胰岛素诱导基因及其在猪育种中应用的研究进展
猪胰岛素样生长因子-Ⅰ基因的结构与功能
ｓ ｕｔｒ ｏ ｌｇ ｉ ｓｌ ；ｔ ｓｅｐｅｓｄｆ ｍ ａｇｎ ｏ ｓ ｔ ｇｏ ｔ ｅｓ ｓ ｘ ｎ ｅｏ ｓ － ） ｔ ｃ ａ ｈｍｏ ｙｗ ｔ ｉ ｕｉ ｉ ｉ ｘ ｒｓｅ ｏ ｅ ｅｃｎｉ ｉ ｆ ａｔ ｉ ｅｏ ｓ（ ｎ ｌ ６ ｒ ｕｌ ｏ ｈ ｎ ｎ ｒ ｓｎ ａｌ ｘ ｘ ｓｐ ｒｔｄｂ ｖ ｔ ｎ（ ｔ ｎ － １ ｎ ｐ ｎ ｉｇｍ ｒ ａ ０ｋ ｆ ｅｏ ｉ Ｄ Ａ ｒ１ ｉｇｅ ｃｐ ｅ ａａｅ ｙｆ ｅｉ ｒ ｓ ｎｒ ｓ１ ５ ａｄｓａ ｎｎ ｏｅｔ ｎ８ ｂｏ ｎ ｍ ｃ Ｎ ．Ｉ ｉ ｓ ｌ ｏｙ ｉ ｎｏ ｉ ｏ ｈ ｇ ＇ｓ ｎ － ｌ
ｍａ ｌ ａｓ ｒ １ ｔｒ ＧＦ－Ｉ ｉ ａ ７ － ｍｉｏ ａ ｉ ｅｉｅ ａ ｉ ｉｇｅ ｃ ａｎ ｐ ｌｐ ｐｉｅ ｗ ｉｈ ｓ ｏ ｎｌ ｌ．Ｉ ｅ ｍａｕ ｅ Ｉ ｎ ＇ ｌ ｓ ０ ａ ｎ ｃｄ ｒｓｄ ．ｂ ｓｃ ｓｎ ｌ ｈ ｉ ｏｙ ｅ ｔ ｈｃ ｈ ｗｓ ｄ
ｏ ｈ ｉ Ｉ －Ｉｇ ｎ ． ｆｔｅｐｇ ＧＦ ｅ ｅ Ｋｅ ｒ ｓ ｐｇ ｉｓ ｌ － ｉｅｇｏ ｈｆｃｏ－Ｉ；ｔ ｃｕ ｅ ｆｎ ｔ ｎ ｙ ｗｏ ｄ ｉ ；ｎ ｕｉ ｌ ｗ ａ ｔｒ ｎ ｋ ｒ ｔ ｓｒ ｔ ｒ ；ｕ ｃｉ ｕ ｏ
Ｉ Ｆ 是 机体生长 、 Ｇ ＿Ｉ 发育 和代谢 的一个重要 调控 分 泌 ， 许多 肝外组 织也 能合成 Ｉ Ｆ Ｇ —Ｉ， 主要 以 自分 其 因子 ， 同时也是 生长激 素（Ｈ 启动生 长 活性 的主要介 泌 或旁分 泌 的形式 发挥 作用 。 自 Ｓ ｍ ｎ Ｄ ｕ ｈ Ｇ） 从 ａ ｏ 和 ａｇ ． ｌ
ｇ ｎ ｓ ｔ ｎ ｃ ｂ ｄ ａ ｄ ｐ ｏ ｅ ｓ ｄ ｉ ｏ ｌ ｘ ｍａ ｎ ｒ ｔ ｒ ｄ ｃ ａ ｇ ｕ ｅ ｆ ｍａ ｕ ｅ ｍＲＮ ｅ ｅ ｉ ｒ ｓ ｒ ｅ ｎ ｒ ｃ ｓ ｅ ｎ ａ ｃ ｍｐ ｅ ｎ ｅ ｏ ｐ ｏ ｕ ｅ ａ ｌ ｅ ｎ ｍｂ ｒ ｏ ｔ ｒ ａ ｉ ｒ Ａ
猪干扰素基因研究进展及其在抗病育种中的应用展望
素的主要生物学功能可概括为（Samuel,2001）：
1、广谱抗病毒功能：I 型和 II 型干扰素基因均 可经诱导剂激活而表达，表达产物通过特定信号 转导通路，激活干扰素诱导基因的转录，机体合 成多种具阻断病毒复制功能的抗病毒酶和蛋白 质，抵抗病毒对机体细胞的感染；2、免疫调节 功能：I 型干扰素可增强 MHC-I 类分子表达，而 强烈抑制 MHC-II 类分子表达；II 型干扰素可促 进 MHC-II 类分子表达，两类干扰素的协同调节 作用，使机体处于最佳免疫应答状态。此外 INFγ 的生成可促进 Th0 细胞向 Th1 分化，而抑制 Th2 的生成，由于 Th1 和 Th2 分别介导机体细胞免疫 和体液免疫，因此 INF-γ 可根据不同病原感染， 与其它细胞因子（如 IL-4 等）共同作用，对机
（Ben-Arietal.，2003）；Lioetal.（2002）、
Stasseal.（2002）、Luetal（2002）也报导了类 似研究结果。此外，大量体内和体外试验表明， 猪干扰素对生产具重大威胁的传染病病毒均具 有防御和抑制作用。一系列体外试验表明：用 IFN-γ 处理感染 PRRSV(繁殖与呼吸综合征病毒) 的 猪 巨 噬 细 胞 ， 可 抑 制 PRRSV 增 殖 （BautistaMolitor， 1999)；用重组 interferonγ 处理 Marc-145 细胞后，可抑制 PRRSV 野毒株
畜遗传方差组分，估计瑞典猪群对呼吸道疾病易
感性 h2 为 0.14，萎缩性鼻炎易感性 h2 为 0.16
（1979）；肠道疾病的 h2 为 0.59（1988）。 PryztulskiandPorzeczkowska(1980) 估 计 了 猪 对螺旋体的抗病力 h2 为 0.20-0.21 ； Bumsteadetal.（1991）分析了 8 个不同鸡的近 交系试验对 7 种不同种球虫、沙门氏杆菌、大肠 杆菌、马立克氏病毒、传染性支气管炎病毒以及 5 种禽白血病病毒的抗性，结果表明，各种近交 系对病原的抗性均存在差异，结果表明畜禽抗病 力大多受多基因及环境效应共同影响。尽管数量 性状的多基因效应为开展猪特定病原抗病力选 育奠定了理论基础，但在育种实践中至今仍存在 待以解决的问题，具体表现为：（1）对特定疾病 抗性的直接选择所耗费的成本和对生产造成的
猪胰岛素样生长因子-I（IGF-1）酶联免疫分析
