际 应 用 中 主 要还 是 以 色谱 、色质 以及光 谱 等 理化 手 段 进行 检 测 。这 种 传统 的 理化 检 测手 段 存 在检 测 样 品少 、检测 成 本 高 、费 时 等诸 多 弊端 。 同 时 在 检 测 过 程 中所 产 生 的大 量 的 有 机 溶 液 也 会 对 环 境 产 生 污 染 。免 疫 分析 法 是 近年 出现 的一 中新 生 的 药残 分 析 技术 ,近 年来 在 相关 领域 内得 到 了广 泛 的推 广 应用 。为 探讨 分 析标 记 免 疫 分析
进行 简单地 介 绍 、对 比和 分 析 。 同时 ,对各 种 标 记免 疫 分析 技 术在 兽 药 残 留监 测 的应 用 方 法与应 用 价值 展 开 了讨论 。 并 最终 认 为标 记 免 疫 分 析技 术 在农 兽 药 残 留监 测 的应 用 中操 作 简 单 、特 异性 强 , 能有 效保 障农 兽产 品 的食 用 安全 性 ,其 实 际应 用价 值 高 ,值得 在 相 关
技术 在 对农 兽 药 残 留 的检 测 中的 应用 价 值 与应 用 方 法 ,本 文对 当 下 应用 较 广 的几 种标 记 免 疫 分析 技 术进 行 了 总结 和 分 析 ,其 具 体 情况 如 下 :
免疫亲和柱-高效液相色谱荧光检测法测定饲料中的T-2毒素
a f t e r i mm u n o a f f i ni t y c o l u mn pu r i f i c a t i o n
LI N Mi a o, Z H A 0 Zhi — hu i 。 H A N We i
( I n s t i t u t e f o r Ag r i — Fo o d S t a n d a r ds a n d Te s t i n g Te c h n o l o g y,S h a n g h a i Ac a d e my o / Agr i c u l t u r a l
法可用 于饲料中 T 一 2毒 素 的 测 定 。
关键 词 : 饲料 ; T 一 2毒 素 ; 高效液相色谱 ; 免疫亲和柱 ; 柱 前 衍 生 化
中图分类号 : T S 2 0 7 文献标识码 : A
De t e r mi n a t i o n o f T_ _ 2 t o x i n i n f e e d b y h i g h p e r f o r ma n c e l i q u i d c h r o ma t o g r a p h y wi t h f l u o r e s c e n c e d e t e c t i o n
上海农业学报
2 0 1 3 , 2 9 ( 1 ) : 4 2—4 7
Ac t a Ag r i c ul t ur a e S ha ng h ai
文章编号 : 1 0 0 0 — 3 9 2 4 ( 2 0 1 3 ) 0 1 — 0 4 2 — 测法测定饲料 中的 I ' - 2毒素
c ol u m ns c o nt a i ni ng a nt i b od i e s s p e c i f i c f or T一 2 t o xi n, a nd qu an t i f i e d by r e ve r s e d pha s e hi gh pe r f or m—
免疫分析技术在兽药残留检测中的应用
72免疫分析技术在兽药残留检测中的应用宫秀杰(新疆兽药饲料监察所830063)摘要:食品中的抗生素、驱肠虫剂、类固醇等兽药残留物对人体健康造成危害。
本文利用免疫分析技术对化合物展开筛查,减少以往常规分析方法的取样需求量,提升兽药残留检测效果,维护人体健康。
关键词:免疫分析技术;兽药残留检测;胶体金层析法为提升动物生产量,大量化学合成物作为兽药,被用于动物疾病治疗和诊断,虽然大多数兽药没有强烈毒性,但残留物也会损害人体健康。
氯霉素、硝基呋喃类兽药带有致癌性,这种化合物已被禁止使用,通过免疫分析技术的应用,加强对兽药的残留检测,检测饲料和食品内兽药残留成分,从而保护人体与动物健康。
