蝇蛆壳聚糖的制备工艺与壳寡糖的初步制备
壳聚糖的制备及性质的鉴定
壳聚糖的制备及性质的鉴定实验目的：1、掌握从虾、蟹壳中制备壳聚糖的方法及原理。
2、掌握多糖分离的基本步骤。
3、掌握壳聚糖的基本指标鉴定及检测方法。
实验原理：甲壳素生物多糖之一，其制备原料主要是虾壳、蟹壳、蚕蛹、蝇蛆、蘑菇、真菌等。
制备甲壳素的主要操作是脱钙和脱蛋白，再脱乙酰基就得到壳聚糖。
壳聚糖的基本指标有脱乙酰度、分子量、含氮量、水分、灰分等（本实验用测定脱乙酰度）。
脱乙酰度的测定方法有酸碱滴定法、电位滴定法、紫外光谱法、红外光谱法等。
本实验采用虾壳原料、用酸碱滴定测定脱乙酰度。
器材：玻璃棒、催洗瓶、烧杯(50ml、500ml、1000ml)各一个、胶头滴管、量筒（10ml、50ml）各一个、铁夹子、酸碱滴定装置、电子天平、恒温箱、恒温水浴箱、烘干箱。
试剂：31克鲜虾壳、蒸馏水、10%HCL溶液、10%烧碱溶液、1%KMnO4溶液、2%NaHS溶液、50%烧碱溶液、0.1mol/L标准HCL溶液、0.1mol标准NaOH溶液（两者都要用分析纯配制）、0.1%甲基橙水溶液、0.1%苯胺蓝水溶液、甲基橙—苯胺蓝以1:2（v/v）混合配制，作为指示剂使用。
溶液的配制：1、10%盐酸：吸取（36%~38%）盐酸250ml于1000ml容量瓶，加蒸馏水定容至1000ml。
2、10%烧碱溶液：称取100gNaOH粉末，加蒸馏水溶解，于1000ml 容量瓶中定容至1000ml。
3、1%KMnO4溶液：取5g KMnO4粉末，加蒸馏水溶解，于1000ml 大烧杯中配成500ml溶液。
4、2%NaHS溶液：取10gNaHS粉末，加蒸馏水溶解，于1000ml 大烧杯中配成500ml溶液。
5、浓度为C1标准盐酸：吸取（36%~38%）盐酸15ml于100ml 容量瓶，定容至100ml。
6、0.1mol/L标准NaOH溶液;称取1gNaOH固体，加蒸馏水溶解，于250ml容量瓶中定容至250ml。
7、0.1%甲基橙水溶液：称取0.1g甲基橙粉末，溶解于10ml水中。
概述壳寡糖的制备方法
概述壳寡糖的制备方法壳寡糖是一种多糖化合物，由壳聚糖经酸性水解或酶解而得。
壳聚糖是一种天然存在于海洋中的多糖，具有许多生物活性和应用价值，如抗菌、抗肿瘤、抗炎、抗氧化等。
壳寡糖是壳聚糖的降解产物，具有更小的分子量和活性基团，因此其生物活性更高。
壳寡糖的制备方法主要有以下几种：1.酸性水解法：将壳聚糖溶解在酸性溶液中，如醋酸、盐酸等，并在适当温度下加热反应。
酸性条件可以使壳聚糖链断裂，生成壳寡糖。
反应结束后，通过中和酸性溶液或沉淀法将产物分离出来。
2.酶解法：使用壳聚糖酶或其他适用的酶对壳聚糖进行酶解反应。
酶解过程中，酶可以选择性地断裂壳聚糖链，生成壳寡糖。
酶解反应可以在适宜的温度和pH值下进行，并通过酶的活性和反应时间来控制产物的数目和分子量。
3.化学修饰法：通过化学反应将壳聚糖的部分功能基团修饰成壳寡糖。
例如，可以通过酯化反应在壳聚糖分子上引入乙酰基等基团，从而生成壳寡糖。
化学修饰法可以根据需要选择适合的修饰试剂和反应条件，并通过改变反应物的摩尔比例和反应时间来控制修饰程度和产物的分子量。
4.高效液相色谱法：通过高效液相色谱（HPLC）技术从壳聚糖中分离壳寡糖。
HPLC分离通常使用聚合物或凝胶柱，通过调节流动相的组成、流速和梯度来实现壳寡糖的分离。
此方法具有高分离效率和纯度，但对仪器的要求较高，因此成本较高。
壳寡糖的制备方法选择取决于所需壳寡糖的数目、分子量和纯度，以及实验室条件和经济成本。
