急性氨氮胁迫对于草鱼sod和hsp90基因表达及鳃部结构的影响
氨氮对草鱼的急性半致死试验
0.17, 0.23, 0.36, 0.55, 1.02, 1.82 mg/L of 96 h, the mortality rate of 0%, 0%, 10%, 10%, 25%, 45%, 60%, 100%, corresponding to
the concentration of non-ionic ammonia safe concentration of 0.0615 mg/L.Ammonia nitrogen and half lethal concentration of 2.40 mg/
池塘中的底泥也是影响氨氮含量的因素之一。
国 中 西 医 结 合 脾 胃 杂 志 ,1998(4):231-232. [10] 吴 天 石,张 会 永,张 哲,等.脾 虚 证 动 物 模 型 造 模 方 法 述 评
[J].中 医 杂 志 ,2015,56(11):978-983. [11] 刘 芳 芳,王 平,李 俊 莲,等.脾 阳 虚 加 湿 邪 大 鼠 内 外 合 邪 模
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福建畜牧兽医 第 41 卷 第 2 期 2019 年
氨氮对草鱼的急性半致死试验
林 晶 建瓯市水产技术推广站 福建建瓯 353100
多胺对水生植物镉胁迫的缓解效应及机理研究
多胺对水生植物镉胁迫的缓解效应及机理研究本文以分布广泛的菹草、竹叶眼子菜、水鳖及慈姑为研究对象,以常见的重金属离子(Cd<sup>2+</sup>)为胁迫因子。
系统研究了水生植物抗重金属胁迫机理以及外施多胺（PAs）对水生植物重金属胁迫的缓解效应和机理。
研究结果表明：（1）不同浓度Cd<sup>2+</sup>（0、30、50、70、90μM）胁迫下,菹草叶片叶绿素、叶绿素Chi （a+b）/Car比值逐渐下降；O2·-产生速率、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、多胺氧化酶（PAO）、二胺氧化酶（DAO）活性、抗坏血酸（AsA）、谷胱甘肽（GSH）和游离脯氨酸（Pro）含量先升后降；抗坏血酸过氧化物酶（APX）、谷胱甘肽还原酶（GR）活性、H<sub>2</sub>0<sub>2</sub>和丙二醛（MDA）含量呈上升趋势。
随着Cd<sup>2+</sup>处理浓度增加,Cd<sup>2+</sup>在菹草叶细胞中大量积累,促进对Ca<sup>2+</sup>、Na+、Mn<sup>2+</sup>、Fe3+、Cu<sup>2+</sup>的吸收,降低对大量元素P、K+的吸收。
此外,菹草叶片内游离态腐胺（free Put）含量上升,游离态亚精胺（free Spd）和精胺（free Spm）含量以及游离态（Spd+Spm）/Put比值下降。
总多胺（Total-PAs）和结合态多胺（PS-PAs）的变化趋势和游离态PAs的变化趋势相同。
束缚态腐胺（PIS-Put）含量先升后降,束缚态精胺（PIS-Spm）和亚精胺（PIS-Spd）变化趋势不大。
电镜观察发现,Cd<sup>2+</sup>对菹草叶片细胞的叶绿体和线粒体造成严重损伤。
氨氮胁迫对福瑞鲤幼鱼GST活性的影响
氨氮胁迫对福瑞鲤幼鱼GST活性的影响李利红;袁宏利;胡振平;武雨欣【摘要】以福瑞鲤幼鱼为研究对象,设置对照组0 mg/L和低(10 mg/L)、中(20 mg/L)、高(30 mg/L)3个氨氮浓度处理组,分别在试验的6、24、48和96 h取样,研究氨氮胁迫对肝和鳃组织中谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性的影响.研究发现,福瑞鲤幼鱼肝组织中GST活性随氨氮胁迫浓度的增加和胁迫时间的延长呈不断上升的趋势,并在整个胁迫过程中维持较高水平.而鳃组织中GST活性在氨氮胁迫6h后迅速显著增高,随着氨氮胁迫时间的延长,鳃组织GST活性回落到对照水平.研究结果表明,氨氮胁迫诱导福瑞鲤幼鱼肝和鳃组织中GST活性改变,在清除胁迫诱导产生的有毒代谢物过程中发挥重要作用.【期刊名称】《水产养殖》【年(卷),期】2015(036)010【总页数】4页(P7-10)【关键词】福瑞鲤;氨氮;谷胱甘肽硫转移酶【作者】李利红;袁宏利;胡振平;武雨欣【作者单位】山西省水产科学研究所,山西太原 030006;山西省水产科学研究所,山西太原 030006;山西省水产科学研究所,山西太原 030006;山西省水产科学研究所,山西太原 030006【正文语种】中文【中图分类】S965.112福瑞鲤是以建鲤和野生黄河鲤为亲本，经选育而成的鲤鱼新品种，具有生长速度快、体型好、饵料系数低、适应能力强和遗传性状稳定等特点，适宜在全国淡水水域中养殖［1-2］。
随着高密度、集约化养殖模式的迅速发展，水体中的残饵和生物排泄物等不断增多，经氨化作用产生了大量的氨态氮，目前已经成为诱发鱼病的主要环境因子之一［3］。
