江苏盐城市2018届高三生物一轮复习第十三单元生物技术第4讲DNA的粗提取与鉴定作业苏教版
dna粗提取高考知识点
dna粗提取高考知识点1. DNA的结构与功能DNA是人体内的遗传物质,也是一种双螺旋结构的分子。
它由核苷酸组成,每个核苷酸由糖分子、碱基和磷酸组成。
DNA的主要功能是存储和传递遗传信息,在细胞分裂时起到重要的作用。
高考中,对DNA的结构和功能是非常重要的考点。
2. DNA复制的过程DNA复制是指在细胞分裂过程中,DNA分子通过复制的方式得到了复制。
在DNA复制过程中,DNA双螺旋结构被解开,然后由DNA聚合酶复制成两个完全一样的DNA分子。
这个过程是生物体生长和繁殖的基础,也是高考生物考试的重要内容之一。
3. DNA的转录与翻译DNA的转录与翻译是指DNA信息转换成蛋白质的过程。
在细胞核内,DNA通过转录过程生成RNA分子,然后RNA分子通过翻译过程生成蛋白质。
这是生物体生命活动中非常关键的一环,高考中对该过程的理解和掌握是必不可少的考点。
4. DNA突变与遗传病DNA的突变是指DNA的碱基发生改变,可以导致遗传信息的改变,甚至引发遗传病。
遗传病是指由突变引起的一类疾病,如遗传性血友病、先天性心脏病等。
对于高考生物考试来说,对DNA突变和遗传病的了解是非常重要的。
5. DNA提取实验方法DNA提取是指从生物体内分离出DNA分子的过程。
在高考生物考试中,常常会涉及与DNA提取相关的实验方法,如盐提法、酚-氯仿提法、硅胶柱提法等。
了解这些提取方法及其原理,对于掌握DNA提取的实践操作和理论知识都起到了重要的作用。
6. DNA技术在实际应用中的意义DNA技术在生物学领域有着广泛的应用,如基因工程、DNA指纹鉴定、基因检测等。
这些应用使科学家们能够更好地研究和应用DNA,为人类生活和健康提供了更多可能。
对于高考生物考试来说,了解DNA技术在实际应用中的意义是非常重要的。
总结DNA粗提取是高考生物中的重要知识点,掌握DNA的结构和功能、复制过程、转录与翻译、突变与遗传病、提取实验方法以及DNA技术在实际应用中的意义,有助于考生们在考试中准确把握相关考点。
DNA的粗提取与鉴定(一轮复习)
四、DNA的鉴定 在 沸水浴的条件下,DNA遇 二苯胺 会被染成 蓝 色。
实验组: DNA提取液 +二苯胺 对照组:2mol/LNaCl溶液+二苯胺
实验过程
鸡血细胞→加入蒸馏水→过滤(保留__滤__液____) →加入NaCl,使浓度为2mol/l →过滤(保留___滤__液___) →加入蒸馏水,调节NaCl浓度至0.14mol/l→过滤(保留__滤___渣___)
三、去除蛋白质等杂质(理化性质差异)
溶解度 酶的专一性(加木瓜蛋白酶) 对高温的耐受性
DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中的溶解度最____小__, DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中将__析_出__,过滤后保留_滤__渣__。 …………… 2mol/L的NaCl溶液中将__溶_解__,过滤后保留__滤_液__。 在95%酒精溶液中,DNA的溶解度___小___,结果__析__出____;
→溶解在2mol/lNaCl溶液中→加入二苯胺,水浴加热
思考:三次过滤和加入冷却的酒精分别除掉了什么杂质?
