生化检测方法汇总情况
常见的生化检测方法
---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------常见的生化检测方法Western-blot 法 Western Blot 印迹法是把通过电泳分离的蛋白质组分从凝胶转移至一种固相支持物,通过抗体与附着于固相支持物的靶蛋白的抗原表位发生特异性反应进行检测。
Western Blot 既可以定性,又可以半定量,是初步鉴定靶蛋白表达的最方便也是最通用的方法。
1、试剂耗材的准备:⑴、转膜缓冲液(48 mM Tris-HCl, 39 mM 甘氨酸, 0. 037% SDS, 20%甲醇):⑵、 10丽春红染液:⑶、 TBS 缓冲液:⑷、 TBST 缓冲液(含 20%Tween20 的 TBS 缓冲液):⑸、封闭液(含 5%脱脂奶粉的 TBST 缓冲液):⑹、一抗、二抗及抗体稀释液:参照说明书,以封闭液或 TBST 进行稀释。
⑺、底物显色液 ECL,4℃ 避光保存,现用现配。
⑻、显影液和定影液。
用水稀释 10-20 倍于铝盒中,可多次使用。
室温避光存放。
2、实验步骤:⑴、蛋白样品制备:1 / 15用细胞裂解液抽提蛋白,并测蛋白浓度。
⑵、取 1mg 蛋白进行 SDS-PAGE。
⑶、转膜:(转膜缓冲液4℃预冷备用,冷却装置于-80℃冰箱冷冻备用)。
⑷、将 2 张海绵垫、 2 张滤纸、转膜夹子及玻棒浸泡在盛转膜缓冲液的铝盒中。
⑸、戴上手套,剪一张与凝胶尺寸相近的 PVDF 膜(83 mm75 mm),左上角剪一缺口作为标记,浸泡在盛有 20mL 甲醇的平皿中约 15 sec,直到膜变半透明。
用纯水冲洗膜2 次。
浸泡在盛转膜缓冲液的铝盒中。
⑹、 SDS-PAGE 结束后,小心地剥下两块凝胶,一块用于考马斯亮兰染色观察电泳情况,另一块浸泡在转膜缓冲液中预平衡。
生化的检测原理和方法
生化的检测原理和方法
生化的检测原理和方法是通过测量生物体内相关物质或生物过程的变化来判断生物体的健康状况或病理状态。
生化检测的原理主要有以下几种:
1. 化学法:利用化学反应来检测生物体内的化学物质浓度变化。
例如,酶促反应法可以测量血糖、血脂等物质的浓度。
2. 免疫学法:利用抗原与抗体的特异性结合来检测相关物质的存在。
例如,酶联免疫吸附试验(ELISA)可以检测病原体、
药物、激素等的浓度。
3. 光谱法:利用物质对光的吸收、散射或发射特性进行测定。
例如,紫外可见光谱可以测定蛋白质、核酸等的浓度。
4. 电化学法:利用电流、电位等电化学参数来检测生物体内活性物质的浓度变化。
例如,电化学法可以测定电解质、肝功能、心肌损伤等指标。
而生化检测的方法通常包括以下几个步骤:
1. 采集样本:一般通过采血、尿液、体液等方式采集样本。
2. 样本预处理:对采集到的样本进行处理,如离心、滤过、稀释等,以得到合适的测试样品。
3. 加入试剂:将样品与相应的试剂进行反应,触发化学、生物或免疫反应。
4. 测量结果:利用相应的仪器设备对反应后的样品进行测量,如光谱仪、分光光度计、电化学分析仪器等。
5. 分析结果:根据测量结果,与参考范围或标准曲线对比,来评估样品中所测定物质的浓度。
6. 结果判读:将分析得到的结果与相关的疾病诊断标准进行比
对,判断生物体的健康状况或病理状态。
总之,生化的检测原理和方法通过测量生物体内相关物质或生物过程的变化,利用化学、免疫学、光谱学等原理,通过一系列的采集、处理、反应和测量等步骤来进行。
生化分析仪的常用检测方法
生化分析仪的常用检测方法
生化分析仪以机械化的设备模仿代替以前的手工操作,它的应用提高了工作效率,减少了主观误差,具有灵敏、准确、快速、标准化等特点,成为医院检验科必备的检测设备。
按照生化分析仪的结构原理,生化分析仪可以分为管道连续流动式、分立式、离心式和干片式等几种,目前临床最常用的是分立式生化分析仪,其常用检测方法包括终点法、固定时间法和连续监测法。
终点法:
被测物质在反应过程中完全被转变为产物,即达到反应终点,根据终点吸光度的大小求出被测物浓度,称为终点法。
终点法参数设置简单,反应时间一般较长,精密度较好
固定时间法:
指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点,此两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度,这两点的吸光度差值用于结果计算,称为固定时间法。
该分析方法有助于解决某些反应的非特异性问题。
连续监测法:
又称速率法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期的吸光度值,并以此线性期的单位吸光度变化值(ΔA/min)计算结果。
连续监测法的优点即是可以确定线性期并计算ΔA/min,根据此值再准确地计算酶活性,因而使自动生化分析仪在酶活性测定方面显著地优于手工法。
通常情况下,全自动的生化分析仪是几种检测方法并存,如海力孚的HF240-300全自动生化分析仪检测方法就包括终点法、动力学法、免疫比浊发、固定时间发、双试剂法等,仪器检测范围宽泛,是基层医院首选的医疗设备。
常用生化检测项目分析方法及参数设置
常用生化检测项目分析方法及参数设置一、常用生化检测项目分析方法举例1.终点法检测常用的有总胆红素(氧化法或重氮法)、结合胆红素(氧化法或重氮法)、血清总蛋白(双缩脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、总胆汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白胆固醇(直接测定法)、钙(偶氮砷Ⅲ法)、磷(紫外法)、镁(二甲苯胺蓝法)等。