水体中高浓度氨氮诱导水生动物的鳃、肾和肝组织抗氧化系统发生改变，鱼体生长、发育受阻等［4-5］，降低鱼体的免疫力［6-7］，增加细菌的易感性等［8］。
本研究通过氨氮胁迫对福瑞鲤幼鱼鳃和肝组织谷胱甘肽硫转移酶（GST）活性的影响，探讨氨氮对福瑞鲤的毒理机制，旨在为淡水鱼类养殖中氨氮胁迫的防控提供科学依据。
急性淡水胁迫对四指马鲅幼鱼鳃、心脏、脾脏和肝脏组织结构的影响
收稿日期：2023-02-18基金项目：国家重点研发计划“蓝色粮仓科技创新”重点专项（2018YFD0900200）；中国水产科学研究院基本科研业务费资助项目（2020TD55）；岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心自主科研项目（2022ZD009）； 广东省省级乡村振兴战略专项资金种业振兴项目（2022-440000-4301030302-9582）通信作者：区又君（1964—），女，研究员，研究方向为鱼类生物学、发育生物学与水产养殖技术，E-mail: 广东农业科学2023，50（5）：121-131Guangdong Agricultural SciencesDOI:10.16768/j.issn.1004-874X.2023.05.014徐淑玉，区又君，温久福，林欣，李加儿.急性淡水胁迫对四指马鲅幼鱼鳃、心脏、脾脏和肝脏组织结构的影响［J］. 广东农业科学，2023，50（5）：121-131.急性淡水胁迫对四指马鲅幼鱼鳃、心脏、脾脏和肝脏组织结构的影响徐淑玉1，2，区又君1，3，温久福1，林 欣1，4，李加儿1（1.中国水产科学研究院南海水产研究所/农业农村部南海渔业资源开发利用重点实验室，广东 广州 510300；2.上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306；3.岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心，广东 茂名 525000；4. 大连海洋大学水产与生命学院，辽宁 大连 116000）摘 要：【目的】探究急性淡水胁迫对四指马鲅（Eleutheronema tetradactylum ）幼鱼鳃、心脏、脾脏和肝脏组织结构的影响，为低盐度养殖及良种选育提供参考。
【方法】将暂养于盐度9水体中的四指马鲅幼鱼放入盐度0的水族箱中，分别于淡水胁迫2、6、12、24、48、72 h 时进行活体取样，采用组织学方法对四指马鲅幼鱼的鳃、心脏、脾脏和肝脏组织结构进行研究。
【结果】四指马鲅幼鱼在受到急性淡水胁迫时，鳃小片长度出现逐渐增长的趋势，宽度先缩小后逐渐增大，鳃小片间距先增大后有回落，线粒体丰富细胞数量持续增多。
氨氮胁迫对水产动物生长、消化酶及免疫影响的研究进展
《河北渔业》2021年第5期(总第329期)DOI：10.3969/j.issn.1004-6755.2021.05.012氨氮胁迫对水产动物生长、消化酶及免疫影响的研究进展韩朝婕，陈屹洋，贺振楠，张严匀，周文礼，高金伟，贾旭颖(天津农学院水产学院,天津市水产生态及养殖重点实验室，天津300384)摘要：为深入了解水体中过量的氨氮对水产动物带来的问题，综述了氨氮胁迫对水产动物的生长、消化酶、抗氧化酶活及免疫机制的影响。
关键词：氨氮胁迫；生长；消化酶；免疫中国是全球水产养殖第一大国，然而，在集约化高密度养殖的迅猛发展形式下，养殖过程中受到各种环境因子的应激影响，尤其是在水产养殖过程中，随着养殖时间的变长，水体中的氨氮浓度会不断富集，当氨氮含量达到或者超过水产动物本身耐受限值时，会使得其生长缓慢，代谢能力下降，长期以往会导致其免疫力下降,最终感染多种病菌造成大面积死亡E1_2]o在目前的养殖水体环境中，大部分氨氮来自于养殖动物的残饵分解与代谢物，无机氮主要以钱态氮、非离子氨和亚硝酸氮的形式存在于水体中，氨氮里最有害的毒性物质是非离子氨(NH3),过量的非离子氨会造成水产动物代谢紊乱,影响其离子调节能力，是目前水产养殖中所急需解决的问题之一37〕。
因此，本文综述了氨氮胁迫对水产动物生长、消化酶及免疫的不同影响，以期为后期解决集约化养殖中的问题提供参考。
1氨氮胁迫对水产动物生长的影响水体中的氨氮主要由水产动物未消耗的饲料、排泄等其它有机物的分解产生,是存在于养殖水体中重要的污染物曲。
Zhang等旳通过试验发现,氨氮胁迫的时间越长，浓度越高，会导致团头鲂(Megalobrama amblycephala)的存活率显著降低,抑制其生长。
已有研究表明，在对“新吉富”罗非鱼(Oreochroms niloticus)进行30d的慢性氨氮胁迫试验中发现幼鱼具有一定的耐受性，但当氨氮浓度超出耐受阈值后，会抑制其生长发育，影响幼鱼摄食⑷。
水产动物对氨氮胁迫响应的转录组分析研究进展
水产动物对氨氮胁迫响应的转录组分析研究进展作者：章琼蒋高中李冰来源：《江苏农业科学》2015年第03期摘要：氨氮胁迫是影响水产养殖和生态环境的重要非生物胁迫之一；而转录组学是一个新兴的研究细胞表型和功能的重要手段，在研究基因结构、表达和功能上开拓了一个新型的研究方向。
