大肠杆菌与沙门氏菌鉴别方法
沙门氏菌的检验方法
沙门氏菌的检验方法沙门氏菌（Salmonella）是一类革兰氏阴性的杆状细菌，是引起沙门氏菌属感染的病原菌。
这种细菌可以引发食物中毒和伤寒症，其中食物中毒是最常见的感染途径。
因此，对沙门氏菌的快速、准确的检测非常重要。
目前，沙门氏菌的检测方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
以下是关于沙门氏菌检验方法的相关参考内容。
1. 传统培养分离法传统的沙门氏菌检验方法是利用富含寡糖的培养基，如XLD、SS等，以及一些选择性供氧培养基，如亚硫酸和肉汤琼脂培养基等，将样品进行培养。
通过培养，沙门氏菌会形成典型的红色或蓝绿色菌落。
然后，从菌落中挑取纯培养物，并进行生理生化反应和田纳氏试验以确定是否为沙门氏菌。
2. 免疫学方法免疫学方法是通过检测沙门氏菌特异性抗原或抗体来诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- 血清凝集试验：利用特异性沙门氏菌抗原和患者血清，在特定条件下观察血清与抗原的凝集反应，可确定是否感染沙门氏菌。
- 酶联免疫吸附试验（ELISA）：利用特异性沙门氏菌抗原或抗体和酶标记的二抗，通过检测光学密度来判断是否存在沙门氏菌。
3. 分子生物学方法分子生物学方法可以通过检测沙门氏菌的基因或DNA来快速、准确地诊断沙门氏菌感染。
常用的方法有：- PCR（聚合酶链式反应）：通过特异性引物扩增沙门氏菌的DNA片段，然后进行凝胶电泳分析。
PCR可以提供快速、高效的沙门氏菌检测结果。
- 实时荧光PCR：使用带有荧光探针的PCR引物，通过检测荧光信号的强度来定量沙门氏菌的存在量。
- 基因芯片技术：基因芯片上固定了沙门氏菌特异性的探针，可以同时检测多个基因或DNA序列，提高检测效率。
除了上述方法，还可以利用质谱仪等仪器进行快速鉴定，甚至利用抗生素敏感试验、细菌溶解酶试验等进行进一步的鉴定和鉴别。
总结起来，沙门氏菌的检验方法主要包括传统培养分离法、免疫学方法和分子生物学方法。
这些方法可以单独或联合使用，以提供准确、快速的沙门氏菌检测结果，对于预防和控制沙门氏菌感染具有重要意义。
大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案
大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案实验原理：1、大肠杆菌的性质：大肠杆菌是G--无芽孢直杆菌，在大多数培养基上表现出不同的特性。
在麦康凯琼脂平板上是凸起光滑湿润的粉红菌落，革兰氏染色镜检为红色短杆菌。
三糖铁琼脂上的反应为斜面和底部都变黄，产气，不产生硫化氢。
生化特性为发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖。
MR试验，吲哚试验为阳性，VP试验为阴性，不产生H2S，不能利用枸椽酸盐。
半固体中沿穿刺线向四周生长。
2、沙门氏杆菌的性质：沙门氏杆菌是G-直杆菌。
在麦康凯平板上为细小半透明、圆形、无色小菌落，三糖铁斜面下层变黄色，上层仍为红色，穿刺处为变黑产生H2S。
能发酵葡萄糖产酸产气，能利用枸椽酸盐，不发酵乳糖不利用蔗糖肌醇，MR阳性，VP阴性，不产吲哚，不分解尿素。
实验材料：含有大肠杆菌和沙门氏菌的猪肝脏、培养基（琼脂平板培养基、三糖铁琼脂斜面培养基、麦康凯琼脂、生化培养基、SC）、器械（剪刀、记号笔、接种环、酒精灯、显微镜、试管、玻片、培养皿）、药品（消毒酒精、结晶紫、碘液、酸酒精、品红、松柏油）实验内容及操作程序：一、培养基制备：制备普通琼脂培养基、麦康凯平板、SC增菌培养基、生化培养基，制备方法见附1.二、标本制备：（1）取新鲜猪肝脏一小块，火焰表面消毒。
（2）用浸过消毒液的剪刀剪开一个小口于消过毒的猪肝脏。
（3）用接种环在剪开的肝脏小口沾取肝脏液，分别画线于麦康凯培养基和接种于SC中，37°C恒温培养24小时。
三、细菌分离培养：（1）取出培养了24小时的麦康凯平板。
挑选麦康凯平板上的凸起光滑湿润的粉红菌落染色镜检，看是否为红色短杆菌，若是，即疑似为大肠杆菌，则取其接种于另一麦康凯平板，37°C 恒温培养24小时。
（2）取出培养了24小时的SC增菌培养基，染色镜检，看是否有疑似沙门氏菌，有则取其中细菌画线接种于麦康凯平板上，37°C恒温培养24小时。