1免疫分析技术基本原理根据抗原抗体的特异性结合反应,免疫分析技术可以检测各类物质。
当前免疫分析技术已被用于化合物的检测,不仅价格便宜,还可高通量筛查,不需要使用高科技设备,能够直接用于兽药残留的现场检测。
常见的免疫分析技术主要有酶联免疫吸附分析法、胶体金免疫测定法、量子点荧光免疫分析法。
分析抗原发生结合反应,形成分析物—抗体复合物,随后通过示踪剂的标记与测定作用,这就是免疫分析法在兽药残留检测中的应用。
标记抗原与抗体能够提升免疫分析技术灵敏度,标记属于发光物,可以使发射性或荧光性的[1]。
2免疫分析技术在兽药残留检测中的应用2.1酶联免疫吸附分析法用于酶联免疫吸附分析法的测试,标记物主要有辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶和丙酮酸脱氢酶。
酶促反应会引发基质降解,产生有色生成物,利用分光光度计可以检测生成物。
有研究人员使用阳离子牛血清白蛋白的免疫原和氯丙嗪缀合,支撑了单克隆抗体,同时研发出对抗型酶联免疫吸附分析法,以此检测猪肝和鸡肝中是否带有氯丙嗪成分。
抗体灵敏度较高,监测数据稳定,IC50平均值可以达到0.73μg·L-1。
随后,研究人员制作出专门针对培氟沙星与加替沙星兽药残留成分的抗体,用来检测牛奶和鸡肝食品是否安全。
免疫分析技术在兽药残留检测中的有效利用
胶 体 金 免 疫 层析 条制 备 】 。将 包 被 好 的磷 酸 盐 缓 冲 溶 液稀
释为 原来 浓 度的 l 、 2 、 4 、 6 、 8 倍, 将划 膜仪 器 的参 数设 定 为 0 . 6 、
促 进 畜 禽 动 物 健 康 生长 、提 高 饲料 利用 率 和 改 善 畜 禽 产 品 质量 释 1 0倍 。 以及 品质 方 面 发 挥 着十 分 重 要 的 作 用 ,逐 渐 成 为 未 来 现 代 化 畜 2 结 果分 析 牧 产业 发 展不 可或 缺 的生 产资 料 。 但 是 畜牧行 业 在使 用兽 药过 程 中还 存在 很 多 问题 , 大剂 量 、 多种 类 的 过 度 使 用 ,导 致 了动 物 体 内 的 药物 积 累量 不 断 提 升 , 2 . 1 胶体 金 测试 条灵 敏度 分 析
之 后 , 就 能 够直 接 开 始 检 测 。 视 觉检 测 限 度 为 O. O1 mg / k g , 检 测
后保存。
时间在 1 0 mi n以 内. 操作 简便 , 灵敏 性较 高。 胶 体金 免 疫层 析
配制金 标 抗体 稀释 液 。 1 0 0 mL双 蒸 水加 入 1 2 g的三 羟 甲 基氨 基 甲烷盐 酸盐 ,1 mL T we e n 一 2 0 ,1 g的牛 血清 蛋 白和 0 . 5
0 . 8 、1 . 0 、1 . 2 L / c m ,划 膜干 燥 后 使 用金 标 抗 体 按 照 1 : 4 、
1 : 8 、1 : 1 0 、1 : 1 2 、1 : 1 5的 比例 稀释 ,观 察试 纸 条控 制 线和 检 测
色谱技术在畜产品安全检测中的应用
此外,色谱技术的飞速发展,色谱质谱联用技术 日趋成熟,成为畜产品安全检测的主要技术。如高 效液相色谱 -质谱联用、气相色谱质谱联用。
薄层色谱法是将适宜的固定相铺于玻璃板或铝 基片上,形成均匀薄层板,在同一水平线上点样,用 合适的溶剂展开后,将样品比移值与对照品比移值 作对比,而用于药品鉴别和杂质检查的方法。薄层 色谱法具有操作简单、快速分离、定性分析的特性, 是实验室检验常用的技术手段。
气相色谱法是用气体作为流动相的色谱方法, 根据固定相的不同,可分为气固色谱法和气液色谱 法。气相色谱法主要是利用于物质的极性、沸点及 吸附性质的差异,分离性质相似的物质,比如同分异 构体、同位素、对映体等。气相色谱一般使用毛细管 柱或填充柱,每种组分都在流动相和固定相之间进 行多次吸附、分配、解吸等过程,在色谱柱内形成分 离谱带。在流动相的带动下依次从色谱柱中流出。