不同的制备方法也会对壳寡糖的结构和性质产生影响，因此需要根据研究目的和应用要求选择最合适的方法。
壳聚糖的制备方法
壳聚糖的制备方法
壳聚糖可以通过多种方法制备，以下是一些常见的制备方法：
1. 天然提取法：天然提取法是直接从自然界中提取壳聚糖的方法。
例如，从虾、蟹等甲壳类动物的外壳中提取壳聚糖。
这种方法得到的壳聚糖纯度较高，但产量较低。
2. 化学合成法：化学合成法是通过化学反应在实验室里制备壳聚糖的方法。
这种方法可以大规模生产壳聚糖，但需要使用大量化学试剂，且产物的纯度可能不如天然提取法。
3. 生物合成法：生物合成法是利用微生物发酵的方法生产壳聚糖。
这种方法可以大规模生产壳聚糖，且不需要使用化学试剂，因此对环境友好。
但需要选择合适的微生物和发酵条件，以确保产物的纯度和产量。
4. 酶促合成法：酶促合成法是利用酶催化反应制备壳聚糖的方法。
这种方法可以在温和的条件下进行，且使用的酶通常对环境友好。
但需要选择合适的酶和反应条件，以确保产物的纯度和产量。
总的来说，制备壳聚糖的方法有很多种，可以根据实际需求选择合适的方法。
从蝇蛆中提取亮聚糖的研究
等原 因，使得 海洋资源 日渐匮乏 。而家蝇属 于再 生资源 ，在昆虫世界里 ，苍蝇 的繁殖 能力位 居第
一
，
一
对苍蝇 ４个月可繁殖２６０ ６ 亿个蝇蛆 。据测
基金项 目：黑龙江省科技攻关项 目资助（ Ｃ ３ ５ ５） Ｇ ０Ｂ０ 作者简介 ：徐宁彤 （９ ４ ，女 ，满族 ，黑龙江人 ，博 士研究 １６ 一）
表 １。试验结果表明：在６ ～ ５ 时 甲壳素脱乙酰 ） Ｏ６ ℃
度 达到 最大 。
１ ． 利 用黏度 仪 测定黏 度 ４
维普资讯
从 蝇 蛆 巾 漫 取 竞 囊 糖 的 硪 宄
徐 宁彤 ，曲琪环 ，周玉岩 ，刘纹芳
（ 东北农业大学 ，黑龙江 哈尔滨 １０ ３ ５０ ０）
摘
要：蝇蛆属 于再生资源。在 昆虫世界 里 ，苍蝇的繁 殖能力位居 第一 ，一对苍 蝇 ４个 月可繁 殖 ２６０ 亿个 ６
含量 为３ ％左右 。 由于 水污 染及 虾 、蟹 过量 的打捞 ０
的一种天然高分子聚合物，属于直链 氨基多糖 ，由 于 大分 子间强 的氢 键作 用 ，导致 甲壳 素成 为保 护 生
物 的一 种 结 构物 质 ，结 晶构 造 坚 固 ，一 般不 熔 化 ，
也不溶于一般的有机溶剂和酸碱 ，只溶于浓酸和某 些 溶 剂 。化 学 性质 非 常稳 定 ，应用 有 限【。甲壳 素 ２ ＿
蝇蛆 。据测算干蛆 中含 甲壳质 ３％ ５ ． ０ ４ ％。 因此 ， 蝇蛆 中 取的一种极有前途的抗茵活性蛋 白后 的蛆皮 ，提取 ８ 从 提 甲壳质 ，再 脱 乙酰基制成 壳聚糖 ，是很 有经济价值 的。研 究表明 ，将提取后 的甲壳质经 ５％的 Ｎ Ｏ ０ ａ Ｈ溶液在 ６— ０ ６℃的水浴锅 中 热 ８ ，可以得到较好质量的壳聚糖 。 ５ 加 ｈ 关键 词：壳聚糖 ；脱 乙酰基 ； 蝇蛆 中圈分类号 ：￥ １． ；￥ １． 文献标 识码 ：Ｂ 文章编号 ：１０－０４ ２０ ）７－ ３－３ ８６ ５ ８６ ９ ３ ７ ０ １０ ８ （ ６０－０２０ ０ ０
蝇蛆壳聚糖制备工艺的研究
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是采用其脱乙酰产物—— —壳聚糖。壳聚糖现已广泛 地应用于食品工业、医药工业、轻纺工业和环境保 护等行业 。在以往壳聚糖制备工艺研究中，大多数
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以虾、蟹为原料 ，而以蝇蛆为原料制备壳聚糖甚少。