四、细菌的鉴定纯化：（1）检查疑似大肠杆菌的培养基是否长满了粉红色菌落，染色镜检。
大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案
实验原理：1、大肠杆菌的性质:大肠杆菌是G无芽抱直杆菌，在大多数培养基上表现出不同的特性。
在麦康凯琼脂平板上是凸起光滑湿润的粉红菌落，革兰氏染色镜检为红色短杆菌。
三糖铁琼脂上的反应为斜面和底部都变黄，产气，不产生硫化氢。
生化特性为发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖。
MR试验，口引噪试验为阳性，VP试验为阴性，不产生H2S,不能利用xx酸盐。
半固体中沿穿刺线向四周生长。
2、沙门氏杆菌的性质：-沙门氏杆菌是G直杆菌。
在麦康凯平板上为细小半透明、圆形、无色小菌落，三糖铁斜面下层变黄色，上层仍为红色，穿刺处为变黑产生H2S。
能发酵葡萄糖产酸产气，能利用枸椽酸盐，不发酵乳糖不利用蔗糖肌醇，MR阳性，VP阴性，不产呵噪，不分解尿素。
实验材料：含有大肠杆菌和沙门氏菌的猪肝脏、培养基（琼脂平板培养基、三糖铁琼脂斜面培养基、麦康凯琼脂、生化培养基、SQ、器械（剪刀、记号笔、接种环、酒精灯、显微镜、试管、玻片、培养皿）、药品（消毒酒精、结晶紫、碘液、酸酒精、品红、松柏油）实验内容及操作程序：一、培养基制备：制备普通琼脂培养基、麦康凯平板、SC增菌培养基、生化培养基，制备方法见附1.二、标本制备：(1) 取新鲜猪肝脏一小块，火焰表面消毒。
(2) 用浸过消毒液的剪刀剪开一个小口于消过毒的猪肝脏。
(3) 用接种环在剪开的肝脏小口沾取肝脏液，分别画线于麦康凯培养基和接种于SC中，37 C恒温培养24小时。
三、细菌分离培养：(1) 取出培养了24小时的麦康凯平板。
挑选麦康凯平板上的凸起光滑湿润的粉红菌落染色镜检，看是否为红色短杆菌，若是，即疑似为大肠杆菌，则取其接种于另一麦康凯平板，37 C恒温培养24小时。
(2) 取出培养了24小时的SC增菌培养基，染色镜检，看是否有疑似沙门氏菌，有则取其中细菌画线接种于麦康凯平板上，37 C恒温培养24小时。
四、细菌的鉴定纯化：(1) 检查疑似大肠杆菌的培养基是否长满了粉红色菌落，染色镜检。
沙门氏菌检验及分析
沙门氏菌检验及分析一、简介沙门氏菌是一种能引起人类和动物肠道感染的细菌，也可以引起食品中毒。
它主要通过食品、饮用水和接触感染物传播。
对于食品中的沙门氏菌进行检验和分析，对保障食品安全至关重要。
二、检验方法1.纳氏肠杆菌培养基法用纳氏肠杆菌培养基法检验食品中的沙门氏菌，是一种常用的方法。
它利用富含养分的培养基，使得沙门氏菌能够在培养基中迅速生长，并形成典型的菌落。
检验人员可以根据菌落的形态、颜色和大小等特征来识别沙门氏菌的存在。
2.血液平板培养法血液平板培养法是另一种常用的检验方法。
将待测样品涂抹在富含养分的血液平板上，再将平板置于恒温培养箱中培养一段时间，观察是否有典型的沙门氏菌菌落的产生。
3. PCR法PCR法是一种较为快速、敏感的检验方法。
通过PCR技术可以快速对样品中的沙门氏菌进行检测，结果准确可靠。
这种方法对实验条件和检验人员的要求较高，但可以提高检测的速度和准确性。
三、分析结果通过上述方法进行检验后，需要进行有关分析。
针对检验结果，进行有关的分析可以有效地判断食品中是否存在沙门氏菌污染，并确定污染的程度。
1. 菌落计数通过检验方法得到的菌落数可以反映食品中的沙门氏菌污染程度。
一般来说，菌落数越多，说明沙门氏菌污染越严重。
2. 菌株鉴定对分离出的菌株进行鉴定，可以确定其是否为沙门氏菌。
根据鉴定结果，可以进一步分析菌株的来源和特性。
3. 毒素检测有些沙门氏菌会产生毒素，对食品中的毒素进行检测，可以确定食品中是否存在具有毒素产生能力的沙门氏菌。
四、实验注意事项在进行沙门氏菌检验及分析时，有一些实验注意事项需要遵守。
1. 实验室操作检验和分析工作要在严格的实验室条件下进行，保证实验室内的环境洁净，避免交叉污染。
2. 操作规范操作人员要求严格遵守相关操作规程，使用消毒剂对实验仪器、培养基和工作台进行处理。
3. 实验安全在进行检验和分析实验时，要注意个人防护，避免因接触致病菌而导致感染。
五、应用领域沙门氏菌检验及分析在食品安全领域具有广泛的应用。
禽源大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性检测