·51·
李洪波,等:色谱技术在畜产品安全检测中的应用
同组分在固定相保留时间不同而相互分离。根据物 质的分离机理不同,色谱又可分为吸附色谱、离子色 谱、凝胶色谱、分配色谱和亲和色谱等。色谱技术常 见的方法有:柱色谱法、薄层色谱法、气相色谱法、高 效液相色谱法等。
柱色谱法是最原始纸。样品用固定相 饱和并将其置于玻璃管柱顶端,用流动相洗脱,收集 分离后的纯净组分。柱色谱法主要应用于混合物的 分离,包括 对 化 学 合 成 产 物、中 草 药 提 取 物 等 的 分 离;在畜产品安全检测中极少用到。
免疫分析技术在兽药残留检测中的有效利用
农业工程技术·综合版 2017年第3期14科 研 试 验DOI:10.16815/ki.11-5436/s.2017.08.010(下转第17页)免疫分析技术在兽药残留检测中的有效利用拜锦美,洪加平,成 强,陈京都,吴红军(江苏扬州市农产品质量监督检测中心,江苏扬州 225101)摘要:以胶体金免疫层析法为研究方法,研究免疫分析技术在兽药残留检测中的应用效果。
建立一种用于快速检测动物制品中磺胺类药物的胶体金免疫层析法,检测动物制品中磺胺类药物残留。
胶体金采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒直径为20 mm 的胶体金纤维素膜,对待测样品中的磺胺类药物羽包被抗原中竞争集合胶体金标记抗磺胺类药物多克隆抗体相结合,用肉眼观察检测线颜色深浅变化。
采用该种检测手段,对猪肉、肌肉和鱼类样品进行简单提取和稀释之后,就能够直接开始检测。
视觉检测限度为0.01 mg/kg,检测时间在10 min 以内,操作简便,灵敏性较高。
胶体金免疫层析法具有较高的灵敏性和特异性,整个操作过程简单,容易操作,检测结稳定,可以作为磺胺类药物现场检查使用,在今后的动物兽药残留检测中值得推广应用。
关键词:胶体金层析法;兽药残留;应用拜锦美,洪加平,成 强,等. 免疫分析技术在兽药残留检测中的有效利用[J]. 农业工程技术,2017,37(08):14+17进入新世纪以来,畜牧产业不断向前发展,兽药在畜牧产业中的应用范围和应用频率在逐年增加,其在防控多种疾病,促进畜禽动物健康生长、提高饲料利用率和改善畜禽产品质量以及品质方面发挥着十分重要的作用,逐渐成为未来现代化畜牧产业发展不可或缺的生产资料。
但是畜牧行业在使用兽药过程中还存在很多问题,大剂量、多种类的过度使用,导致了动物体内的药物积累量不断提升,在整个动物养殖周期内,动物很难全部将其代谢出去。
消费者在购买了药物残留的畜禽产品之后,将过量的药物引入人的体内,最终导致人药物蓄积,给肝肾造成严重负担。
色谱分析技术在兽药残留及违禁添加物检测中的应用具体实例讲课文档
样分析。
1.6 结果计算 试样中三聚氰胺的含量由色谱数据处理软件或按式(1)计算获得:
X= AcV1000f As m1000
式中: X——试样中三聚氰胺的含量,单位为毫克每千克(mg/kg); A——样液中三聚氰胺的峰面积;
c——标准溶液中三聚氰胺的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL); V——样液最终定容体积,单位为毫升(mL);
第12页,共29页。
净化
Oasis HLB固相萃取柱或相当者:500mg,6mL。使用前分别用5ml甲醇和10ml水预处理,
保持柱体湿润。
阳离子交换柱:羧酸型,500mg,3mL。使用前用5ml乙酸乙酯预处理,保持柱体湿
润。
将上清液倒入下接Oasis HLB固相萃取柱的贮液器中,上清液以≤3mL/min的流速 通过固相萃取柱,待上清液完全流出后,用5mL甲醇 + 水(1+19)洗柱,弃去全部 流出液。在65kPa的负压下,减压抽干40min,最后用15 mL乙酸乙酯洗脱,收集洗脱液于 100mL平底烧瓶中。
色谱法
第4页,共29页。