以上项目中,除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外,其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法,包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用。
2.固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
3.连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法,如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等,也可用连续监测法。
4.透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目,多数属免疫比浊法,载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗"O"、类风湿因子,以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。
二、分析参数设置分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等,其程序均已经固化在存储器里,用户不能修改。
各种测定项目的分析参数(analysis paramete)大部分也已设计好,存于磁盘中,供用户使用;目前大多数生化分析仪为开放式,用户可以更改这些参数。
生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道,由用户自己设定分析参数。
因此必须理解各参数的确切意义。
一、分析参数介绍(一)必选分析参数这类参数是分析仪检测的前提条件,没有这些参数无法进行检测。
1.试验名称试验名称(test code)是指测定项目的标示符,常以项目的英文缩写来表示。
2.方法类型(也称反应模式)方法类型(assay)有终点法、两点法、连续监测法等,根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
常用生化检测项目分析方法与参数设置
常用生化检测项目分析方法及参数设置一、常用生化检测项目分析方法举例1.终点法检测常用的有总胆红素(氧化法或重氮法)、结合胆红素(氧化法或重氮法)、血清总蛋白(双缩脲法)、血清白蛋白(溴甲酚氯法)、总胆汁酸(酶法)、葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)、尿酸(尿酸酶法)、总胆固醇(胆固醇氧化酶法)、甘油三酯(磷酸甘油氧化酶酶法)、高密度脂蛋白胆固醇(直接测定法)、钙(偶氮砷Ⅲ法)、磷(紫外法)、镁(二甲苯胺蓝法)等。
以上项目中,除钙、磷和镁基本上还使用单试剂方式分析因而采用一点终点法外,其它测定项目都可使用双试剂故能选用两点终点法,包括总蛋白、白蛋白测定均已有双试剂可用。
2.固定时间法苦味酸法测定肌酐采用此法。
3.连续监测法对于酶活性测定一般应选用连续监测法,如丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶、γ谷氨氨酰基转移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。
一些代谢物酶法测定的项目如己糖激酶法测定葡萄糖、脲酶偶联法测定尿素等,也可用连续监测法。
4.透射比浊法透射比浊法可用于测定产生浊度反应的项目,多数属免疫比浊法,载脂蛋白、免疫球蛋白、补体、抗"O"、类风湿因子,以及血清中的其他蛋白质如前白蛋白、结合珠蛋白、转铁蛋白等均可用此法。
二、分析参数设置分析仪的一些通用操作步骤如取样、冲洗、吸光度检测、数据处理等,其程序均已经固化在存储器里,用户不能修改。
各种测定项目的分析参数(analysisparamete)大部分也已设计好,存于磁盘中,供用户使用;目前大多数生化分析仪为开放式,用户可以更改这些参数。
生化分析仪一般另外留一些检测项目的空白通道,由用户自己设定分析参数。
因此必须理解各参数的确切意义。
一、分析参数介绍(一)必选分析参数这类参数是分析仪检测的前提条件,没有这些参数无法进行检测。
1.试验名称试验名称(testcode)是指测定项目的标示符,常以项目的英文缩写来表示。
2.方法类型(也称反应模式)方法类型(assay)有终点法、两点法、连续监测法等,根据被检物质的检测方法原理选择其中一种反应类型。
生化检验的方法及原理
生化检验的方法及原理生化检验是一种通过检测血液、尿液、体液等体内物质的变化来评估人体健康状况的方法。
它通过测定体内化学物质的浓度或活性,可以提供有关内脏功能、营养状况、代谢情况以及某些疾病的信息。
下面将介绍一些常用的生化检验方法及原理。
1. 血常规检验:血常规检验是对血液中红细胞、白细胞、血小板等的数量、形态和功能状态进行检查的方法。
该检验方法主要包括测定血红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞体积分布宽度、白细胞计数、血小板计数等项目。
常用的测定方法包括血细胞自动分析仪、涂片染色和显微镜观察等。
血常规检验可以评估机体的贫血程度、血液的凝血功能以及炎症反应等。
2. 肝功能检验:肝功能检验主要包括测定血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)、总胆红素、直接胆红素、白蛋白、球蛋白等指标。
ALT和AST是血液中常用的肝细胞损伤指标,其升高提示肝细胞受到损伤。
总胆红素和直接胆红素可以评估肝脏排泄胆红素的功能,其升高可说明肝功能异常。
血清蛋白水平可以反映肝脏合成功能的变化。
3. 肾功能检验:肾功能检验常用的指标有血尿素氮(BUN)、肌酐、尿酸等。
BUN是肾脏排泄代谢废物的指标,其升高可以反映肾脏排泄功能的下降。
