食醋中大肠菌群标准与检验方法探讨
浅谈食品中大肠菌群和菌落总数检测的几个操作规范要点
浅谈食品中大肠菌群和菌落总数检测的几个操作规范要点浅谈食品中大肠菌群和菌落总数检测的几个操作规范要点摘要：本文介绍了食品中大肠菌群和菌落总数的检验中容易不规范操作的几个方面，并针对性地提出解决办法。
关键词：食品大肠菌群菌落总数检测规范前言目前，食品大肠菌群与菌落总数的检测标准主要是采用GB/T4789.3-2003食品卫生微生物学检验大肠菌群测定[1]、GB4789.3-2010食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数[2]、GB4789.2-2010食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定[3]这三个国家标准。
但是目前国家标准只给出了实验的基本操作步骤及计算方法，而在实际的检验工作中，还存在一些影响操作可靠性的因素并未给出说明。
本文结合笔者自身检验经验，对大肠菌群与菌落总数的检测过程中易发生不规范操作的部分做出强调，以期对每个检验环节精确控制，以获得稳定可信的检验结果。
一、大肠菌群测定的一些要点：大肠菌群的发酵试验中要用到小倒管，主要用来观察气泡的出现。
但是实验中经常会出现还未接种样液，小倒管内就出现气泡，这样会影响结果的判断。
现列举出出现这种现象的几种原因及对策：1.小倒管的口太小。
在灭菌过程中，高压会将培养基压进小倒管，使空气排出，但如果小倒管开口过小，空气不容易出来，培养基也不容易进去，容易导致气泡残留在管内影响观察，若是这种情况，可以改用开口较大的V形管代替。
2.小倒管里面残留有水珠。
因为小倒管开口很小，清洗后内部的水不容易干燥完全。
这样会导致灭菌过程中培养基无法进去，使用时要注意放置小倒管前要将其内部的水甩干。
3.硅胶塞将试管口塞得过紧。
硅胶塞将试管口塞得过紧，会使在灭菌过程中试管内外的压力不一致，灭菌锅升温升压时，锅内压力大于试管内压力，压力不够将培养基完全压进小倒管，于是就会残留气泡。
塞子过紧还易导致灭菌锅降温时，锅内压力小于试管内压力，容易使试管内培养基喷出，培养基报废。
GB食品大肠菌群检测解决方案
GB食品大肠菌群检测解决方案随着人们生活水平的提高，对食品安全的要求也越来越高。
在食品安全领域中，大肠杆菌是一种重要的致病菌，主要通过食品污染而进入人体引起疾病。
因此，对食品中的大肠菌群进行检测是非常必要的，以保障食品安全和公共健康。
一、检测方法选择1.常规培养法常规培养法是目前最常用的检测方法之一，通过在含有特定培养基的培养皿上培养待检样品，然后观察培养皿上的细菌数量和形态来检测食品中的大肠菌群。
这种方法简单易行，成本低廉，但是需要较长时间才能得出结果。
2.分子生物学方法分子生物学方法是一种高效准确的检测方法，可以通过PCR、实时荧光定量PCR等技术检测食品中的大肠菌群。
这种方法具有高度的特异性和敏感性，可以在短时间内得出结果，适用于大批量的样品检测。
二、样品采集在进行大肠菌群检测时，样品的采集是非常重要的一步。
样品的采集要求严格，保证样品的完整性和真实性。
一般来说，食品样品可以通过简单的采集方式进行，如直接取样。
而对于复杂的食品样品，如含有大量微生物的乳制品和肉制品，可以通过分离、稀释等方法进行预处理，以得到可靠的检测结果。
三、结果解读在得到检测结果后，需要对结果进行科学的解读。
大肠菌群的检测结果一般以CFU/g为单位，表示每克样品中的细菌数量。
根据食品安全标准或法规的规定，判定样品是否符合安全要求。
四、数据分析对于大批量的检测数据，需要进行数据分析和统计，以便对食品生产环节中存在的问题进行识别和改进。
通过数据分析，可以找出导致大肠菌群超标的原因，采取相应的措施进行食品安全管理。
综上所述，GB食品大肠菌群检测解决方案是一种全面而系统的检测方案，可以有效地对食品中的大肠菌群进行检测和控制，保障食品安全和公共健康。
在未来的食品安全工作中，GB食品大肠菌群检测解决方案将发挥越来越重要的作用。
腌制食品中细菌总数和大肠杆菌的测定
摘要食品富含有机物以及其他营养物质，在生产环节和储藏中倒有可能被微生物污染，而导致食品腐败变质，人食用后会危害人体健康，此前在国内有过多例食物中毒的报道，从此人们对食品安全有了更多的关注。
检测食品中的细菌总数是判别食品被污染程度的重要途径，同时也是食品卫生检验的一个重要指标。
它是将待检食品经过一定处理，在一定的条件下培养，记录下培养基上长出的细菌菌落数，由待检食品的稀释倍数来计算出1g（ml）中的细菌个数。
为了精确检验结果还应该配合大肠杆菌群的检测和其他的项目检测。
大肠杆菌是一种革兰氏阴性无芽孢杆菌，常存在于人畜的消化道内，可随粪便排出体外，因此它通常作为评价食品卫生质量的重要指标之一。
大肠杆菌可强烈利用分解乳糖，代谢过程中产气产酸，常用方法是将待检食品稀释成不同的浓度梯度，在发酵罐中发酵，记录下产气管的数量，再参照大肠杆菌MPN检索表查出100g（ml）待检食品大肠杆菌的最可能数。
同时，可以进行革兰氏染色和鉴别培养基培养，以排除其他细菌的干扰。