李淑 芳 ，曹 慧 ，黄 燕霞 ，陈冬 杰 ，邹海鹏 ，迟 明 飞 ，陈伟垣 ，谢 文斌 （ 广东海洋大学动物 医学系，广东湛江 ５ ２ ４ ０ ８ ８ ）
摘 要 ：为 了解湛江 市禽源致病 菌大肠杆 菌和 沙门氏菌对 禽 肉产品 的污染程 度及其耐 药性 ，采集市售禽 肉中的肝脏样
３ ５ Ｅ． ｃ ｏ ｌ ｉ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ，７ ＥＨＥＣ Ｏ １ ５ ７ ：Ｈ７ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ａ ｎ ｄ ｌ １ Ｓ ａ ｌ ｍｏ ｎ ｅ ｌ ｌ ａ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｗｅ ｒ ｅ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｉ ｆ ｅ ｄ ｂ ｙ ｂ ｉ ｏ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ ｔ ｅ ｓ ｔ ． Ｔｈ ｅ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｅ． ｃ ｏ ｌ ｉ ｗａ ｓ ４ ３ ． ２１ ％ ，ｔ ｈｅ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｅ ＨＥ Ｃ ０ｌ ５ ７： Ｈ７ ｗａ ｓ ８ ． ６ ４ ％ ，ａ ｎ ｄ ｔ ｈ ｅ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｒ ａ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｓ ａ ｌ ｍｏ ｎ ｅ ｌ ｌ ａ ｗａ ｓ １ ３ ． ５ ８ ％． Ａ ｔ ｏ ａｌ ｔ ｏ ｆ ２ ｌ Ｅ． ｃ ｏ ｌ ｉ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ａ ｎ ｄ ｌ １ Ｓ ａ ｌ ｍｏ ｎ ｅ ｌ ｌ ａ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ ｓ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ｉ ｎ
Ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｏｎ， Ｉ ｄｅ ｎｔ ｉｆ ｉｃ ａ ｉｏ ｔ ｎ ａ ｎｄ Ｄｒ ｕ ｇ — ｒ ｅ ｓ ｉ ｓ ｔ ａ ｎｃ ｅ Ｄｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏｎ ｏ ｆ Ｅｓ ｃ ｈｅ ｒ ｉ ｃ ｈ ｉ ａ ｃ ｏ ｌ ｉ ａ ｎ ｄ Ｓａ ｌ ｍｏ ｎｅ ｌ ｌ ａ ｆ ｒ ｏ ｍ Ｐｏ ｕｌ ｔ ｒ ｙ
鉴别大肠杆菌的方法
鉴别大肠杆菌的方法大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道细菌，存在于人和动物的肠道中。
尽管大肠杆菌是正常肠道菌群的一部分，但有些菌株可以引起食物中毒和感染。
因此，准确鉴别大肠杆菌的方法对食品安全和公共卫生至关重要。
在鉴别大肠杆菌时，通常需要从样品中分离出细菌，并进行初步的鉴定。
下面是一些常用的鉴别大肠杆菌的方法：1. 培养基选择：大肠杆菌可以在普通富营养的培养基上生长，如营养琼脂和TSA 寒天琼脂。
与其他致病菌不同的是，大肠杆菌具有乳糖发酵能力，因此可以使用含有乳糖的培养基如EOH（大肠杆菌溶血素乳糖琼脂）、MacConkey琼脂和XLD （硫代硫酸亚铁氧化琼脂）来选择性培养大肠杆菌。
2. 形态学特征：在琼脂平板上培养后，大肠杆菌形成小型、粉红色的圆形菌落。
在显微镜下观察，大肠杆菌呈革兰阴性，为杆状细菌，长度约为2微米，直径约为1微米。
此外，大肠杆菌具有移动性，在液体培养基中呈现出活跃的运动。
3. 生化特性：通过测试大肠杆菌的生化特性，可以进一步鉴别该菌株。
常见的生化试验包括蔗糖发酵试验、气体发酵试验、硫化试验和尿素酶试验等。
大肠杆菌通常可以产生气体和酸，而不产生硫化物，同时具有尿素酶活性。
4. 分子生物学方法：PCR（聚合酶链式反应）和基因测序技术能够快速、准确地鉴定大肠杆菌。
