药物分析实验作业

实验作业二
一、作业要求
进入“实验教学”查看“设计性实验”学习内容。

在以下7个设计性实验内容中选做至少两个不同类型（区别与鉴别、检查、含量测定）实验内容，完成3学时设计性实验内容。

二、内容
注：以上设计性实验的具体要求请点击“实验教学”——“设计性实验”查看。

三、完成作业
实验一：药物的鉴别试验
1、苯佐卡因的鉴别试验：苯佐卡因属于芳香胺类药物，具有对氨基苯甲酸酯的结构，可以利用结构中的芳伯氨基，采用芳香第一胺（重氮化-偶合）反应；同时利用其结构中酯键水解后产生乙醇，与碘作用生成特异臭味的碘仿而鉴别之。

（1）碘仿反应：取供试品约0.1g，加氢氧化钠试液5ml，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。

（2）重氮化-偶合反应：取供试品约50mg，加稀盐酸1ml，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mol/L 亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性b-萘酚试液数滴，生成橙红色沉淀。

2、硫酸链霉素的鉴别试验：利用硫酸链霉素结构中苷键在适当条件下水解，产生链霉糖、链霉胍，前者有专属的麦芽酚反应，后者有坂口反应，可以用来鉴别链霉素。

（1）麦芽酚反应：取供试品约20mg，加水5ml溶解后，加氢氧化钠试液0.3ml，置水浴上加热5分钟，加硫酸铁铵溶液（取硫酸铁铵0.1g，加0.5mol/L硫酸溶液5ml使溶解）0.5ml，即显紫红色。

（2）坂口反应：取供试品约0.5mg，加水4ml溶解后，加氢氧化钠试液2.5ml与0.1%8-羟基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至约15℃，加次溴酸钠试液3滴，即显橙红色。

实验二：药物的区别试验
可采用三氯化铁反应，在不同实验条件下，两者产生不同的结果。

方法如下：
（1）水杨酸：取供试品适量，加水溶解制成稀溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫色。

（2）苯甲酸：取供试品约0.2g，加0.4%氢氧化钠溶液15ml，振摇，滤过，滤液中加三氯化铁试液2滴，即生成赭色沉淀。

实验三：药物的区别、鉴别试验
1、首先从外观性状进行分析，然后选择相对简单的方法进行区别，再后选择专属鉴别试验进行确证。

2、异烟肼在水中易溶，在乙醇中微溶；维生素B1在水中易溶，在乙醇中微溶；硫酸奎宁在三氯甲烷-无水乙醇（2:1）中易溶，在水、乙醇、三氯甲烷中微溶。

3、维生素B1的水溶液具有氯化物鉴别反应和硫色素专属鉴别反应；硫酸奎宁的稀硫酸溶液显蓝色荧光，具有氯奎宁专属反应；异烟肼具有酰肼基的银镜反应、缩合反应。

4、方法举例：
第一步：初步区别
第二步：区别
第三步：确证
异烟肼——取本品约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。

维生素B1——取本品约5mg，置试管中，加氢氧化钠试液2.5ml溶解后，加铁氰化钾试液0.5ml与正丁醇5ml，强力振摇2分钟，放置使分层，上面的醇层显强烈的蓝色荧光；加酸使成酸性，荧光消失，再加碱使成碱性，荧光又出现。

硫酸奎宁——取本品约5mg，置试管中，加水5ml溶解后，加溴试液3滴与氨试液1ml，即显翠绿色。

说明：
1、第一步用溶解度进行判断，取用量与溶剂量需严格按照药典凡例规定进行，易溶系指1g物质在不到10ml溶剂中完全溶解；微溶系指1g物质在100到1000ml溶剂中完全溶解。

2、第二步①法是鉴别氯化物，只有维生素B1有此反应；②、③分别是鉴别硫酸奎宁的硫酸根和荧光性质，可任选一项。

3、第三步确证，可根据前二步结果，选择其中一个药物的专属鉴别试之。

4、以上方法组合并不是唯一的，可以有其它组合。

实验四药物的特殊杂质检查（一）
贝诺酯中游离水杨酸的检查——利用水杨酸有游离酚羟基，贝诺酯没有游离酚羟基不会干扰显色，采用高铁离子比色法。

方法如下：
取本品0.1g，加乙醇5ml，加热溶解后，加水适量，摇匀，滤入50ml比色管中，加水使成50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液1ml，摇匀，30秒钟内如显色，与对照液比较，不得更深（0.1%）。

对照液制备：精密称取水杨酸0.1g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀，再加水适量至刻度，摇匀。

精密量取1ml，置另一比色管中，加乙醇5ml与水44ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml，摇匀。

实验五药物的特殊杂质检查（二）
肾上腺素中肾上腺酮的检查——利用肾上腺酮在310nm波长处有最大吸收，而肾上腺素在此波长处无吸收的特性，采用紫外分光光度法，于310nm测定一定量供试品溶液的吸光度来检查酮体的量。

方法如下：取本品，加盐酸溶液(9→2000) 制成每1ml 中含2.0mg 的溶液，在310nm 的波长处测定，吸光度不得过0.05。

实验六药物含量测定（一）
阿司匹林及其制剂的含量测定——分析阿司匹林结构特点，属于芳酸类药物，有较强的酸性，可以用碱滴定液直接滴定，其制剂因辅料、水解产物游离水杨酸等干扰，一般不采用直接滴定法。

而是采用其它一些方法或采取适当措施后再滴定。

如2005年版中国药典采用两步滴定法测定片剂含量（有关原理、方法、注意事项等，查阅2005年版中国药典及有关教材）；2010年版中国药典采用HPLC法测定（查阅2010年版药典，以及有关文献）。

对于复方制剂中的阿司匹林、体内生物样本中的阿司匹林的分析，干扰因素就更多，常需进行适当前处理，然后采用适当方法进行分析（查阅文献）。

实验七药物含量测定（二）
②磺胺嘧啶及其制剂的含量测定——分析磺胺嘧啶的结构，具有芳伯氨基和磺酰氨基，可利用芳伯氨基的重氮化反应，采用亚硝酸钠滴定法测定含量，如中国药典对其原料、部分制剂采用亚硝酸钠滴定法，以永停法指示终点（有关原理、方法、注意事项等，查阅中国药典及有关教材）；2010年版中国药典采用HPLC法测定磺胺嘧啶片、磺胺嘧啶混悬液的含量（查阅2010年版药典，以及有关文献）。

对于复方制剂中的磺胺嘧啶、体内生物样本中的磺胺嘧啶的分析，还受到其他药物的干扰、生物体液中内源性物质的干扰，常需进行适当前处理，然后采用适当方法进行分析（查阅文献）。