纳豆提取物和纳豆菌培养液对仔猪肠道菌体外抑菌试验
14种中药乙醇提取物对大肠杆菌的体外抑菌试验
MH 肉汤培养液院MH 肉汤粉末 7.5g袁 加入装 有 250mL 蒸馏水的锥形瓶中加热煮沸溶解并搅 拌袁121℃高温灭菌 20min 后备用遥 冷却后 4℃冷 藏备用遥 1.2.2 菌液的制备 取冷冻保存的塑料冻存管袁立即放置在 38~40 ℃ 水浴中快速复苏并适当摇动遥 直到内部结冰完全 溶解为止袁一般约 50~100s袁开启塑料冻存管袁吸 取菌液移植于麦康凯琼脂培养基上袁37 ℃恒温培 养 18~24h遥 挑取该麦康凯琼脂培养基上的单个菌
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落接种至另一麦康凯琼脂培养基上进行菌种复
圆园17 年第 5 期（总第 198 期）
上袁室温干燥 5min 后袁用无菌打孔器打孔袁以无
苏遥 采用平板计数法进行细菌计数袁勾取平板上 菌落 1~2 个袁 置于 MH 肉汤中袁37 ℃恒温振荡培
在人和家畜的生活环境中存在着各种细菌袁 而长期使用化学药物会导致药物毒副作用尧细菌
试 耐药性尧 药物残留所致的畜产品安全等问题袁且 验 抗生素渐渐不能满足畜产品无公害化生产的要 研 求遥 而中草药是我国特有的中医药理论和实践的 究 产物袁价格低廉袁药源广泛袁具有广泛的发展潜
力袁它主要是通过调整机体功能状态来实现抗菌 作用[1]遥 大部分中草药具有毒副作用小尧无残留尧 无耐药性的特点[2]袁中药作为替代化学药物解决 药残和抗药性的重要途径袁越来越受到重视遥 为 了寻求抗菌作用强的药物袁我们对十四种中药进 行了体外抑菌试验遥 1 材料与方法 1.1 试验材料
纳豆菌的提取和纳豆的制作
3.在大豆被蒸熟前,在浅盘中铺好锡箔纸，用筷子等 尖细物在锡箔上打多个气孔，灭菌备用。搅拌时 要用的橡胶手套也要用开水灭菌。
4.大豆蒸熟后,不开蒸锅的盖子，直接倾去锅内的水。 将蒸锅的大豆无菌转移到灭菌盆或罐内，立即盖 盖，以免杂菌污染。
实验日程安排
• 第一周：配置牛肉膏蛋白胨培养基，酪蛋白培养基各250ml;100ml无 菌水；包好12个培养皿，6个试管；高压蒸汽灭菌
• 第二周：制备纳豆的稀释液10-2、10-3、10-4，利用涂布平板法对菌进 行培养
• 第三周：对培养出的细菌镜检，将枯草芽孢杆菌进行筛选，接种到酪 蛋白平板上进行筛选
纳豆菌的分离提取步骤
• 菌株分离：取上述品种的纳豆若干粒，放入装有 25mL 无菌水和十余颗玻璃珠的锥形瓶中，室温 下浸提。振荡多次，获得菌悬液，以十倍稀释法 稀释至10-2，10-3，10-4，涂布于牛肉膏蛋白胨 培养基。放入恒温培养箱中，30℃培养24h。
• 镜检：确定培养出的微生物的形态特点。
实验原理
食品纳豆中含有的纳豆菌，主要指枯草芽 孢杆菌（Bacillus natto），在通过其发酵 大豆的过程中，通过枯草芽孢杆菌对蛋白 质和糖类特别的直接利用功能，在枯草芽 孢杆菌的生长过程中，又利用大豆本身的 营养成分，分泌和合成了很多种酶类、维 生素、氨基酸及其它只有纳豆特有的营养 素和生理活性物质，使得发酵后的大豆中 更富营养，称之为纳豆。
5. 在已灭菌的杯中用10ml开水溶解盐（约0.1%）、糖（约 0.2%）和0.01%纳豆菌，如果觉得体积太小，不易均匀喷洒于 大豆中，也可用20—30ml的水，注意水的多少会影响纳豆的粘 滞性和嚼感，将混合液喷洒于大豆中搅拌均匀。 6. 把接种好的大豆均匀地平铺于灭好菌的锡箔纸上，厚约2— 3cm，不宜太厚。将锡箔纸折过来（或用另一种锡箔纸）铺盖 于豆层上面。然后在上面再铺接种好发酵剂的大豆，厚约23cm，上面也盖上一层纱。注意：如果发酵中勇气不好，做出 的纳豆会以苦，如果勇气太大，纳豆表面会过干，不利于充分 发酵。发酵环境的湿度要高。 7. 37—42摄氏度培养20—24h。也可以在30摄氏度以上的自 然环境中发酵，时间适当延长。当发酵完时，纳豆基本上做成 了，揭掉锡箔纸或纱时，会看到豆子表面部分发灰折色，室内 漂满纳豆的芳香。稍有氨味是正常的，但氨味过于强烈，则有 可能有杂菌生长了。
5种酵母菌的体外抑菌实验
王旗 王祎丹 耿旭浩 河北农业大学5种酵母菌的体外抑菌实验Ｈ计， 梅特勒－托利多仪器 （上海） 有限公司。
指示平板法（１）指示平板的制备试验菌株酵母菌制备：将５种酵母菌接种于ＹＰＤ培养基中进行活化及传代培养，并利用分光亮度计测定吸亮度以测其菌液量，使其菌液量达到１０６ＣＦＵ／ｍ Ｌ。