完成课后作业
一轮复习 知识内容
DNA粗提取与鉴定
考纲要求
要求
考点细化―――关键词
DNA粗提取与鉴定的实验原理和 DNA的粗提取与鉴定 实验与探究 方法
一、选材 原则上,只要有DNA的细胞皆可 哺乳动物的成熟红细胞没有DNA
二、破碎细胞、获取含DNA的滤液
动物细胞:加入蒸馏水→玻捧搅拌→过滤,收集滤液 植物细胞:加入洗涤剂溶解细胞膜→研磨→过滤
高三生物一轮教学案(DNA的粗提取和鉴定)
课时2 DNA的粗提取和鉴定一、书本知识整理1.实验目的2.目的要求3.方法步骤二、思维拓展1.用猪的血液代替鸡血不行的原理是:哺乳动物成熟的细胞中无细胞核2.实验成功的关键:能否提取到较纯净的DNA丝状物3.实验的注意事项:①实验中共有三次过滤。
第1、3次要用其滤液,使用纱布为1~2层,第二次要用其滤出的黏稠物,使用的纱布为多层。
②实验中有6次搅拌。
除最后一次搅拌外,前5次搅拌均朝一个方向,且第一次快速搅拌,其余各步搅拌都要不停地轻轻搅拌,玻璃棒插入位置不同,进行第2、3、5次时,玻璃棒不要直插杯底,进行步骤7时,玻璃棒插入烧杯溶液的中间。
③实验中两次使用蒸馏水。
步骤1中加入蒸馏水是为了得到浓度低于血细胞内部浓度的溶液,使血细胞吸水膨胀破裂,要充分搅拌不应少于5min。
步骤3中加入蒸馏水是为了使氯化钠的物质的量浓度达到DNA溶解度的最低点0.14mol/L,即稀释氯化钠溶液。
④实验中三次加入氯化钠溶液。
在步骤2、5中加入的质量浓度为2mol/L,在步骤8中加入的质量浓度为0.015mol/L,目的一样都是为了DNA的溶解。
⑤用冷酒精浓缩和沉淀DNA时所用的95%酒精,必须经过充分预冷后才能使用,冷酒精与含DNA的氯化钠溶液体积比是2:1。
如果用冷酒精处理后,悬浮于溶液中的丝状物较少,可将混合液放于冰箱中再冷却几分钟,然后再用玻璃棒卷起丝状物。
⑥盛放鸡血细胞液的容器和实验中的烧杯和试管最好也是塑料制的。
由于玻璃表面带电荷,DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面,故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。
课时2跟踪训练一、单项选择题1.下列图示中能反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()2.下列关于基因、DNA和染色体的叙述,正确的是()A.DNA只存在于染色体上B.每个染色体总是只含有一个DNA分子C.一个DNA分子含有一个基因D.不同基因中脱氧核苷酸序列不同3.对真核细胞的基因的叙述不正确的是()A.没有调控基因B.有RNA聚合酶结合位点C.能控制合成RNA聚合酶D.并不是所有区域都可以编码蛋白质4.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA的粘稠物的操作过程中均用到蒸馏水,其作用在于()A.前者用来溶解血细胞,后者用来溶解DNAB.前者使血细胞吸水破裂,后者用来稀释NaCl溶液C.前者用来分离细胞核与细胞质,后者用来提取DNAD.前者使DNA从核中分离出来,后者使DNA析出5.制备鸡血细胞液的过程中,要除去上清液的主要原因是()A.上清液中存在有毒物质B.上清液中的某些成分能与DNA结合成复合物C.DNA分子不存在于上清液中D.上清液中水分含量高,影响DNA的提取6.在DNA的粗提取和鉴定的实验中,提取含杂质较少的DNA时必须用()A.0.14 mol/L的NaCl溶液B.玻璃棒充分搅拌直至丝状物溶解C.经充分预冷的95%的酒精溶液D.0.lg/mL的柠檬酸钠溶液7.科学家利用“同位素标记法”弄清了许多化学反应的详细过程。
高三生物一轮复习 5.1 NDA的粗提取与鉴定
课题1DNA的粗提取与鉴定【目标导航】 1.理解DNA的理化性质及进行DNA的粗提取和鉴定的原理。
2.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
一、提取DNA的方法1.提取生物大分子的基本思路选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
2.提取DNA的思路:利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
3.原理(1)DNA的溶解性:①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同。
利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离的目的。
②DNA不溶于酒精,但是细胞中的某些蛋白质则溶于此溶液。
(2)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性:①蛋白酶能水解蛋白质,但对DNA没有影响。
②大多数蛋白质不能忍受60~80_℃的高温,而DNA在80_℃以上才会变性。
③洗涤剂能瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
4.DNA的鉴定在沸水浴的条件下,DNA与二苯胺反应呈现蓝色。
注意二苯胺试剂要现配现用。
二、DNA粗提取实验流程1.实验材料的选取选用DNA含量相对较高的生物组织。
2.破碎细胞,获取含DNA的滤液(1)动物细胞的破碎——以鸡血为例在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。