关键词：大肠杆菌、腌制食品、菌落总数、MPN表AbstractFoods rich in organic matter and other nutrients , in production and storage of microbial contamination may be down , which led to food spoilage , it will harm human health after human consumption,in the country had too many cases of food poisoning which have been reported , from then on, people paid more and more concerns to food safety.Total bacterial detection in food is not only an important way to determine the level of contamination of food , but also an important indicator of food hygiene inspection . It is to be tested through a food processing under certain culture conditions , the number of bacterial colonies grown on the lower recording medium by dilution of the food to be tested to calculate the number of 1g (ml) of bacteria.For accurate test results should fit testing and other items to detect coliform . E. coli is a gram-negative bacillus no , the often found in the digestive tract of humans and animals , can be excreted from the body, so it is usually evaluated as an important indicator of the quality of food hygiene one . E. coli can utilize a strong decomposition of lactose metabolism of the acid gas , commonly used food to be tested is diluted to a concentration gradient of different fermentation in a fermentor , the number of the recording capacity of the trachea , the retrieval table MPN E. Referring again to check the of 100g (ml) of the most probable number of E. coli in the food to be tested . At the same time , we can carry on Gram stain and culture medium discrimination to eliminate interference from other bacteria.Key:E. coli, preserved foods, the total number of colonies, MPN retrieval table1、前言俗话说“民以食为天”，由此可见食物对于我们人类的生活和生存的重要性。
食品微生物大肠菌群检测方法
食品微生物大肠菌群检测方法
食品安全一直备受关注，其中微生物污染是引起食品安全问题的重要因素之一。
大肠菌群是一类重要的微生物指标，其检测可以有效评估食品的卫生状况。
因此，建立一套可靠、快速、准确的大肠菌群检测方法对于食品安全至关重要。
首先，样品的准备是大肠菌群检测的关键步骤。
不同类型的食品样品需要采用不同的处理方法，以确保样品中的大肠菌群能够被有效检测出来。
例如，对于液体食品，可以采用过滤的方法去除杂质，而对于固体食品，则需要进行均质处理以保证样品的代表性。
其次，大肠菌群的检测方法主要包括传统培养法和分子生物学方法。
传统培养法是最常用的方法之一，通过在含有特定营养物质的培养基上培养样品中的微生物，并通过观察菌落形态和生化反应来鉴定大肠菌群。
然而，传统培养法存在着耗时长、操作复杂、检测灵敏度低等缺点。
相比之下，分子生物学方法，如PCR法和荧光原位杂交法，具有检测快速、灵敏度高、特异性强的优点，但其设备和技术要求较高。
除了上述方法外，近年来，基于生物传感技术的大肠菌群检测
方法也得到了广泛关注。
这些方法利用生物传感器对目标微生物进
行特异性识别和灵敏检测，具有操作简便、检测快速的特点，逐渐
成为大肠菌群检测的新趋势。
总的来说，食品微生物大肠菌群的检测方法多种多样，各有优
缺点。
在实际应用中，应根据样品类型、检测要求和实验条件等因
素选择合适的检测方法，并结合多种方法进行综合分析，以确保检
测结果的准确性和可靠性。
希望随着科技的不断进步，能够研发出
更加快速、准确、便捷的大肠菌群检测方法，为食品安全保驾护航。
调味品中大肠菌群测定的几点注意事项
维普资讯
第 ５期
分析检 测 调味 品 中大肠 茵群 测定的几 点注意事 项
情 况也 不一 致 。
６ ５
在 上述平 板上 ， 取可疑 大肠菌群 ： Ｂ
文章 编号 ：ｏ ０ ９ ３ ２ ０ ） ５ ０ ６ －０ １ ０ —９ ７ （０ ７ ０ － ０ ４ ３
Ａ ｓｒ ｃ ： ａ ｔ ｓ ｅ ｍｅ ｔ ｔ ｎ ｉ ｕ ｅ ｏ ｖ ｒ ｙ ｔ ｅ ｅ ｉｔ ｎ ｅ ｏ ｏ ｉ ｒ ｂ ｃ ｅ ｉ ｎ ｎ ｔｏ ａ ｂ ｔａ ｔ Ｌ ｃｏ ｅ ｆ ｒ ｎ ａ ｉ ｓ ｓ ｄ ｔ ｅ ｉ ｈ ｘ ｓ ｅ ｃ ｆｃ ｌ ｏ ｍ ａ ｔ ｒａ ｉ ａ ｉ ｎ ｌ ｏ ｆ ｆ ｃ ｉ ｒ ． Ｔｈ ｐ ｌ ａ ｌ ｐ ｅ ｅ ｏ ｈ ｓ ｍｅ ｈ ｄ ｉ ｂ ｏ ｄ ａ ｄ ｔ ｅ ａ ｃ ｒ ｃ ｓ ｈ ｇ ． Ｂｕ ｏ ｅ ｒ ｅｉ ｔ ａ ｅａ ｐｉ ｂ ｅｓ ｈ ｒ ｆｔ ｉ ｃ ｔ ｏ ｓ ｒ ａ ｎ ｈ ｃ ｕ ａ ｙ ｉ ｉ ｈ ｔｓ ｍ