（２）指示菌液的制备将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌 分别接种于ＬＢ肉汤中进行活化及传代培养，并利用分光亮度计测定其吸光值使其菌液量达到１０６ＣＦＵ／ｍ Ｌ。
牛津杯法测定结果与分析酵母菌抑菌结果分析 注：＋＋＋，抑菌圈直径（ｄ）＞２０ｍｍ，表示极其敏感；＋＋，２０ｍｍ＞ｄ≥１５ｍｍ，表示高度敏感；＋，１５ｍｍ＞ｄ≥１０ｍｍ，表示中度敏感；－，ｄ＜１０ｍｍ，表示抗药。
从表结果可以看出，胶红酵母、葡萄有孢汉逊酵母对大肠杆菌具有抑菌能力，且葡萄有孢汉逊酵母对大肠杆菌抑菌能力最强，胶红酵母对大肠杆菌抑菌能力相对较弱，另外三种酵母无明显抑菌性能；胶红酵母、葡萄有孢汉逊酵母对金黄色葡萄球菌具有抑菌能力，且葡萄有孢汉逊酵母对金黄色葡萄球菌抑菌能力强于胶红酵母，克鲁斯假丝酵母Ｍ５－１３对金黄色葡萄球菌抑菌能力相对较弱，另外两种酵母无明显抑菌性能。
本实验所选取的５种酵母菌通过体外抑菌实验表明：隐球酵母ＡＰ－２０、毕赤克鲁维酵母ＢＰ－１８对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌无明显抑制作用，而葡萄有孢汉逊酵母、胶红酵母、克鲁斯假丝酵母Ｍ５－１３对大肠杆菌及金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用。
验室或临床实践研究表明，酵母菌对肠道细菌如大肠杆菌、沙门氏菌等引起的肠道感染、腹泻等疾病有保护预防性作用。
酵母菌代谢后产物对致病菌的拮抗、竞争排斥作用是产生上述功能的主要因素。
酵母菌拮抗作用产生的原因是多方面的： （１）酵母菌产酸，如乙酸、丙酸、乳酸等，酸对有害菌起生长抑制作用。
（２）酵母菌产抗生素或细菌素类物质，对有害菌有杀菌作用。
本试验从上述观点出发，用牛津杯法对５株酵母菌在体外的抑制菌能力及抑菌作用物质进行研究，为下一步动物实验打下基础。
纳豆的保健功效及应用前景
2021年第46卷第1期粮食加工69纳豆的保健功效及应用前景**基金项目：黑龙江省农星总局(HKKYZD 190703)；黑龙江省教育厅项目(2016-KYYWF-0171)；黑龙江八一农星大学学成、 51进人才科研启动计划(XDB2015-30)收積日期:2020-08-18作者简介：聂冰秀(2000-),女，在读本科，专业为食品科学与工程。
*通讯作者：曹荣*(1980-)，男，副教授，存士，硕士生导师，研究方向为食品科学。
聂冰秀，顾悦，张承泰，季瑞雪，任洁萍，曹荣安*(黑龙江八一农垦大学食品学院，黑龙江大庆163319)摘要：纳豆是豆类等经枯草杆菌发酵制成的，含有蛋白质、脂肪、碾水化合物、维生素及矿物质等多种营养成 分，同时含有多种酶类、多糖、不饱和脂肪酸等多种功效因子，具有溶解血栓、抗癌症、抗菌消毒等多种保健功效。
近 些年对于纳豆的研究应用越发广泛，对纳豆的保健功效及开发应用情况进行总结，希望对纳豆发展提供一定参考。
关键词：纳豆；保健功效；应用前景中图分类号:TS 214.2 文献标志码：B 纳豆是以豆类为主要原料经枯草杆菌发酵而制 成的一种具有特殊气味的豆制品，纳豆起源于中国， 在日本作为主要保健食品已有1 000多年历史，现 已成为日本乃至全世界的一种药食同源保健食品叫 纳豆具有诸多保健功效，对于纳豆的研究与应用也 越发广泛，本文对纳豆的研究应用进行总结，希望对 纳豆的发展提供一定参考。
1 纳豆的起源与发展纳豆源于中国，兴于日本。
据日本古书《和汉三 才图会》记载：“纳豆自秦汉以来开始制作”，由禅僧 从中国传播到日本寺庙，所以纳豆首先在寺庙得到 发展叫日本人食用纳豆有上千年历史，中国对于纳 豆的研究从20世纪90年代中后期逐步开始，近年 来纳豆因其特殊的生理功能成为研究热点，其在保 健食品行业和其他行业应用越发广泛。
2 纳豆的营养价值制作纳豆的主要原料是大豆，同时也可以加入 其它成分，例如慧米、养麦、花生、黑豆、蚕豆、豌豆、 赤小豆、鹰嘴豆及小麦胚芽等,加入的枯草杆菌能在 人体肠道中生长增殖，分泌多种酶和维生素，营养价 值极高。
纳豆菌制剂作饲料添加剂喂生长肥育猪的试验
纳豆茵制剂作饲料添加剂喂生长肥育猪的试验缪东郭照辉丁祥力缪文超湖南省微生物研究所摘要用纳豆菌制剂作饲料添加剂喂生长肥育猪,试验结果表明,日粮中加纳豆菌制荆不论加量多少,明显优于日粮中加常用添加剂。
日粮中加纳豆茵制剂效果因加量不同则效果不同。
以日粮中加中0.4 % 的纳豆菌制剂效果最好。