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本文以蝇蛆甲壳素为原料，探讨合适的工艺条件， 为工业化生产提供理论基础。 # 实验 #*# 材料和仪器 材料：蝇蛆甲壳素、氢氧化钠 +,-./0、冰醋酸 —苯胺蓝指示剂； +1/21../3：化学纯；甲基橙——
过氧化氢制备壳寡糖的工艺
过氧化氢制备壳寡糖的工艺
舒德海;钱俊青;吴薇
【期刊名称】《食品与发酵工业》
【年(卷),期】2009(035)006
【摘要】为了简便高效的制备出壳寡糖,采用过氧化氢(质量分数1.0%)来降解稀醋酸溶液(质量分数1.0%)中含量为3.5%的壳聚糖,60℃下摇床反应4.5 h后得到壳寡糖水溶液,检测溶液中还原性端基数并估算降解物平均聚合度来表征降解程度.降解液浓缩到25%,调pH 7.0,用体积分数95%乙醇分级沉淀分离壳寡糖可以除掉部分单糖,总的回收率达93.0%.通过电喷雾电离质谱(ESI-MS)分析,3倍醇沉出的产物为2-4糖为主的壳寡糖产品.实验说明过氧化氢氧化降解壳聚糖可制取聚合度为2-4的壳寡糖.
【总页数】5页(P121-125)
【作者】舒德海;钱俊青;吴薇
【作者单位】浙江工业大学药学院,浙江,杭州,310014;浙江工业大学药学院,浙江,杭州,310014;浙江工业大学药学院,浙江,杭州,310014
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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1.蝇蛆壳聚糖的制备工艺与壳寡糖的初步制备 [J], 竺锡武;罗赫荣;钟自勉
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彬;胡立峰;姜祥兵;刘群
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壳寡糖制备
壳寡糖是指由壳聚糖通过特定的酶或化学反应加工制得的寡聚糖。
壳聚糖是一种天然存在的多糖，主要存在于海洋中的甲壳类生物壳中。
壳寡糖的制备通常使用两种主要的方法，一种是酶法，另一种是化学法。
酶法制备壳寡糖的步骤如下：
1. 收集壳类生物的壳，将其清洗干净并切碎成小块。
2. 使用酶类（如壳酶、纤维素酶等）将壳类生物的壳中的聚糖酶解为寡糖。
3. 对酶解产物进行筛选和纯化，得到壳寡糖。
化学法制备壳寡糖的步骤如下：
1. 收集壳类生物的壳，将其清洗干净并切碎成小块。
2. 将壳类生物的壳中的聚糖用酸（如盐酸、硫酸等）进行酸水解，将聚糖分解为寡糖。
3. 对酸水解产物进行中和、沉淀、洗涤和干燥等处理，得到壳寡糖。
无论是酶法还是化学法制备壳寡糖，其得到的壳寡糖成分和结构都会受到原料的种类、加工方法的不同而有所差异。
制备得到的壳寡糖可以通过化学或物理手段进行纯化和分离，得到理想的壳寡糖产品，以供药物、保健品、食品等领域的应用。
壳寡糖生产工艺
壳寡糖生产工艺壳寡糖是一种由藻类、真菌和细菌发酵产生的复杂多糖，具有良好的生理活性和生物功能。
壳寡糖具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、降血脂等多种药理活性，因此在医药、食品、农业、化妆品等领域具有广泛的应用前景。
下面将介绍一种常用的壳寡糖生产工艺。
壳寡糖的生产工艺主要分为发酵和提取两个步骤。
第一步是藻类、真菌或细菌的发酵。
首先，需要选择优良的壳寡糖菌种，比如海藻菌、真菌菌种等。
这些菌种在发酵过程中能够产生壳寡糖。