通过特定引物放大大肠杆菌特有的基因片段，再进行测序比对，可以确定分离菌株是否为大肠杆菌。
5. 抗生素敏感性测试：鉴别大肠杆菌的方法还可以包括抗生素敏感性测试。
通过对细菌进行抗生素敏感性的测试，可以确定菌株对不同抗生素的敏感程度。
大肠杆菌通常对多种抗生素敏感，但也能产生耐药株。
通过该方法，可以观察和评估细菌感染的治疗方法。
综上所述，鉴别大肠杆菌的方法包括培养基选择、形态学特征观察、生化特性测试、分子生物学方法以及抗生素敏感性测试。
这些方法可以相互配合，提供准确和可靠的鉴别结果，对于食品安全和公共卫生具有重要意义。
禽大肠杆菌病与沙门氏菌病：流行病学、病原、诊断、防治和公共健康的关注上十分近似
大肠杆 菌病和禽沙门氏菌病 ，它们的详细信息还未见报 荐为鉴定禽源性大肠杆菌的替代性技术 。 其它分子技术 ， 道， 因此 ， 本综述着重介绍与公共卫生 问题有关的禽大肠 如核糖分型和同工酶也被用于评价禽大肠杆菌克隆形成 杆菌病和禽沙门氏菌病的各个方面。 能力。一些克隆株对Ａ Ｅ 有特异性 ， ＰＣ 对共生和致病性分 离株进行 的小规模 比较显示８ ３％致病菌属于仅有 的５ 个
家禽大肠杆菌和沙门氏菌分离及药敏试验
家禽大肠杆菌和沙门氏菌分离及药敏试验方法鸡大肠杆菌病主要依靠药物防治，但药物的大量使用带来了大肠杆菌多重耐药性和药物残留等诸多问题。
目前世界许多地方开展了调查研究试验材料1.病料来源。
养殖户送检样本有典型大肠杆菌和沙门氏菌病变的病死鸡，孵化后期死亡鸡胚（没有出壳鸡苗）作病料。
毛蛋没有出壳小鸡小鸡卵黄囊青年鸡病料2.细菌分离用的培养基：麦康凯培养基、普通培养基、SS培养基、亚硫酸铋培养基等二、试验方法1.大肠杆菌的分离培养。
无菌采取死鸡的肝、孵化后期死胚卵黄囊（没有出壳鸡苗）在麦康凯平板上分区划线37℃培养12~24小时，在麦康凯培养基上生长出边缘整齐稍凸起、表面光滑湿润、直径1～2毫米的红色圆形菌落，革兰氏阴性，接种到SS培养基37℃培养12~24小时，生长出粉红菌落。
亚硫酸铋琼脂大肠杆菌不生长。
2.沙门氏菌分离培养。
无菌采取死鸡的肝、孵化后期死胚卵黄囊在在麦康凯平板上分区划线37℃培养12~24小时，然后挑取麦康凯琼脂平板上淡黄色半透明单个菌落，接种到SS培养基37℃培养12~24小时，生长出黄色半透明或黑色菌落。
亚硫酸铋琼脂沙门氏菌生长绿色单个菌落。
如图：SS培养基沙门氏亚硫酸铋琼脂沙门氏菌麦康凯培养基大肠杆菌SS培养基大肠杆菌和沙门氏菌普通培养基大肠杆菌和沙门氏菌三．药敏试验分离到的大肠杆菌和沙门氏菌混合在一起，涂匀营养培养基，选用的药敏片做好标号，平整贴在培养基上37℃培养12~24小时，观察细菌抑菌圈大小，选抑菌圈越大药物敏感度越高，使用疗效越好。
同时考虑某些药物肠道不吸收问题。
四．药敏分析及预防：该地区的大肠杆菌和沙门氏菌对粘杆菌素、痢菌净、氟苯尼考、硫酸阿米卡星、头孢噻呋、硫酸新霉素较敏感。
合理搭配抗生素使用减少细菌耐药性的产生，临床上长期大量使用不规范抗菌药物，致使大肠杆菌沙门氏菌耐药菌株不断产生，敏感的药物越来越少，也可以据本场的大肠杆菌和沙门氏菌血清型做疫苗预防。
这提示我们每隔一定时间要对本地区的大肠杆菌耐药性进行检测，以便更好地选择敏感有效的药物，以控制该病的流行。
鹌鹑大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的病原分离与鉴定
美兰 （ ＥＭＢ 琼 脂 、 康 凯 （ ｃ Ｏ ｋ ｙ 琼 脂 、 ） 麦 ＭａＣ ｎ ｅ ） Ｓ—Ｓ琼 脂 、 绿 肉 汤 增 菌 液 、 白 胨 水 、 萄 糖 煌 蛋 葡
蛋 白胨 水 、 橼 酸 盐 琼 脂 、 发 酵 管 ． ． 枸 糖 Ｍ Ｒ试 剂 、 —Ｐ试 剂 、 哚 试 剂 、 酸 盐 还 原 试 剂 ． Ｖ 吲 硝
０ 前 言
大 肠 杆 菌 病 （ ｏｉａ ｉｏ ｉ 和 沙 门 氏 菌 病 （ ａ ｎ ｌ ｓ ） 别 是 由 致 病 性 大 肠 杆 菌 和 沙 Ｃ ｌ ｃ ｌｓ ） ｂ ｌ ｓ Ｓ ｌ ｅｏｉ 分 ｍｏ ｌ ｓ
门 氏菌 属 的细 菌 引起 的消化 道 传染 病 ， 行广 ， 病 率 和死 亡 率较 高 ， 年 来 ， 着 鹌 鹑 养殖 流 发 近 随 业 的 发 展 ， 关 鹌 鹑 疾 病 的 报 道 也 陆 续 增 多 ， 国 内 对 鹌 鹑 的 细 菌 性 疾 病 ， 其 是 混 合 感 染 有 但 尤