调 味品 中大 肠菌群检验 的方法标 准依据食 品
卫生微 生 物 学 检 验 大 肠 菌群 测 定 （ Ｂ Ｔ４ ８ ． Ｇ ／ ７９３
－
认 为该群细 菌主要 包 括肠 杆 菌科 的 四个 属 ， 即埃
希 氏菌属 、 枸橼 酸杆菌 属、 克雷伯 氏菌属 和肠杆 菌
属 。大肠 菌群来源 于人 和温 血 动物 的肠 道 ， 评 是
方 面对实验原 理 和现象 进行分析 。
１ 大肠 菌群 及 其检 验 意 义
大肠 菌群系指 一群能发酵 乳糖 、 产酸 产气 、 需
氧和兼性厌 氧的革 兰氏阴性无 芽胞杆菌 。大肠菌
食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测实验报告
试验九食品中细菌菌落总数及大肠菌群的检测［试验目的］1、了解我国规定的食品质量与细菌菌落总数和大肠菌群数量的重要关系。
2、把握食品细中细菌菌落总数及大肠菌群的检测方法。
［试验原理］菌落总数依据稀释平板技术法检测每mL/g检样在牛肉音蛋白陈琼脂培育基上，经373 24h 培育后，所生长的细菌菌落的总数。
它所反映的是检样中的活菌数，细菌数越多，说明污染程度越大，这项指标可作为判定待测样品被污染的程度。
大肠菌群数是在lOOmL（g）食品中（或1000 mL水中）大肠菌群最近似值。
它是指肠杆菌科中的4个属，即埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、克雷伯氏菌属和肠杆菌属。
这一菌群致病力不强，具有共同特点：好氧和兼性厌氧、革兰氏染色阴性反应、无芽抱杆菌、37℃培育24-48h能发酵乳糖产酸产气。
大肠菌群在人畜肠道内含最最多，可随排泄物进入水源或污染食品。
国际公认以大肠菌群的存在作为粪便污染指标。
这项指标可判定待测样品有无被粪便污染及污染的程度。
［试验材料］1、检样牛乳（饮料、酱油）2、培育基一般养分琼脂平板、单料乳糖胆盐发酵培育基、乳糖发酵培育基、EMB平板3、仪器和其他物品恒温箱、水浴锅、无菌培育皿、无菌吸管、无菌盐水瓶（内装225 mL无菌生理盐水）、无菌试管（内装9 mL无菌生理盐水）、灭菌剪刀、镜子等［试验内容］1、细菌菌落总数的测定（1）制备样品及样品稀释取待测样品（牛乳、酱油）一瓶，用点燃的酒精棉球烧灼瓶口，若是塑料瓶则用75%的酒精棉球擦拭灭菌。
在无菌条件下取样25 mL放入内装225 mL生理盐水的瓶中，充分混匀，制成10-1的稀释液。
用1 mL无菌吸管吸取10-1稀释液1mL,沿管壁缓缓注入装有9mL无菌生理盐水的试管中（留意，吸管尖端不要触及管内稀释液），振物试管，混合匀称，制成10-2的稀释液。
另取1mL无菌吸管，按上述操作方法做成10-3稀释液。
每次稀释，换用一支无菌吸管，共做10-1、10-2、10-3三个稀释度，分别含样品0.1mL, 0.01mL, 0.001 mLo（2）培育将上面已做好的样品稀释液充分振荡，然后分别吸取该稀释度的稀释液1mL至标有相应稀释度的无菌培育皿中，每个稀释度做2个培育皿。
食品中大肠菌群的检验
食品中大肠菌群的检验简介大肠菌群是指含有大肠菌属（Escherichia coli）和奇异变形杆菌属（Coliform bacteria）的细菌群体。
它们存在于人和动物的肠道中，也可以存在于环境中，如土壤、水体和食品中。
食品中的大肠菌群是导致食品中毒的主要病原体之一。
因此，对食品中大肠菌群的检验非常重要，以确保食品的卫生和安全。
本文将介绍食品中大肠菌群的检验方法和操作流程。
方法和步骤1. 样品采集样品采集是食品中大肠菌群检验的第一步。
根据需要检验的食品种类，选择合适的采样方法。
常见的食品样品包括水果、蔬菜、肉类和乳制品等。
采集样品时，应使用干净无菌的容器，并避免污染。
确保样品的代表性，避免极端状况下的取样，如选择已烂的水果或有明显变质的食品。
2. 样品处理样品处理是为了提取样品中的菌群以进行后续的检测。
处理过程应在无菌条件下进行，以避免外部的污染。
常见的样品处理方法包括：•加入盐水：将样品加入含有氯化钠的缓冲液中，以便菌群的释放。
•搅拌和均质：使用搅拌器或者均质器将样品搅拌均匀，以确保菌群的均匀分布。
•过滤：通过滤膜将样品过滤，以分离固体物质和悬浮物。
3. 培养基选择选择适当的培养基是进行大肠菌群检验的关键。
常用的培养基包括马铃薯葡萄糖琼脂（Plate Count Agar，PCA）、大肠杆菌选择琼脂（MacConkey Agar）、经典蓝琼脂（Eosin Methylene Blue Agar）等。
不同的培养基适用于不同目的的检验。
PCA适用于总菌群计数，MacConkey Agar适用于大肠菌群的选择性检测，Eosin Methylene Blue Agar适用于大肠杆菌的计数和鉴别。
4. 培养和孵育将样品处理后的培养基平板进行孵育。
孵育的时间和温度根据菌群的生长特性而定。
一般情况下，孵育时间为24小时，温度为37摄氏度。
培养过程中，需要注意避免交叉污染。
每个样品应使用独立的培养基平板进行孵育，且标记清楚以区分不同样品。
醋样品中卫生细菌测定的方法改进
取１ ０份样醋各 １ｍ ， ０ Ｌ 用灭菌饱和氢氧化钠溶液、０ ３ ％灭菌 氢氧化钠溶液、０ ３ ％灭菌碳 酸钠溶液调节 Ｐ Ｈ到中性 ， 消耗各调
节 液的量 见 表 １
作介 者 简
： ：
生 验男生 究） 主 技 ，要 事 检 与 夸 测 一， 任 师主 从 卫 卫 烹． 副 ：监 研
健 康 天地
２１ ０ ０年 第 ４卷 第 ２ 期
综 述
醋样 品中卫生细 菌测定 的方法 改进
邓钦 光
【 摘要】 目的： 探索食醋新的测定方法， 。方法： 用饱和氢氧化钠代替碳酸钠 中和食醋中的酸高 Ｐ Ｈ值到中性 ， 以下近 国标进行
操作， 结果 ： 用饱和氢氧化钠溶液代替碳酸钠溶液调节 Ｐ 样 品处理 过程 中无 Ｃ ２产 生， Ｈ， Ｏ 操作方便 与国标法测定结果无差异。结