(2)植物细胞的破碎——以洋葱为例先将洋葱切碎,然后加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
3.去除滤液中的杂质(1)方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。
(2)方案二:直接向滤液中加入嫩肉粉,反应10~15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
(3)方案三:将滤液放在60~75____℃的恒温水浴箱中保温10~15 min,注意严格控制温度范围,使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未发生变性,可以将DNA 与蛋白质分离。
4.DNA的进一步提纯利用DNA不溶于冷却的酒精溶液这一原理,可从溶液中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状物。
江苏省盐城中学高中生物 技术实践知识点总结 课题1 DNA的粗提取与鉴定 苏教版选修1
江苏省盐城中学高中生物技术实践知识点总结课题1 DNA的粗提取与鉴定苏教版选修1·提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
·DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。
·在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。
酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。
从理论上分析,预冷的乙醇溶液具有以下优点。
一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子运动,易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂。
·采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的?将DNA和蛋白质进一步分离。
·提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。
利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值?蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
补充:DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋,其温度在80℃以上,如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
·洗涤剂在提取DNA中有何作用?洗涤剂将细胞膜上的蛋白质,从而瓦解细胞膜。
·当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
原理总结:通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。
高三生物一轮复习 DNA的粗提取与鉴定导学案 新人教版
高三生物一轮复习 DNA的粗提取与鉴定导学案新人教版【重难点突破】一DNA的理化性质有哪些1.DNA的溶解性DNA分子和蛋白质等其他分子在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。
DNA不溶于酒精,但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
利用这一点,可以将DNA与蛋白质进一步分离。
DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。
NaCl浓度从2 mol/L降低过程中,溶解度逐渐增大由上表可以看出,在NaCl为2mol/L时DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质;NaCl为O.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶解的部分蛋白质。
2.DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响(DNA水解酶能水解DNA分子),大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温,而DNA在80℃以上才会变性。
洗涤剂能够分解细胞膜但对DNA没有影响。
从细胞中提取DNA可用洗涤剂来破坏细胞膜。
3.DNA的鉴定(1)二苯胺鉴定:在沸水浴的条件下,DNA被二苯胺染成蓝色。
(2)紫外线照射法:配制染色剂。
用蒸馏水配制成万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。
将玻璃棒上缠绕的白絮状物抹于蜡纸上,再滴加1滴EB溶液染色;将蜡纸放在紫外灯(260 nm)下照射(暗室中),可见橙红色的荧光(DNA的紫外线吸收高峰在280 nm)处。