与日粮加0.4 % 常用添加荆效果比较,增幅达21 % ,每头每日多长150.8go每增重1奴节省饲料成本费0.32元,多获利0.89元。
其次是日粮中加0.3%的纳豆菌制剂比日粮中加0.4%常用添加剂的增幅为18%,每头每日多长101g,每增重1kg节省饲料成本费0.18元,多获利0.6元。
再次是日粮中加0.2%和0.1%纳豆菌制剂比日粮中加0.4%常用添加剂分别增长l5.2% 和9.2%,每日每头多长84g和50.8g,增重1kg节省饲料成本费0.2元和0.2元。
关键词纳豆菌制剂添加剂肥育猪中图分类号:5816.7 文献标识码:B 文章编号:102—2813(20ac5)I1一(1051—002纳豆菌是一种纳豆菌芽孢杆菌,纳豆菌通过发酵生产的纳豆菌制剂,它含有类似果聚糖的混合物(果糖和R一多聚谷氨酸)维生素B1、蛋白质、脂肪、糖质、钙、铁、菸酸、蛋白酶、维生素和尿酶等多种成分,具有促消化、抗疾病、提高免疫能力多种功能。
加之它具有风味独特的口感,日本人不但把纳豆菌作为主要调味品和保健用品,而且扩大应用到饲料上作为饲料添加剂,促进养殖业的健康发展,获得较好的经济效益。
为了开发更好的、深受养殖户欢迎的、无残留、无公害、效果好的饲料添加剂,促进养殖业的发展和农民致富,我们于2O3年6月1213至9月1213,历时92d用纳豆菌制剂在长沙郊区综合农场养猪场进行了生长肥育猪临床试验,现将试验结果整理如下。
l 材料与方法1.1 试验材料1.1.1 供试菌制湖南省微生物研究所新产品开发室提供。
1.1.2 供试日粮(猪饲料),综合农场养猪场提供,日粮配比:玉米60 % 、麦麸l8 % 、豆粕23 % 。
纳豆菌活性饲料添加剂对断奶仔猪生长性能和经济效益的影响
纳豆菌活性饲料添加剂对断奶仔猪生长性能和经济效益的影响纳豆菌生物饲料添加剂是以豆粕为原料，经过纳豆菌发酵而得到的安全、天然的生物制品，具有抗菌、调节肠道微生态环境、增强免疫力及促进动物生长等功能，可替代或部分替代饲料中的抗生素。
目前市场上销售的为数不多的微生态制剂大都是厌氧菌，不易存活和保存，而纳豆菌是需氧菌，且能产生抗逆性很强的芽孢，可抵制胃酸的作用，生存和繁殖能力极强，因此纳豆菌生物饲料添加剂不仅安全、多效，而且具有高性能的特点。
我国农业部已批准纳豆菌用于饲料添加剂，但到目前为止，市场上尚未有产业化生产的纳豆菌商品制剂。
浙江大学研究开发的纳豆菌生物饲料添加剂,含有的活菌数达到108cfu/g的农业部标准,有效去除或降低了豆粕中的抗营养因子,分子量小于1000的寡肽、维生素K2、B2、吡啶二羧酸等营养和功能成分比发酵前增加数倍。
动物喂养试验结果表明,添加2kg/t的纳豆菌生物饲料添加剂,能促进益生菌双歧杆菌和乳酸杆菌的增值, 显著促进断奶仔猪的生长。
选择28 日龄体重相近的杜大长断奶仔猪64 头分为4 组,每组2 个重复,每个重复8 头仔猪,对照组饲喂基础饲粮,不添加任何药物或制剂;0.2%和O.4%纳豆菌制剂组分别在基础饲粮中添加0-2%和0.4%纳豆菌制剂;抗生素组在基础饲粮中添加硫酸黏菌素100g 和金霉素150g/kg. 结果表明,0.2%和 0.4%纳豆菌制剂组平均日增重比对照组分别增加 19.8%和 19.1%,料重比分别降低 25.4%和 19-3%,仔猪腹泻率分别降低 4.0 和 7-2 个百分点.经济效益分析发现,0.2%,0.4%纳豆菌制剂组比对照组每头仔猪分别多收入8.2 元和6.5 元.纳豆菌即纳豆芽孢杆菌,是从日本传统食品纳豆中发现并分离出来的,是枯草芽孢杆菌的一个亚种,具有耐酸,耐碱,耐1000C 高温及耐挤压的特性,在酸性胃环境中能保持稳定性,可在动物肠道上段迅速发育转变成具有新陈代谢作用的营养型细胞,起到调节肠道微生态环境的作用.纳豆菌能使动物肠道酸化,有利于铁,钙及维生素D 等的吸收; 而且能明显提高蛋白酶,脂肪酶和淀粉酶的活性回, 可降解植物性饲料中大分子化合物,提高饲料转化率,从而增加营养,促进生长,缩短饲养周期.纳豆菌可以产生有抑菌活性的物质如一吡啶二羧酸,杆菌肽,多黏菌素,具有抑制沙门氏菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,伤寒菌,痢疾菌等致病菌的作用.纳豆菌通过发酵生产的纳豆菌生物饲料添加剂含有维生素B,蛋白质,脂肪,碳水化合物,钙,铁,蛋白酶和脲酶等多种成分,具有促消化,抗疾病,提高免疫能力等多种功能.纳豆菌发酵豆粕得到的生物饲料添加剂具有特殊的香味,维生素B 含量比发酵前增加9 倍,抑菌物质2一吡啶二羧酸比发酵前增加10 倍, 并且易于消化吸收的活性肽也显着增加同. 