猪胰岛素样生长因子-I（IGF-1）酶联免疫分析试剂盒使用说明书产品编号：E0050p9.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
标本的采集及保存1．细胞培养物上清：请离心后收集上清，并将标本保存于-20℃，且应避免反复冻融。
2．血清：标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
3．血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，在采血后30分钟内1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
每次检测都应该做标准曲线。
如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100ul，余孔分别加标准品或待测样品100ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100ul（取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350ul/每孔，甩干。
4.每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液）100ul，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350ul/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
基因组选择在猪杂交育种中的应用
Hereditas (Beijing) 2020年2月, 42(2): 145―152 收稿日期: 2019-08-28; 修回日期: 2020-02-08基金项目:国家重点研发计划项目(编号：2017YFD0501504，2016YFD0501308)和国家现代农业产业技术体系建设专项资金(编号：CARS-36)基金资助[Supported by the National Key Research and Development (Nos. 2017YFD0501504, 2016YFD0501308) and Special Fund forthe Industrial Technology System Construction of Modern Agriculture (No. CARS-36)]作者简介: 杨岸奇，博士研究生，研究方向：猪遗传育种。
E-mail: yanganqi90@通讯作者:陈斌，教授，博士生导师，研究方向：猪遗传育种。
E-mail: chenbin7586@冉茂良，博士，研究方向：猪遗传育种。
E-mail: ranmaoliang0903@DOI: 10.16288/j.yczz.19-253网络出版时间: 2020/2/17 17:00URI: /kcms/detail/11.1913.R.20200214.1640.001.html综 述基因组选择在猪杂交育种中的应用杨岸奇1,2,3，陈斌1,3，冉茂良1,3，杨广民2，曾诚21. 湖南农业大学动物科学技术学院，长沙 4101282. 湖南美可达生物资源股份有限公司，长沙 4103313. 畜禽遗传改良湖南省重点实验室，长沙 410128摘要: 基因组选择是指在全基因组范围内通过基因组中大量的标记信息估计出个体全基因组范围的育种值，可进一步提升育种效率和准确性，目前在猪纯繁育种中得到广泛应用。
但有研究表明，现有的基因组选择方法在猪杂交育种上的应用效果并不理想，在跨群体条件下预测准确性极低。
动物基因工程技术在动物遗传育种上的应用现状与发展前景
工作研究2021.07 畜牧业环境33摘 要：动物基因工程是在分子水平上操纵基因的复杂技术。
它是体外将重组外源基因导入受体细胞的过程，使基因能够被复制、转录和翻译成受体细胞，是当下动物机体改造中最热门的技术。
动物转基因技术、克隆技术和转基因克隆技术是动物基因工程的三个热门技术。
其重要功能与重大意义会成为21世纪最炙手可热的研究领域。
本研究对这三大类技术的发展应用进行了综述，着重说明了基因工程技术在动物育种、遗传检测等方面的应用情况，并讨论了该技术的发展前景。
关键词：动物；基因工程；转基因技术；克隆技术；遗传育种1 动物基因工程技术概述1973年，HBoyer和Cohen及其团队成功进行了体外重组实验，获得了具有双重抗性的大肠杆菌转化子（卡那霉素和四环素），标志着基因工程的诞生。
基因工程是指狭义的基因工程。