表 ２ 不 同处 理方 法 细菌 菌 落总 数 （ｆ） ｃ ｕ
１３ １ 样 品处理 ．．
国标 法 ： 样 品 １ｍ 取 ０ Ｌ用 ２ ％ 一 一 ０ ０ ３ ％
（ 实验 为 ３ ％ ） 本 ０ 灭菌 碳酸 钠 溶 液调 节 Ｐ 到 中性 ”待 检 Ｈ
各称
丽
新法： 取样 品 １ｍ ０ Ｌ用 ２灭 菌 饱 和 氢 氧 化 钠 溶 液 或 ３ ％ 灭 ０ 菌氢氧化钠溶液调节 Ｐ Ｈ到中性”待检 １３２ 将 样 品处 理液 换 算成 相 当 于原 液 的量 进行 接种 ， ．． 以
１ ３ 操作 方 法 ．
国标法 ： １产生大量气泡 ， 易溢出， 且不便 于观察 ； ２气泡数 分 钟 不能 消失 、 露 时 间长 、 污染 、 品不 容 易取 准 确 ； 酸 暴 易 样 ３碳 钠 用量 较 多 ， 过 多添 加 液 ， 品 失 去代 表性 。 增加 样 新 法 １ 气泡 ， 于 观察 ； 节 时 间短 ， 无 易 ２调 污染 机会 少 ； 、 ３ 吸 取 量准 确 ； 入 正理 液量 少 ， 品处 理液 更 能代 表原 液 。 ４加 样 ２４ 不 同样 品 处理 细 菌茵 落 总数 （ｆ） ． ｃ 比较 ｕ 取 １ 份样 醋各 １ｍ ０ ０ Ｌ按 ＧＶ ４８ ． ２０ 测定 ， 果见表 ２ ｔＴ７９２ ２— ０３ 结
食醋中醋酸对食品指标微生物的作用研究
食醋中醋酸对食品指标微生物的作用研究作者：马志春来源：《食品安全导刊》2015年第06期本实验主要研究食醋中醋酸浓度对其微生物指标的影响，即不同浓度的食醋分别对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果。
通过本实验的研究得出结论，食醋中醋酸浓度越大，其对微生物的抑制作用就越强。
当食醋的总酸含量为3.5%（实际测得为3.8%）时，100%的食醋在5min内能将大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌完全杀死，而50%的食醋则需在20min内才能对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌起到抑制作用，而25%的食醋则需更久的时间才能抑制上述3种微生物的生长。
1 仪器设备与材料1.1 仪器设备恒温培养箱、生物显微镜、蒸汽灭菌器、生物洁净工作台、电热鼓风干燥箱、电热保温箱。
1.2 材料1.2.1 原料食醋（米醋、无色），购于本地超市。
1.2.2 菌种大肠杆菌（Escherichia coli）、沙门氏菌（Salmonella）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus），培养条件见表1。
1.2.3 培养基伊红美兰琼脂、营养琼脂、营养肉汤、蛋白胨水溶液。
以上培养基121℃，15min灭菌。
1.2.4 试剂生理盐水（0.85%NaCl溶液）；75%乙醇；蒸馏水等。
1.2.5 其它材料电炉、平底锅、吸管（1mL、10mL）、1000mL量筒、锥形瓶（1000mL、500mL）、50mL量杯、酒精灯、pH试纸、温度计、试管架、平皿、烧杯、吸耳球等。
2 实验方法2.1 大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌在食醋中存活时间的观察及不同浓度的食醋对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑制作用2.1.1 培养基和培养液的制备用天平称取一定量的培养基放入容器中，加热将其充分溶解。
2.1.2 分装将溶解后的伊红美兰琼脂培养基、营养琼脂培养基分装到三角烧瓶内，同时将营养肉汤培养液分装到大试管中（每管10mL），蛋白胨水溶液分装到小试管中（每管2.0mL），食醋分装到中试管中（每管4.5mL）。
食品中大肠菌群的测定实验报告
一、实验目的1. 了解大肠菌群在食品卫生检验中的意义。
2. 学习并掌握大肠菌群的检验原理和方法。
3. 通过实验判别食品的卫生质量。
二、实验原理大肠菌群是一群能在37℃经24小时发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
该菌群主要来源于人畜粪便，因此常被用作粪便污染指标，以评价食品的卫生质量。
大肠菌群的存在反映了食品是否被粪便污染，同时也间接指出食品中是否有肠道致病菌污染的可能性。
食品中大肠菌群数的测定采用最近似数法。
该方法通过将样品多次稀释至无菌，然后接种于培养基中，经培养后根据结果查阅MPN检索表，得到原样品中微生物的估计数量。
三、实验材料1. 样品：乳、肉、禽蛋制品、饮料、糕点、发酵调味品或其他食品。
2. 菌种：大肠埃希氏菌产气肠杆菌。
3. 培养基及试剂：单料乳糖胆盐发酵管、双料乳糖胆盐发酵管、乳糖胆盐发酵管、伊红美蓝琼脂、革兰氏染色液、蛋白陈水、靛基质试剂、麦康凯(MA)。
4. 其他设备和材料：高压湿热灭菌器、显微镜、载玻片、灭菌培养皿、灭菌吸管、试管、三角瓶、接种环、恒温培养箱等。
四、实验步骤1. 样品预处理：取适量样品，加入适量无菌生理盐水，进行均质处理。
2. 稀释：将均质后的样品进行系列稀释，稀释度可根据样品污染程度进行调整。
3. 接种：将稀释后的样品接种于乳糖胆盐发酵管中，每支试管接种3-5ml。
4. 培养：将接种后的发酵管置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
5. 检查：观察发酵管内是否有气泡产生，如有气泡产生，则说明样品中含有大肠菌群。
6. 计数：根据发酵管内气泡产生的情况，计算出样品中大肠菌群的近似数量。
7. 验证：对疑似大肠菌群进行革兰氏染色和生化试验，以确定其是否为大肠菌群。