简述了水产养殖中氨氮的危害以及氨氮胁迫而引起的生理和生化反应，同时介绍了常见的转录组学平台技术及其在一些胁迫反应代谢调控机制及分子机制研究中的应用，认为水产动物氨氮胁迫的转录组分析将为水产动物的毒理学效应提供重要的理论依据和线索，也将在水产动物分子育种中发挥重要作用。
关键词：水产动物；氨氮胁迫；代谢调控机制；转录组；转录组测序中图分类号： S917.4 文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）03-0227-04氨氮是水产养殖中常见的胁迫因子，以2种形式存在于水体中，即非离子氨（NH3）和离子铵（NH+4），离子铵的存在对水产动物是无毒的，对水产动物产生危害的是非离子氨，主要影响它们的游泳行为、生长性能、呼吸及代谢的变化、渗透调节、免疫力等。
随着转录组学、蛋白质组学和代谢组学等的出现，标志着生命科学的研究已经跨入后基因组时代。
转录组（transcriptome）概念最先是由Velcalescu和Kinzler等在1997年提出的，是指某一特定生物体在特定状态下所有基因转录产物的总和，主要包括mRNA和非编码RNA，其中 mRNA 较为引人关注，被研究得较多，因此狭义上的转录组一般指的是所有mRNA的总和。
目前，人们已经对机体受氨氮胁迫时的生理和生化反应做了大量深入的研究，然而对引起这些反应的代谢调控机制、分子机制的相关研究报道甚少。
本文主要通过综述氨氮胁迫的危害及生理生化反应，以及转录组平台技术的应用，以期为氨氮胁迫的代谢调控机制提供线索，并对其分子机制的研究提出展望。
1 水产养殖中氨氮的来源及其危害1.1 氮素的循环及水体中氨氮的来源自然界中的各种元素都是守恒的，都可以循环利用，在水体中也是如此，而影响水产养殖业发展最大的因素是氮元素的循环。
氨氮胁迫对鲫免疫系统及肠道菌群结构的影响
氨氮胁迫对鲫免疫系统及肠道菌群结构的影响摘 要集约化生产养殖、高密度养殖以及蛋白饲料的过度使用，容易造成水体中氨氮含量升高，引起水华、赤潮等水体富营养化，既破坏生态环境又给水产养殖业带来巨大的经济损失。
氨氮胁迫会危害鱼体免疫系统，损伤肠道粘膜，提高鱼体对病原菌的易感性。
本研究利用静水试验法测定氨氮对鲫的半数致死浓度（LC50）及其安全浓度；通过氨氮胁迫试验研究氨氮对鲫免疫系统的影响；利用高通量测序技术分析氨氮对鲫肠道菌群结构的影响，研究氨氮浓度、暴露时间与肠道菌群种类、含量的关系；初步探讨氨氮—免疫—肠道微生物三者之间的关系。
本研究得到的主要结果如下：1. 氨氮在96 h时对鲫的LC50为110.66 mg·L-1，安全浓度为11.07 mg·L-1。
2.通过氨氮胁迫试验，发现在安全浓度（10 ppm）处理组中，免疫相关基因（IL-1β，CXCL-8，TNFα）和抗氧化酶相关基因（GST，CAT，PRX）第15天时与对照组相比表达量显著上调；在高浓度（50 ppm）处理组中，免疫相关基因（IL-1β，CXCL-8，TNFα）和抗氧化酶相关基因（GST，SOD，CAT，PRX）第15天和第30天表达量较对照显著下调；再经15天无氨氮处理，免疫相关基因和抗氧化酶相关基因表达可恢复到对照水平。
3.通过16S rDNA微生物多样性分析，发现氨氮胁迫对肠道菌群物种丰度无显著影响；对肠道菌群结构组成显著影响，在属水平上，随着氨氮胁迫浓度升高拟杆菌属Bacteroides和鲸杆菌属Cetobacterium比例先升高后降低；在高浓度组中，黄杆菌属Flavobacterium相对含量随氨氮暴露时间不断升高，在第30 d时与对照相比相对含量升高近25%，病原菌含量的升高可能与免疫基因显著下调有关。
综上所述，氨氮胁迫对鲫免疫系统及肠道菌群结构有一定的影响。
高浓度氨氮胁迫抑制免疫相关基因和抗氧化酶相关基因的表达，同时鲫肠道内潜在病原菌黄杆菌属Flavobacterium含量升高。
氨氮急性胁迫下二、三倍体雌性虹鳟应激耐受性比较
Comparison of tolerance between diploid and triploid female rainbow trout under acute ammonia nitrogen stress/HAN Ying1, LIN Jiawen1, LYU Xiaonan2,
XUE Shuqun1, HAN Yue1(1. School of Animal Sciences and Technology, Northeast Agricultural
供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 二、三倍体雌性虹鳟来源于哈尔滨市农业科
学院水产分院，遗传背景相同，平均体重为（200± 10）g。试验开始前在 100 cm×50 cm×50 cm（有效水 体 体 积 为 200 L）水 族 箱 中 暂 养 3 周 。 试 验 水 温 （16.0±0.5）℃ ， 溶 解 氧（7.8±0.2）mg·L-1， pH 7.85， 氨氮（0.07±0.1）mg·L-1，光照周期为 12 h：12 h。暂 养期间饱食投喂，每日在 8: 00、12: 00 和 16: 00 定 时投喂虹鳟商品饲料，试验开始前 2 d 停食。 1.2 主要仪器与试剂