它是指在体外剪接和重组供体基因和载体，然后将它们转移到另一个有机体（受体），并根据人们的需要稳定地遗传它们，表达新的性状或产生新的产品。
重组DNA分子在受体细胞中扩增，因此可以称为分子克隆或基因克隆。
动物基因工程一般包括传统操作技术中的杂交技术、现代操作技术中的基因工程和细胞生物工程，充分体现了重组DNA技术的工业化设计和实际应用，包括进行基因重组、克隆和表达（DNA重组技术）的设计和构建的上游技术，以及规模化培养基因工程菌和提取外源基因表达产物并纯化的下游技术。
将下游操作工艺和装备复杂化会为上游重组DNA技术带来困难与麻烦，同理忽视上游重组的实现则是下游技术的桎梏——基因工程产业化的基本原则。
基因工程是利用基因重组，进行体外剪切拼接，获得重组后的新的目的基因，然后导入细胞或微生物体内并成功得到表达，从而产生人类需要的产物。
基因工程是极具理论与技术性的当代前沿技术。
设计重组和表达分别在基因水平及细胞、组织和动物个体水平进行的便是动物基因工程。
主要分为三大类。
1.1 转基因动物人工培养从动物体内分离提取或人工构建的目的基因，并进行重建和扩增，再将此目的基因导入受精卵原核或细胞质中，使其在受体细胞的基因组中稳定存在，移入母体，形成新个体。
一只可能改变糖尿病史的猪
一只可能改变糖尿病史的猪3只可以分泌人胰岛素的克隆猪。
其中2只是完全分泌人胰岛素的，另一只既分泌人胰岛素也分泌猪胰岛素。
（受访者供图）□本版撰文信息时报记者蒋隽通讯员黄博纯一只猪，它的胰岛能分泌人的胰岛素，糖尿病人只要植入这只猪的胰岛细胞，就能治疗糖尿病，不用再打针补充胰岛素。
这不是科幻小说。
4个月前，世界上第一只完全分泌人胰岛素的“基因编辑猪”在广州萝岗出生。
前日，记者走进中国科学院广州生物医药与健康研究院赖良学课题组实验室，他们已培养出2只完全分泌人胰岛素的克隆猪。
科学家期望在5年内实现将克隆猪体内的胰岛移植到人体内。
去年全球500万人死于糖尿病胰岛是寄存在胰腺组织里一小团一小团的细胞，可以说是人体最小的器官之一。
胰岛坏了很麻烦，人体不能产生胰岛素调控血糖，就是糖尿病，得不停打针注射胰岛素。
根据国际糖尿病联盟的最新统计数据，世界范围内共有4.15亿成年人患有糖尿病；2015年有500万人因糖尿病死亡，超过了疟疾、肺结核与HIV的致死人数总和。
一只猪，也许能改变这一切。
今年3月18日，中国科学院广州生物医药与健康研究院赖良学课题组在《分子细胞生物学杂志》发表论文，宣布利用精确基因编辑技术对猪胰岛素基因进行了无痕定点修饰，使猪胰岛素基因编码生产人胰岛素，成功培育出了完全分泌人胰岛素的基因编辑猪。
它的出现，或许能根治Ι型糖尿病。
养克隆猪远贵过养科研团队前日，记者在位于萝岗的实验室看到，这只4个月大的小猪，体重50多斤，品种是巴马小型猪，也叫巴马香猪。
它体内的胰岛分泌的是人胰岛素，而不是猪胰岛素。
原因在于，它的胰岛素蛋白基因，有一个密码被人为地改变了，使它的胰岛素蛋白基因可以编码人的胰岛素。
克隆猪虽然“高大上”，但其实先天不足，体质弱，第一代特别难养，容易生病，发育不好。
有的克隆小猪不会吃奶，得靠人喂。
而且科学家拿最好的雀巢奶粉喂都长不好，后来科学家们兼职挤奶工，从母猪身上挤奶，搭配奶粉喂养，小猪们才长好。
2023新教材高考生物二轮专题复习 整合训练(十六)细胞工程
整合训练(十六) 细胞工程全员必做题1.[2022·辽宁省营口市高三期末质量检测]甲品种青花菜具有由核基因控制的多种优良性状，另一远缘植物乙的细胞质中存在抗除草剂基因，欲将乙细胞质中的抗性基因引入甲中。
相关叙述错误的是( )A．操作过程中生物材料、培养基、培养环境都要严格的灭菌B．过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗C．过程B中可以用物理法或化学法诱导原生质体融合D．过程C中只有活性部位互补的融合细胞，才可以正常生长2．[2022·江苏省扬州市高三期末]植物体细胞杂交需要分离出有活力的原生质体，研究者通过实验研究了酶解时间对原生质体产量和活力的影响，结果如图。
相关叙述错误的是( )注：原生质体活力＝(有活力的原生质体数/原生质体总数)×100%A．利用纤维素酶和果胶酶去壁后可分离得到原生质体B．随酶解时间延长两种原生质体产量均先增加后减少C.适宜两植物细胞的最佳酶解时间分别为10 h和12 hD．原生质体活力可通过质壁分离与复原实验进行验证3．[2022·山东省高三学业水平等级考试模拟]抗体—药物偶联物(ADC)通过采用特定技术将具有生物活性的小分子药物连接到能特异性识别肿瘤细胞的单克隆抗体上，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。