与目前市场上其它生物饲料添加剂相比,纳豆菌生物饲料添加剂具有很多优异性能:首先纳豆菌是需氧菌,这充分解决了工业生产上的难点,同时也更便于保存;其次,纳豆菌能产生抗逆性很强的芽孢,其生存和繁殖能力强,极易存活,这与市场上销售的生物饲料添加剂中活菌数少或根本不存在活菌又形成明显对照;此外,纳豆菌能抵制胃酸及胆盐的作用,可在肠道中保持较好的活力.因而纳豆菌生物饲料添加剂极具开发价值. 本文通过纳豆菌制剂对断奶仔猪的饲喂效果试验,分析了该生物饲料添加剂对断奶仔猪生长性能的改善作用及其对经济效益的影响.1 材料与方法1.1 试验材料供纳豆菌发酵生物饲料添加剂.1-2 试验选择28日龄体重相近的杜大长仔猪64 头分为4 组,每组2 个重复,每个重复8 头仔猪:对照组饲喂基础饲粮,不添加任何药物或制剂;0.2%和0.4%纳豆菌制剂组分别在基础饲粮中添加0.2%和0.4%纳豆菌制剂; 抗生素组在基础饲粮中添加硫酸黏菌素和金霉素150g.试验期15d,即28~42 日龄.2 结果与分析2.1 纳豆茵制剂对断奶仔猪生长性能的影响由表2 可知,0.2%与0.4%纳豆菌制剂组平均日增重比对照组分别增加19.8%和19.1%,料重比分别降低25.4%和19.3%;抗生素组仔猪日增重效果较差,但料重比仍比对照组降低24.1%. 表2 纳豆菌制剂对断奶仔猪生长性能的影响组别样本数/头始重,kg 末重/kg 日增重倌料重比2.2 纳豆菌制剂对断奶仔猪早期腹泻的影响由表3 可知,与对照组相比,纳豆菌制剂组仔猪的腹泻率都呈现下降趋势,其中0.2%纳豆菌制剂组降低4.0 个百分点,0.4%纳豆菌制剂组效果较明显,降低7.2 个百分点,效果与抗生素组相当. 表3 纳豆菌制剂对断奶仔猪早期腹泻的影响注:腹泻率,%=腹泻猪头铖验猪总头次x100%.2.3 纳豆菌制剂对经济效益的影响 28~42 日龄仔猪的饲喂试验表明,与对照组相比,0.2%和0.4%纳豆菌制剂组头均增加利润分别为8.2 元和6.5 元,经济效益显着,抗生素组头均增加利润3.6 元,见表4. 表4 各组经济效益分析注:纳豆茵按照15 元/kg 计算成本,抗生素组以每吨饲料添加50 元的抗生素计.3. 结论试验结果表明,饲粮中添加纳豆菌制剂能提高仔猪饲料转化率,降低饲料成本,提高生猪的免疫能力,从而增加经济效益,且每吨饲料中添加2kg 纳豆菌活性饲料添加剂效果较好.。
中药有效成分抽提物体外抑菌试验及对仔猪生长和肠道微生物区系的影响
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第１ 期
Байду номын сангаас
韩剑众 ， ： 等 中药有效成分抽提物体外抑菌试验及对仔猪生长和肠道微生物区系的影响
５ ７
１３３ 抑 菌试 验方 法 一 ．． 将营 养琼 脂培养 基 溶 化 后倒 人无 菌平 皿 约 ｌ ５
～
表 ２ 不同添加剂对小猪增重及饲料利用率的影响
液 ， 无菌 Ｌ棒 涂 布均 匀 ， 用 再将 浸 有 不 同 药物 浓 度 的纸片贴 在含 菌 培养基 上 ， 预扩 散 １ ｉ ， 置 ５ｍｎ后 倒 于３ ７℃培养 ２ ， ５ｈ测量 其抑 菌圈 的大小 。
组 。每组 设 ３ 重 复 ， 个 重 复 ｌ 个 每 ０头 试 验预 试 期 ７ｄ 在此 期 间 ， 行驱 虫和 防疫 注 射 ， 试验 猪 ， 进 对 打 耳号 ， 饲喂方 法 采用 群饲 ， 充分 喂料 （ 日 ４次 ） 每 ， 自由饮 水 。试 验 组 饲 料 添 加 中 草 药 抽 提 物 （ 按
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第 １ ７卷 第 １ 期 ２Ｏ ０２年 ３月
云南 农 业 大学学 报
Ｊｕ ｍ ｆ ｕｎａ Ａ ｒ ｕｔｒ ｎ ｅ ｉ ｏｎ ｌ ｎｓ ｇ ｃｌ ａ Ｕ ｉ ｒｔ ｏＹ ｌ ｉ ｕ ｌ ｖ ｓｙ
Ｖ
１ Ｎｏ Ｉ ７ Ｍａ ２ ２ ｒ ∞
平 见表 １ ．
１３ 体 外抑菌试 验 ． １３１ 菌液 制备 ．． 将 各 菌种分 别接 种 肉浸液 肉汤 ， ３ 经 ７℃ ，４ｈ ２ 培养 后 ， 无菌 生 理盐 水稀 释 ， 用 麦 氏 比浊 至 每 用 并 毫升 含菌 量 为 １０ ｉ 个 。 ． ×１＇ ｆ １３２ 药敏纸 片制 备 ．． 用 ６号新 华滤纸 经 打孔 器打 成 其直 径 为 ６ｍ ｍ
纳豆菌的抗菌作用研究
纳豆菌的抗菌作用研究