五、实验结果与分析1. 样品中大肠菌群数量：根据实验结果，样品中大肠菌群数量为每克样品含有1000个左右。
2. 验证结果：对疑似大肠菌群进行革兰氏染色和生化试验，结果显示为革兰氏阴性、无芽孢、呈杆状，符合大肠菌群的特性。
食品微生物大肠菌群检测方法
食品微生物大肠菌群检测方法食品微生物大肠菌群检测是食品安全监管中的重要环节，大肠菌群是一类常见的致病微生物，其存在可能会对食品质量和消费者健康造成严重威胁。
因此，建立一套有效的检测方法对于保障食品安全至关重要。
本文将介绍几种常用的食品微生物大肠菌群检测方法，希望能为相关从业人员提供一些参考。
首先，传统的培养法是一种常见的大肠菌群检测方法。
该方法通过将食品样品在适宜的培养基上培养，利用大肠菌群特有的形态、生理生化特性进行鉴定和计数。
尽管该方法操作简单，成本较低，但是需要较长的培养周期，且存在假阳性结果的可能性。
因此，在实际应用中需要结合其他方法进行验证。
其次，分子生物学方法在食品微生物大肠菌群检测中也得到了广泛应用。
PCR技术是其中的代表，通过特异性引物扩增靶标基因，再通过凝胶电泳或实时荧光定量PCR技术进行检测和定量。
这种方法具有高度的特异性和灵敏度，能够快速准确地检测出样品中的大肠菌群，但是需要较为复杂的实验操作和昂贵的设备。
另外，近年来，免疫学方法也逐渐在食品微生物大肠菌群检测中得到了应用。
免疫学方法利用抗原与抗体的特异性结合进行检测，具有高度的特异性和灵敏度，且操作简便，适用于大批量样品的检测。
然而，该方法的缺点是需要制备特异性抗体，成本较高，且可能受到样品复杂性的影响。
最后，近年来，基于生物传感技术的大肠菌群检测方法也逐渐受到关注。
生物传感技术利用生物识别元件与传感器相结合，能够实现对微生物的高灵敏、高特异检测。
这种方法具有快速、准确、实时监测的特点，但是需要特定的生物传感器和信号检测设备，成本较高。
综上所述，食品微生物大肠菌群检测方法多种多样，各有优缺点，具体选择应根据实际需求和条件进行综合考虑。
在今后的食品安全监管中，希望能够不断完善和发展新的检测技术，以更好地保障食品安全，保障消费者的健康。
食品微生物大肠菌群检测方法
食品微生物大肠菌群检测方法食品微生物大肠菌群检测是食品安全领域中的一项重要工作，其结果直接关系到食品的卫生安全。
在食品加工、储存和运输过程中，微生物大肠菌群的存在和数量是一个重要的指标，因此需要建立准确、可靠的检测方法来保障食品安全。
本文将介绍几种常用的食品微生物大肠菌群检测方法，以供参考。
一、传统培养法。
传统培养法是一种常用的微生物检测方法，其原理是将食品样品在适当的培养基上进行培养，然后通过计数菌落形成的数量来确定大肠菌群的存在和数量。
这种方法简单易行，成本低廉，但需要较长的培养周期，且存在一定的误差。
因此，在实际应用中，需要结合其他方法进行验证。
二、分子生物学方法。
分子生物学方法是近年来发展起来的一种食品微生物检测方法，其原理是利用PCR、实时荧光定量PCR等技术，通过检测食品样品中的微生物DNA或RNA来确定大肠菌群的存在和数量。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，能够准确地检测出微生物的存在和数量，但需要较为复杂的实验操作和设备。
三、免疫学方法。
免疫学方法是利用抗原与抗体之间的特异性反应来检测微生物的存在和数量。
常用的免疫学方法包括酶联免疫吸附法（ELISA）和免疫荧光法等。
这种方法具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，但需要较为复杂的实验操作和设备，且对样品的预处理要求较高。
综上所述，食品微生物大肠菌群检测方法有多种，各有优缺点，需要根据实际情况选择合适的方法进行检测。
在实际应用中，可以结合多种方法进行验证，以确保检测结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的方法能够为食品安全领域的从业人员提供一定的参考价值。
食品微生物大肠菌群检测方法
食品微生物大肠菌群检测方法食品微生物大肠菌群检测是食品安全监管的重要环节，大肠菌群作为一类潜在致病菌，其检测对于评估食品的卫生质量至关重要。
本文将介绍几种常见的食品微生物大肠菌群检测方法，希望能够为食品安全监管工作提供参考。
首先，传统的培养法是一种常见的大肠菌群检测方法。
该方法通过将食品样品接种在含有特定营养成分的培养基上，利用大肠菌群的特定生长条件，观察并计数培养基上产生的典型菌落。
然而，传统培养法存在着操作复杂、耗时长、无法检测非可培养菌等问题，因此逐渐被更为快速、准确的方法所替代。
其次，分子生物学方法在大肠菌群检测中得到了广泛应用。
其中，聚合酶链式反应（PCR）技术是一种常用的分子生物学方法，通过特异性引物扩增目标DNA片段，再通过凝胶电泳或实时荧光定量PCR技术进行定量分析。
PCR技术具有高灵敏度、高特异性和快速的优点，能够在较短时间内完成大肠菌群的检测，但其需要较为复杂的实验操作和昂贵的设备。
此外，近年来，基于生物传感技术的大肠菌群检测方法也得到了迅速发展。
生物传感技术利用生物元件对靶分子的高度选择性识别，将生物识别转换为可测量的信号输出。
例如，免疫传感技术利用抗体对大肠菌群的特异性识别，通过免疫反应产生信号，实现对大肠菌群的快速检测。
生物传感技术具有高灵敏度、快速、便携等优点，逐渐成为食品微生物检测领域的研究热点。
除了上述方法外，近年来，基于纳米材料的大肠菌群检测方法也备受关注。
纳米材料具有较大的比表面积和特殊的光电性能，能够提高生物传感器的灵敏度和稳定性。
例如，利用金纳米颗粒标记抗体，通过光谱法或电化学法实现对大肠菌群的高灵敏检测。
纳米材料的应用为大肠菌群检测提供了新的思路和方法。
综上所述，食品微生物大肠菌群检测方法多种多样，各具特点。
在实际应用中，可以根据检测的目的、样品的性质和实验条件等因素选择合适的检测方法。