基金项目：中国博士后科学基金项目（2017M611347） 作者简介：韩英（1963-），女，教授，博士，研究方向为水产动物遗传育种。E-mail: hanyingzou@
亚硝态氮胁迫对草鱼非特异性免疫性能的影响_叶俊
第43卷第4期Vol.43No.4淡水渔业Freshwater Fisheries2013年7月Jul 2013收稿日期：2013－01－13；修订日期：2013－05－13资助项目：现代农业产业技术体系建设专项资金（NYCYTX －49）；“十二五”农村领域国家科技计划课题（2012BAD25B01）；湖北省自然科学基金重点项目（2012FFA029）；中央高校基本科研业务费专项资金（2013PY024）第一作者简介：叶俊（1990－），男，硕士研究生，专业方向为水产养殖学。
E-mail ：yesanzi@通讯作者：李大鹏。
E-mail ：ldp@ 亚硝态氮胁迫对草鱼非特异性免疫性能的影响叶俊1，肖琛1，尹晓燕1，汤蓉1，2，李大鹏1，2（1.华中农业大学水产学院，武汉430070；2.淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心，武汉430070）摘要：为探讨亚硝态氮胁迫对草鱼（Ctenopharyngodon idellus ）非特异性免疫性能的影响，将草鱼（0.15ʃ0.05g ）分别暴露在0mg /L 、0.2mg /L 、0.4mg /L 、0.8mg /L 、1.0mg /L 、2.0mg /L 、4.0mg /L 和8.0mg /L 的亚硝态氮溶液中，分别在暴露后0d 、1d 、4d 、7d 测定草鱼体内补体C3和C4含量、超氧化物歧化酶（SOD ）活力、谷胱甘肽（GSH ）含量以及γ－谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ－GCS ）活性。
结果表明，亚硝态氮胁迫对草鱼非特异性免疫性能产生了消极影响，其胁迫效应随着暴露浓度的不同而表现出不同的特性。
当暴露浓度低于1.0mg /L 时，补体C3和C4含量维持正常水平或显著升高；但暴露浓度超过1.0mg /L ，补体C3和C4含量水平会显著下降。
SOD 活性随着暴露时间而显著升高，但高浓度暴露使SOD 活性在暴露7d 时显著下降。
γ－GCS 活性一般都随着暴露时间延长而显著升高，虽然暴露后期其活性下降，但还是显著高于对照组。
急性氨氮胁迫对尖吻鲈稚鱼消化酶及抗氧化酶活性的影响
急性氨氮胁迫对尖吻鲈稚鱼消化酶及抗氧化酶活性的影响作者：刘亚娟胡静周胜杰彭晓瑜来源：《南方农业学报》2018年第10期摘要：【目的】明确氨氮对尖吻鲈（Lates calcarifer）稚鱼消化酶及抗氧化酶活性的影响，为提高尖吻鲈仔、稚鱼养殖存活率及丰富尖吻鲈养殖生态学理论提供依据。
【方法】对15日龄的尖吻鲈稚鱼进行急性氨氮胁迫试验，分别于氨氮胁迫0、6、12、24、36、48、72和96 h时测定超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、酸性磷酸酶（ACP）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等抗氧化酶及脂肪酶（LPS）、淀粉酶（AMS）、胰蛋白酶（TRYP）等消化酶活性，揭示急性氨氮胁迫下尖吻鲈稚鱼抗氧化酶及消化酶的变化规律。
【结果】氨氮胁迫下，5 mg/L处理组尖吻鲈稚鱼SOD活性在胁迫36 h后显著高于对照组（P关键词：尖吻鲈；稚鱼；氨氮胁迫；抗氧化酶；消化酶中图分类号： S965.211 文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2018）10-2087-090 引言【研究意义】氨氮是养殖环境中重要的水质指标，一般分为离子氨和非离子氨两大类（刘洪展等，2012）。
非离子氨在低浓度下即会对鱼类产生较强的毒性作用，而离子氨的毒性相对较小（龙章强，2008）。
大多数硬骨鱼类对非离子氨非常敏感，当其浓度大幅度超标时会直接损伤鳃组织，渗透进入血液淋巴组织，影响机体呼吸及免疫功能（de Freitas Rebelo et al.，2000；Koo et al.，2015），甚至引起发病死亡（Benli et al.，2008）。
氨氮是引发鱼病的主要环境因子，当鱼类个体受氨氮刺激尤其在超出其可调节阈值时，机体抗氧化酶系统受损，鳃、肾脏及肝脏组织结构发生病变，机体呼吸及排泄系统将遭到破坏，进而影响机体的正常生理功能（王琨，2007）。
因此，研究氨氮胁迫对水产动物生理指标及组织结构的影响，可为胁迫因子对机体的影响监测提供基础指标及明确鱼类对氨氮的耐受性，对促进水产养殖可持续发展具有重要意义。
环境胁迫对鱼类生理机能的影响