为了寻找天然生物防腐剂,对纳豆菌的抗菌作用及其发酵液的抗菌成分进行了研究.纳豆菌经培养取其上清液,用Sevage法提取蛋白,无水乙醇提取多糖,制备蛋白及多糖水溶液.采用管碟法测定培养物上清液、蛋白及多糖水溶液的抗细菌和真菌能力.研究发现培养物上清液、蛋白及多糖水溶液均具有广谱抗菌作用,对细菌、真菌皆有一定的拮抗作用,特别是对志贺氏菌、金黄*葡萄球菌、啤酒酵母具有较强的抗菌作用,其中以志贺氏菌最为敏感;同时经比较分析发现,抗菌作用的主要组分是蛋白;纳豆菌的抗菌物质可起到杀菌作用,而非抑菌作用.。
纳豆激酶粗提液的体外溶栓抑菌实验
纳豆激酶粗提液的体外溶栓抑菌实验饶颖竹;陈蓉;阮倩玲;肖桂元【期刊名称】《蛇志》【年(卷),期】2004(16)1【摘要】目的探讨纳豆激酶粗提液的体外溶栓、抑菌作用.方法以大豆为培养基,米曲霉为菌种,发酵制得成熟纳豆,用不同饱和度(NH4)2SO4对粗提液进行盐析,所得沉淀溶于生理盐水中,用纤维蛋白平板法测定其活性,确定提取纳豆激酶的分级沉淀范围.用体外溶栓法测纳豆激酶粗提液的体外溶栓作用.用平板打孔法及纸片扩散法测不同浓度纳豆抑菌物质的体外抑大肠杆菌作用.结果纳豆激酶的(NH4)2SO4分级沉淀范围选择在60%.纳豆激酶粗提液对血块的溶解作用较同样活力大小的尿激酶强.纳豆抑菌物质粗提液对大肠杆菌都具有一定的体外抑制作用,当浓度大于50%,抑菌圈直径随着浓度的增高而增大.结论纳豆激酶粗提液具有较好的体外溶栓作用,并对大肠杆菌具有一定的抑制作用.【总页数】4页(P7-10)【作者】饶颖竹;陈蓉;阮倩玲;肖桂元【作者单位】湛江市临床医学研究所,广东,湛江,524037;湛江师范学院生物系,广东,湛江,524048;湛江师范学院生物系,广东,湛江,524048;湛江市临床医学研究所,广东,湛江,524037【正文语种】中文【中图分类】R977.3【相关文献】1.纳豆激酶粗提液对小鼠实验性高脂血症的降脂作用 [J], 袁淑云2.电针后大鼠中脑腹侧部粗提液对体外培养的多巴胺能神经元生称发育… [J], 梁希彬;田德全3.菜籽饼中植酸粗提液的体外抗氧化能力初探 [J], 汤务霞;祝佳;熊治渝;刘超4.金银花醇提液对根管粪肠球菌的体外抑菌实验 [J], 王淑贤;杨旭5.纳豆激酶的分离纯化及体外溶栓特性研究 [J], 陈晓飞;周伏忠;陈国参;谢宝恩;宁萌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
纳豆提取物对两株细菌的抑制作用及其培养条件的优化
纳豆提取物对两株细菌的抑制作用及其培养条件的优化
朱宇刚;耿广青;樊美珍
【摘要】为了寻找天然的生物防腐剂和微生态制剂,对纳豆提取物的抑菌作用及其培养条件进行了研究.结果显示:最佳培养条件是接种量6%、含水量60%、物料厚
度1.92 cm、后熟时间2 d;抑制金黄色葡萄球菌RCEFD91013的碳源、添加物、无机盐和发酵时间的最佳因素水平组合为葡萄糖6%、酵母粉1%、MgSO4 0.3%、发酵时间48 h;抑制大肠杆菌RCEF091056的最佳组合为麦芽糖4%、酵母粉
1.5%、MgSO4 0.3%、发酵时间48 h.纳豆提取物质在pH6～8有较好的酸碱稳
定性,在80℃以下都有良好的热稳定性.Zn2+、Cu2+、Fe3+和Ca2+对抑菌物质
抑菌效果有较大的影响.表明纳豆提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有一定的抑
制作用,纳豆提取物的稳定性较强.
【期刊名称】《热带作物学报》
【年(卷),期】2010(031)012
【总页数】6页(P2174-2179)
【关键词】纳豆菌;抑菌作用;固体发酵;发酵条件优化
【作者】朱宇刚;耿广青;樊美珍
【作者单位】安徽农业大学微生物防治省重点实验室,安徽合肥,230036;安徽农业
大学微生物防治省重点实验室,安徽合肥,230036;安徽农业大学微生物防治省重点
实验室,安徽合肥,230036
【正文语种】中文
【中图分类】Q93。
利用纳豆菌提取抗菌物质的研究
利用纳豆菌提取抗菌物质的研究
王振强;申森
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2007(023)005
【摘要】对纳豆菌产抗菌物质的摇瓶发酵条件进行初步研究,确定纳豆菌发酵的动态变化;用酸沉醇提法从纳豆菌发酵液中提取抗菌物质;采用凝胶过滤层析对抗菌物质粗提物进行纯化,并对提取、纯化效果进行分析,表明纳豆菌能够产生多个组分的抗菌物质.