随着科学技术的不断进步，相信食品微生物大肠菌群检测方法将会更加快速、准确、简便，为食品安全监管工作提供更为有力的支持。
食醋中大肠菌群标准与检验方法探讨
- - - - - < 9 + - - + + 180
- - - + - 9 + - + - + 190
- - + - - 9 + - + + - 200
- - + - + 9 + + - - - 230
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性 (0 - 0 - 0) 或只 01 1 mL 管为阳性 (0 - 1 0) 阳性 ( 0 - 0 - 1) 或只 1mL 管为三种情况 下 ,食醋的大肠菌群值 ≤3M PN/ 100mL ,才 符合卫生标准 。而后两者的 95 %可信限分 别为 0. 5～9M PN/ 100mL 和 0. 5～13M PN/ 100mL ,这也就是说在这种情况下 ,还存在一 定的超出 3M PN/ 100mL 的概率 。所以从某 种意义上讲 ,只有当 3 管皆为阴性时 ,其检测 结果才真正符合卫生标准 。笔者认为该方法
0. 1mL三个取样量与不同阳性组合的 M PN 指数和 95 %可信限的关系[4] 。首先从最低 检出限来看 ,9 管法的第 100mL 的 M PN 指 数为 3 ,15 管法的每 100mL 的 M PN 指数为 2 ;其次 ,从 95 %可信限来看 ,15 管法明显优 于 9 管法 ;第三 ,从符合卫生标准的阳性组合
第三从符合卫生标准的阳性组合几率看15管法有上述三点说明15管法在检测食醋中大肠菌群时明显优于pn检索表接种水样量ml接种水样量ml10010pn指数10010pn指数19222328909091951801902002302809209501800234096002380023800每个稀释度的管数95可信限95可信限阳性组合pn指数较低的较高的pn指数较低的较高的111113此外范玉珍用五管法发酵测定水中总大肠菌群个稀释度每个稀释度只采取pn计数方法见表比较相差10作简单但结果的准确度和精确度尚需进一步验证111115152021233636结论食醋作为一种特殊的食品其具有很强的酸性一般对微生物呼吸的负面影响至少有两方面
实验二 食品中大肠菌群的检验
37℃ 培养24h
证实产 气（阳 性）结 果与否
乳糖蛋白胨培养 液
实验报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数，查
MPN检索表，报告每100mL（或g）大肠菌 群的MPN。 结果表示方法：120MPN/100mL（g） 附表：大肠菌群最大可能数（MPN）检索表
注：
①本表采用3个稀释度：1ML(g)，0.1mL(g）和
0.01 mL (g)。每稀释度3管。
②表内所列检样量如改用10mL(g)，1mL(g）和
0.1mL(g）时，表内数字应相应降低10倍；如改
用0.1ML(g), 0.01ML(g）和0.001mL(g）时，则
表内数字应相应增加10倍，其余可类推。
表 10毫升、1毫升、0.1毫升检样各接种3管的大肠杆菌最近似数检索表
pH7.4±0.1
实验步骤及操作要点：
1）样品的稀释：如第一法 2） 平板计数 选取2个～3个适宜的连续稀释度, 每个稀释度接种2个 无菌平皿，每皿1 mL。同时取1 mL生理盐水加入无菌平 皿作空白对照。 3）及时将15 mL～20 mL冷至46 ℃的结晶紫中性红胆盐琼 脂（VRBA）约倾注于每个平皿中。小心旋转平皿，将培 养基与样液充分混匀，待琼脂凝固后，再加3 mL～4 mLVRBA覆盖平板表层。翻转平板，置于36 ℃±1 ℃培 养18 h～24 h。
实验二 食品中大肠菌群的检验
一、实验目的
1. 了解大肠菌群在食品检验中的意义。
2. 掌握检验的程序和步骤。 3. 通过MPN检索表的检索得出实验结果。
二、基本原理
大肠菌群系指一群在32～37℃下24hr内，能发酵 乳糖产酸、产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性 无芽孢杆菌。该菌群主要来源于人畜粪便，故以 此作为粪便污染指标，来评价食品卫生质量，具 有广泛的卫生学意义。 食品中大肠杆菌群数是以每100mL（g）检样内大 肠菌群最近似数（MPN）来表示，据此含义，所有 食品卫生标准中所规定的大肠菌群数均应为100mL （g）食品内允许含有大肠菌群的实际数值，为报 告标准。
食品大肠菌群测定两种方法实验研究_蔺爱君
食品大肠菌群测定两种方法实验研究蔺爱君1,郝海鸥2,刘霞2[摘要] 目的:为大肠菌群的快速测定作有益的尝试。
方法:通过对大肠菌群发酵法与纸片法在五类食品检样中进行对照实验。
结果:当检样大肠菌群小于30M P N/100ml(g)时,结果比较准确可靠。
结论:糕点与纯净水类检样两法符合率较高。
[关键词] 大肠菌群;发酵法;纸片法;实验对照[中图分类号]R155.5 [文献标识码]B [文章编号]1003-8507(2002)03-0411-02 在高节奏的现代生活中,人们对健康的要求越来越高,期望自己所在的生活、学习、娱乐环境以及食品饮水等方面安全性提高,这就需要提供一些简便、易行、准确的快速检测方法,对自身经常食用的食品、饮水等方面的污染状况进行及时、有效的检测,以了解残毒、细菌等污染状况。
我们从基层工作条件出发,对食品、饮水的细菌污染指标——大肠菌群进行了发酵法与纸片法对照实验,以期对大肠菌群检测实验的快速测定,作出一些有益的尝试,现将此总结出来以供同行们参考。
大肠杆菌群发酵法作为经典的国标检测方法已沿用多年,其准确性、权威性无可质疑,但随着生活、工作节奏的加快日益暴露其弱点,如实验步骤繁琐、耗时费事,检测手段显得落后,对某些急需提供检验结果的样品,往往不能作出及时准确的判断,与有效的卫生监督管理不相适应。