ADC的结构及其发挥作用的机理如图所示，下列有关说法错误的是( )A．单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合B．用96孔板培养和多次筛选杂交瘤细胞后，在体外大规模培养可获得单克隆抗体C．ADC通过抗体与细胞膜上的受体特异性结合，以主动运输的方式进入肿瘤细胞D．ADC在肿瘤细胞里被溶酶体裂解，释放药物，使肿瘤细胞死亡4．[2022·山东省菏泽市高三一模]据报道，世界上仅剩下两头雌性北方白犀牛，实验室只留有冷冻的北方白犀牛的精子。
若通过胚胎工程技术尝试拯救该物种，下列叙述正确的是( )A．体外培养受精卵时，培养液中通常加入动物血清、蔗糖等成分B．用雌性北方白犀牛体细胞进行克隆出多头子代后，让其自行繁衍C．可通过胚胎分割技术增加其数量，该技术属于有性繁殖D．这样人工繁育的种群与野生种群相比，遗传多样性降低，野外生存能力下降5．[2022·山东省济南大学城高三月考]我国科学家利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将150CAG重复序列精确地插入猪成纤维细胞内的亨廷顿蛋白(HTT)内源性基因中，并成功培育出世界首例含人类突变H基因的模型猪，基本原理如图。
分子育种技术及其在猪育种中的应用研究进展
分子育种技术及其在猪育种中的应用研究进展作者：丁丽艳何宝国宋斌韩永胜李同豹丁昕颖李平来源：《现代畜牧科技》2018年第01期摘要：随着分子遗传学和现代生物技术的快速发展，分子数量遗传学也得到了相应的发展，这为动物分子育种技术的发展和应用提供了基础与保障。
与传统的育种方法相比，动物分子育种是直接在分子水平上对性状的基因进行选择，选种的准确性更高。
现综述动物分子育种及其在猪育种中应用进展，为猪分子育种技术的应用提供参考。
关键词：猪；分子育种；基因；应用中图分类号：S81文献标识码：A文章编号：2095-9737（2018）01-0001-03自20世纪80年代以来，随着现代分子生物技术和信息技术的迅速发展，动物分子遗传学和动物基因组计划的研究取得了大量的突破性进展，动物育种技术已逐渐从群体水平进入分子水平，从传统育种方法向着快速改变动物基因型方向发展。
随着动物分子育种理论基础不断完善，应用技术不断成熟，各种现代生物技术的综合应用，动物（尤其是猪）育种进程得到了飞速的发展。
1 动物分子育种的概念动物分子育种即利用数量遗传学理论和分子诊断技术来改良动物品种的新型学科，是以分子生物学为基础，遗传学为依据，在DNA分子水平上对家畜品种进行改良，包括转基因技术、克隆技术、胚胎生物技术和分子遗传标记，分子育种技术加快了动物育种速度，改良了动物品种。
由于分子育种是直接在分子水平上对性状基因进行选择，准确性大大提高的同时，也克服了传统育种方法的缺陷。
动物分子育种包括两方面内容：一是基因组育种，即在动物重要经济性状基因型分析基础上，通过分子标记技术对动物数量性状基因进行直接选择，或者通过标记辅助导入有利基因或清除不利基因等，建立在基因组变异图谱基础上的全基因组关联分析，以达到更有效地改良动物的目的；二是转基因育种，即通过基因转移技术将外源基因导入某种动物的基因组上，达到改良重要生长性状或非常规育种性状，育成转基因动物新品种（系）的目的。
家猪染色体研究进展及其在猪育种中的应用
1． 2 家猪染色体高分辨显带研究 家猪起源是由
收稿日期： 2014 － 12 － 11 作者简介： 李志惠（ 1980—） ，女，讲师，硕士，动物遗传育种与繁殖。 E － mail： zhihuili321@ 126． com
野猪进化而来，在不同时期、不同地区、不同条件下 或在同一时期、不同地区、不同条件下选育形成的家 猪不同品种之间存在遗传上的差别会在染色体上表 现出来，通过对染色体进行显带处理，不同品种间的 差异会通过带纹显现，而随染色体显带带纹的增加， 差异程度会相应加大。家猪高分辨显带更能把染色 体上 的 深 染 区 域 与 浅 染 区 域 区 分 开。丹 麦 Hansen［6］对家猪染色体 Q 带、G 带、Ｒ 带进行了比较分 析。国内陈文元［7］首次报道了我国 4 个家猪品种 的 G 带带型模式图。
【CN109880793A】一种青年猪胰岛细胞培养基及其使用方法【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910194216.9(22)申请日 2019.03.14(71)申请人 湖南赛诺生物科技股份有限公司地址 410600 湖南省长沙市宁乡县金洲新区金水东路128号(72)发明人 王维 王佳 谷星石 李桑 徐畅 (74)专利代理机构 长沙市融智专利事务所(普通合伙) 43114代理人 袁靖(51)Int.Cl.C12N 5/071(2010.01)(54)发明名称一种青年猪胰岛细胞培养基及其使用方法(57)摘要本发明公开了一种青年猪胰岛细胞培养基及其使用方法。