【典题演示1】1.(09江苏生物)下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有()A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化【答案】BD【解析】本题主要考查DNA与蛋白质在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度,以及血红蛋白分离及提纯和相关知识。
江苏盐城市2018届高三生物一轮复习第十三单元生物技术第4讲DNA的粗提取与鉴定作业苏教版
第4讲 DNA的粗提取与鉴定一、单项选择题1. (2013·江苏卷)某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是( )A. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC. 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热2. (2016·南京二模)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是( )A. DNA既溶于物质的量浓度为2mol·L-1的NaCl溶液也溶于蒸馏水B. 向鸡血细胞液中加蒸馏水是为了释放出DNAC. 向溶解DNA的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出DNAD. 用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同3. (2016·盐城模拟)以菜花为实验材料进行“DNA粗提取与鉴定”的实验中,下面操作与目选项 A B C D加入试剂加入蒸馏水加入食盐洗涤剂体积分数为95%冷却的酒精目的使细胞破裂溶解DNA瓦解细胞膜析出DNA4. (2016·南京一模)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是( )A. 向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNAB. 鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴C. 利用鸡血细胞提取DNA时,初步析出DNA的试剂是物质的量浓度为mol·L-1的NaCl溶液D. 向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为95%的酒精,可以获得无杂质的DNA5. (2016·扬州模拟)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同,下列有关叙述不正确的是组别实验材料提取核物质时加入的溶液去除杂质时加入的溶液DNA鉴定时加入的试剂甲鸡血蒸馏水体积分数为95%的酒精(25 ℃)二苯胺乙菜花蒸馏水体积分数为95%的酒精(冷却)双缩脲试剂丙猪血蒸馏水体积分数为95%的酒精(冷却)二苯胺丁鸡血蒸馏水体积分数为95%的酒精(冷却)二苯胺A. 实验材料选择错误的组别是丙B. 沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C. 甲组实验现象差的原因是25 ℃的酒精对DNA的凝集效果差D. 乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂6. 若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等,其不可能的原因是 ( )A. 植物细胞中DNA含量低B. 研磨不充分C. 过滤不充分D. 体积分数为95%冷酒精的量过少7. (2015·南通、扬州三模)如右图是利用鸡血粗提取DNA的基本操作,下表选项烧杯甲中的试剂烧杯乙中的液体或物质操作目的A 蒸馏水鸡血细胞液使鸡血细胞吸水涨破B 蒸馏水含DNA的浓NaCl溶液去除不溶于低浓度NaCl溶液中的杂质C 冷却的酒精含DNA的浓NaCl溶液去除溶于酒精中的杂质D物质的量浓度为2 mol·L-1的NaCl溶液纱布上的黏稠物去除不溶于物质的量浓度为2 mol·L-1NaCl溶液中的杂质8. (2016·南通一模)“DNA的粗提取”实验中,应尽可能避免DNA断裂和降解。
(江苏专版)高考一轮复习第4讲DNA的粗提取与鉴定讲义(选修1)(生物 含解析)
| 实验:DNA 的粗提取与鉴定b[思维导图·成一统][基础速练·固根基]1.判断下列叙述的正误(1)用不同浓度的NaCl 溶液反复溶解与析出DNA 可去除蛋白质(√)(2)提取DNA 时,如果没有鸡血材料,可用猪血代替(×)(3)在DNA 的粗提取与鉴定实验中,用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同(×)(4)洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA 在NaCl 溶液中的溶解度(×)(5)将制备的含有DNA 的滤液加入60~75 ℃的恒温水浴箱中保温10~15 min ,可以将DNA 析出(×)(6)实验中两次使用蒸馏水的目的不同(√)(7)在DNA 的粗提取与鉴定实验中,将丝状物溶解在2 mol/L NaCl 溶液中,加入二苯胺试剂即呈蓝色(×)2.填空识记实验原理(1)粗提取原理:DNA 在不同浓度NaCl 溶液中溶解度不同,且不溶于冷酒精。