肌酐是肌肉代谢废物,其浓度增高可提示肾小球滤过功能减退。
尿酸是嘌呤代谢产物,尿酸增高可与痛风等疾病相关。
4. 血糖检测:血糖检测是评估糖代谢情况和糖尿病诊断的常用方法。
常用的检测方法有空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等。
其中空腹血糖是指在至少8小时禁食后测定的血糖浓度,可以鉴别糖尿病和糖尿病前期。
餐后血糖是指进食后2小时的血糖浓度,可以评估胰岛功能及胰岛素敏感性。
糖化血红蛋白是反映血糖控制情况的指标,其浓度升高可预测糖尿病的并发症。
5. 血脂检测:血脂检测是为了评估血液中脂质成分的含量和分布,以及心脑血管疾病的风险。
常用的检测指标有总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇等。
总胆固醇和甘油三酯是评估血液脂质紊乱的指标,高密度脂蛋白胆固醇被认为是“好胆固醇”,低密度脂蛋白胆固醇是“坏胆固醇”,两者浓度高低与心脑血管疾病的发生相关。
常见的生物化学实验方法
常见的生物化学实验方法生物化学实验是研究生物分子结构、功能和相互作用的重要手段,广泛应用于生物医学研究、药物开发和环境保护等领域。
本文将介绍一些常见的生物化学实验方法。
一、色谱技术色谱技术是一种分离和分析物质的方法,根据分子的化学性质和大小差异,将混合物分离成各个组分。
常见的色谱技术包括气相色谱(GC)、液相色谱(LC)和薄层色谱(TLC)等。
在生物化学实验中,色谱技术常用于对生物样品中的分子进行纯化和分析。
例如,气相色谱可用于分析氨基酸和脂肪酸等小分子化合物,液相色谱则可以用于分离蛋白质、核酸和多糖等生物大分子。
二、电泳技术电泳技术是利用电场作用下物质的电荷和大小差异,将混合物分离成各个组分的方法。
常见的电泳技术包括聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和凝胶过滤电泳等。
在生物化学实验中,电泳技术常用于分离和检测蛋白质和核酸等生物大分子。
例如,聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于分离和测定蛋白质分子量,SDS-PAGE则可以用于检测蛋白质的纯度。
三、质谱技术质谱技术是利用质量分析仪器对物质的质量和结构进行分析的方法。
常见的质谱技术包括质谱仪、飞行时间质谱(TOF-MS)和液相色谱质谱联用(LC-MS)等。
在生物化学实验中,质谱技术常用于鉴定和定量生物分子。
例如,利用质谱仪可以对蛋白质进行鉴定,通过测定样品中蛋白质的质量和碎片离子的质量谱图,确定蛋白质的氨基酸序列。
四、核酸杂交技术核酸杂交技术是利用互补的DNA或RNA序列进行结合,从而检测目标序列的方法。
常见的核酸杂交技术包括Southern blot、Northernblot和in situ hybridization等。
在生物化学实验中,核酸杂交技术常用于检测和定量特定DNA或RNA序列的存在。
例如,Southern blot可用于检测DNA片段在基因组中的分布和拷贝数,Northern blot则可用于检测特定mRNA的表达水平。
生化检验项目
生化检验项目生化检验项目是一种常见的实验室检测方法,用于评估人体健康状况和诊断疾病。
本文将详细介绍生化检验项目的标准格式,包括项目名称、目的、材料与方法、结果与分析以及结论等内容。
一、项目名称:生化检验项目二、目的:生化检验项目旨在通过分析人体体液或者组织样本中的生化指标,评估人体的健康状况,发现异常情况并提供诊断依据。
三、材料与方法:1. 样本采集:根据需要,选择合适的样本类型进行采集,如血液、尿液、脑脊液等。
2. 样本处理:根据实验要求,对采集到的样本进行预处理,如离心、稀释等。
3. 试剂准备:准备所需的试剂和标准溶液,确保其质量和浓度符合实验要求。
4. 仪器操作:使用适当的仪器设备进行实验操作,如分光光度计、电化学分析仪等。
5. 实验步骤:按照实验方案进行样本处理、试剂添加、反应时间等操作步骤。
6. 数据记录:记录实验过程中的关键数据,包括样本编号、试剂用量、反应时间等。
7. 数据分析:根据实验结果,进行数据统计和分析,如计算平均值、标准差等。
四、结果与分析:根据实验的具体目的和方法,得到的结果可能包括以下内容:1. 生化指标浓度:根据样本的生化指标测定结果,给出相应的数值,如血清中的葡萄糖浓度、尿液中的蛋白质含量等。
2. 参考范围:根据正常人群的数据统计,给出该生化指标的参考范围,用于判断结果是否正常。
3. 异常情况:如果测定结果超出了参考范围,需要指出该结果的异常性质,并进行进一步的分析和解释。
4. 相关性分析:对于多个生化指标的测定结果,可以进行相关性分析,探讨其之间的关系。
五、结论:根据实验结果和分析,得出结论,包括以下内容:1. 结果评价:根据测定结果和参考范围,对样本的生化指标进行评价,判断其是否正常。
2. 诊断依据:根据异常情况的分析和解释,提供诊断依据,如疾病的可能性、进一步的检查建议等。
六、注意事项:1. 样本采集:确保采集的样本符合实验要求,避免污染和变质。
2. 试剂准备:按照要求准备试剂,确保其质量和浓度的准确性。
检验科生化学常见检测与分析方法
检验科生化学常见检测与分析方法生化学是一门研究生物体内化学变化及相互关系的科学。
在检验科中,生化学是一项重要的技术领域,用于检测和分析样本中的化学成分和反应。
本文将介绍一些生化学常见的检测与分析方法。
一、色谱法色谱法是一种常见的分离和检测技术,广泛应用于生化学领域。
其中,气相色谱法(GC)和液相色谱法(LC)是两种常见的色谱方法。
1. 气相色谱法气相色谱法是将气体或者挥发性液体样品通过色谱柱进行分离和检测的方法。
该方法适用于分离和检测样品中的挥发性有机化合物和气体。
它的原理是通过样品在高温下蒸发,然后被带动进入色谱柱中。