接着，将选好的菌种接种到含有适宜培养基的发酵罐中，培养条件包括温度、pH值、光照等。
在培养过程中，菌种会不断繁殖，并分泌出壳寡糖。
第二步是壳寡糖的提取。
提取壳寡糖的方法有很多种，常用的包括酸提法、碱提法和酶法。
其中，酸提法是传统的提取方式，通过酸性条件将发酵液中的壳寡糖转化为溶液形式，然后经过滤、浓缩等工艺步骤得到壳寡糖产品。
碱提法是近年来发展起来的一种新方法，它通过碱处理将壳寡糖从固体沉淀物中释放出来，然后经过离心、洗涤等步骤得到壳寡糖。
酶法是一种比较新颖的提取方式，通过加入特定的酶，使壳寡糖在较低温度下得以提取，从而减少能耗和损失。
值得注意的是，壳寡糖的提取工艺需要进行冻干处理，以保持壳寡糖的活性。
冻干是将提取得到的壳寡糖溶液在低温下进行冷冻，然后在真空中加热，将水分从溶液中去除，最终得到冻干粉末。
这种冻干粉末不仅方便保存和运输，而且能够保持壳寡糖的生物活性和稳定性。
总之，壳寡糖的生产工艺主要包括发酵和提取两个步骤。
发酵是通过藻类、真菌或细菌菌种在适宜培养条件下分泌壳寡糖。
提取则是通过酸提法、碱提法或酶法将壳寡糖从发酵液中提取出来，并通过冻干处理得到冻干粉末。
壳寡糖生产工艺的不断改进和创新，将进一步提高壳寡糖的生产效率和纯度，为其在各个领域的应用开辟更广阔的发展空间。
壳聚糖和壳寡糖的制备及应用
壳聚糖和壳寡糖的制备及应用
常海洋;赵安琪;王婧;圣志存
【期刊名称】《现代农业科技》
【年(卷),期】2024()5
【摘要】壳聚糖和壳寡糖因其生物相容性、降解性、无毒和多种生物活性等特性,在食品、化妆品、复合材料、废水处理和生物医药等众多领域广泛应用。
本文介绍了壳聚糖和壳寡糖的研究历史、制备原料,分析了壳聚糖的制备工艺(包括脱蛋白工艺、脱盐工艺、脱色工艺、脱乙酰工艺)和应用领域以及壳寡糖的制备方法(包括化学降解法、物理降解法、酶降解法)和应用领域,以期为壳聚糖和壳寡糖及其衍生产品的研究利用提供一定的参考。
【总页数】4页(P161-164)
【作者】常海洋;赵安琪;王婧;圣志存
【作者单位】江苏农牧科技职业学院;泰州学院
【正文语种】中文
【中图分类】O636.1
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1.蝇蛆壳聚糖的制备工艺与壳寡糖的初步制备
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蝇蛆壳聚糖季铵盐的制备及红外光谱分析
蝇蛆壳聚糖季铵盐的制备及红外光谱分析李小波;刘文彬;褚夫江;金小宝【期刊名称】《广东化工》【年(卷),期】2017(044)003【摘要】甲壳素是资源昆虫蝇蛆的生物活性成分之一,但是,甲壳素不溶于水及常见溶剂,限制了其应用.本研究从蝇蛆壳中提取了甲壳素和壳聚糖,并进一步制备为水溶性羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖(HACC).FTIR光谱分析结果表明:蝇蛆甲壳素和壳聚糖均具有三个典型的酰胺谱带特征吸收峰,分别为1653 cm-1和1621 cm-1(Ⅰ)、1552 cm-1(Ⅱ)、1309 cm-1(Ⅲ)(甲壳素);以及1642 cm-1(Ⅰ)、1589 cm-1(Ⅱ)和1321 cm-1(Ⅲ)(壳聚糖);在HACC中,壳聚糖位于1589 cm-1(酰胺Ⅱ谱带)处的吸收峰消失,但在3021 cm-1和1480 cm-1处出现了两个新的吸收蜂.蝇蛆水溶性壳聚糖季铵盐的制备有助于拓展其深层次开发利用.