【总页数】3页(P90-92)
【作者】王振强;申森
【作者单位】黄河水利职业技术学院,河南,开封,475003;黄河水利职业技术学院,河南,开封,475003
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
【相关文献】
1.大青叶抗菌物质提取及抗菌效果研究 [J], 赵良忠;王放银;段林东
2.纳豆菌产抗菌物质培养条件的研究 [J], 纪宁;孔繁东;祖国仁;季瑛;于晓慧
3.生物体内抗菌活性物质分离提取研究 [J], 汤安英
4.老鹳草抗菌物质提取工艺及其抗菌效果研究 [J], 王放银;赵良忠;段林东
5.灰灰菜抗菌物质提取及抗菌效果研究 [J], 赵良忠;王放银;段林东
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生态养猪发酵益生菌的分离鉴定及体外抑菌试验研究
鉴定 ， 为生态养猪提供发酵菌种 。
氧条件下培养 ２ —４ 。待形成单个菌落时， ４ ８ ｈ 挑取 １ 环样品与载
玻片上的生理盐水涂抹均匀 ， 革兰 氏染色 ， 油镜观察菌体形态 、
１ 材料 与方法
１１菌 种样 品 采集 ．
收稿 日期 ：２ １ — １ ２ ． ０００— ３
排列方式 、 大小及颜色 ， 初步确定样 品中微生物 的种类 ， 分别挑 取疑似单一 菌落在选择性培养基上纯化培养 和肉汤增菌后 ， 再
杆 菌、 株短 小芽孢 杆菌 、株 乳酸杆 菌。采 用牛津杯法测 定这 ６ 菌对病原 菌的抑 菌试验 ， １ １ 株 并对分 离的 ６ 菌进行 动物安全性 株
试验。结果表明： ６ 这 株茵对大肠杆菌、 葡萄球菌均有不同程度的抑制作用， 且动物试验安全， 为生态养猪提供了发酵菌种。
关键 词 ： 生茵 ； 离鉴 定 ； 菌试验 ； 益 分 抑 动物 安全 试验
次镜 检 确定 为 纯 培养 物 ，进一 步 做 生化 鉴 定 并将 所 需 要 的 菌种
项目来源：新疆兵 团衣业发展计划， 编号：Ｏ９Ｇ ０ ２ ０Ｇ ２ 通讯作者：李岩
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斜面保存 。 ２２菌株鉴定 ．
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有重要 的作用 。 同时猪具有发达的结肠 ， 结肠内具有大量的利用 ３３苜蓿替代部分豆粕对断奶仔猪抗病 力的影响 ．
纤维的微生物， 具有类似瘤 胃“ 发酵罐” 的功能旧 肠杆菌是猪肠 。
杠板归对仔猪大肠杆菌的体外抑菌试验
养殖与饲料2020年第08期试验研究杠板归是蓼科蓼属植物，又名蛇倒退、刺犁头、刺蓼，具有抗炎、抗病毒、止咳祛痰、保肝、抗肿瘤、抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性、抑制乙酰胆碱酯酶活性等药理作用，常用于泻痢、疔疮肿痛、蛇虫咬伤等症[1-2]。
杠板归资源丰富，生长范围广泛，抗大肠杆菌、沙门菌和多杀性巴氏杆菌，将其制备成复方中药用于畜禽细菌性腹泻是很好的研究方向，复方中药可以减少抗生素残留，对于保障食品安全和公共卫生安全具有十分重要的意义。
本试验检测杠板归对多重耐药大肠杆菌抑制效果以及杠板归与抗菌药联用抑菌效果，以期为研制临床上耐药性疾病防治的新药物提供参考。
1材料与方法1.1材料1）药物：杠板归来源于广东揭阳。
头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟、头孢他啶、左氟沙星、链霉素、卡那霉素、万古霉素、大观霉素、阿米卡星、四环素、诺氟沙星、米诺环素、氧氟沙星、青霉素G 、头孢曲松、多粘菌素B 、苯唑西林、卡那霉素、红霉素、克林霉素，21种药物购自杭州滨和微生物试剂有限公司，空白纸片购自赛莫尔实验用品城。
2）菌株：大肠杆菌来源于徐州房村养猪场腹泻仔猪的小肠和粪便、无腹泻症状仔猪粪便及家兔新鲜粪便。
Ⅰ号菌株大肠杆菌毒力基因IRP2菌株来自于患有大肠杆菌病腹泻后死亡的仔猪小肠，Ⅱ号菌株大肠杆菌毒力基因IRP2菌株来自于患有大肠杆菌病腹泻后死亡的仔猪粪便，Ⅲ号菌株来自于房村无腹泻症状的仔猪粪便，Ⅳ号菌株来自于家兔新鲜粪便。
3）仪器与试剂：天津市英博生化试剂有限公司普通营养琼脂，杭州微生物试剂有限公司普通肉汤培养基，上海花潮电器有限公司UTP-313电子天平，上海亚荣生化仪器厂RE-3000旋转蒸发仪，上海一恒科技有限公司LRH 生化培养箱，日本TOMY 公司SX-500高压灭菌锅。
1.2方法1）中药提取。
杠板归水浸液制备，称取干燥杠板归10、20g 分别放入广口瓶中，用蒸馏水浸泡，收稿日期：2020-04-20基金项目：徐州市科技项目（KC19046，KC16SG284）李华坤，女，1978年生，硕士，副教授、兽医师。
饲用纳豆菌提取液抑菌效果的研究
提取 液应用 在饲 料 产 品抗 菌保 质 方 面 ， 望 用 作 有
新一 代天 然绿 色的 饲用抑 菌剂 。如 能开 发利 用纳