在色谱柱中,不同物质由于相互作用力的差异而分离,最终通过检测器检测。
气相色谱法常用于环境监测、食品安全等领域。
2. 液相色谱法液相色谱法是将溶解在溶剂中的样品通过色谱柱进行分离和检测的方法。
该方法适用于分离和检测样品中的非挥发性有机化合物和离子。
它的原理是将样品溶解在流动相中,通过色谱柱的分离作用,不同物质在色谱柱中的停留时间不同,从而实现分离和检测。
液相色谱法常用于药物分析、食品成分分析等领域。
二、光谱法光谱法是一种通过物质对光的吸收、散射或者发射来进行分析的方法。
常见的光谱方法包括紫外可见光谱法(UV-Vis)、红外光谱法(IR)和质谱法(MS)。
1. 紫外可见光谱法紫外可见光谱法是一种用于测定物质在紫外和可见光波段吸收特性的方法。
该方法适用于分析样品中的有机物、无机物和生物分子等。
紫外可见光谱法的原理是通过物质对紫外或者可见光的吸收来得到样品的吸收光谱,进而推断出样品中的成分和浓度。
紫外可见光谱法在药物分析、环境监测等领域得到广泛应用。
2. 红外光谱法红外光谱法是一种用于测定物质在红外光波段吸收特性的方法。
该方法适用于分析样品中的有机物和无机物等。
红外光谱法的原理是通过物质对红外光的吸收来得到样品的红外光谱,进而推断出样品中的分子结构和化学键的类型。
红外光谱法在药物研发、聚合物材料分析等领域具有重要应用价值。
生物化学检验项目
生物化学检验项目
生物化学检验是通过检测生物体内的化学成分、代谢产物、酶活性等指标,来评估生物体的健康状况和疾病状态的一种实验室检查方法。
以下是一些常见的生物化学检验项目:
1. 肝功能检查:包括血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)等指标,用于评估肝脏的功能状态。
2. 肾功能检查:包括血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、尿酸(UA)等指标,用于评估肾脏的功能状态。
3. 血糖和糖尿病相关检查:包括空腹血糖(FPG)、餐后 2 小时血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)等指标,用于诊断糖尿病和评估血糖控制情况。
4. 血脂检查:包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等指标,用于评估心血管疾病的风险。
5. 电解质检查:包括钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)、钙(Ca)、镁(Mg)等指标,用于评估电解质平衡情况。
6. 心肌酶检查:包括肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)等指标,用于诊断心肌梗死和评估心肌损伤情况。
7. 肿瘤标志物检查:包括甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、前列腺特异性抗原(PSA)等指标,用于肿瘤的筛查和诊断。
这些只是生物化学检验项目的一部分,具体的检验项目和指标会根据不同的疾病类型和患者情况而有所不同。
在进行生物化学检验时,需要根据医生的建议和实验室的要求进行采样和检测,以获得准确的检验结果。
生化检验项目
生化检验项目生化检验项目是一种常见的医学检验方法,通过对人体血液、尿液和其他生物体液中的化学物质进行定量或者定性分析,以评估人体的生理功能和疾病状态。
下面将详细介绍几个常见的生化检验项目及其相关信息。
1. 血常规检验:血常规检验是评估人体血液系统功能的重要方法,通常包括血红蛋白、白细胞计数、血小板计数等指标的测定。
血常规检验可以匡助医生判断贫血、感染、出血等疾病的存在与程度。
2. 肝功能检验:肝功能检验是评估肝脏功能的关键指标,常包括血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)、总胆红素、直接胆红素等的测定。
肝功能检验可以匡助医生判断肝脏是否受损,如肝炎、肝硬化等。
3. 肾功能检验:肾功能检验是评估肾脏功能的重要方法,常包括血尿素氮(BUN)、肌酐、尿酸等指标的测定。
肾功能检验可以匡助医生判断肾脏是否正常排除代谢产物,如肾炎、肾结石等疾病。
4. 血脂检验:血脂检验是评估血液中脂质代谢情况的指标,常包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的测定。
血脂检验可以匡助医生评估血液中脂质的水平,如高血脂、动脉粥样硬化等。
5. 血糖检验:血糖检验是评估血液中葡萄糖水平的重要方法,常包括空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等指标的测定。
血糖检验可以匡助医生判断糖尿病的存在与程度,并指导糖尿病患者的治疗。
以上仅为几个常见的生化检验项目,实际上还有许多其他项目,如电解质检验、甲状腺功能检验、心肌酶谱等。
这些生化检验项目可以提供重要的医学信息,匡助医生进行疾病的诊断和治疗方案的制定。
在进行生化检验时,患者需要按照医生的指导进行采样,并在医疗机构进行检验。
检验结果将由专业的医学人员进行解读,并与患者进行沟通和解释。
需要注意的是,生化检验项目的结果受多种因素影响,如个体差异、饮食、药物等,因此,结果的解读应结合临床症状和其他检查结果进行综合分析。
如果发现异常结果,建议及时就医,接受进一步的检查和治疗。
生化检验项目
生化检验项目生化检验项目是一种常见的医学检验方法,用于评估人体内各种生化指标的水平,以帮助医生诊断疾病、监测疾病的进展和评估治疗效果。
生化检验项目通常包括血液、尿液和其他体液的检测。
以下是一些常见的生化检验项目及其相关内容:1. 血常规检验:血常规检验是评估全血细胞成分和形态学的常用方法。