1. 原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法—高效液相色 谱法(原文参见GB/T 22388-2008)2008-10-07发布
2008-10-07实施 1.1 方法原理
汇总|兽药残留检测前处理类型
汇总|兽药残留检测前处理类型由于兽药残留种类繁多、在样品中残留水平低、基质复杂、干扰物质多等,使样品前处理技术,即分离纯化技术成为兽药残留分析的重点和难点。
目前,兽药残留的样品前处理方法主要有液液萃取、固相萃取、固相微萃取、免疫亲和色谱、分子印迹、超临界流体萃取、基质固相分散技术、微波辅助萃取、凝胶渗透色谱和超声波辅助提取等。
液液萃取液液萃取(liquid-liquid extraction, LLE)是利用待测物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中分配系数的不同而达到分离纯化的目的,是兽药残留分析中一种常用的前处理技术。
有国外学者将肉类样品用乙腈除蛋白,正己烷脱脂后,加乙酸乙脂液液萃取,利用超高效液相色谱串联质谱技术对肉中的24 种磺胺类药物残留进行了测定。
也有学者等运用液液萃取结合低温纯化技术作为前处理技术,测定了牛奶中大环内酯类抗生素,得到了良好的回收率。
液液萃取对实验条件和仪器要求不高,但操作繁琐、有机溶剂消耗大,污染严重,逐渐被一些新的前处理方法所取代。
固相萃取固相萃取(solid phase extraction, SPE)是目前兽药残留检测中最为常用的一种样品前处理技术。
它是利用固体吸附剂将样品中目标化合物吸附,使其与样品基质及干扰化合物分离,再用洗脱液洗脱下来从而达到分离和富集的目的。
固相萃取技术由于具有操作简单快速、消耗有机溶剂少、样品回收率高、易于自动化等优点,在样品前处理中得到广泛应用。
目前,固相萃取技术已可用在磺胺类、四环素类、阿维菌素类、氯霉素类、喹诺酮类、激素类、β -受体激动剂等多类兽药残留的定量分析中。
有学者采用固相萃取结合液相色谱方法测定了鸡肉组织中的喹诺酮类药物。
对比了Oasis HLB,Oasis MAX, SDB-RPS 三种不同填料固相萃取柱的萃取效率,最终得出SDB-RPS 填料的固相萃取柱的萃取效果最好。
固相微萃取固相微萃取(solid phase microextraction, SPME)技术是20 世纪90 年代兴起的一项新颖的样品净化富集技术,属于非溶剂型选择性萃取法。
兽药残留检测原理
兽药残留检测原理兽药残留是指动物体内残留的药物,这些药物可能来自动物生病时使用的药物、添加剂或生长促进剂等。
兽药残留不仅会对动物本身健康产生影响,也可能危害人类健康。
因此,兽药残留检测在食品安全领域具有重要意义。
本文将介绍免疫分析法、微生物学法、理化分析法、生物传感器法、活体检测法、光谱分析法、色谱分析法、质谱分析法和酶抑制法等兽药残留检测原理。
1.免疫分析法免疫分析法是利用抗原抗体反应原理进行兽药残留检测的方法。
该方法可分为固相免疫分析法和液相免疫分析法。
固相免疫分析法中,待测样品中的药物与固相载体上的抗体结合,再加入标记物,通过信号放大系统检测药物残留量。
液相免疫分析法中,待测样品中的药物与液相载体上的抗体结合,加入酶或荧光物质等标记物,通过信号检测系统测定药物残留量。
2.微生物学法微生物学法是利用微生物学原理进行兽药残留检测的方法。
该方法可分为直接计数法和间接计数法。
直接计数法是通过对动物组织中的细菌进行培养计数,推测兽药残留量。
间接计数法是通过测定动物组织中抗生素残留量,推测兽药残留量。
3.理化分析法理化分析法是利用物理和化学方法进行兽药残留分析的方法。
可分为光谱分析和色谱分析法。
光谱分析法是利用不同物质对特定波长光线的吸收、反射或透射等特性,对兽药残留进行定性或定量分析。
色谱分析法则利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异,将兽药残留分离出来,再进行定性或定量分析。