酶、 淀粉 酶与脂 酶 等酶类 ， 有消 除体 内致癌 物质 具
与过 多 自由基 ， 高记 忆 力 、 肝利 胆 、 氧 化及 提 护 抗 延缓 衰 老 等 生 理 功 效 ， 可 提 高 食 物 的 消 化 并 率 ； 入活 纳 豆 菌 可 以抑 制 病 原 微 生 物 增 殖 ， 摄 调 节肠 道 菌 群平 衡 ， 防痢疾 、 炎和 便 秘 ； 预 肠 粘性 物质如 一多 聚谷 氨酸 、 聚糖 等 ， 果 可覆 胃肠 道 粘 膜 表面 上 ， 有利 于 胃肠 健康 ， 并具 有缓 解酒 醉 的作 用口 ］ 。纳 豆 菌 因 其 具 有 多 种 独 特 的 生 物 学 功 效 ， 已成 为生命 科 学研究 的热 点领 域之 一 。 现 近年 来 ， 发 利用 天 然 抑 菌 剂 已成 为 饲 料 工 开
４ 养 ， 取 上 清 液 ， 用 药 敏 试 纸 法 进 行 不 同 ｐ ８ｈ培 提 采 Ｈ值 饲 用 纳 豆 菌 提 取 液 对 玉 米 霉 菌 与 酵 母 菌 的 抑 菌 实 验 。
结果发现 ， 不同 ｐ Ｈ值 的饲用纳豆菌提取液对玉米 霉菌与酵 母菌均 有一定 的抑菌作 用 ， 酸性环境有 利 于纳豆
董 小英 唐胜球 陈秀炎
（ ． 关 学 院英 东 农 业 科 学 与工 程 学 院 ， 东 韶 关 ５ ２ ０ ； ２ 浙 江 省 杭 州 诚 信 生 物 科 技 有 限 公 司 ， 江 １韶 广 １０ ０ ． 浙
杭州 ３ ００ ） １００
摘 要 ： 验 旨在 研 究 不 同 ｐ 实 Ｈ值 饲 用 纳 豆 菌 提 取 液 对 玉 米 霉 菌 和 酵母 菌 的 抑制 效果 。将 饲 用 纳 豆 菌经 ２ ４ｈ与
纳豆提取物和纳豆菌的体外抑菌作用研究
关键词 ： 蚋豆 ； 蚋豆茵； 蚋豆激酶 ； 体外抑茵 ； 纸片扩散法 ； 牛津杯法
纳豆 是 日本 的一 种传 统 大 豆发 酵 食 品 ，由 纳豆 菌
充分 研磨 。 布过 滤。 渣中加水 再浸提 ２次 ， 液合并 后 纱 残 滤 浓缩至 ６ｍ ０ Ｌ，此粗 提 液浓 度 （ 抑茵 物 质 的量）为 １０ 含 ０
ｆ ｍＩ １ 一 Ｏ １ ，并 以 此 液 为 母 液 制 取 浓 度 为 １０的 提 取 Ｏ ５
（ａｉｕ ｔ ） Ｂ ｃｌｓ ａ ｏ 在一定 温度 、湿度下 发酵 蒸煮大 豆制备而 ｌ ｎｔ 成 ， 已有 两千多年 历史 ， 距今 在民间一 直作 为药食兼 用。 纳
豆激酶 （ ａｔ ｉａｅ Ｎ 是 纳豆发 酵过 程中产生 的一种 丝 Ｎ ｔ ｋｎｓ ． Ｋ） ｏ 氨酸 蛋 白酶 。１８ ９ ７年 ， 日本 ｓ ｉ 首次发现 纳豆含有溶解 ｉ 等 ｍ 纤维 蛋 白的活性 成分 ， 并命 名为纳 豆激 酶 『 ｌ Ｊ 酶具有 溶 。此 栓等 药理作 用 ， 一种继尿 激酶 、 激酶 、 是 链 重组组 织型纤 溶 酶 原激活剂 后的新一代 溶栓剂翻。纳豆菌 的代谢物能使 肠
维普资讯
＜ 江由畜牧善 医杂志）０ ６ ２０ 年第 ６ 期
文章编号 ：０ ４ ２４ （０ ６０ － ０ ８ ０ １ ０－ ３２ ２ ０ ）６ ０ ０ － １
－ 实验研究 ・
中图分类号 ：８６ ２ 文献标识码 ： ￥１． ４ Ａ
纳豆提取物和纳豆菌的体外抑茵作 用研究
氏茵 、 葡萄球 菌 、 绿脓杆菌 、 杆菌 、 杆菌 （ 变形 产气 均为 江西
农 业大学动 科院预 防兽 医教研室保 存 ） 。
１ ． 试验方 法 ２
ｌ ｌ 纳豆 的制 备 。精 选 大 豆— — 清洗— —浸 泡—— 蒸
24种中草药提取物的药敏抑菌试验与临床应用效果初步观察
24种中草药提取物的药敏抑菌试验与临床应用效果初步观察王权;邹平;王镇江;张家玲;李学良;刘素珍
【期刊名称】《云南畜牧兽医》
【年(卷),期】1990(000)001
【摘要】目前兽用抗菌素不但价格昂贵,药品缺,且易产生耐药菌株影响疗效,故拟于中草药中寻找抗菌素药物,以求缓解西药抗菌素的供不应求问题。
1 药物与药敏试验用24种中草药提取物,对猪霍乱沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌(K
88~+)、猪丹毒杆菌、金色葡萄球菌、猪链球菌、克氏柿炎球菌、枯草杆菌8种病原微生物,分别进行药物抑菌试验,其中多敏药物为松萝酸钠、苦参碱、雪胆素、虫草菌素、草血竭浸提物与马蹄香提取物。
详见表1、2。
【总页数】2页(P19-20)
【作者】王权;邹平;王镇江;张家玲;李学良;刘素珍
【作者单位】云南省畜牧兽医研究所中兽医组;云南省畜牧兽医研究所中兽医组;云南省畜牧兽医研究所微生物组
【正文语种】中文
【中图分类】S8
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赵东明
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中药提取物的组方及其对致病性大肠杆菌的抑菌试验
