速冻水饺中金黄色葡萄球菌计数结果不确定度的评定
水饺里混进了金黄色葡萄球菌
美味水饺里的致病菌水饺是中国最传统的食品，皮薄馅多的水饺咬在嘴里，热乎乎，香喷喷。
但是，美味的速冻水饺却“出事”了。
食品质量检测部门对市面上的一些速冻水饺产品进行了卫生抽检，结果发现一部分品牌的水饺里面含有一种致病菌———金黄色葡萄球菌。
这样的食品抽检结果不由得让人大跌眼镜，水饺里为什么会出现这种名为金黄色葡萄球菌的病菌呢？速冻水饺的生产部门解释：金黄色葡萄球菌在自然界中就存在，可能是生产环节中的一些漏洞让金黄色葡萄球菌混进了水饺里面，例如生猪划破皮就可能产生这种细菌，还有包水饺的工人如果手上有伤也会产生这种金黄色葡萄球菌，然后通过工人的操作混进水饺里……听了生产厂家的解释，我们不由得倒吸一口冷气———因为生产过程的漏洞而混进水饺里的金黄色葡萄球菌，到底是一种什么菌，会有什么危害呢？认识金黄色葡萄球菌显微镜下的金黄色葡萄球菌形状呈葡萄串状，金黄色，所以被称为金黄色葡萄球菌。
这种病菌在自然界里可以说是无处不在：空气里、水里、灰尘里都能找到它们的身影。
因为金黄色葡萄球菌在自然界里的广泛存在，所以食品极容易被它污染，要想从生制食品里将金黄色葡萄球菌完全除掉，几乎不可能。
现行的食品标准都允许限量的金黄色葡萄球菌存在于生食制品里。
因为金黄色葡萄球菌容易污染食品，人类又容易通过进食受到这种细菌的危害，由这种细菌而引起的感染占第二位（首位是大肠杆菌感染）。
被金黄色葡萄球菌感染后引起的人类肠毒素疾病，主要病症是呕吐和腹泻，对这种病的救治至今是世界卫生难题。
金黄色葡萄球菌除了能引起人类的肠道疾病，还容易让人患有肺炎、心包炎，甚至还会引起败血症、脓毒症等全身感染。
所以说金黄色葡萄球菌是一种很“凶险”的致病菌。
金黄色葡萄球菌如此凶险，那么我们在进食时应该如何防备被金黄色葡萄球菌侵害呢？如何拒绝金黄色葡萄球菌的侵害我们吃水饺时，要想远离金黄色葡萄球菌对身体健康的危害，主要应该做好以下两个防护工作。
首先，不要选购非正规厂家出品的速冻水饺。
速冻食品新国标被指倒退金荀菌可限量存在
速冻食 品新 国标被指倒退 金葡菌可限量存在
对速冻食品中金黄色葡萄球菌超标的争论有了
明确 答 案 。昨 日，卫生 部发 出通 知 ，今 年 １ 月２ 日 ２ １ 起 ，新 国标将 正 式实施 ，这 意味 着 ，速 冻食 品 中 ， 金 黄色葡萄球 菌将 由不得检 出变为限量检 出 。 此 前 ，三全 、思念 、湾 仔码 头等 国 内知名速 冻 食品 品牌产 品 ，纷纷 被检 出金 黄色葡 萄球 菌超 标 ， 而有 品牌 公开 表示 ，现行 国标 ，金 黄色葡 萄球 菌是 不得检 出的 ，但 是 当时正 在征 求意 见 的新 国标 里 ， 则可限 量检 出 ，如 果按照新 国标 ，则产品合格 。
“ 标准 制定借 鉴国际相关规定 ， 也要考虑 国情 ” 但
在 《 速冻面米制品 》食品安全国家新标准 中， 金黄色葡萄球菌的限制数量由原来的 “ 不得检 出” 改为限量检出。对此 ， 三全食品相关负责人昨 日表 示， 对新国标不便做出评论。
企业 召 回的不合 格速 冻食 品 ，在 １月２ 日后按 ２ １ 新 国标可 能 又合 格 了 。有市民 质疑 ，新 国标是 否 是
标发布后已经属于合格产品 ，那前期企业召回的产 品是否会继续流向市场 ，未召回完的产品是不是就
不再继续召回了？ 三全上述负责人昨 日表示 ，依照国家规定 ，企
个过程 中，有记载的研讨会至少有７ ，参与标准 次
研讨和提 出意见的有３ ０ ０多人 ，我们 的编制说明就
福建轻纺 ２ １年 ｌ月 第ｌ期 ０１ １ ｌ
新 国标是否 被企业 “ 架”？ 绑
子 、粽子 、汤圆等速冻预包装食品。卫生部有关负
责人说 ，在 ２ １年 １月２ 日前 ，鼓励 企业按 照新 标 ０１ ２ １ 准 组织 生产 经营 。 自２ １年 １月２ 日起 ，企业 必须 ０１ ２ １
能力验证中金黄色葡萄球菌定量检测测量不确定度评定
标准与检测
食品研究与பைடு நூலகம்发
云ood Research And Development
DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2018.07.029
圆园18 年 4 月
第 39 卷第 7 期 165
能力验证中金黄色葡萄球菌定量检测 测量不确定度评定
王俊，滕钰*，周映佑 （贵州省食品药品检验所，贵州 贵阳 550004）
作者简介：王俊（1974—），男（穿青人），副主任技师，本科，主要从事食品、药品、保健食品、化妆品等微生物研究工作。 * 通信作者：滕钰（1987—），女（汉），主管技师，硕士研究生。
[4] 姚碧霞,曾琼萍,肖富玉,等.几种动物肝脏中维生素 A 的含量分 析[J].应用化工,2008,37(8): 953-954