【总页数】2页(P15-16)【作者】李小波;刘文彬;褚夫江;金小宝【作者单位】广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室,广东广州510006;广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室,广东广州510006;广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室,广东广州510006;广东药科大学基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】TQ041【相关文献】1.蝇蛆壳聚糖的制备工艺与壳寡糖的初步制备 [J], 竺锡武;罗赫荣;钟自勉2.水溶性蝇蛆甲壳素的提取及红外光谱分析 [J], 李小波;褚夫江;沈娟;金小宝3.水溶性蝇蛆甲壳素的提取及红外光谱分析 [J], 李小波;褚夫江;沈娟;金小宝;4.聚乙烯醇/壳聚糖季铵盐薄膜的制备及其对黄骨鱼保鲜效果研究 [J], 翟纬坤; 王源升; 王轩5.壳聚糖季铵盐的制备及抑菌性能研究 [J], 包艳玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
壳寡糖工艺流程
壳寡糖工艺流程
《壳寡糖工艺流程》
壳寡糖是一种生物大分子多糖，在医药和健康食品行业有着广泛的用途。
壳寡糖的生产工艺流程是一个复杂的过程，需要经过多个步骤来完成。
首先，原料的选择非常重要。
通常使用虾壳、螃蟹壳、贝类壳等富含壳聚糖的生物废弃物作为原料。
这些原料在经过清洗、破碎、脱蛋白等处理之后，可以获得富含壳寡糖的壳聚糖提取物。
接下来是酶解过程。
将壳聚糖提取物与适量的水混合后，加入适量的酶解剂，通过恒温酶解的方式进行酶解反应，将壳寡糖分解为较短链的寡糖分子。
随后是精制过程。
将酶解后的混合液进行过滤、沉淀、浓缩和冷冻干燥等步骤，得到精制的壳寡糖产品。
这个过程可以去除杂质，提高产物纯度。
最后是包装和储存。
将精制的壳寡糖产品进行包装，并进行质量检测后，储存在阴凉干燥的地方，以延长其保存期限。
这就是壳寡糖的生产工艺流程。
通过这些步骤，我们可以得到高纯度、高活性的壳寡糖产品，为医药和健康食品行业提供优质原料。
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蝇蛆壳聚糖的制备工艺与壳寡糖的初步制备
竺锡武,罗赫荣,钟自勉
(湖南省植物保护研究所,湖南长沙 410125)
摘 要:选用家蝇幼虫皮及蛹壳作原料,采用酸碱法通过选择一定的反应条件及工艺路线,制得脱乙酰度95%以上的壳聚糖。
利用蝇蛆壳聚糖采用复合酶降解法初步制得可溶于水的壳寡糖。
关键词:蝇蛆壳聚糖;制备工艺;壳寡糖
中图分类号:Q966 文献标识码:B 文章编号:1006-060X(2004)02-0041-02
家蝇通常称为“苍蝇”,它在长期恶劣环境的生态压力下,通过产生抗菌物质如溶菌酶、抗菌肽、凝集素、甲壳质等产生了特有的抗逆能力。
因此,研究利用家蝇的各种成分,开发各种产品为人类及其环境服务,成为资源昆虫研究的重要方向之一。
蝇蛆壳聚糖的制备已有部分学者进行了研究,认为蝇蛆壳聚糖在低重金属离子含量、低灰分含量方面优于虾蟹壳聚糖。
有关蝇蛆壳寡糖的研究尚未见报道。
笔者在壳聚糖制备工艺与壳寡糖的初步制备方面进行了研究,现将研究结果予以报道。
1 材料与方法
111 材 料
蝇蛆皮与蛹壳,自制;氢氧化钠(化学纯),湖南化学试剂总厂;过氧化氢(化学纯),湖南试剂厂;浓盐酸(化学纯),信阳市化学试剂厂;乙酸(分析纯),湖南师范大学试剂厂;乳酸(化学纯),广东汕头新宁化工厂;甲基橙,自制自配;复合酶(由蛋白酶、脂肪酶、糖酶等组成),自配。