4.生物传感器法生物传感器法是利用生物传感器技术进行兽药残留检测的方法。
生物传感器可分为组织传感器、酶传感器和生物芯片等。
组织传感器利用组织切片中的酶或细胞等生物活性物质作为传感器,检测兽药残留。
酶传感器利用药物对特定酶的抑制作用,测定兽药残留量。
生物芯片则利用微电子技术和微加工技术在芯片上构建生物传感器,检测兽药残留。
5.活体检测法活体检测法是一种直接在动物体内检测药物残留的方法。
可分为猪囊虫病检测法和鸡胚检测法等。
猪囊虫病检测法是通过观察猪肌肉组织中的囊虫数量,判断药物残留情况。
分析食品兽药残留方面的新兴技术
分析食品兽药残留方面的新兴技术食品兽药残留是指动物生产和兽药使用过程中,残留在动物产品中的兽药成分。
兽药残留不仅会给动物健康带来风险,还会直接或间接地危害人体健康。
为保障公众健康,新兴技术不断涌现,以提高兽药残留检测的准确性和效率。
1.等离子体质谱技术(ICP-MS)等离子体质谱技术是一种高灵敏度、高精度、快速分析的技术。
它可以实现对微量元素的定量分析,能够检测到不同类型的兽药,并能适应不同动物组织和食品基质。
该技术在兽药残留检测中表现出较好的结果。
2.荧光免疫分析技术(FIA)荧光免疫分析技术是基于抗体-免疫反应的方法。
它可以快速、精准地检测到目标分子,在兽药残留检测中具有很高的敏感性和特异性。
该技术因其高通量、快速、低成本而成为了目前兽药残留分析的热点技术之一。
质谱成像技术是一种非侵入性的成像分析技术。
采用该技术可以对样品进行空间分辨率的研究,并能在其上提供不同化合物的相对浓度。
该技术不仅用于液态和固态样品的分析,而且在动物组织和食品中的兽药残留检测中也表现了很好的检测效果。
4.纳米技术纳米技术是基于纳米材料的应用技术,具有高灵敏度和高特异性的优点。
在兽药残留检测中,纳米技术可以实现对兽药分子的选择性识别和定量分析,同时具有较高的快速性和灵敏度。
5.电化学技术电化学技术是基于电化学信号的分析技术,在兽药残留检测中能够实现对兽药分子的灵敏度和特异性检测。
该技术具有快速分析、实时检测以及成本低等特点。
总的来说,新兴技术的出现为兽药残留的精确检测提供了有力的支持,从而为食品安全保障提供了可靠的技术手段。
随着科学技术的不断发展,相信其在兽药残留检测方面的应用将越来越广泛。
免疫分析技术在食品农残药残检测方面的应用
食品科技FOODSCIENCE&TECHNOLOGY农作物中的农药残留、畜产品水产品中的药物残留,及其它食品中的药物残留严重危害着人体健康,也造成了巨大的经济损失。
发展有效的农残药残检测技术是保证食品安全的前提。
免疫学检测方法是依据免疫学理论设计的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞及其分泌的细胞因子的实验方法。
由于操作简单反应灵敏,近几年得到了较快的发展,在农药残留、药物残留等方面发挥着重要作用。
其分类较多,按指示标记物质的不同可分为五类,即酶免疫技术(EIA)、发光免疫技术(LIA)、荧光免疫技术(IFT)、金免疫技术(ICG)和放射免疫技术(RIA)。
目前,在农残、药残检测方面应用较多的是酶免疫技术(EIA)、金免疫技术(ICG)和放射免疫技术(RIA)。
1免疫分析技术基本原理1.1酶免疫测定技术(EIA)酶免疫技术(EIA)是以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,利用抗体(抗原)与酶标抗原(抗体)结合反应,然后加入底物,通过酶与底物的显色反应进行检测。
是一种将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。
酶免疫技术按照抗原抗体系统是定位于组织细胞上还是存在于液体样品中分为酶免疫组化技术和酶免疫测定,酶免疫测定又可分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定。
因分离游离和结合的标记物的方法不同,异相酶免疫测定又分成液相酶免疫测定和固相酶免疫测定两类方法。