环境胁迫对鱼类生理机能的影响洪 磊,张秀梅*(中国海洋大学水产学院,山东青岛266003)摘 要:综述了环境胁迫的类型以及胁迫条件下鱼类的生理状态及其变化规律,认为鱼类对胁迫的适应反应从神经内分泌活动变化开始,激素含量变化是鱼类应激的敏感指标,血液指标在鱼类应激检测中有较高的应用价值。
关键词:环境胁迫;鱼类;生理机能中图分类号:Q 494 文献标识码:A 文章编号:1671-6647(2004)01-0114-08环境胁迫(environmental stress)是环境对鱼类所处的生存状态产生的压力,环境对鱼类的各种刺激,即为环境胁迫因子(environmental stress factor)[1]。
鱼类是水生低等变温脊椎动物,容易受外界环境的影响。
在工厂化养殖生产过程中温度、盐度、溶解氧、酸碱度、氨氮和亚硝酸盐等因素是影响鱼类生长的主要胁迫因子。
温度可以影响鲢、鳙鱼体内转氨酶活性,随温度升高酶活性增强而且鱼体血液红细胞数目也随温度变化发生波动[2]。
盐度在鱼类的生长过程特别是在仔鱼期起重要的作用[3]。
低pH 值不仅可以影响鱼类的胚胎发育、耗氧代谢和血液酸碱平衡,也可以引发草鱼鳃和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性的升高[4]。
另外,暴露于pH 4.5~ 5.0水体中的鲤鱼血糖明显升高,体重明显下降,可抑制鱼体生长[5]。
在氨氮对鲢鱼(Hy -p op hthalmichthys molitr ix )、鳙鱼(A ristichthys nobilis )、草鱼(Ctenop hary ngodon idellus )、鲤鱼(Cyp r inus carp io )的影响实验中,水中氨氮含量过高会导致鳃丝扭曲明显、鳃上皮增生、鳃丝粘连,同时可以观察到肝组织变得松软、易破碎、肝实质细胞的细胞质明显减少,有的甚至出现空泡化[6]。
养殖水体中亚硝酸盐达到一定浓度易引起鱼类中毒而使血液里高铁血红蛋白的含量升高、载氧能力下降,造成组织缺氧、神经麻痹、甚至窒息死亡[7]。
pH、氨氮胁迫对中国对虾HSP90基因表达的影响
关 键 词 中 国 对 虾 ＨＳ Ｐ９ ０基 因 ｐ Ｈ 胁 迫 氨 氮 胁 迫
中图分 类号
￥ ９ １ ７ ． ４
文 献 识 别 码 Ａ
文 章 编 号 １ ０ ０ ０ — ７ ０ ７ ５ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ０ ４ ３ — ０ ８
Ｅｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｐ Ｈ ａ ｎ ｄ ａ ｍｍ ｏ ｎｉ ａ — Ｎ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｓ ｅ ｓ ｏ ｎ Ｈ ＳＰ９ ０ ｇ ｅ ｎ ｅ ｅ ｘ ｐｒ ｅ ｓ ｓ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｆ ｒ Ｄ Ｚｈ ｅ 。 ＨＥ Ｙｕ — ｙ ｉ ｎ ｇ
王 芸 。 李 健 张 拮 何 玉英 常 志 强 陈 萍 李 吉涛 刘 德 月
（ 农 业 部 海 洋 渔 业 可 持续 发 展 重 点 实 验 室 中 国水 产 科 学 研 究 院黄 海 水 产 研 究 所 ， 青岛 ２ ６ ６ ０ ７ １ ）
（ 。 农 业 部 水 产 品加 工 重 点 实 验 室 中 国 水 产 科 学 研 究 院 南 海 水 产 研 究 所 ， 广州 ５ １ ０ ３ ０ ０ ）
第 ３ ４ 卷
第 ５期
急性氨氮暴露对大弹涂鱼炎性反应相关基因表达的影响
关键词 ：大 弹涂 鱼 ；氨氮 ；基 因；促 炎性 因子
中图分 类号 ：Ｑ ７８６；Ｓ ９６５．３
文 献标 志 码 ：Ａ
鱼 类 氨 中 毒 与 哺 乳 动 物 肝 性 脑 病 的致 病 机 制 相 同 ，都 是 因 为 大 脑 中高 含 量 的 非 离 子 态 氨 氮 （ＮＨ ）在 谷 氨 酰胺 合 成 酶 （Ｇｓ）催 化 下 合成 大量 的 谷 氨 酰胺 ，使 得 星 状 胶 质 细 胞 肿 胀 引 起 颅 内 高 压 导致 死 亡 【１］，长期 以来 ，该 假 说得 到 大 多数 学 者 的认 可 。但 近年 来 ，Ｖａｎ Ｄｅｒ Ｌｉｎｄｅｎ等［２ 针对 这 一观 点 提 出 了质 疑 ，他 们发 现 鲤 （Ｃｙｐｒｉｎｕｓ ｃａｒ— ｐｉｏ）受 到 氨氮 胁 迫 后 ，谷 氨 酰 胺 积 累量 远 超过 哺 乳 类 的致 死 浓度 ，大脑 体积 扩大 了６．５％却 未 发现 动 物 死 亡 ，组 织 学 证 据 表 明 ，鱼 类 颅 骨结 构 较 之 哺 乳 类 具 有 更 多 的 颅 内间 隙 ，能 够 耐 受 更 强 的 颅 内压 ，因此 推 测 颅 内压 升 高 可 能并 不 是 导 致 鱼类 氨 中毒死 亡 的主 要原 因。
摘要 ：为 研 究 急 性 氨 氮 胁 迫 对 大 弹 涂 鱼 炎 性 反 应相 关 基 因表 达 的 影 响 ，实 验 挑 选 初 始 体