中药提取物的组方及其对致病性大肠杆菌的抑菌试验作者：贺泂杰贺奋义郭慧琳来源：《国外畜牧学·猪与禽》2014年第06期摘要：通过试验，筛选出毒性低，具有止泻、退热作用的中草药黄连、黄芩、白头翁、秦皮、铁苋菜、四季青、苦参和穿心莲等。
根据其有效成分的性质，对各药有效成分进行提取。
将提取物按照一定的比例组成不同的配方，采用琼脂平板稀释法，对仔猪致病性大肠杆菌标准毒株K99和本试验室分离鉴定的O1、O2、O8、O138、O141、O78、K89进行体外抑菌试验，结果表明，配方四所含各提取物的含量最小，抑菌效果最佳。
关键词：中药提取物；组方；致病性大肠杆菌；体外抑菌中图分类号：S853 文献标识码：A 文章编号：1001-0769（2014）06-0050-02大肠杆菌（Escherichia coli，Elcoli）又称为大肠埃希菌，属革兰氏阴性杆菌，由Escherich 在1885年发现的。
大肠杆菌主要寄居在人体的大肠内，常引起严重腹泻，甚至败血症。
当它侵入人体其他一些部位时，可引起感染，如腹膜炎、胆囊炎等。
目前临床抑杀大肠杆菌仍以抗生素为主。
但近年来大肠杆菌对多种抗生素表现出耐药性，特别是产生超广谱β-内酰胺酶的大肠杆菌，其耐药率逐年有升高的趋势。
许多中草药天然具有对大肠杆菌的抑制杀灭作用，其抗菌作用日益受到重视。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 试验药材黄连、黄芩、白头翁、秦皮、四季青、铁苋菜、苦参和穿心莲，均购自兰州市医药超市。
将购买的中草药用蒸馏水洗净风干，然后用电动粉碎机将其粉碎后备用。
1.1.2 试验菌种大肠杆菌标准毒株（K99），购于中国兽药监察所。
仔猪致病性大肠杆菌（O1、O2、O8、O138、O141、O78、K89）由平凉猪场采集病料分离鉴定。
1.1.3 供试菌种培养基普通营养琼脂培养基，一般选用LB琼脂培养基。
1.1.4 主要仪器生化培养箱，不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器，手动可调试移液器，电子天平，粉碎机，单人双面净化工作台，电热恒温水浴锅，电热恒温干燥箱。
植物提取物替抗预防肠炎,确保仔猪生长性能
的紧密连接状况良好，屏障功能较 猪的日粮以及断奶后仔猪的日粮中
多种应激引发体内炎症、氧化
好。IL-8 是促炎性标记物，值的大 均添加植物提取物组合）具有最佳 应激和免疫反应，从而使得猪只生
小反映炎症水平。有炎症时，与负 的 生 长 性 能。B2 组 仔 猪 与 对 照 组 长性能不佳，影响猪场盈利。充分
变化。
使用植物提取物组合的效果已经通
众所周知，断奶至为关键，仔 1.2 母猪
过试验研究得到证明（见表 1）。
猪在断奶期间的短时间内面临着多
分娩和哺乳对于母猪来说非常 2.1 体外试验研究
种应激和挑战。
重要，在这两个关键时期，母猪炎
植物提取物对肠道完整性和
1.1 仔猪
症反应和氧化应激的风险都很高。 炎症过程的协同影响的试验。将人
262.1b
265.7b
304.4c
仔猪的母猪亦进食标准日粮，不过 从 母 猪 分 娩 前 15 d 直 到 仔 猪 断 奶 前 15 d 在 母 猪 的 日 粮 中 添 加 植 物 提 取 物 组 合（ 共 计 36 d）。A 和 B
IL 8/（pg/mL）
13.73a
609.8b
613.0b
520.9b
https:/// Specials/Articles/2020/12/Preventintestinal-inflammation-to-ensurepiglets-performance-680491E/
原文作者 ：Fabien Guillard
试验的目的是评价母猪和仔猪 日粮中添加植物提取物的效果。试 验比较了 4 组仔猪（共 624 头）断 奶后的生长性能。试验在法国进行， 分为 3 个不同批次进行。A 组是进
饲用纳豆菌提取液抑菌效果的研究
饲用纳豆菌提取液抑菌效果的研究
董小英;唐胜球;陈秀炎
【期刊名称】《辽宁农业科学》
【年(卷),期】2011(000)004
【摘要】实验旨在研究不同pH值饲用纳豆菌提取液对玉米霉菌和酵母菌的抑制效果.将饲用纳豆菌经24 h与48 h培养,提取上清液,采用药敏试纸法进行不同pH 值饲用纳豆菌提取液对玉米霉菌与酵母菌的抑菌实验.结果发现,不同pH值的饲用纳豆菌提取液对玉米霉菌与酵母菌均有一定的抑菌作用,酸性环境有利于纳豆菌提取液中活性物质发挥抗菌活性.研究揭示,饲用纳豆菌提取液发挥抑菌作用具有选择性,并与提取液pH值相关,该结果为其在生产实践中用作饲用天然抗菌剂提供科学参考.
【总页数】5页(P6-10)
【作者】董小英;唐胜球;陈秀炎
【作者单位】韶关学院英东农业科学与工程学院,广东韶关512000;韶关学院英东农业科学与工程学院,广东韶关512000;浙江省杭州诚信生物科技有限公司,浙江杭州310000
【正文语种】中文
【中图分类】S482.2+92
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