目前固相酶免疫测定中以酶联免疫吸附试验(ELISA)为最常用。
ELISA基本原理是将过量抗体(抗原)包被于载体上,通过抗原抗体反应使酶标记抗体(抗原)也结合在载体上,经洗涤去除游离的酶标记抗体(抗原)后,加入底物显色,定性或定量分析有色产物确定待测物的存在与含量的检测技术。
ELISA的主要技术类型有双抗体夹心法、间接法、竞争法、捕获法等。
1.2放射免疫技术(RIA)放射免疫技术(radioimmunoassay,RIA),简称放免法,它是将放射性同位素标记物显示的高灵敏性与抗原抗体反应具有的高特异性这两大特点相结合而发展起来的一种现代检测手段。
牛肌肉中阿维菌素类药物残留的免疫亲和色谱——高效液相色谱荧光检测方法的研究
牛肌肉中阿维菌素类药物残留的免疫亲和色谱——高效液相色谱荧光检测方法的研究杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2014(41)1【摘要】本研究旨在建立以免疫亲和色谱(IAC)柱为净化手段的高效液相色谱荧光检测方法(HPLC-FLD),可同时检测牛肌肉组织中的阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素和埃普里诺菌素残留.样品用甲醇提取,IAC柱净化,以乙酸酐—甲基咪唑的乙腈溶液作衍生化试剂,96℃条件下,完全衍生化100 min.在5、10、50和100 ng/g添加水平下,牛肌肉组织中4种药物添加回收率为77.3%~119.5%,变异系数为1.5%~18.9%,方法的检测限为0.8 ng/g.该方法可用于检测牛肌肉组织中的阿维菌素类药物残留.【总页数】3页(P243-245)【作者】杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫【作者单位】中国牧工商(集团)总公司,北京 100070;中国牧工商(集团)总公司,北京100070;中牧实业股份有限公司,北京100070;北京农学院,北京 102206;中国牧工商(集团)总公司,北京 100070;中牧实业股份有限公司,北京100070;中牧实业股份有限公司,北京100070【正文语种】中文【中图分类】S859.84【相关文献】1.高效液相色谱-荧光-紫外法测定动物肌肉组织中多类药物残留 [J], 李存;江海洋;吴银良;王战辉;赵思俊;李建成;石玉祥;沈建忠2.牛肝中阿维菌素类药物残留的高效液相色谱荧光检测方法的研究 [J], 侯晓林;何继红;杜向党;沈建忠3.高效液相色谱法测定牛肌肉中苯并咪唑类药物残留的研究 [J], 张英宣4.牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 [J], 张正英;崔乃元;高海燕;刘海珍;黄文颖;郝云晴;马立才5.牛肌肉组织中苯并咪唑类药物的基质固相分散-高效液相色谱多残留分析法 [J], 张素霞;李俊锁;钱传范因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
免疫亲和色谱-HPLC-FLD法测定动物肝脏中10种喹诺酮类药物残留
免疫亲和色谱-HPLC-FLD法测定动物肝脏中10种喹诺酮类药物残留赵思俊;郑增忍;曲志娜;江海洋;张素霞;沈建忠【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2009(37)3【摘要】利用免疫亲和色谱净化技术建立了可同时检测动物肝脏组织中10种喹诺酮类药物(麻保沙星、环丙沙星、诺氟沙星、单诺沙星、洛美沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星、恶喹酸和氟甲喹)的高效液相色谱检测方法.对利用喹诺酮抗体制备的免疫亲和色谱柱的性能、操作条件进行了考察和优化.