质 量 为 （１５．１４￣０．０５）ｇ的 健 康 大 弹涂 鱼 幼 鱼 １８０尾 ，进 行 ９６ ｈ的 急 性 氨 氮胁 迫 实 验 。结 果 显
示 ， 大 弹 涂 鱼 ９６ ｈ氨 氮 半 致 死 浓 度 为８．９９ ｍｇ／Ｌ总 氨 氮（０。１１ ｍｇ／Ｌ￣ 离 子 氨 ，Ｔ—ＡＮ）； 氨 氮
草鱼(Ctenopharyngodon idella)对亚硝酸氮、氨氮和温度胁迫的生理响应
草鱼（Ctenopharyngodon idella）对亚硝酸氮、氨氮和温度胁迫的生理响应草鱼是我国国内广泛养殖的一种淡水鱼类，但是在养殖过程常常会面对多种多样的环境胁迫而产生应激反应。
本研究通过在亚硝酸盐，氨氮和温度胁迫下草鱼几种应激反应相关基因的表达，初步探讨了环境胁迫下草鱼的生理响应。
1.亚硝酸盐胁迫对于草鱼（Ctenopharyngodon idella）sod和hsp90基因表达的影响在草鱼的养殖生产中，由于精养和工厂化养殖的扩大，水体中常含有较高浓度的亚硝酸盐。
本实验通过测定草鱼的24h半致死浓度，sod和hsp90的表达模式研究了草鱼在分子生物学水平上对高浓度亚硝酸盐暴露的响应。
经过半致死实验确定的亚硝酸盐24h LC<sub>50</sub>为445mg/L。
实验中草鱼被置于5个浓度的处理组中（50,87,151,263,400mg/L）,取肝脏，肠和鳃来测定sod和hsp90的表达情况。
经过高浓度的亚硝酸盐暴露处理， sod和hsp90的表达受到了显著的上调，但是在不同组织中的表达模式不同。
这些结果指出，高浓度的亚硝酸盐能够诱导应激蛋白的表达，并且sod和hsp90可以作为评估草鱼氨氮暴露水平的良好指标。
2.急性氨氮胁迫对于草鱼（Ctenopharyngodon idella）sod和hsp90基因表达及鳃部结构的影响本实验通过测定草鱼的24h半致死浓度，鳃的细胞结构以及sod和hsp90的表达模式研究了草鱼在组织学和分子生物学水平上对高浓度氨氮暴露的响应。
经过半致死实验确定的氨氮24h LC<sub>50</sub>为243mg/L试验中草鱼被置于5个浓度的处理组中（50,72,104,151,220mg/L）,之后取鳃组织进行组织切片分析，取肝脏，肠和鳃来测定sod和hsp90的表达情况。
经过高浓度的氨氮暴露处理，鳃组织的细胞排列和结构产生了明显的变化，并且sod和hsp90的表达受到了显著的上调，这些结果指出，高浓度的氨氮能够损害鳃部的细胞结构并且诱导应激蛋白的表达。
拥挤胁迫和亚硝酸盐胁迫对草鱼应激相关基因和泛素—蛋白酶体系统的影响
华中农业大学硕士学位论文拥挤胁迫和亚硝酸盐胁迫对草鱼应激相关基因和泛素-蛋白酶体系统的影响THE EFFECT OF CROWDING STRESS AND NITRITE STRESS ON STRESS-RELATED GENES AND UBIQUITIN -PROTEASOME SYSTEM IN GRASS CARPCTENOPHARYNGODON IDELLA研究生:孙怡晴学号:2015308110017指导教师:李大鹏教授指导小组:李大鹏教授专业：水产养殖研究方向：鱼类生理与分子生物学获得学位名称：农学硕士获得学位时间：2018年6月20日华中农业大学水产学院二○一八年六月拥挤胁迫和亚硝酸盐胁迫对草鱼应激相关基因和泛素-蛋白酶体系统的影响目录目录 (I)摘要 (i)Abstract (iii)缩略语表 (vi)1文献综述 (1)1.1鱼类的应激反应 (1)1.2拥挤胁迫对鱼类生理机能的影响 (3)1.3亚硝酸盐胁迫对鱼类生理机能的影响 (5)1.4肌肉的蛋白质代谢 (6)1.5泛素—蛋白酶体系统 (8)1.6泛素—蛋白酶体系统在应激反应中的作用 (10)1.7研究目的与意义 (11)2材料与方法 (12)2.1实验材料 (12)2.2实验设计 (12)2.2.1拥挤胁迫实验设计 (12)2.2.2亚硝酸盐胁迫实验设计 (13)2.3组织样品采集 (14)2.4血液生化指标测定 (14)2.5总RNA的提取和反转录 (14)2.6基因克隆 (16)2.6.1引物设计 (16)2.6.2目的基因PCR (17)2.6.3目的片段的回收 (17)2.6.4目的片段的连接 (17)2.6.5目的片段的转化 (18)2.7实时荧光定量PCR (18)2.8泛素化蛋白含量测定 (19)2.9酪氨酸和3-甲基组氨酸的检测 (20)2.10组织学观察 (20)2.11数据分析 (20)3实验结果 (21)3.1拥挤胁迫实验 (21)3.1.1应激相关基因的表达 (21)3.1.2泛素—蛋白酶体系统活性 (22)3.1.3肌肉蛋白质代谢 (23)3.2亚硝酸盐胁迫实验 (24)3.2.1血液生化指标 (24)3.2.2肝脏内相关基因表达与泛素化蛋白含量 (26)3.2.3肌肉中相关基因表达及泛素化蛋白含量 (28)I华中农业大学2018届硕士研究生学位（毕业）论文3.2.4肝脏、肌肉和鳃的组织病理学观察 (30)4讨论 (32)4.1拥挤胁迫实验 (32)4.1.1应激相关基因的表达 (32)4.1.2泛素-蛋白酶体系统活性与肌肉蛋白质降解 (33)4.1.3肌肉蛋白质合成与代谢 (33)4.2亚硝酸盐胁迫实验 (34)4.2.1血液生化指标 (34)4.2.2肝脏相关基因表达及泛素化蛋白含量 (35)4.2.3肌肉相关基因表达及泛素化蛋白含量 (36)4.2.4肝脏、肌肉和鳃的组织病理学 (37)参考文献 (39)发表论文及专利情况 (53)致谢 (54)II拥挤胁迫和亚硝酸盐胁迫对草鱼应激相关基因和泛素-蛋白酶体系统的影响摘要鱼类是水生低等变温脊椎动物，对外界环境有较强的依赖性，其生存易受到外界环境因子的影响。