①DNA 与蛋白质在不同浓度的NaCl 溶液中溶解度不同。
②DNA 与杂质对酶、高温和洗涤剂的耐受性不同。
③DNA 不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,利用这一原理可将DNA 与蛋白质进一步分离。
(2)鉴定原理: DNA +二苯胺试剂――→沸水浴 蓝色。
3.填空掌握操作流程4.据图回答①~④操作的目的分别是什么①_____________________________________________________________________,②_________________________________________________________________,③________________________________________________________________________,④________________________________________________________________________。
高三生物一轮复习教案:DNA的粗提取与鉴定
DNA 的粗提取与鉴定教学目的1. 初步掌握DNA 粗提取和鉴定的方法。
2. 观察提取出来的DNA 物质。
实验原理1. DNA 在NaCl 溶液中的溶解度是随NaCl 的浓度变化而改变的。
DNA 在0.14mol/L 的NaCl 溶液中的溶解度最低,据此可使溶解于NaCl 溶液中的DNA 析出。
2. DNA 不溶于酒精溶液,但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液,据此可提取杂质较少的DNA 。
3. DNA +二苯胺−−→−沸水浴蓝色(用于DNA 的鉴定)实验步骤1.材料制备0.1G/ml 柠檬酸钠100ml 500ml 烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min 离心2min →吸去上清液→活鸡血180ml即得鸡血细胞液(也可将上述烧杯置于冰箱中,静置一天使鸡血细胞自行沉淀)2.方法步骤取血细胞液5-10ml +20ml 蒸馏水,玻璃棒沿一个方向快速搅拌(1)提取血细胞核物质 纱布过滤,滤液中含DNA 和其他核物质,如蛋白质原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破,玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂(2)溶解核内DNA :滤液+2mol/LNaCl 溶液40ml ,玻璃棒沿一个方向搅拌(3)析出含DNA 的粘稠物:向上述溶液中缓缓加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液相当于稀释到0.14mol/L )(4)滤取含DNA 的粘稠物:用多层纱布过滤,含DNA 的粘稠物留在纱布上(5)DNA 粘稠物再溶解: 20ml2mol/LNaCl 溶液 50ml 烧杯,上述粘稠物 缓慢搅拌3 min(6)过滤含DNA 的2mol/LNaCl 溶液:用2层纱布过滤,滤液中含DNA(7)提取含杂质较少的DNA :上述溶液+95%酒精,缓慢搅拌,出现乳白色丝状物,用玻璃棒将丝装物卷起。
(8)DNA 鉴定:实验关键:本实验成功的关键是获取较纯净的DNA ,因此应注意:1.充分搅拌鸡血细胞液。
江苏盐城中学2018届高三一轮复习学生作业第十三单元生物技术第4讲 DNA的粗提取与鉴定 含解析
学必求其心得,业必贵于专精第4讲DNA的粗提取与鉴定一、单项选择题1。
(2013·江苏卷)某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是( )A. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC。
加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热2. (2016·南京二模)下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是( )A。
DNA既溶于物质的量浓度为2mol·L-1的NaCl溶液也溶于蒸馏水B. 向鸡血细胞液中加蒸馏水是为了释放出DNAC. 向溶解DNA的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出DNAD。
用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同3. (2016·盐城模拟)以菜花为实验材料进行“DNA粗提取与鉴定”4。
(2016·南京一模)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是()A. 向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNAB。
鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴C. 利用鸡血细胞提取DNA时,初步析出DNA的试剂是物质的量浓度为0。