抗体的偶联量为5 g/L,其对10种喹诺酮药物的柱容量为3.75~6.67 μmol/L gel(1425~2135 mg/L gel),选用V(甲醇):V(PBS)=7:3作为洗脱溶液,连续使用12次后,QNs的柱容量仍能达到初始柱容量的38%~45%;IAC柱重复使用20次后,药物的回收率与样品的净化效果无明显变化.动物肝脏组织样品用PBS溶液提取,IAC柱净化,HPLC-FLD检测.方法的线性范围为0.15~200 μg/L,相关系数大于0.9989,检出限为0.05~0.15 μg/kg;10种喹诺酮类药物在动物肝脏的平均回收率为74.7%~94.8%,相对标准偏差为3.9%~12 1%.【总页数】6页(P335-340)【作者】赵思俊;郑增忍;曲志娜;江海洋;张素霞;沈建忠【作者单位】中国农业大学动物医学院,北京,100094;中国动物卫生与流行病学中心,农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心,青岛,266032;中国动物卫生与流行病学中心,农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心,青岛,266032;中国动物卫生与流行病学中心,农业部动物及动物产品卫生质量监督检验测试中心,青岛,266032;中国农业大学动物医学院,北京,100094;中国农业大学动物医学院,北京,100094;中国农业大学动物医学院,北京,100094【正文语种】中文【中图分类】O6【相关文献】1.牛肌肉中阿维菌素类药物残留的免疫亲和色谱——高效液相色谱荧光检测方法的研究 [J], 杨君宏;何继红;侯晓林;齐鹏;吴家鑫2.胶体金免疫层析技术在鸡蛋中喹诺酮类药物残留快速检测中的应用 [J], 宋贵方;娄亚坤;付燕峰;赵林萍3.超高效液相色谱-串联质谱法测定沙拉酱中16种喹诺酮类药物残留 [J], 黄思聪;杨建涛;黄象金4.超高效液相色谱-串联质谱法测定沙拉酱中16种喹诺酮类药物残留 [J], 黄思聪;杨建涛;黄象金5.分散固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定蔬菜中17种喹诺酮类药物残留[J], 盛华栋;张水峰;崔海容;叶明立因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
本底干扰 , 降低结果 的可靠性。因此建立 高效的样
本净化技术已成为痕量分析中的主要问题 。 最近 2 0年, 对固相提取技术研究 的不断深入 ,
推进了从分析物中选择性萃取 目标产物为 目的的
A 新 技 术 发 展- 。免 疫 亲 合 色 谱 (m nof i 2 IC效率 的关键 影 响 因素 l j im ua it ny cr a g py IC 提供 了一种从 液体材料中进 h m tr h,A ) o oa IC作用的基础是色谱法 与抗原抗 体 的可逆 A
异性亲合作用 , 从复杂的待测样品中捕获 目标化合 物。其原理是将抗体与惰性微珠共价结合 , 然后装
柱, 将含抗 原的溶 液过免疫亲和柱 , 抗原与 固定 了
的抗体结合 , 而非 目标化合物则沿柱流下 , 最后用
洗脱缓冲液洗脱抗原 , 从而得到纯化 的抗原。用适 当的缓冲液和合适 的保存方法 , 柱子可 以再 生 , 反 复使用。IC A 提纯效率很高 , 通常只需一次提取就 可达到 1 0 1 0 0— 000倍的纯化效果 。 0
始 , C成为免疫化学中最有效的分离手段之一。 I A
各国都高度重视。由于药物残留检测属 于复杂混 合物 中的痕量有机物质分析 , 且分析量大 , 因此非
常需要采用有效、 快捷 、 普及 的净化方法。免疫亲
IC主要用 于仪器分析样 品 的前 处理。18 A 97
年 V n e t 等 首次应用 IC技术净化 了猪 a e d Wa r A
和色谱技术即是一种较好 的净化技术 , 近年来发展
很快 , 在兽药残留检测中的应用越来越广泛。 1 免疫亲和色谱技术简介 11 免疫亲和色谱技术产 生的背景 随着检测技 . 术日 益趋向于高技术化、 系列 化( 同时分析 多种组