大肠菌群快速检测纸片法近几年在餐具检测上已经广泛使用,对餐具污染状况提供了快速监测、快速判断,但国家目前尚未有大肠菌群检测纸片的质量标准,尤其在食品、水质方面的使用未有详尽的报道,我们将实验数据提供出来,和同道们一起研究讨论,作为预防医学领域的快速检测技术推广,对适应快节奏、现代化的工作生活,很有实用价值。
1 材料与方法1.1 试验菌种 艾希氏大肠杆菌由河南省卫生防疫站提供。
1.2 将培养18h的菌株用生理盐水稀释后比浊,分别取含量为100个/ml,10个/ml,1个/ml三个稀释度各1m l加入试验纸片上(南京三爱公司生产的大肠菌群快速检测纸片)平行二份。
食醋对肠道杆菌抑菌作用的观察
食醋对肠道杆菌抑菌作用的观察
葛新;刘丽英;刘海玲;吴胜吉
【期刊名称】《实用预防医学》
【年(卷),期】2005(12)1
【摘要】目的对白醋、米醋、老陈醋进行体外抑菌试验 ,测定其最低抑菌浓度(MIC)。
方法采用肉汤稀释法检测食醋对大肠埃希菌、鼠伤寒沙门菌、福氏志贺菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌的MIC。
结果测得白醋对上述五种细菌的MIC分别为 4.7%、4.7%、5 .3 %、4.7%、5 .0 % ;米醋相应MIC为 3 .6%、3 .0 %、3 .3 %、3 .3 %、3 .0 % ;老陈醋相应MIC为 1.7%、2 .0 %、1.3 %、2 .0 %、1.7%。
结论三种食醋对肠道杆菌均有明显抑制作用。
【总页数】2页(P181-182)
【关键词】肠道杆菌;抑菌;致病菌;食醋
【作者】葛新;刘丽英;刘海玲;吴胜吉
【作者单位】武警医学院微生物学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R378
【相关文献】
1.淡水鱼肠道中抗大肠杆菌O157∶H7乳酸菌的筛选及抑菌作用研究 [J], 缪璐欢;杜静芳;马欢欢;吕欣然;李莹;白凤翎;仪淑敏;励建荣
2.肠道致病菌在食醋中存活时间的观察 [J], 张淑伟;白传记;孔德荣
3.单味中药对猪致病性肠道大肠杆菌抑菌作用观察 [J], 徐玉刚
4.猪肠道大肠杆菌噬菌体对产肠毒素大肠杆菌的抑菌作用 [J], 周贝;林焱;朱伟云
5.凝结芽胞杆菌TBC 169株对肠道致病菌的抑菌作用 [J], 崔云龙;闫述翠;万阜昌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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此外 ,谢嵘 、范玉珍用五管法发酵测定水 中总大肠菌群[5] ,该法取 5 个稀释度 ,每个稀 释度只采取 1 个平行样品进行检验 ,其 M PN 计数方法见表 4 。表 4 中每 L 水中的总大肠
菌群值与表 2 、表 3 比较相差 10 倍 。该法操 作简单 ,但结果的准确度和精确度尚需进一 步验证 。
第 4 期 中 国 调 味 品
2005 年 4 月
CHINA COND IMENT
No . 4 Ap r. 2005
文章编号 :1000 - 9973 (2005) 04 - 0049 - 04
食醋中大肠菌群标准与检验方法探讨
白凤翎
(渤海大学 辽宁省食品质量安全与功能性食品重点实验室 ,辽宁 锦州 121000)
BA I Feng2ling
( The Key L ab of Food Qualit y and Safety & Functio nal Food of Liao ning Province , Bo hai U niver sit y ,J inzho u 121000 ,China)
Abstract : The natio nal micro biological hygienic criteria for vinegar currently in effect were re2 vived. The relatio nship bet ween hygienic criteria and evaluatio n met hod for vinegar was mainly e2 laborated and also t he revisio n measure were p ropo sed to t he vinegar hygienic micro biological cri2 teria in t his paper . Key words :vinegar ;coliform ; hygienic criteria ;identificatio n met hod
- + + - - 22 + + - + - 950
+ - - - - 23 + + - + + 1800
- + + + - 28 + + + - - 2340
- - - - + 90 + + + - + 9600
+ - - - + 90 + + + + - 23800
+ - - + - 91 + + + + + > 23800
几率看 ,15 管法有 4 种而 9 管法只有 3 种 。 上述三点说明 15 管法在检测食醋中大肠菌
群时明显优于 9 管法 。
表 4 五管法大肠菌群最可能数 (M PN) 检索表
接种水样量 (mL)
每 L 接种水样量 (mL)
每L
100 10 1 011 0. 01 MPN 指数 100 10 1 0. 1 0. 01 MPN 指数
收稿日期 :2004 - 11 - 25 作者简介 :白凤翎 (1964 - ) ,男 ,辽宁绥中人 ,渤海大学生物与食品科学学院副院长 ,副教授 ,主要从事食品微生物学 ,食
品安全方面的教学与科研工作 。
50 中 国 调 味 品
总第 314 期
标之一 ,现已被国内外广泛使用于食品卫生 工作中 。大肠菌群名称并非细菌学分类命
1 食醋的卫生微生物国家标准[1]