该培养基是在基础培养基(M199)中添加：谷胱甘肽1-50mM，谷氨酰胺1-50mM，ITS0.01-1％，尼克酰胺1-50mM ，水溶性维生素E0.1-20μM，肝素1-100U/L，4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐0.01-0.5mM，艾塞那肽0.01-0.1μM。
相比与普通培养基(1640、F10、EGM2)能够显著提高青年猪胰岛细胞活率及其成熟率。
权利要求书1页 说明书5页 附图3页CN 109880793 A 2019.06.14C N 109880793A权 利 要 求 书1/1页CN 109880793 A1.一种青年猪胰岛细胞培养基，其特征在于，是基础培养基M199中含有谷胱甘肽1-50mM，谷氨酰胺1-50mM，胰岛素转铁蛋白0.01-1％，尼克酰胺1-50mM，水溶性维生素E 0.1-20μM，肝素1-100U/L，4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐0.01-0.5mM，艾塞那肽0.01-0.1μM。
2.根据权利要求1所述的青年猪胰岛细胞培养基，其特征在于，是基本培养基M199中含有谷胱甘肽1-25mM，谷氨酰胺1-25mM，ITS 0.01-0.5％，尼克酰胺1-25mM，水溶性维生素E 0.1-10μM，肝素50-100U/L，4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐0.01-0.25mM，艾塞那肽0.05-0.1μM。
猪带绦虫胰岛素受体TsIR-的鉴定及其配体结合结构域的表达
受体蛋白的基因克隆：通过PCR技术从猪带绦虫基因组中克隆出TsIR基因
受体蛋白的纯化：通过亲和纯化、离子交换纯化、凝胶渗透纯化等方法对表达的受体蛋白进行纯化
受体蛋白的鉴定：通过Western blot、ELISA等方法对纯化的受体蛋白进行鉴定，确认其是否为TsIR蛋白
受体蛋白的表达：将TsIR基因转入表达系统（如大肠杆菌、酵母等）中进行表达
优化表达条件：选择合适的宿主细胞、培养基和诱导条件
产物纯化：采用亲和纯化、离子交换纯化或凝胶渗透纯化等方法
产物鉴定：通过SDS-PAGE、Western blot或质谱分析等方法进行鉴定
产物活性分析：通过酶活性测定、结合实验或细胞生物学实验等方法进行验证
目的：检测配体结合结构域的活性
方法：使用荧光共振能量转移（FRET）技术
受体功能：识别并结合胰岛素，调节细胞生长和代谢
鉴定方法：基因克隆、表达纯化、功能分析
受体结构：由多个结构域组成，包括细胞外域、跨膜域和细胞内域
受体活性：通过结合胰岛素，激活下游信号通路，影响细胞功能
配体结合结构域的定义：在蛋白质中，与配体结合的特定区域
配体结合结构域的重要性：对于理解蛋白质的功能和药物设计至关重要
探讨TsIR-在猪带绦虫生命周期中的作用
探究TsIR-与配体结合的结构和功能
展望未来，新型药物靶点在疾病治疗中的应用和前景
探索新型药物靶点的方法和技术
研究新型药物靶点的意义和价值
猪带绦虫胰岛素受体TsIR-的鉴定及其配体结合结构域的表达
猪带绦虫胰岛素受体TsIR-的鉴定及其配体结合结构域的表达是一个跨学科的研究领域，需要生物学、化学、医学等多个领域的专家共同合作。
加强跨学科合作与交流可以促进不同领域的专家相互学习、相互启发，从而推动研究的深入发展。
全基因组关联分析及其在猪育种中的研究进展
1052016年33卷第12期 SWINE INDUSTRY SCIENCE 猪业科学遗传改良GENETIC IMPROVEMENT精品思想 市场战略5 精液的分装、贮存与运输精液的包装方式采用袋装，利于精子的保存、运输和便于输精。
按品种、种公猪耳号逐头进行分装，并在包装上标明品种、耳号、批号、生产日期、有效期、贮存温度、检验员等内容。
结合本县实施良种补贴项目，必须在精液包装上标明《国家生猪良种补贴项目》字样。
包装好的精液其温度待放置与室温相同时，将其放入17℃恒温箱贮存，精液在贮存期间会沉淀、聚集，应每日轻轻摇匀精液2～4次。
包装好的精液要尽快送至养殖户，避免精液在运输过程中的温度变化过大。
因此，精液应保存在15～20 ℃的环境中，使用专用的精液运输保存箱可保证精子活力。