急性氨氮胁迫对虎斑乌贼肝脏、鳃和脑组织结构的影响
急性氨氮胁迫对虎斑乌贼肝脏、鳃和脑组织结构的影响陈思涵;彭瑞冰;黄晨;赵晨曦;李建平;薛瑞萍;蒋霞敏【期刊名称】《水产学报》【年(卷),期】2018(042)009【摘要】为了探讨氨氮对虎斑乌贼器官组织结构的影响,以体质量为(13.80±0.65)g的幼虎斑乌贼为对象,研究了氨氮胁迫对其肝脏、鳃和脑组织结构的影响.根据96 h的LC50实验结果设计5个梯度(0、1、3、6和12 mg/L)进行96 h的氨氮胁迫后,利用光学显微镜和透射电子显微镜观察其肝脏、鳃和脑组织结构.结果显示,在相同浓度的氨氮胁迫下,虎斑乌贼不同组织器官之间损伤程度存在差异,其中肝脏损伤的程度最大,对氨氮胁迫表现最敏感,其次是鳃组织和脑组织,组织器官损伤程度与氨氮浓度呈现正相关.氨氮胁迫浓度越大或胁迫时间越长,肉眼观察发现肝脏颜色越鲜红,肿胀和易糜烂程度越明显,可通过肉眼观察肝脏颜色和肿胀程度初步判断机体氨中毒程度;氨氮胁迫后,对肝脏和鳃组织造成较为严重的损伤,可能是虎斑乌贼氨中毒致死的原因.当氨氮高于或等于6 mg/L时胁迫96 h后,通过显微观察发现肝小叶轮廓模糊不完整、排列不紧密和胞浆疏松透明,大量的细胞核溶解,细胞出现空泡化,肝血窦扩张;通过电镜观察发现细胞核皱缩变形、核仁消失、线粒体嵴紊乱、线粒体空泡化、线粒体外室肿胀,高尔基体数量减少;显微观察发现鳃组织的泌氯细胞和上皮细胞核溶解,细胞出现空泡化、排列紊乱,鳃丝肿胀淤血、轮廓模糊不完整,并出现坏死脱落和缺损;通过透射电镜观察,发现细胞核皱缩、核膜破损和细胞核裂解,线粒体出现了皱缩变形、空泡化和不完整破损现象;观察脑组织的神经团和视叶,未发现脑组织的细胞有显著损伤.【总页数】10页(P1348-1357)【作者】陈思涵;彭瑞冰;黄晨;赵晨曦;李建平;薛瑞萍;蒋霞敏【作者单位】宁波大学海洋学院,浙江宁波 315211;宁波大学海洋学院,浙江宁波315211;宁波大学海洋学院,浙江宁波 315211;宁波大学海洋学院,浙江宁波315211;宁波大学海洋学院,浙江宁波 315211;宁波大学海洋学院,浙江宁波315211;宁波大学海洋学院,浙江宁波 315211【正文语种】中文【中图分类】S917.4【相关文献】1.运输胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏、鳃和脾脏组织结构的影响 [J], 刘奇奇;温久福;区又君;李加儿;周慧;2.运输胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏、鳃和脾脏组织结构的影响 [J], 刘奇奇;温久福;区又君;李加儿;周慧3.急性氨氮胁迫对于草鱼sod和hsp90基因表达及鳃部结构的影响 [J], 周鑫;董云伟;王芳;董双林4.Pb2+对泥蚶鳃、肝脏等组织结构的影响 [J], 陈彩芳;沈伟良;申屠基康;林志华5.急性低温胁迫对四指马鲅幼鱼肝脏、肌肉以及鳃组织结构的影响 [J], 区又君;刘奇奇;温久福;李加儿;李活因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
亚硝酸盐胁迫对草鱼肝脏泛素-蛋白酶体系统的影响
亚硝酸盐胁迫对草鱼肝脏泛素-蛋白酶体系统的影响孙怡晴;梁骁;熊梅;ONXAYVIENG Kommaly;汤蓉;李大鹏【摘要】为了探究亚硝酸盐胁迫对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏泛素—蛋白酶体系统(ubiquitin proteasome sys-tem,UPS)的影响,将草鱼随机暴露于0、0.5、20 mg/L的亚硝酸盐溶液中,在12、24、48、96 h后采集肝脏样品,检测血液的生化指标,nrf2、hsp70和UPS相关基因的表达,泛素化蛋白的含量以及肝脏的组织学变化.结果显示:在亚硝酸盐胁迫12 h,血清皮质醇含量呈现显著的剂量依赖式升高,且在24 h和48 h显著高于对照组.谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量在96 h 显著性降低.暴露12 h时,20 mg/L暴露组的nrf2、hsp70的表达量显著性高于对照组,ub、chip、psma2、psmc的表达水平和泛素化蛋白的含量在20 mg/L亚硝酸盐胁迫24 h均出现显著升高.在高浓度亚硝酸盐胁迫96 h后,肝细胞出现明显的空泡化.研究表明,亚硝酸盐胁迫使草鱼产生了显著的应激反应,造成了肝组织损伤,使肝脏UPS活性上升.