它包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等指标。
这些指标可以帮助医生了解患者的贫血、感染和出血风险等情况。
2. 肝功能检验:肝功能检验是评估肝脏功能和疾病的重要方法。
它包括血清谷丙转氨酶(ALT)、血清谷草转氨酶(AST)、总胆红素、直接胆红素等指标。
这些指标可以帮助医生判断肝脏是否受损,是否存在肝炎、肝硬化等疾病。
3. 肾功能检验:肾功能检验是评估肾脏功能和疾病的重要方法。
它包括血清肌酐、血尿素氮、尿酸等指标。
这些指标可以帮助医生了解患者的肾功能是否正常,是否存在肾炎、肾结石等疾病。
4. 血脂检验:血脂检验是评估血液中脂质代谢情况的常用方法。
它包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)等指标。
这些指标可以帮助医生了解患者是否存在血脂异常、动脉粥样硬化等情况。
5. 血糖检验:血糖检验是评估血液中葡萄糖水平的常用方法。
它包括空腹血糖、餐后血糖、糖化血红蛋白等指标。
这些指标可以帮助医生判断患者是否患有糖尿病、监测糖尿病患者的血糖控制情况。
6. 电解质检验:电解质检验是评估体内电解质平衡的常用方法。
它包括血钠、血钾、血钙、血镁等指标。
这些指标可以帮助医生了解患者是否存在电解质紊乱、肾功能异常等情况。
7. 甲状腺功能检验:甲状腺功能检验是评估甲状腺功能的常用方法。
它包括甲状腺素(T3、T4)、促甲状腺激素(TSH)等指标。
这些指标可以帮助医生判断患者是否存在甲状腺功能亢进或功能减退等情况。
以上是一些常见的生化检验项目及其相关内容,这些项目可以帮助医生了解患者的健康状况,指导诊断和治疗。
生化检验项目
生化检验项目
生化检验项目是临床医学中常用的一种检验手段,通过检测人体内各种生化指标来评估机体的生理功能和疾病状态。
本文将介绍生化检验项目的普通内容和意义。
一、血常规项目
1.1 血红蛋白测定:用于评估贫血程度和输血需求。
1.2 白细胞计数:检测白细胞数量,用于评估炎症和感染程度。
1.3 血小板计数:评估凝血功能和出血风险。
二、肝功能项目
2.1 谷丙转氨酶(ALT)测定:评估肝脏功能,常用于肝炎和脂肪肝的诊断。
2.2 谷草转氨酶(AST)测定:评估肝脏和心肌损伤的程度。
2.3 白蛋白测定:评估肝脏合成功能,常用于肝功能不全的诊断。
三、肾功能项目
3.1 肌酐测定:用于评估肾小球滤过功能,检测肾功能伤害。
3.2 尿素氮测定:评估氮代谢和肾功能,常用于急性肾损伤的诊断。
3.3 尿酸测定:评估尿酸代谢和痛风的风险。
四、血脂项目
4.1 总胆固醇测定:评估心血管疾病风险,常用于高血脂症的诊断。
4.2 甘油三酯测定:评估脂肪代谢和胰岛素反抗程度。
4.3 高密度脂蛋白胆固醇测定:评估心血管健康和动脉粥样硬化的风险。
五、血糖项目
5.1 空腹血糖测定:评估糖尿病和胰岛素反抗程度。
5.2 糖化血红蛋白测定:评估长期血糖操纵情况。
5.3 葡萄糖耐量试验:评估糖耐量和胰岛素分泌功能。
综上所述,生化检验项目是临床医学中重要的辅助诊断手段,通过检测各种生化指标可以匡助医生评估患者的健康状况和疾病风险,提供有效的诊断和治疗方案。
对于患者来说,及时进行生化检验可以匡助早期发现潜在疾病,提高治疗效果和生活质量。
检验科常见生物化学检测方法与解读
检验科常见生物化学检测方法与解读生物化学检测在现代医学诊断中起着至关重要的作用。
通过检验体液中的生化指标,可以了解人体内部的代谢状态、器官功能以及疾病发生发展情况。
本文将介绍一些检验科常见的生物化学检测方法以及对检测结果进行的解读。
一、血液生化指标检测方法及解读血液生化指标是人体内部各种物质的重要代谢指标,通过测定这些指标可以评估人体健康状况。
常见的血液生化指标包括血糖、血脂、肝功能指标、肾功能指标等。
1. 血糖检测方法与解读血糖是评估糖代谢功能的指标,常见血糖检测方法有空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋白等。
空腹血糖水平在正常范围是指餐前至少8小时未进食或不含碳水化合物的饮食后,血浆中的葡萄糖浓度。
正常成年人的空腹血糖水平应该在3.9-6.1mmol/L之间。
餐后血糖检测结果能够评估人体对葡萄糖的代谢能力,正常成年人的餐后2小时血糖应该在4.0-7.8mmol/L之间。
糖化血红蛋白测定可以反映过去2-3个月的平均血糖水平,是评估长期血糖控制情况的重要指标。
2. 血脂检测方法与解读血脂指标主要包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。
检测血脂的方法有血清化学法、酶促动力学法等。
正常人的总胆固醇水平应该在3.1-5.2mmol/L之间,甘油三酯水平应该在0.6-1.7mmol/L之间,高密度脂蛋白胆固醇水平应该大于1.0mmol/L,低密度脂蛋白胆固醇水平应该小于3.4mmol/L。
3. 肝功能指标检测方法与解读肝功能指标是评估肝脏功能情况的指标,常见的包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆汁酸(TBA)等。
肝功能的测定方法有比色法、化学发光法等。
正常人的谷丙转氨酶水平一般在5-40U/L之间,谷草转氨酶水平一般在5-40U/L之间,总胆汁酸水平一般在0.2-1.5mmol/L之间。
4. 肾功能指标检测方法与解读肾功能指标是评估肾脏功能情况的指标,常见的包括尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和尿酸(UA)等。
生化检验质控方法之大全
Levey-Jennings质控图
多规则质控技术
22
一、确定质量目标
质量目标是实验室选用的质控方法所需达到 的目标,质量目标可用总允许误差的形式表示.
目前中国尚未确立各项目的总允许误差,可 参考美国(表4-1)和欧洲(表4-2).