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王俊，等：能力验证中金黄色葡萄球菌定量检测测量不确定度评定
标准与检测
surement play a leading role in the evaluation. This method is applicable to the uncertainty evaluation of Staphy原
金黄色葡萄球菌检验 标准文本(食品安全国家标准)
食品安全国家标准金黄色葡萄球菌检验1 范围本标准规定了食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的检验方法。
本标准第一法适用于食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌的定性检验；第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌的计数；第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌的计数。
2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。
2.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。
2.3 恒温水浴箱：37 ℃～65 ℃。
2.4 天平：感量0.1 g。
2.5 均质器。
2.6 振荡器。
2.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
2.8 无菌锥形瓶：容量100 mL、500 mL。
2.9 无菌培养皿：直径90 mm。
2.10 L涂布棒。
2.11 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
3 培养基和试剂3.1 7.5 %氯化钠肉汤：见附录A 中A.1。
3.2 血琼脂平板：见附录A 中A.2。
3.3 Baird-Parker 琼脂平板：见附录A 中A.3。
3.4 兔血浆纤维蛋白原（RPF）琼脂培养基：见附录A 中A.4。
3.5 脑心浸出液肉汤(BHI) ：见附录A 中A.5。
3.6 兔血浆：见附录A 中A.6。
3.7 稀释液：磷酸盐缓冲液：见附录A 中A.7。
3.8 营养琼脂小斜面：见附录A 中A.8。
3.9 革兰氏染色液：见附录A 中A.9。
3.10 无菌生理盐水：见附录A 中A.10。
第一法金黄色葡萄球菌定性检验4检验程序金黄色葡萄球菌定性检验程序见图1。
图1 金黄色葡萄球菌检验程序5 操作步骤5.1 样品的处理称取25 g 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。
能力验证中金黄色葡萄球菌定量检测测量不确定度评定
能力验证中金黄色葡萄球菌定量检测测量不确定度评定王俊;滕钰;周映佑【摘要】The uncertainty of quantitative detection of Staphylococcus aureus in food samples was analyzed and the related factors affecting the quantitative detection of Staphylococcus aureus were analyzed.According to the work instruction of capability testing and GB 4789.10-2010《The national food safety standards of food microbiological examination of Staphylococcus aureus》Staphylococcus aureus second Baird-Parker plate count was determined,analyzed and evaluate the test results in accordance with JJF 1059.1-2012《Evaluation and expression of uncertainty in Measurement》.The results showed that the expanded uncertainty was introduced by 1 025 cfu/mL when determinate Staphylococcus aureus in samples.the uncertainty caused by repeated mea-surement play a leading role in the evaluation.This method is applicable to the uncertainty evaluation of Staphy-lococcus aureus under similar detection conditions.