【期刊名称】《淡水渔业》【年(卷),期】2019(049)004【总页数】7页(P76-82)【关键词】泛素—蛋白酶体系统;草鱼(Ctenopharyngodon idellus);亚硝酸盐;应激;基因【作者】孙怡晴;梁骁;熊梅;ONXAYVIENG Kommaly;汤蓉;李大鹏【作者单位】华中农业大学水产学院,池塘健康养殖湖北省工程实验室,武汉430070;华中农业大学水产学院,池塘健康养殖湖北省工程实验室,武汉 430070;华中农业大学水产学院,池塘健康养殖湖北省工程实验室,武汉 430070;华中农业大学水产学院,池塘健康养殖湖北省工程实验室,武汉 430070;家畜和渔业部,农林部,老挝万象 6644;华中农业大学水产学院,池塘健康养殖湖北省工程实验室,武汉430070;华中农业大学水产学院,池塘健康养殖湖北省工程实验室,武汉 430070【正文语种】中文【中图分类】S965.112亚硝酸盐是生态系统中氮循环的重要中间产物，也是水产养殖过程中常见的污染物。
急性镉胁迫下草鱼肝胰脏中几个内参基因表达稳定性的比较研究
急性镉胁迫下草鱼肝胰脏中几个内参基因表达稳定性的比较研究吴勇亮;杨颖康;谭淑雯;彭钟琴;苗鹏飞;于辉【摘要】为筛选重金属镉胁迫下稳定性较好的内参基因,选择在镉胁迫下草鱼肝胰腺中4个候选内参基因18S核糖体RNA(18S Ribosomal RNA,18S rRNA),甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH),β-肌动蛋白(beta actin,β-actin)和β微球蛋白(beta-2-microglobulin,β2m)进行分析.结果表明,geNorm软件分析得到18S rRNA和β2m的M值为0.716,稳定性最好;NormFinder软件分析得到GAPDH和18S rRNA稳定值分别为0.423和0.431,稳定性较好;BestKeeper软件分析得到18S rRNA标准差为0.28,稳定性最好.研究结果知,在研究重金属镉胁迫下草鱼肝胰脏基因表达情况时应选用18S rRNA为内参基因.【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2018(039)007【总页数】5页(P16-19,41)【关键词】镉胁迫;草鱼;实时荧光定量PCR;内参基因;稳定性【作者】吴勇亮;杨颖康;谭淑雯;彭钟琴;苗鹏飞;于辉【作者单位】佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528231;佛山科学技术学院生命科学与工程学院,广东佛山528231【正文语种】中文【中图分类】S811.5美国毒性物质与疾病管理委员会(ATSDR)对毒性物质的排序中，重金属镉(Cadmium，Cd)位列第7位，国际抗癌症联盟(IARC)于1993年将镉定为确定性的人类致癌毒物[1]。
急性低氧胁迫对翘嘴鳜抗氧化酶、呼吸相关酶活性及相关基因表达的影响
急性低氧胁迫对翘嘴鳜抗氧化酶、呼吸相关酶活性及相关基因表达的影响【研究意义】溶解氧（Dissolved oxygen，DO）是影响鱼类生存和生长的重要环境因子。
在水产养殖过程中，影响水体溶解氧的因素很多，包括天气、水流和水温等（Wu et al.，2020）。
大多数鱼类具有适应溶解氧波动的能力，但溶解氧长期处于较低水平，则会对鱼类造成不可逆损伤，甚至导致死亡（Abdel-Tawwab et al.，2019），给水产养殖业带来严重损失。
因此，探究低氧胁迫下鱼类生理生化指标及相关基因的表达变化规律，明确鱼类对低氧的效应及耐受限度，对科学指导鱼类高密度养殖具有重要意义。
【前人研究进展】随着养殖水体中溶解氧水平的降低，鱼类的呼吸和摄食活动会随之降低，其生理和代谢活动也受到不利影响（Wedemeyer，1996）。
鱼类响应低氧胁迫是一个复杂的生理过程，是多种因素相互作用的结果（熊向英等，2016），通常需要在基因水平、信号通路及低氧信号途径网络调控等不同层面进行深入探讨。
Pichavant等（2002）研究表明，在严重低氧条件下鱼类的有氧呼吸速率受到影响，腺苷三磷酸（ATP）产生减慢，导致肌肉组织中乳酸含量发生变化;Rinaldi等（2005）研究发现，在轻度低氧条件下欧洲鲈（Dicentrarchus labrax）的鳃组织结构会受到影响;Omlin和Weber（2010）在研究虹鳟（Oncorhynchus mykiss）时发现，由低氧引起的乳酸增加在降低循环中乳酸负荷具有战略性作用;狄治朝等（2018）研究表明，斑马鱼（Danio rerio）在低氧胁迫下Hsp90ab1基因相对表达量呈上调趋势;Sun等（2020）研究表明，大嘴鲈（Micropterus salmoides）受低氧胁迫时其肝脏的过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性明显升高;张凯强等（2020）研究发现，HIF-1α基因在花鲈的低氧应答中发挥重要作用。