最佳变异和常规变异的设定
最佳变异(optimal conditions variance OCV)表示实 验室在最佳条件下测定项目所能达到的最好精密 度水平。 常规变异(routine conditions variance RCV)表示实 验室在常规条件下测定项目所能达到的精密度水 平。 RCV<2OCV 或 RCV 接 近 OCV 时 , 可 接 受 ; RCV>2OCV时,不可接受.二者是反映实验室工 作水平的基础指标,也是开展室内质控工作的基 础工作。
32
(2)判断规则:
① 12S警告规则:当2份质控血清中的任意1份测定值处于 ±2s~±3s界限内,为“警报”信号。 ② 13S规则:当2份质控血清中的任意1份测定值超过
±3s界限,为“失控”。提示存在随机误差。
3s
2s
x -2s -3s
33
③ R4S规则:同一批 中二个质控结果之差 超出4s范围,其中一 个超出+2s限值,另 一个超出-2s限值, 为“失控”,属随机 误差过大。 ④ 22S规则:同批两 个质控品结果同方向 超出±2s限 值,或 同一质控品连续两次 质控结果超出±2s限 值为“失控”,多由 系统误差造成。
医学决定水平三种水平浓度。
16
医学决定水平
定义:
是指对临床诊治疾病具有决定性作用的被
分析物的浓度,是临床上按照不同病情给予
不同治疗方案而确定的阈值。
生化检测技术(
2014-02-10—2014-02-12学习总结:一、常用的生化检测方法1.终点法通过检测终点吸光度变化的大小来求出被测物的含量。
选择终点法的重要因素,终点时间的确定a)根据时间—吸光度曲线来确定:选取吸光度趋于稳定后的时间b)根据被测物反应终点,结合干扰物的反应情况来确定如:溴甲酚绿法测血清白蛋白溴甲酚绿(BCG)是一种pH指示剂,变色域3.8(黄色)-5.4(蓝绿色)溴甲酚绿不但与清蛋白呈色,而且与血清中多种蛋白质成分呈色,其中以a1-球蛋白、运铁蛋白、结合珠蛋白更为显著,其反应速度较清蛋白稍慢。
由于在30s内呈色对清蛋白特异,所以溴甲酚绿与血清混合后,在30s内读数可明显减少非特异性呈色反应。
1.1一点终点法反应达到终点,即在时间—吸光度曲线上,当吸光度不再改变时,选择一个终点吸光度值。
待测物浓度=(待测吸光度AU-空白AB)*K(校准系数)1.2两点终点法在被测物反应尚未开始时,选择第一个吸光度,在反应达到终点或平衡时,选择第二个吸光度,用两次吸光度之差计算结果。
优点:有效地消除溶血、黄疸和脂浊本身光吸收造成的干扰,适应于反应初期吸光度无明显变化的被测物。
1.3固定时间法在时间—吸光度曲线上选择两个测光点,既非反应物初始也非终点,差值用于计算结果例:苦味酸法测定肌酐,反应初30s,血清中快反应干扰物(微生物、丙酮酸、乙酰乙酸等)与碱性苦味酸反应;第二个30s主要与肌酐反应,并且吸光度线性良好;80-120s之后,苦味酸可以与蛋白质以及其他慢反应干扰物反应。
所以用第二个30s为测定时间,有利于提高试验特异性和准确性。
1.4连续监测法也称速率法,测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选择时间—吸光度曲线中线性期的吸光度值,并以此线性期的单位吸光度变化值△A/min计算结果二、了解免疫学检验常用的技术1.免疫比浊技术原理:免疫浊度法是可溶性抗原、抗体在液相中特异结合,产生一定大小的复合物,形成光的折射或吸收,测定这种折射或吸收后的透射光或散射光作为计算单位。
检验科常见生化学检测方法与解读
检验科常见生化学检测方法与解读生化学检测方法是临床检验科中常见的一种检测方法,通过分析人体液体、组织或细胞中的生物化学物质,可以揭示人体的生理状态和疾病情况。
本文将介绍一些常见的生化学检测方法及其解读。
一、血液生化学检测方法血液生化学检测是一种常见的检测方法,可以了解人体内各种生物化学物质的水平。
常见的血液生化学指标包括:血糖、血脂、肾功能、肝功能等。
1. 血糖检测血糖检测是评价人体糖代谢情况的重要指标,常用的检测方法有空腹血糖、餐后血糖和糖化血红蛋白。
正常人空腹血糖水平一般在3.9-6.1mmol/L之间,餐后血糖水平在7.8mmol/L以下。
糖化血红蛋白则可以反映近期(2-3个月)内平均血糖水平,正常水平一般在4%-6%之间。
2. 血脂检测血脂检测是评估人体脂质代谢情况的指标,主要包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。
正常人总胆固醇水平一般在5.2mmol/L以下,甘油三酯水平在1.7mmol/L以下,高密度脂蛋白胆固醇水平在1.0mmol/L以上,低密度脂蛋白胆固醇水平在3.4mmol/L以下。
3. 肾功能检测肾功能检测是评价肾脏排泄功能的重要指标,包括血清尿素氮、血清肌酐和尿液常规等。
正常人血清尿素氮和血清肌酐的水平较稳定,尿液常规正常应无蛋白、红细胞、白细胞等异常。
4. 肝功能检测肝功能检测是评价肝脏代谢和排泄功能的指标,包括血清谷丙转氨酶、血清谷草转氨酶、总胆红素、直接胆红素和白蛋白等。
正常人血清谷丙转氨酶和血清谷草转氨酶的水平较低,总胆红素和直接胆红素的水平也较低,而白蛋白水平较高。
二、尿液常规检测方法尿液常规检测是一种常见的生化学检测方法,通过分析尿液中的物质含量和性状,可以了解人体的代谢和排泄情况。
常见的尿液常规指标包括:尿液比重、PH值、蛋白质、糖、酮体、亚硝酸盐等。