14 mol·L-1的NaCl溶液D. 向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为95%的酒精,可以获得无杂质的DNA5. (2016·扬州模拟)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但学必求其心得,业必贵于专精的酒精(冷却)A。
实验材料选择错误的组别是丙B。
沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C。
甲组实验现象差的原因是25 ℃的酒精对DNA的凝集效果差D. 乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂6. 若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等,其不可能的原因是()A。
植物细胞中DNA含量低B。
25.1 DNA的粗提取与鉴定-2018年高三生物一轮总复习名师伴学含解析
【学案导航】-——明方向!【课程学习目标】1. 了解DNA的物理化学性质。
2。
理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理.第一层级:预学区.不看不讲【知识体系梳理】1.提取DNA的基本思路:(1)生物大分子的提取:选用一定的________方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
(2)DNA的粗提取:利用DNA与_______________等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.提取DNA的原理:(1)利用DNA的溶解度方面的性质。
①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的_______________中溶解度不同;②DNA不溶于________溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
(2)利用DNA的耐受性方面的性质。
①蛋白酶能水解________,但对DNA没有影响.②大多数________不能忍受60〜80°C的高温,而DNA在80°C以上才会变性。
③洗涤剂能够瓦解________,但对________没有影响。
3.DNA的鉴定:DNA+________________.4.“DNA的粗提取与鉴定”实验材料的选取:选用____________________的生物组织。
5.“DNA的粗提取与鉴定”的实验过程中,破碎细胞,获取含DNA的滤液:(1)动物细胞(以鸡血为例):在鸡血细胞液中加入一定量的________,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液。
(2)植物细胞(以洋葱为例):先将洋葱切碎,加入一定的____________________,充分搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
6.“DNA的粗提取与鉴定”的实验过程中,去除滤液中的杂质:(1)方案一:通过控制________溶液的浓度,去除杂质。
(2)方案二:直接在滤液中加入________,反应10〜15 min,嫩肉粉中的________能够分解蛋白质。
(3)方案三:将滤液放在60〜75 °C的恒温水浴箱中保温10〜15 min,注意严格控制温度范围,使蛋白质沉淀,将________分离。
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第4讲 DNA 的粗提取与鉴定一、单项选择题1. (2013·江苏卷)某同学用洋葱进行DNA 粗提取和鉴定实验,操作错误的是 ( )A. 加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B. 用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC. 加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D. 加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热2. (2016·南京二模)下列有关“DNA 的粗提取与鉴定”实验的叙述,错误的是 ( ) A. DNA 既溶于物质的量浓度为2mol·L -1的NaCl 溶液也溶于蒸馏水B. 向鸡血细胞液中加蒸馏水是为了释放出DNAC. 向溶解DNA 的浓盐溶液中加蒸馏水是为了析出DNAD. 用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同3. (2016·盐城模拟)以菜花为实验材料进行“DNA 粗提取与鉴定”的实验中,下面操作与目4. (2016·南京一模)下列有关“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是 ( )A. 向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNAB. 鉴定DNA 时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴C. 利用鸡血细胞提取DNA 时,初步析出DNA 的试剂是物质的量浓度为0.14 mol·L -1的NaCl 溶液D. 