水浴锅(H.H.S21.4型),山东医疗器械厂;JJ-1增力搅拌器,江苏金坛市医疗
收稿日期:2004-02-04
基金项目:湖南省财政厅支持项目
作者简介:竺锡武(1964-),男,湖南华容县人,副研究员,主要从事无公害农业及昆虫学研究。
器械厂;真空泵(SHZ-D循环水式),河南巩义市英峪豫华仪器厂。
112 壳聚糖制备方法
采用酸碱法制备壳聚糖。
113 壳寡糖制备方法
采用酶降解法制备壳寡糖。
114 壳聚糖脱乙酰度测定方法
准确称取015000g的壳聚糖样品置于250ml 烧怀中,加入25100ml、0110284m ol/L HCl标准溶液,高温下溶解1h后,加入2滴甲基橙指示剂,用01091415m ol/L NaOH溶液滴定盐酸。
重复测定3次。
有关计算式如下:
理论氨基含量=16/161×100%=9194% (1)
实际氨基含量=(N1V12N2V2)/G(100-W)×
16×100% (2)脱乙酰度(D.D)=NH2%/9194%×100%(3)
式(2)中N1为HCl的摩尔浓度,m ol/L;V1为HCl的用量,ml;N2为NaOH的摩尔浓度,m ol/L;V2为NaOH的用量,ml;W为样品中水分的含量,%;G 为样品的质量,g。
115 蝇蛆壳聚糖灰分测定
(1)将瓷坩埚用盐酸(1∶4)溶液煮沸10min,放入500～600℃马福炉中灼烧015h,待炉温降到200℃以下时,取出坩埚,置于干燥器中,冷却015 h,称重,准确到01001g。
时除草,摘除下部老黄病叶,发现病株立即拔除、深埋或烧毁,保持田园清洁。
313 搞好化学防治
田间发现病株,即全面喷洒14%络氨酮水剂300倍液或77%可杀得可湿性粉剂500倍液或72%农用硫酸链霉素4000倍液,每隔5～7d喷酒一次,连续喷施,直到病情得到控制为止。
若结合灌根,每株灌药液0125kg,连续2～3次,效果更好。
参考文献:
[1] 王春林1植物检疫性有害生物图鉴[M]1北京:农业出版社,
20011
[2] 吕佩珂,李明远,吴钜文,等1中国蔬菜病虫原色图谱[M]1北
京:农业出版社,19981
湖南农业科学 2004,(2):41～42 Hunan Agricultural Sciences
(2)精确称取样品1～2g置于坩埚内,在300℃下灼烧2h,使其完全炭化,再将马福炉温度升至600℃灼烧2h,使全部变成白灰。
关闭电源,待冷却到200℃时,取出置于干燥器中冷却015h后称重,再置马福炉中灼烧1h。
如此反复,直至前后重复不超过012mg为止。
按下式计算灰分含量:灰分=(M2-M3)/(M1-M3)×100%
式中M1为坩埚加样品的质量,g;M2为坩埚加灰分的质量,g;M3为灼烧至恒重时的坩埚质量,g。
116 蝇蛆壳聚糖水分含量测定
(1)将称量瓶在100℃烘箱内干燥1h,取出后放于干燥器中冷却015h,用分析天平准确称重。
(2)在称量瓶中放入2g样品,准确到010001g。
(3)放置恒温干燥箱中,在105℃下烘2h,反复烘至恒重为止。
按下式计算水分含量:
水分=(M12M2)/(M3-M4)×100%
式中M1为样品干燥前质量,g;M2为样品干燥后质量,g;M3为称量瓶加样品质量,g;M4为称量瓶质量,g。
2 结果与分析
211 蝇蛆甲壳素的制备