1. 尿液比重尿液比重反映尿液的浓缩程度,正常人尿液比重通常在1.005-1.025之间。
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一、血清谷丙转氨酶(SGPT)赖氏改良法器材:试管及试管架、移液器或吸量管、恒温水浴锅、721型分光光度计、温度计、动物血清试剂:(1)0.1mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液:①0.1mol/L磷酸氢二钠溶液:称取Na2HPO414.22g或Na2HPO4·2H2O17.8g溶解于蒸馏水中,并稀释至1 000ml,4℃保存。
②0.1mol/L磷酸二氢钾溶液:称KH2PO413.61g溶解dH2O中,稀释至1000ml,4℃保存。
③将0.1mol/L磷酸氢二钠溶液420ml和0.1mol/L磷酸二氢钾溶液80ml混和即为0.1mol/L pH7.4的磷酸盐缓冲液。
加氯仿数滴,4℃保存。
(2)标准丙酮酸(含丙酮酸2.0μmol/mL):取标准丙酮酸钠10mg,用上述缓冲液准确定容为50mL。
此液须当日用当日配。
(3)SGPT底物液(含α-酮戊二酸2μmol/ml及DL-丙氨酸200μmol/ml) : 取α-酮戊二酸29.2mg,DL-丙氨酸7g ,用试剂1溶成100ml,在稀释到刻度前,以1mol /L NaOH调pH 7.4(因为转氨酶在pH7.3以下或7.6以上的环境中酶活性下降),加数滴氯仿防腐。
此液于冰箱保存可使用4天。
(4)GOT底物液(DL–天冬氨酸200mmol/L ,α-酮戊二酸 2mmol/L):称取α- 酮戊二酸29.2mg 和DL-门冬氨酸2.66g置于一小烧杯中,加入1mol/L氢氧化钠20.5ml使溶解,并校正pH 至7.4,然后将溶液移入100ml容量瓶,用0.1mol/L磷酸盐缓冲液定容至刻度。
放置冰箱保存。
(5)2.4-二硝基苯肼溶液:取分析纯2,4-二硝基苯肼19.8mg,用1mol/L HCl溶于100ml,置棕色瓶中保存。
(6)0.4mol/L NaOH溶液:0.1M磷酸盐缓冲液PH7.4 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1相当于谷丙转氨酶单位0 28 57 97 150 200相当于谷草转氨酶单位0 24 61 114 190 —每个样做3个平行,置37水浴30分钟,各管加2,4-二硝基苯肼液0.5mL,混匀,再在37℃水浴中放置20mL,各管加0.4mol/L氢氧化钠溶液5mL,混匀,10分钟后,从水浴箱中取出,以蒸馏水调“零”点,用520nm波长比色,读取各管之吸光值,各管之吸光值均减去空白的吸光值,然后以吸光值为纵坐标,各管相应的转氨酶单位为横坐标。
绘制成标准曲线。
为了方便,可列出各光度相当于转氨酶单位表。
2、酶活性测定:取试管两支,注明测定管及对照管。
试剂样品测定(每个样3个平行)对照(每个样3个平行)血清(mL)0.1 0.1SGPT或SGOT底物(mL)0.5 —置37℃水浴30分钟(SGOT为37℃,60分钟后再加枸橼酸苯胺1滴)2.4-二硝基苯肼(mL)0.5 0.5置37℃水浴20分钟SGPT或SGOT底物(mL)—0.5 NaOH溶液(mL) 5.0 5.0对照及样品各做3个平行,充分摇匀,静置10分钟后,用520nm波长比色,以蒸馏水调节零点,读取吸光值,用样品减去对照吸光值,求得样品的谷丙转氨酶活力。
谷丙转氨酶活性单位:37℃, pH7.4,每小时每毫升血清催化生成1μmol 丙酮酸为1个单位。
例:0.1ml 血清每小时催化生成0.1μmol丙酮酸, 即相当于GPT 100U / 100ml 血清。
注意:1. 在测定SGPT时,应事先将底物、血清在37℃水浴中保温,然后在血清管中加入底物,准确记时。
2. 标准曲线上数值在20~500U是准确可靠的,超过500U时,需将样品稀释。
3. 转氨酶只能作用于α-L-氨基酸,对D-氨基酸无作用。
实验室多用α-DL-氨基酸(较L-氨基酸价廉),若用L-氨基酸,则用量减半。
4. 溶血标本不宜使用,因血细胞中转氨酶活力较高,会影响测定效果。
5. 血清样品的测定需在显色后30分钟完成。
6.丙酮酸标准液的浓度要求十分精确。
由于丙酮酸后易变质为多聚丙酮酸,而影响丙酮酸标准液的有效浓度而不易察觉。
建议使用质量可靠的市售丙酮酸标准液。
7.每批试剂的空白管吸光度上下波动不应超过0.015A,若有超出,应仔细检查试剂与仪器方面的问题。
8.严重脂血、黄疸、溶血和糖尿病酮症酸中毒病人血清标本可增加测定的吸光度,测定这类标本应做血清标本对照管优点:尽管基质液中余下的a-酮戊二酸同样可生成红棕色苯腙硝醌化合物而影响测定结果,但因其量不多,加之对505nm的吸光度远不如丙酮酸生成的苯腙硝醌化合物强,尤其用标准曲线作测定时,所用的酶活性单位通过卡门氏分光光度速率法矫正,摈弃了赖氏法一些固有弊端,结果比其他比色法准确.故卫生部临检中心建议国无条件使用连续监测法的单位使用赖氏法.1981年全国常规生化检验方法学术讨论会认为赖氏法测定ALT活性较为合理, 缺点:由于赖氏法设计的底物浓度,如a-酮戊二酸不足,反应速度只能达到最大速度的65%;显色剂2,4-二硝基苯肼的用量只及反应液中酮酸浓度的一半;保温30min的酶促反应后,新生成的丙酮酸和未用完的a-酮戊二酸存在着无法人为控制的竞争显色的几率问题,如此等等,使赖氏法的重现性较差,在测量精度上仍与连续监测法相差甚大.* 1个卡门氏单位的定义是:在温度25℃,pH7.4,波长340nm,光径1cm 的条件下,1ml血清使NADH的吸光度下降0.001的转氨酶活性。