常温精液使用前必须检查，当精子活力低于0.6时，不能使用。
种公猪站严格按照相关技术要求进行种猪常温精液生产，在湄潭县及周边县（区）实行集中供精，加快了人工授精技术的推广，提高了良种公猪的覆盖率，产生了显著的经济效益。
参考文献[1] 曾琼,申牷,肖礼华,等.贵州山区良种公猪集中供精技术体系初探[J].猪业科学,2015,32(11)﹕41-42. [2] 雷毅．社会化公猪站种猪常温精液产品生产关键技术[J].当代畜牧，2015（2）：16-17.[3] 王一明，张海兰，谢鹏贵．猪精液品质检测与处理[J].当代畜禽养殖业，2010（6）：14-16.（收稿日期：2016-11-17）摘 要：近年来，随着高通量单核苷酸芯片和基因分型技术的不断发展，利用全基因组关联分析猪的性状成为可能。
全基因组关联分析是一种新兴的遗传分析方法，能有效进行复杂疾病和性状的研究。
国内外相关研究人员针对猪性状进行全基因组关联分析，积累了大量的单核苷酸多态性（SNP）标记、候选基因以及数量性状位点，为猪分子育种提供基础。
该文主要对全基因组关联分析的基本原理、分析方法以及对猪性状的研究进展进行综述。
猪胰岛素启动子调控 EGFP 表达载体的优化及体外验证
猪胰岛素启动子调控 EGFP 表达载体的优化及体外验证于淑珍;冯冲;石宁宁;宋小凤;潘登科【摘要】目的：获得猪胰岛素启动子调控外源基因的高效表达载体，为制备转基因猪胰岛特异性表达目的基因奠定基础。
方法利用猪胰岛素启动子（ PIP，包含5′调控区、第一外显子、第一内含子及第二外显子ATG前的序列共1．5 kb）构建表达载体，连接PIP和EGFP的酶切位点HindⅢ设计在起始密码子前，命名为PIP－HindIII－EGFP。
鉴于酶切位点的插入位置可能会影响外源基因的表达效率，对载体进行了优化：将HindIII酶切位点删除，实现PIP和EGFP无缝连接，载体命名PIP－EGFP；将第一内含子3′端的内含子剪接受体位点（ splicing acceptor site， SA）突变为HindIII内切酶识别位点，命名为PIP－SA（ M）－EGFP。
三种载体分别电转染小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN－6细胞、猪耳成纤维细胞以及猪肾细胞，48 h后通过荧光强度、流式分析、RT－PCR及Western blot检测，验证载体的表达效率。
结果转染细胞后，三种载体都仅在MIN－6胰岛β细胞表达绿色荧光。
RT－PCR及其产物测序结果显示三种载体的胰岛素启动子第一内含子的剪切存在差异：载体PIP－HindIII－EGFP和PIP－EGFP的内含子存在剪切和不剪切两种情况，剪切不稳定；载体PIP－SA（ M）－EGFP的SA位点突变后内含子不剪切，流式细胞及Western blot检测显示，与另外两种载体相比，该载体目的蛋白的表达量最高。
结论通过突变胰岛素启动子第一内含子的3′端的剪接受体位点，成功获得了胰岛β细胞的高效表达载体，可用于制备胰岛特异表达外源基因的转基因猪。
%Objective Getting the robust exogenous gene expression vector under the control of porcine insulin promoter, and to lay the foundation for pancreaticβ-cells specific transgene expressingpigs.Method Using porcine insu-lin promoter ( PIP, 1500 bp of the 5′UTRfrom the porcine INS gene including the first exon and the first intron) to con-struct expression vector, the HindIII restriction site which connected the sequences of PIP and EGFP was designed before ATG, named PIP-HindIII-EGFP.Considering that the different location of restriction site may affect the expression efficien-cy of the transgene, we optimized the expression vector.Firstly the