肉中的氯霉素 , 之后于 18 9 9年又在此技术基础上
体的偶联量有很大关系, 但并非无限制成正 比。因
增加识别位点浓度的各种优点, 但实验室还没有广 泛的应用 , F b片段很容 易从 单抗或 多抗 中获 如 a
得, 这种片段已被用作在线偶联 毛细管电泳的免疫 吸附剂 。I C技术应用 的抗体有两种类型, A 即单克 隆抗体 ( c b ) M A s和多克隆抗体( c b ) PA s 。与单抗相
动物性食 品中兽药残 留水平是食 品安全检验 的重要内容。兽药残 留超标不仅给公众健康带来 严重危害, 也影响动物性食 品的进出 口贸易 , 世界
行选择性净化的有 效方法 ,可对化合物进行浓缩、
分类 , 然后从 固相支持物 中提取纯化了的样品。从
2 0世纪 6 年代末溴化氰活化琼脂糖载体 出现开 o
虽然抗体的化学特性 直至二 十世纪 中叶才被 揭示 , 利用抗体进行分析却 已有百年的历史。抗血
容量或柱床体积下完成净化过程 , 了非特异性 清 中的抗体含量最多的是 I , 以常用其制备免 减少 g 所 G 吸附并节省昂贵的柱材和抗体。另外 , 柱容量与抗 疫吸附剂。已有人研究多样性 的抗原结合 片段对
程。因此影响 IC效率的因素有很多。 A
m lLN C ( H 2 8) 柱 可 用 3 o, a1 p . , / 0次 , 容 量 未 下 柱
降 。
2 1 柱 容量 免疫 亲和柱 常用 的柱 床体积 为 1 . m 。其高效特异性 保 留能力 , L 使之能 在较小 的柱
异性可逆结合特性 的 S E技术, P 根据抗原抗体 的特
传统的样品净化技术主要有液 一 液分配 ( L ) 固 LE 、 相萃取 (P )基质固相分散 ( S D 、 SE 、 M P )超临界萃取 (F ) SE 等。这些 净化 技术净化 步骤 多; 乏选择 缺
性; 费时繁琐; 容易污染或损失样 品而引起严重 的
测定了蛋、 牛奶 中的氯 A 兽药 、 品检测 中 食 应用的一种 重要前处理方法。这项技 术在兽药 残
留中的应用特别广泛 , 例如猪 肉中的磺胺类药物 、
分)速测化、 、 便携化 , 对样 品前处理也提出了更 高
的要求。 兽药痕量检测 中因残 留组分绝对 量很小 , 检测方法需要较高 的灵敏度和准确性。由于仪器
作者简介: 迪(90年一)女, 王 18 , 在读博士, 研究方向为动物性食品中兽药残 留免疫学检测技术。
维普资讯
中国兽药杂 志
’
2 0 ,0 3 :3— 7 王 追 , 0 6 4 ( )2 2 / 等
反应平衡相结合 的理论 , 遵循经典 的 Sa h ̄ 方 ct a c
血浆中克仑特罗、 血清 中二嗯英等。应用 I C分析 A 生物样本中的爱 比菌素 , 回收率 可达到 8 % ~ 其 0
8 % [ 6
。
的灵敏度是固定的, 因此通过改进样 品前处理提高
检测方法 的灵敏度 就成 为分 析方法研究 的重点。
12 IC技术原理 . A
IC是一种利用抗 原抗体特 A
维普资讯
20 . ( )2 2/ 迪, 064 3 : 0 3 7t 等
中国兽药杂志
免疫亲和色谱及其在兽药残 留检测 中的应用
王 迪 , 曙明 杨
( 中国农业科学 院农业质量标准与检测技术研究所 , 北京 1 0 1 0 8) 0 [ ̄t日 】 05 0 — 9 [ 1l 期 20 — 8 2 ll 1 文献标识码]B [ 文章编号 】1 2 20 20 )3 02 — 5 [ 0 —18(06 0 — 0 3 0 0 中围分类号 】 898 ¥5・4
[ 摘
要 ] 随着对兽药残留检测领域研究的不断深入, 免疫亲和色谱技术得到 了越来越 多的广
泛应用。本文详细 阐述 了免疫亲和色谱的原理和关键 技术, 介绍 了其在动物性食 品中兽 药及饲 料 药物添加剂残 留 检测 中的应用与进展。 [ 关键词] 免疫亲和色谱 ; 净化; 兽药残 留