取610g鲜蛆皮加入到250ml三颈烧瓶中,先加入200ml1%～3%的NaOH,于94～96℃水浴锅中加热8h后,过滤并用热水多次浸泡洗涤,于50℃下干燥;然后再加入100ml30%的HCl,于38～40℃水浴锅中加热4h后,过滤并用蒸馏水多次浸泡洗涤,于50℃以下干燥;之后加入50ml5%～10%的NaOH于96～98℃水浴锅中加热5h后,过滤并用热水多次浸泡洗涤,于50℃以下干燥;最后加入115%～10%的脱色剂,于90℃水溶锅中加热115h 后过滤,并用热水多次浸泡洗涤,于50℃以下干燥,得到白色壳状素0185g,得率约为14%。
212 蝇蛆壳聚糖的制备
将上述甲壳素0185g浸泡于100g45%～55%的NaOH溶液中,在98～99℃水浴锅中持续搅拌反应8h,然后加入100g新配制的40%～55%的NaOH,在98～99℃水浴锅中持续搅拌反应8～16h,至产物在1%～2%的乙酸中能完全溶解。
然后过滤,水洗至中性。
真空干燥后得白色壳聚糖016g,收率约70%。
经测定,产物灰分含量为19%,水分含量为9123%,脱乙酰度为9516%。
213 壳寡糖的初步制备
取蝇蛆壳聚糖2g,溶于100ml1%的乙酸中,调节pH值至515～610,加入复合酶014g,在50～55℃下反应9h,再在100℃下煮沸10min,过滤,然后通过乙醇沉淀,冷冻干燥得110g。
滤液再用丙酮沉淀,冷冻干燥得0145g。
两产物分别以5%的浓度加入到蒸馏水中,均能溶于水,表明其分子量明显小于壳聚糖,为壳寡糖。
3 小 结
通过本研究,可得出以下几点:(1)由家蝇可制得较高质量的壳聚糖,灰分含量低。
(2)蝇蛆壳聚糖通过复合酶降解法可制备壳寡糖。
(3)甲壳素不溶于水、酸、碱,经甲壳素脱乙酰得到的壳聚糖溶于部分稀酸,经壳聚糖降解制得的壳寡糖溶于水,溶解性逐步增强。
壳寡糖具有提高机体免疫力、改善肠道微生物区系、抗癌、提高植物抗病虫能力等功能,其功能与应用范围超过壳聚糖。
(4)通过复合酶降解壳聚糖来制备壳寡糖是可行的。
欲高产率制得高活性壳寡糖6～8糖,以及研制农用壳寡糖防病制剂,尚需进一步深入研究。
参考文献:
[1] 蒋挺大1甲壳素[M]1北京:化学工业出版社,19991
[2] 郑连英,姚 恕,刘茉娥1壳聚糖的质量分析和测定[J]1精细
化工,1993,10(1):161
[3] 李 蕾,刘小明,钟永聪1线性滴定法同时测定壳聚糖的脱乙
酰度及氨基的表观离解常数[J]1分析实验室,1996,15(2):211 [4] 李 治,刘晓非,杨冬芝,等1壳聚糖降解研究进展[J]1化工进
展,2000,(6):20-231
[5] 夏文水1酶法改性壳聚糖的研究进展[J]1无锡轻工大学学报,
2001,20(5):550-5541
[6] 苏 畅,夏文水,姚惠源1木瓜蛋白酶降解壳聚糖[J]1无锡轻
工大学学报,2002,21(2):112-1151
[7] 章玉苹,陈 霞,吴尤利1壳聚糖———新型生防农药的应用研
究进展[J]1世界农药,2003,25(4):39-421
[8] E inoski M,Fuiko Y,H iroyuki K.Preparation and crystallization of D
-glucosamine olig occharides with DP6-8[J].Carbohydr Res,1993, 239:227-237.
[9] Murakami.The efficient production high DP chitoolig osaccharides by
enzymic hydrolysis of chitosan[J].Adv Chitin Chitosan,1991,(2):59 -67.
24 湖南农业科学 第2期。