HindIII restriction site was deleted to realize the seam-less connection of PIP and EGFP,the vector was named PIP-EGFP.Also we mutated the 3′intron splicing acceptor site( SA) of the first intron into HindIII restriction site, named as PIP-SA( M)-EGFP.Three different EGFP expression vectors were respectively transfected MIN-6 mouse pancreatic β-cells, pig ear fibroblasts and kidney cells.The transfected cells were cultured for 48 h and harvested for RT-PCR, flow cytometry and Western blot analysis, to analyze and compare the expres-sion efficiency of vectors.Results After transfection,green fluorescence was observed only in MIN-6 mouse pancreaticβ-cells.RT-PCR analysis and product sequencing showed that the three expression vectors did have different stability with in-tron splicing.The PIP-HindIII-EGFP construct and PIP-EGFP vector produced two kinds of mRNA with the first intron spliced and no spliced, indicating the instability of intron splicing.Mutation of the PIP splice site would cause the first in-tron not spliced, while flow cytometry and Western blot displayed that the mutation induced a most efficient expression of the downstream gene.Conclusions A robust and specific β-cells expression vector has been successfully generated by mutating the intron splicing acceptor site of the porcine insulin promoter.Itprovides the foundation for preparation of pigs with pancreaticβ-cells specifically expressing the transgene.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2014(000)006【总页数】6页(P34-39)【关键词】胰岛素启动子PIP;特异性表达;小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN-6细胞;EGFP;五指山小型猪【作者】于淑珍;冯冲;石宁宁;宋小凤;潘登科【作者单位】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室，北京 100193; 四川农业大学动物科技学院，四川雅安 625014;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室，北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室，北京 100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业部畜禽遗传资源与种质创新重点实验室，北京 100193【正文语种】中文【中图分类】Q95-33目前，糖尿病已成为威胁全人类健康的重要疾病之一。