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第２ ４卷 第 ２期 ２０ ０ ２年 ６月
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ＶＯ ． ４ ＮＯ． １２ ２
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＡｇ ｉｕ ｔ ｒｌＳ ｉｎ ｅＹａ ｂａ ｉｅ ｓｔ ｏ ｒ ａ ｏ ｒｃ ｌ ａ ｃｅ ｃ ｎ ｉｎ Ｕｎ ｖ ｒｉｙ ｕ
收 稿 日 期 ：２ ０ ０ ２—０ ４—２ ０
作 者 简 介 ：张 宗 植 （９ ０ ）男 （ 鲜 族 ） 吉 林 龙 井 人 ， 吉 市 动 物 卫 生 监 督 所 助 理 兽 医 师 １７ 一 ， 朝 ， 延
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第 ２期
张 宗植 ， ： 鹑 大 肠 杆 菌 与 沙 门 氏 菌混 合 感 染 的 病 原 分 离 与 鉴 定 等 鹌
禽大肠杆菌和沙门氏菌混合感染的诊断
临ห้องสมุดไป่ตู้床 兽 医
中 国 畜牧 兽 医文 摘
２ ０ １ ７ 年
３ ３ 卷
第４ 期
禽大肠杆 菌和沙 门氏菌混 合感染 的诊 断
贾 国 勇
（ 青海 省海南州 畜牧兽 医工作 站 ，青海海南 ８ １ ３ ０ ９ ９ ）
［ 摘 要 ］ 利用 采 自贵 德县 清 源 土鸡 场发 病 鸡 的病 料 ，通 过 细 菌的 分 离培 养鉴 定 和 药敏 试验 对 病 原体 、诊 断 与治 疗进 行 了研 究 。 结果：分离出大肠杆 菌、沙门氏菌各１ 株 。大肠杆菌对头孢 曲松与头孢噻肟 中度敏感；沙门氏菌对头孢曲松 、丁胺卡那中度敏感；对 头 孢 噻肟 、庆 大霉素 、安普 霉 素 、多 西环素 敏 感 。
分 离 菌 在 麦 康 凯 培 养 基 上 菌 落 中 心 呈 深 桃 红 色 ，圆 形 ，扁 平 ，边 缘 整齐 ，表 面光 滑 湿 润 。另 一 种 菌落 为 圆 形 、微 凸 、光 滑 湿润 、无 色半 透 明 中 间呈 黑 色 、边 缘 整 齐 、中等 大小 的菌 落 。将 菌 落转 接 在伊 红 亚 甲蓝 培 养 基上 菌 落 呈 紫黑 色 ，圆形 ，稍 凸 起 ， 边缘 整 齐 ，表面 光 滑 ，湿 润 ，常有 金 属 光泽 。革 兰 氏染 色 为 阴性 的散 在 小 杆 菌 。在 ｓ ｓ 培养 基 上 形成 无 色 透 明 ， 圆形 、微 凸 、光 滑 湿润 、边 缘 整齐 菌 落 。革兰 氏染 色 为 阴性散 在 的小 杆 菌 。 ２ ． ２ 生 化 鉴 定 结 果 采 取病 料 ，在 实验 室做 了生 化 试验 ，结 果 详见 表 １ 和 表２ 。 ２ ． ３ 药 敏 试 验 结 果 对 分离 菌做 了药敏 试验 ，结 果 详 见表 ３ 。 由表 ３ 可知 该 次 试 验 分 离 的 大 肠 杆 菌 对 于 阿 奠 西 林 、氨 苄 西 林 、庆 大 霉 素 、安 普 霉素 、环 丙 沙星 、恩诺 沙 星 、磷 霉 素 、氟 苯 尼 考高 度 耐 药 ，对 于 多西 环 素 、红霉 素 、丁胺 卡 那 耐药 ，对 于 头 孢 曲松 、头 孢 噻肟 中度敏 感 。沙 门 氏菌 高 度耐 受 的 药物 有 阿 莫 西 林 、环 丙 沙 星 、氟 苯 尼考 、磷 霉 素 、恩 诺 沙 星 、红 霉素 。沙 门氏 菌 对 于氨 苄 西林 耐 药 ，对 于头 孢 曲松 、丁 胺卡 那 中度敏 感 ，对 于 头 孢噻 肟 、庆 大霉 素 、安普 霉 素 、多 西环 素敏 感 。
大肠杆菌与沙门氏菌的区别
大肠杆菌病与沙门氏杆菌病，如何鉴别？大肠杆菌病与沙门氏杆菌病，是临床上常见的两个以肠道病变及败血症为特征的疾病。
分别是由大肠杆菌和沙门氏杆菌为其特定病原体,其典型病例特征很好鉴别.但是随着疾病向着非典型化的发展和混合感染的发生，非介助实验室内的病原体分离,病原体生化特性分析及药敏试验等特殊手段很难做出判断。
在缺乏这种特殊诊断手法的前提下,如何尽快的做出尽可能接近事物本质的鉴定，并做出相应的防治策略,是我们需要解决的一个话题。
本文作者试图结合临床上所见到的病例特证，结合中医的认识观，提出对这两种病的签别原则和方法，以求对临床实践有所帮助。
其实，这两种病恰好是内伤性疾病的一对矛盾的对立统一体，即一个事物的正反两个方面。