向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为95%的酒精,可以获得无杂质的DNA5. (2016·扬州模拟)在“DNA 的粗提取与鉴定”实验中,甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外,其他操作步骤均正确,但实验结果却不同,下列有关叙述不正确的是A. 实验材料选择错误的组别是丙B. 沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁C. 甲组实验现象差的原因是25 ℃的酒精对DNA 的凝集效果差D. 乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂6. 若从植物细胞中提取DNA,发现实验效果不好,如看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定时不显示颜色反应等,其不可能的原因是 ( )A. 植物细胞中DNA 含量低B. 研磨不充分C. 过滤不充分D. 体积分数为95%冷酒精的量过少7. (2015·南通、扬州三模)如右图是利用鸡血粗提取DNA 的基本操作,下表8.(2016·南通一模)“DNA 的粗提取”实验中,应尽可能避免DNA 断裂和降解。
下列相关操作正确的是 ( )A. 以菜花为材料进行研磨时,可以适当加热以促进DNA 溶解B. 向DNA 溶液中迅速加入蒸馏水,使DNA 快速析出C. 将丝状物溶解到物质的量浓度为2mol·L -1的NaCl 溶液中后,加水析出D. 向DNA 溶液中加入冷却的酒精并沿同一方向缓慢搅拌9. (2016·泰兴模拟)如下图是有关“DNA 的粗提取与鉴定实验”的原理、操作图,相关叙述不正确的是 ( ) A. 图A 中M 点的物质的量浓度为0.14 mol·L -1B. 图B 中加蒸馏水的目的是析出DNAC. 用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤相同D. 图C 操作目的是去除不溶于高浓度NaCl 的杂质10. (2016·盐城模拟改编)甲、乙两图为“DNA 的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图。
相关叙述正确的是 ( )A. 图甲的烧杯和图乙的试管中所用溶剂都为NaCl 溶液,但两者浓度不同B. 图乙试管经沸水浴后即可观察到两支试管中的溶液均变蓝,但颜色深浅程度不同C. 图甲操作需用玻璃棒迅速搅拌以使DNA 成为絮状沉淀并缠绕在玻璃棒上D. 图乙操作中所用的二苯胺试剂需现配现用以达到较好的鉴定效果二、 多项选择题11. (2016·盐城三模)下列有关“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是 ( )A. 新鲜猪血、菜花等动植物材料均可用于DNA 的粗提取B. 植物材料需先用洗涤剂破坏细胞壁再吸水涨破C. DNA 不溶于体积分数为95%的冷酒精而溶于物质的量浓度为2 mol·L -1的NaCl 溶液D. 溶有DNA 的NaCl 溶液中加入二苯胺试剂,需沸水浴加热后冷却,再观察颜色12. (2016·苏北三市三模)下图所示为“DNA的粗提取与鉴定”实验的部分操作过程,有关分析正确的是( )A. 图①④中加入蒸馏水的目的相同B. 图①中向鸡血细胞液内加入少许嫩肉粉有助于去除杂质C. 图②操作的目的是纯化DNA,去除溶于体积分数为95%酒精中的杂质D. 图③中物质的量浓度为2 mol·L-1的NaCl溶液能溶解黏稠物中的DNA13. (2016·苏锡常镇二模)利用鸡血粗提取DNA,在滤液中含有较多DNA的操作的是( )A. 向鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水,用玻璃棒搅拌后过滤B. 向DNA溶液中加入冷却的体积分数为95%的酒精,用玻璃棒卷起丝状物后过滤C. 将含DNA的黏稠物加入物质的量浓度为2 mol·L-1的NaCl溶液中,用玻璃棒搅拌后过滤D. 将含DNA的黏稠物加入物质的量浓度为0.14 mol·L-1的NaCl溶液中,用玻璃棒搅拌后过滤三、非选择题14. 下图为“D NA的粗提取与鉴定”实验的相关操作。
请回答下列问题:(1) 图中实验材料A可以是等,研磨前加入的B应该是。
(2) 通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入 2 mol·L-1的NaCl溶液的目的是 ,再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸馏水的目的是。
(3) 在该实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2 mL的4种溶液中,经搅拌(4) DNA鉴定的原理是。
15. (2016·南通三模)生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究,主要实验流程如下图,其中SDS(十二烷基硫酸钠)具有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性等作用,苯酚和氯仿不溶或微溶于水。
它们的密度均大于水。
请分析回答:(1) 步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理的主要优点是。