* 国际单位:在最适温度(25℃)下,1分钟产生1μmol丙酮酸的酶量为1个活性单位,即1IU=1umol/min。
* King法单位定义是:每1ml血清在37℃条件下与底物作用60 min,生成1μmol丙酮酸称为一个单位。
* Mohun 法单位定义是:每毫升血清在pH=7.4,37℃条件下与底物作用30 min,每生成2.5微克丙酮酸为1单位。
二、尿素氮(BUN)(二乙酰一肟法尿素测定)(一)仪器设备:水浴锅、紫外分光光度计、10mL试管(二)试剂:1、尿素氮试剂:蒸馏水100mL,浓硫酸44mL,85%磷酸66mL,冷却至室温后,加氨基硫脲50mg,硫酸镉(3CdSO4·8H2O)2g,溶解后稀释至1000mL。
2、20g/L二乙酰一肟试剂:称取二乙酰一肟20g,加入蒸馏水溶解,定容至1000mL。
3、尿素氮标准贮存液(357mmol/L):称取尿素1.072g溶解于蒸馏水中定容至1000mL,至于棕色瓶中贮存。
4、尿素氮标准应用液(17.85mmol/L):取贮存液5mL,加蒸馏水定容至100mL。
(三)操作步骤按下面表格的试剂配比操作:按上述表的配方每个样做3个平行样,混匀,置沸水浴中加热15min,立即用自来水冷却5分钟。
分光光度计选用540nm波长,以空白管调零点,读取各管吸光度。
尿素(mg%)=测定管吸光度/标准管吸光度×17.85(mg/ml)⏹ 1. 此法灵敏度高,用量极微(一般只需0.02ml血清即可)。
本实验是先将血清用生理水以1:4加以稀释再取0.1ml,故最后计算时,应乘以稀释倍数“5”⏹ 2. 试剂中加入硫胺脲和镉离子,可增进显色强度和色泽稳定性,但仍有轻度褪色现象(小于5%/h)。
⏹ 3. 此法操作简单,特异性强,不受其他非蛋白质含氮化合物如尿酸、肌酸等影响,但应控制好实验条件。
⏹ 4. 吸管必须校正,使用时务必注意清洁干净,加量务必准确。
⏹ 5.尿液中的尿素氮也可用此法进行测定。
由于尿液中尿素氮含量高,标本需用蒸馏水以1:50稀释。
如果呈色后吸光度仍超过本法的线性围,还需将尿液再稀释,重新测定。
⏹3.尿素浓度以前习惯用尿素氮表示,尿素分子中含有二个氮原子,因此1mmol/L尿素等于2 mmol/L尿素氮。
世界卫生组织推荐使用尿素,并以mmol/L表示浓度单位,我国卫生部也已规定一律使用尿素,不再使用尿素氮一词。
⏹尿素氮mg% = 测定管/标准管×0.002×100/0.1×5= 测定管/标准管×10【参考围】5-20 mg/dl三、肌酐(Cr)四、血糖(Glu)(邻甲苯胺法)血糖是指血液中的葡萄糖,葡萄糖与冰醋酸、邻甲苯胺共热时,葡萄糖先脱水转化为羟甲基糠醛,再与邻甲苯胺缩合为蓝绿色的薛夫碱,其颜色的深浅与葡萄糖含量成正比。
可用比色法进行定量测定。
1、仪器:紫外分光光度计、水浴锅2、试剂:(1)葡萄糖标准母液(10mg/ml,用饱和苯甲酸溶液配制)(2)邻甲苯胺溶液:2.5g硫脲溶于冰醋酸,加入邻甲苯胺150ml及2.4%硼酸100ml,用冰醋酸定容至1升。
3、操作步骤:(1)配置不同浓度葡萄糖标准溶液:取5支10ml容量瓶,标号,依次加入葡萄糖母液0.25,0.5,1.0,2.0,3.0ml,用饱和苯甲酸稀释至10ml,混匀(则上述溶液100ml葡萄糖含量为25,50,100,200,300mg );(2)分别精密吸取不同浓度葡萄糖标准溶液于试管中,设平行管,空白管加0.1mL蒸馏水,各管加入邻甲苯胺试剂5.0mL,混匀后,置沸水中15分钟,立即移入冷水浴中冷却;(3)以空白号管调零,于紫外分光光度计波长630nm 处测吸光值,以各管的吸光度为纵坐标,相应管中葡萄糖含量(mg)为横坐标,绘制标准曲线,得出线性方程。
(4)测试样品:取全血0.1mL,设平行样,按上述方法测出其A630nm吸光值,通过线性方程求出其血糖含量。
注意事项:1. 本法不需要除去蛋白质,邻甲苯胺试剂只与醛糖显色,血液中其他还原性物质基本上无影响。
2. 邻甲苯胺试剂与葡萄糖显色的深浅及其稳定性与试剂中邻甲苯胺浓度、冰醋酸浓度、加热时间有关。
此法显色稳定,24小时无变化。
如将加热时间缩短,生成颜色容易消褪。
3. 轻度溶血的血清对结果无明显影响。
根据推导,血清中含血红蛋白450毫克/100毫升时,可使测定结果降低约10%。
4.高脂血的标本最后显色有时会出现浑浊,影响测定结果。
可先制备血滤液后再行测定。
五、血清白蛋白(Alb)(溴甲酚绿法BCG)原理:血清白蛋白在PH4.2的缓冲液中带正电荷,在有非离子型表面活性剂存在时,可与带负电荷的染料溴甲酚绿(BCG)结合形成蓝绿色复合物,在波长630纳米处有光吸收峰,其颜色的深浅与白蛋白浓度成正比,与同样处理的白蛋白标准比较,可求得血清白蛋白含量。
试剂:1. 溴甲酚绿(BCG)贮存液:取BCG 419mg,用10ml 0.1mol/L NaOH溶解,加NaN3 100mg ,定容至1000mL。
贮于棕色瓶备用。
如用溴甲酚绿钠盐应称取432mg.加水溶解。
2. 0.1mol/L柠檬酸缓冲液(pH 4.2):分别配制0.1mol/L柠檬酸和柠檬酸钠溶液,然后按12.3:7.7的体积比例混合。