脾胃为后天之本，二者共处中焦，组成机体气机计降之枢纽，阳明胃士为阳为火，主天之气以降;太阴脾土为阴为湿,主地之气以升，二者共同完成水谷精微的腐熟运化。
组成机体阴阳的一个基本配对。
因而有人说脾胃为体内的太极两仪,不无道理。
当脾气旺而胃气受损,下降无权而引起湿热内蕴之时，则多为大肠杆菌病；反之，当脾气受损，升清受阻而胃气受损时，则多发生沙门氏杆菌病。
简言之，两种病虽然都有可能首发于中焦而引起水湿内瘀，大肠杆菌病的特性是热大于湿，而沙门氏杆菌病则是湿大于热。
以此基本思路为基础,我们不难从以下几个方面做出基本的监别方法：一，发病条件:1、机体条件:大肠杆菌病多发于体质较好的鸡群（体），而沙门氏杆菌病则多发于体质条件较差的鸡群（体）。
2、环境条件：大肠杆菌病多发于潮湿,气温较高的环境之中或由湿热病、温热病等继发而来；而沙门氏杆菌病则发生于低温高湿或由寒湿性疾病继发而来。
二，鸡体（群）表现：1、鸡冠：发生大肠杆菌病的鸡，冠肥较红或是桔黄色,沙门氏杆菌病鸡冠较小，白而淡黄。
2、精神：发生大肠杆菌病的群体,精神普遍较好，几乎看不到病鸡而突然死亡；而发生沙门氏杆菌病的鸡群精神状况差,精神萎靡，打焉的鸡较多。
大肠杆菌的鉴定方法
大肠杆菌的鉴定方法大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，属于肠道细菌中的一种重要成员。
由于其在食品安全、水质监测、环境卫生、医疗卫生等领域中具有重要的意义，因此大肠杆菌的鉴定方法非常重要。
以下是一些常见的大肠杆菌鉴定方法：1.生理生化鉴定法：大肠杆菌具有一些特殊的生理生化特征，可以通过一系列的实验来鉴定。
例如，通过青霉素抑制试验，大肠杆菌可在含有青霉素的培养基上生长，而其他肠道细菌则不能。
另外，大肠杆菌也可通过产气、产酸、产硫化氢、可溶性淀粉酶的阳性反应进行鉴定。
2.形态学鉴定法：大肠杆菌的形态特征较为典型，可通过显微镜观察其形态来鉴定。
大肠杆菌呈革兰氏阴性杆状，细胞长约2-3微米，直径约0.5-1.0微米，单个或成对分布。
此外，大肠杆菌的菌落呈白色或乳白色，边缘整齐，表面光滑。
3.抗生素敏感性试验：通过抗生素敏感性试验可以初步判断大肠杆菌的鉴定。
一般情况下，大肠杆菌对多种抗生素敏感，例如青霉素、氨苄西林、氨苄青霉素等，而对青霉素酶分泌的菌则不敏感。
4.分子生物学鉴定法：随着分子生物学技术的发展，PCR（聚合酶链反应）和基因测序等方法可以用于大肠杆菌的鉴定。
通过特异性引物和PCR扩增，可以检测到大肠杆菌特有的基因片段，进一步确认其身份。
另外，通过16SrRNA基因测序也可以鉴定大肠杆菌。
5.培养基选择法：大肠杆菌对培养基的特异性选择性很强，可以根据这一特点来筛选鉴定。
例如，菜单营养琼脂糖培养基（MacConkey Agar）可用于筛选革兰氏阴性杆菌，因为它具有大肠杆菌的选择性。
总结起来，大肠杆菌的鉴定方法有很多种，包括生理生化鉴定、形态学鉴定、抗生素敏感性试验、分子生物学鉴定和培养基选择法等。
这些方法结合使用可以提高鉴定的准确性和可靠性，对于保障食品安全和卫生健康具有重要意义。
实验六 大肠杆菌和沙门氏杆菌
目的要求：
1、掌握致病大肠杆菌、沙门氏杆菌的微生物学诊断方法。 2、熟悉致病大肠杆菌、沙门氏杆菌形态、培养特性。
实验内容：
一、观察致病大肠杆菌、沙门氏杆菌形态、培养特性。 二、接种大肠杆菌、沙门氏杆菌于鉴别培养基（远腾、SS、BTB），观察结果。 三、大肠杆菌、沙门氏杆菌的微生物学诊断程序。
E.Coli为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长 良好，最适宜生长温度为37℃，最适合生 长pH为7.2～7.4。麦康凯琼脂上形成红色 菌落，在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属 闪光的菌落，在SS琼脂上一般不生长或者 生长较差，生长的菌落呈红色。 一些致病性菌株在绵羊血液平板上呈β 型溶血。在营养琼脂上生长24h，形成圆形、 隆起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落， 直径2～3mm。
沙门菌A-F群多价 O血清平板凝集 血清型鉴定
报告鉴定结果
多杀性巴氏菌
革兰氏染色的肺组织中有 大量阴性球杆菌
多杀性巴氏杆菌（Ｐasteurelloa
微生物学诊断
maltocida ）