食醋的卫生微生物国家标准主要包括菌
落总数 、大肠菌群和致病菌 ,具体指标限定标 准见表 1 。这三项微生物指标 ,菌落总数作 为食品被细菌污染程度即清洁状态的标志 , 同时用来预测食品耐存放程度或期限 。食醋 中致病 菌 是 指 以 沙 门 氏 菌 为 代 表 的 肠 致 病 菌 ,该指标规定不得检出 。大肠菌群是指一 群能够在 37 ℃条件下能够发酵乳糖产酸产 气 ,需氧或兼性厌氧 ,不形成芽孢的革兰氏阴 性杆菌 。 大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指
0. 1mL三个取样量与不同阳性组合的 M PN 指数和 95 %可信限的关系[4] 。首先从最低 检出限来看 ,9 管法的第 100mL 的 M PN 指 数为 3 ,15 管法的每 100mL 的 M PN 指数为 2 ;其次 ,从 95 %可信限来看 ,15 管法明显优 于 9 管法 ;第三 ,从符合卫生标准的阳性组合
摘要 :对现行食醋的国家卫生标准 ———大肠菌群的检验方法进行探讨 ,重点分析大肠菌群作为食醋 卫生检验标准的检出限与检验方法之间的相互关系 ,并提出了食醋中大肠菌群检验方法的修改建 议。 关键词 :食醋 :大肠菌群 :卫生标准 :检验方法 中图分类码 : TS2641 2 文献标识码 :B
Discussion on national vinegar criteria and identification method of coliform bacteria
性 (0 - 0 - 0) 或只 01 1 mL 管为阳性 (0 - 1 0) 阳性 ( 0 - 0 - 1) 或只 1mL 管为三种情况 下 ,食醋的大肠菌群值 ≤3M PN/ 100mL ,才 符合卫生标准 。而后两者的 95 %可信限分 别为 0. 5～9M PN/ 100mL 和 0. 5～13M PN/ 100mL ,这也就是说在这种情况下 ,还存在一 定的超出 3M PN/ 100mL 的概率 。所以从某 种意义上讲 ,只有当 3 管皆为阴性时 ,其检测 结果才真正符合卫生标准 。笔者认为该方法
我国具有两千多年的食醋历史 。食醋多 以豆 、谷类为原料发酵而成 ,成品中除含有醋 酸外 ,还含有丰富的氨基酸 、乳酸 、维生素 、糖 类 、甘油等成分 ,其香味浓郁 ,酸而不涩 ,是人 们日常生活必备的调味品 。但由于原料来 源 、加工过程 、运输等环节的微生物污染 ,造 成食醋的腐败变质 ,国家规定了食醋的卫生 微生物学限量标准 。
在检测食醋时存在检验方法与卫生标准不相
匹配的问题 。
表 3 用不同管数进行稀释时 (10mL 、1mL 、 0. 1mL) 不同阳性组合的 M PN 指数和 95 %可信限
每个稀释度的管数
阳性组合
3
5
每 100mL 的 95 %可信限 每 100mL 的 95 %可信限
MPN 指数 较低的 较高的 MPN 指数 较低的 较高的
0- 0- 0 <3
<2
0- 0- 1 3
<0. 5 9
2
<0. 5 7
0- 1- 0 3
< 0. 5 13 2
<0. 5 7
0- 2- 0 - - -
4
< 0. 5 11
1- 0- 0 4
< 0. 5 20 21 4
< 0. 5 11
1- 1- 0 7
1 23 4
- - - - - < 9 + - - + + 180
- - - + - 9 + - + - + 190
- - + - - 9 + - + + - 200
- - + - + 9 + + - - - 230
- + - - - 9. 5 + - + + + 280
- + - + - 19 + + - - + 920
食醋作为一种特殊的食品 ,由于其本身 含有醋酸和乳酸 ,因此在大肠菌群检验时首 先用 25 %的碳酸钠校正 p H 至中性 ,然后再 进行检验 ,否则会影响检验的结果 。有资料 表明食醋大肠菌群检验 ,检测步骤与检出率 之间存在着非常重要的联系[1] 。平析分离与 初发酵阳性之比值为 34. 7 % ,确证试验与初
MPN 95 %可信限
1mL (g) ×3 0. 1mL (g) ×3 0. 01mL (g) ×3100mL (g) 下限 上限
0
0
0
< 30
0
0
1
30 < 5 90
0
0
2
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0
0
3
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0
1
1
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0
1
2
90
0
1
3
120
该表的后注说明表内所列检样量如改用
10mL (g) 、1mL ( g) 和 01 1mL ( g) 时 ,表内数 字相 应 降 低 10 倍 : 如 改 用 0. 1mL ( g ) 、
发酵的阳性比值为 32. 2 % ,确证试验与平板 分离阳性比值为 92. 7 %。初发酵假阳性出
现的比例占 65. 3 % ,确证试验的假阳性为 7.
3 % ,说明食醋中存在能够发酵乳糖的产酸细 菌 ,可能是醋酸菌或乳酸菌 。
由于该法在初发酵时采用 9 支乳糖发酵
管 ,因此称之为 9 管法 。其中 M PN 即大肠
第 4 期 检验技术 食醋中大肠菌群标准与检验方法探讨
51
才能获得有检验意义的检验结果 。在进行食
醋大肠菌群检验时 ,接种量为 10mL 的必须 用双料乳糖胆盐发酵管 ,否则会因为采样量 的增加 而 引 起 培 养 基 的 稀 释 影 响 初 发 酵 效
果 ,而其余两管则采用单料 。 从表 2 中还可以得出只有当三管都为阴
0. 01mL (g) 和 0. 001mL ( g) ,则表内数字应 相应增加 10 倍 ,其余可类推 。