在常温条件下,也可向切碎的组织材料中加入一定量的 ,(2) 根据实验流程可推知,步骤③④所依据的原理是。
(3) 步骤⑤加入2~3倍体积分数95%乙醇的目的是。
(4) 下面是某同学设计的DNA鉴定实验的主要步骤:①取1支20 mL试管,向其中先后加入物质的量浓度为2 mol·L-1的NaCl溶液5 mL和少量絮状DNA沉淀,用玻棒搅拌使其溶解。
②向试管中加入4 mL二苯胺试剂,混匀后将试管置于50~60 ℃水浴中加热 5 min,待试管冷却后,观察溶液是否变蓝。
请指出上面实验步骤中的两个错误: 、。
(5) 兴趣小组成员还以同种苹果的不同组织器官为材料,测定不同组织细胞中DNA的含量,结果如下表(试从细胞分裂的角度,解释不同生物材料中DNA含量差异明显的原因:1. A 【解析】加入洗涤剂后研磨动作要轻缓、柔和,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作;利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开,起到纯化的作用;加入酒精溶液,静置溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA,用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌,防止其断裂;用二苯胺鉴定DNA需要沸水浴加热。
2. D 【解析】用菜花替代鸡血作为实验材料,需要加入洗涤剂和食盐,且需要进行研磨。
3. A 【解析】植物细胞具有细胞壁,加入蒸馏水不会使细胞吸水涨破,A错误;DNA在氯化钠溶液中的溶解度是随着氯化钠浓度的变化而变化的,当氯化钠的物质的量浓度为0.14 mol L-1时,DNA的溶解度最低,然后加入食盐,DNA会溶解,B正确;加入洗涤剂会瓦解细胞膜,C正确;DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精,故加入95%冷却的酒精可析出DNA,D正确。
4. C 【解析】用菜花组织提取DNA时,要加入洗涤剂,洗涤剂可以瓦解细胞膜;鉴定DNA时,应将丝状物溶于一定浓度的NaCl溶液中,再加入二苯胺试剂进行沸水浴;DNA在0.14 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度小,所以初步析出DNA的试剂是0.14 mol·L-1的NaCl溶液;向粗提取的DNA中加入冷却的体积分数为95%的酒精,可以进一步去除杂质,但不等于无杂质。
5. D 【解析】鸡血、菜花中都含有DNA,而猪是哺乳动物,其成熟的红细胞中不含DNA,因此实验材料选择错误的组别是丙,A正确;甲、乙、丁的实验材料中都含有DNA,但乙为植物,将植物细胞放入蒸馏水中,植物细胞不会吸水涨破,且DNA应该用二苯胺鉴定,而不能用双缩脲试剂鉴定,因此沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁,B正确、D错误;甲组实验现象差的原因是25 ℃的酒精对DNA的凝集效果差,C正确。
6. A 【解析】研磨不充分、过滤不充分均会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少;若用于沉淀DNA的酒精量过少,也会导致DNA的沉淀量变少。
7. B 【解析】 A选项使鸡血细胞在低渗溶液中吸水涨破;B选项是降低NaCl溶液浓度,使DNA析出,除去溶于低浓度NaCl溶液的杂质;C选项是利用DNA不溶于冷却的酒精的原理,去除溶于酒精的杂质;D选项是高浓度NaCl溶液溶解DNA,去除不溶的杂质。
8. D 【解析】以菜花为材料进行研磨时要加洗涤剂和食盐,不能加热,否则DNA水解酶活性会上升,会加速分解DNA;向DNA溶液中加蒸馏水要缓慢,使DNA充分析出;将丝状物溶解到2 mol·L-1NaCl溶液中的目的是为了进行鉴定,应该继续加入二苯胺试剂,不是加水;向DNA溶液中加入冷酒精并沿同一方向缓慢搅拌析出DNA,防止DNA断裂。
9. C 【解析】 NaCl溶液的物质的量浓度为0.14 mol·L-1时,DNA的溶解度最小,因此图A 中M点为0.14 mol·L-1,A正确;图B中加蒸馏水的目的是降低NaCl的浓度,使DNA逐渐析出,B 正确;用菜花替代鸡血作为实验材料,其实验操作步骤不完全相同,如动物细胞破碎的方法是加入蒸馏水,而植物细胞破碎的方法是研磨,还需要加入食盐和洗涤剂,C错误;DNA在高浓度NaCl溶液中的溶解度高,因此图C操作目的是去除不溶于高浓度NaCl的杂质,D正确。
10. D 【解析】图甲的烧杯中所用的溶液是冷却的体积分数为95%的酒精,A错误;图乙试管经沸水浴后即可观察到一支试管中的溶液(含有DNA)明显变蓝,另一支试管中的溶液(不含DNA)不变蓝,B错误;图甲操作需用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌以卷起丝状DNA,C错误。
11. CD 【解析】新鲜菜花可用于DNA的粗提取,但猪血中几乎不含DNA;植物材料需先用洗涤剂破坏细胞膜。
12. BCD 【解析】图①中加入蒸馏水是为了使鸡血细胞吸水涨破,释放出DNA,④中加入蒸馏水是为了降低NaCl的浓度,析出DNA;图①中向鸡血细胞液内加入少许嫩肉粉有助于去除蛋白质等杂质;图②目的是去除溶于95%酒精中的杂质,纯化DNA;DNA在2 mol·L-1NaCl溶液中溶解度较大。