病料：（渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等） 涂片镜检：G-；瑞氏/美兰（新鲜病料）两极着染；球杆菌 培养 分离培养：血液/血清裂解血平板 菌落形状 增 菌 ：血清肉汤 运动性 不溶血 G-菌球杆 动物接种：小白鼠皮下接种 死亡检剖败血症 脏器涂片镜检 分离培养 可疑菌落 纯培养
红色带有光泽菌落大肠杆菌大肠杆菌结果观察大肠杆菌动物致病性大肠杆菌分离鉴定程序动物致病性大肠杆菌分离鉴定程序挑取疑似菌落510个分别接种tsi和普通琼脂斜面tsi呈aka反应的其sti生长物或普通琼脂斜面纯培养菌粪便肠内容物及肠黏膜刮取物血液肠淋巴结及其他病变组织etec菌株毒力因子鉴定血清型鉴定生化试验鉴定猪水肿病菌株沙门氏杆菌微生生学诊断程序沙门氏杆菌微生生学诊断程序挑取疑似菌落分别接种tsi和尿素培养基tsi呈未污染病料污染病料在肠道杆菌鉴别培养基上划线分离用肠道杆菌增菌培养基增菌报告鉴定结果血清型鉴定沙门菌生化鉴定沙门菌af群多价o血清平板凝集革兰氏染色的肺组织中有大量阴性球杆菌多杀性巴氏杆菌p多杀性巴氏杆菌pasteurelloamaltocidaasteurelloamaltocida微生物学诊断微生物学诊断病料
大肠杆菌与沙门氏菌的分离鉴定
一、立题依据1、现状分析及研究意义仔猪白痢病是农村养猪中的常发病、多发病。
常常由于延误医治时间，往往发生整窝死亡，造成很大经济损失。
仔猪白痢病在临床上十分多见, 它主要是由致病性大肠杆菌所引起的以仔猪肠炎或败血症为主要症状的一种病症。
仔猪副伤寒是由猪伤寒沙门氏菌等引起的仔猪细菌性传染病。
沙门氏菌属是肠道杆菌科的一个重要属，包括 2 500 种以上血清型，它们主要在人及动物的肠道内寄生，绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性，能引起人和动物多种不同临床病变的沙门氏菌病，在医学和公共卫生上均十分重要。
我小组主要基于以上的情况，针对疑似仔猪白痢与仔猪副伤寒病死猪肝脏病样进行病原菌的分离鉴定，以便通过实验来对两种重要病原菌的主要特征进行更深入的了解和掌握。
二、研究方案（一）研究目的，研究内容和拟解决的问题。
1、研究目的：本次设计性病原菌分离鉴定实验，意在提高我们的实践动手能力，让我们将所学的知识综合运用，开拓自我思维，学会主动思考。
在病原菌的分离鉴定中，还可以促进我们对病原菌生理特性的了解，以及对各种分离鉴定方法和技术的掌握以此提高我们对知识的综合运用能力以及设计实验的谨慎思维能力。
2、研究内容：将疑似疑似仔猪白痢与仔猪副伤寒病死猪肝脏病样进行初步观察并用取样进行实验室病原菌的分离鉴定。
3、拟解决的关键问题：①确定并掌握病原菌的分离鉴定方法。
②充分描述病原菌的特征，将它与已知的细菌特征对比，得出结论。
（二）、所需材料试剂、研究方法及预期结果1、所需材料试剂1.1材料：病死猪肝脏病样1.2试剂：氯化镁孔雀绿增菌培养基、麦康凯琼脂培养基、SS营养琼脂培养基、微量生化发酵管（葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖、葡磷胨、尿素、枸橼酸盐、甘露醇、H2 S），美兰，结晶紫，碘液，酒精，品红，三糖铁培养基、厌氧肉汤和普通肉汤。
附：普通肉汤：牛肉膏0.15g+蛋白胨0.3g+Nacl 0.l5g+H2O 30mL混合倒入容器搅拌均匀（牛肉膏和蛋白胨均用玻璃纸称量后一起放入容器加热后取出，Nacl用标准纸）—称总重—加热融化（搅拌至煮沸）—补水（10g=10mL)—加NaoH调PH（7.4-7.6），用试纸检验—过滤—分装3管—包装好进行灭菌厌氧肉汤：之前步骤与普通肉汤相同，在普通肉汤的基础上没管加入肝粒5~6块，每管加石蜡密封，包装好灭菌2、研究方法2.1指出所给病样及组织2.2初步观察病样2.3.细茵分离病例需进行实验室检查，可从实质器官中取少量病样，依次进行直接染色镜检观察，增菌培养同时鉴别培养，菌落特征观察，麦康凯平板扩大培养，染色镜检，接种肉汤和厌氧肉汤，生化鉴定。
实验五大肠杆菌与沙门氏菌
0.02g 60mL 40mL
• V-P试剂
甲液：α萘酚酒精溶液 （α萘酚5g无水乙醇100mL）
乙液：KOH溶液 （KOH 40g，水100ml）
将甲液和乙液分装棕色瓶中，于4-10℃保存。
五、结果观察
1. 大肠杆菌的生长表现
普通琼脂：形成圆形、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落， 直径约2~3mm；
• 在加入甲基红指示剂后显红色为阳性。
② V-P试验： 某些细菌能发酵
粉
碱
红
+ 二乙酰 色
葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 2,3-丁二烯醇
+
化 合
胨中的胍基化合物 物
注意：通常M.R和V-P试验是密切相关： 如果一个微生物M.R是阳性，则V-P是阴性；或者相反。
• M.R试剂
甲基红 95％酒精 蒸馏水
3. 生化管接种培养
① 糖发酵试验：
葡乳麦甘蔗
② H2S试验； ③ 尿素酶试验； ④ 枸橼酸盐利用试验。
葡 乳 麦 甘 蔗 H2S 尿 枸
葡 乳 麦 甘 蔗 H2S 尿 枸
大肠杆菌
沙门氏菌
大肠杆菌 沙门氏菌 置 37℃培养
4. 吲哚试验
① 接种大肠杆菌或沙门氏菌于5mL邓亨氏蛋白胨水中， 置37℃培养3-5d；
＋(－) ；＋(－)
3. 细菌的染色、镜检
大肠杆菌
沙门氏菌
G－直杆菌，大小0.4-0.7×2-3μm， 无芽胞，两端钝圆，散在或成对。
4. 生化管接种培养
大肠杆菌
沙门氏菌
葡 乳 麦 甘 蔗 H2S 尿 枸
⊕ ⊕ ⊕ ⊕ ⊕/- － － －
葡 乳 麦 甘 蔗 H2S 尿 枸
⊕－ ⊕ ⊕ － ＋ － ＋
雪豹大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离及鉴定
雪豹大肠杆菌与沙门氏菌混合感染的分离及鉴定何顺福【期刊名称】《中国畜牧兽医文摘》【年(卷),期】2016(032)002【总页数】1页(P66)【作者】何顺福【作者单位】西宁野生动物园,青海西宁810000【正文语种】中文2014年8月，西宁野生动物园繁育的2只3月龄雪豹出现腹泻，经过抗生素药物对症治疗数天后效果不佳，随后青海大学农牧学院动物医学系传染病实验室对患病雪豹的腹泻粪便进行了采集，采取常规的病原分离及药敏试验技术进行微生物学诊断，最后，确诊为大肠杆菌与沙门氏菌混合感染，药敏试验结果显示此次分离的病菌对左氧氟沙星、头孢曲松、依诺沙星敏感。
1.1 材料1.1.1 病料采集发病雪豹的粪便，待检。
1.1.2 培养基伊红亚甲蓝平板、SS平板、TSA平板和TSB肉汤培养基。
1.1.3 试验动物健康小白鼠10只。
1.1.4 药敏纸片 14种药敏纸片。
1.2 方法1.2.1 病料的采集采集西宁野生动物园发病雪豹粪便无菌种到TSB肉汤中37℃培养18～24h。
1.2.2 病菌的分离、纯化分别划线种于伊红亚甲蓝平板、SS平板和TSA平板进行分离、纯化。
1.2.3 生化试验将纯化后的分离株种到葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、鼠李糖、棉子糖、阿拉伯糖、木糖、卫矛醇、肌醇、山梨醇、水杨苷、MR、V-P、明胶、鸟氨酸脱羧酶肉汤、硫化氢、西蒙氏枸橼酸钠、硝酸盐、半固体和尿素等各种生化培养基中进行生化鉴定。
1.2.4 动物致病性试验将纯化后的分离株种到鲜血琼脂斜面培养基上，37℃培养18～24h制成菌悬液，并与麦氏浊管进行比浊，选取浓度为3.0×109个/ml的菌悬液分别腹腔注射6只小白鼠，0.2ml每只作为实验组。
同时应用0.22μm细菌滤器分别对上述菌悬液过滤，各取滤液腹腔注射4只小白鼠，0.2ml每只，作为对照组。
对注射后的小白鼠隔离饲养，观察发病及死亡情况，对死亡白鼠立即进行剖检，观察病理学变化，无菌采取肝脏、脾脏组织涂片、染色。
大肠杆菌和沙门菌的鉴别
大肠杆菌和沙门菌，均能引起肠道感染性疾病，但有一定的差异，主要区别在于细菌类型、发病机制、症状等方面。
1、细菌类型：大肠杆菌通常会寄宿在人体中，有时也会存在于自来水中，属于一种条件致病菌。
沙门菌有可能寄宿在人体中，也有可能寄生在动物的肠道内，属于肠道致病菌；
2、发病机制：当人体内本身的大肠杆菌超标或者吃了不干净的食物，会使人体出现各种感染症状。
而人体感染沙门菌的主要发病原因是吃了携带沙门菌的食物，从而出现腹泻现象；
3、症状：感染大肠杆菌可能会出现腹泻、呕吐、排尿困难等症状。
而感染沙门菌，主要会出现腹泻、高热等症状，大便的颜色也会改变，通常是绿色或者黄色的稀便，严重时可导致败血症；
4、肥达氏反应：大肠杆菌感染后，肥达氏反应阴性，而伤寒杆菌感染后，可以产生O抗体和H抗体，肥达氏反应阳性。
5、其他方面：大肠杆菌会导致人体出现感染的症状，如胃肠道、尿路感染，甚至脑膜炎等，而人体感染沙门菌通常会引起胃肠炎。