%通过对食品能力验证样品中金黄色葡萄球菌定量检测进行不确定度评定,分析影响金黄色葡萄球菌定量检测的相关因素.根据能力验证作业指导书和GB 4789.10-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》第二法金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板计数进行测定,按照JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》对检测结果进行分析和评定.结果表明检测样品中金黄色葡萄球菌所引入的扩展不确定度为1025 CFU/mL,重复检测带来的不确定度在评定中贡献较大占主导地位.此评定方法适用于检测条件相近的实验室金黄色葡萄球菌定量检测不确定度评定.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)007【总页数】4页(P165-168)【关键词】能力验证;金黄色葡萄球菌;定量检测;不确定度;重复检测【作者】王俊;滕钰;周映佑【作者单位】贵州省食品药品检验所,贵州贵阳550004;贵州省食品药品检验所,贵州贵阳550004;贵州省食品药品检验所,贵州贵阳550004【正文语种】中文金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aurues，简称S.aurues），是引起细菌性食物中毒的重要病原菌之一，是常见的食源性致病菌之一，当其达到一定数量后产生的肠毒素会引起食品中毒事件[1-2]。
食品快速检测技术W2209-4 PetrifilmTM测试片法测定速冻水饺中金黄色葡萄球菌--微材
《农产品/食品质量安全检测技术》课程-微教材知识讲解1、Petrifilm TM测试片法测定速冻水饺中金黄色葡萄球菌（1）称取一定量的速冻水饺样品放入无菌容器中，加入适量的无菌生理盐水，制成1:10的匀液。
（2）搅拌或均质样品，调整样品稀释液的pH值至中性。
（3）做10倍递增稀释，选择适宜的2~3个连续稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），接种Petrifilm TM测试片，每个稀释度接种2 片，每片1 mL（4）将测试片置于平坦表面处，揭开上层膜，用吸管吸取某一稀释度的1 mL样液垂直滴加到一张测试片的中央处，然后将上层膜缓慢盖下，避免气泡产生，切勿使上层膜直接落下，再把Petrifilm TM金黄色葡萄球菌的压板放置在上层膜中央处，轻轻地压下，使样液均匀覆盖于圆形的培养面积上，拿起压板，静置至少1 min 以使培养基凝固。
（5）将测试片的透明而朝上水平置于培养箱内，堆叠片数不超过20 片，在36℃士l ℃条件下培养24h土2h。
（6）确认反应：如果上述测试片上没有菌落生长或菌落全部是紫红色（典型的金黄色葡萄球菌特征），无需进行确认；如果测试片上出现黑色、蓝绿色菌落或紫红色菌落不明显，需使用Petrifilm TM确认反应片作进一步确认。
（7）将上层膜掀起，将确认反应片置入测试片的培养范围内，再将上层膜放下覆盖在确认反应片上，用手指以滑动的方式轻轻将测试片与确认反应片压紧，包括确认反应片的边缘，此步骤可使测试片与Petrifilm TM确认反应片紧密接触并除去气泡，最后把插入确认反应片的测试片放在36℃士l ℃的培养箱内培养1~3h。
（8）结果判读：培养24 土2h 时在测试片上呈典型紫红色的菌落为确认的金黄色葡萄球菌，无需用确认反应片作进一步确认：如果培养24 土2h 时出现典型紫红色以外的其他菌落，需要用确认反应片进行确认，有粉红色晕圈的菌落为金黄色葡萄球菌。
没有粉红色晕圈的菌落不是金黄色葡萄球菌，不应被计数。
金黄色葡萄球菌MPN计数法结果不确定度评定
金黄色葡萄球菌MPN计数法结果不确定度评定1 金黄色葡萄球菌（Staphylococus aureus)是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococ-cus），革兰阳性菌，有“嗜肉菌”的别称，是人类化脓感染中最重要的致原菌”，也是评价食品卫生安全的重要指标之一。
“测量不确定度”术语，在20世纪70年代初开始逐渐在测量领域广泛应用），目前CNAS、APLAC、EURACHEM/EA都有微生物领域的有关测量不确定度政策。
CNAS-CL07：20l1《测量不确定度的要求》8.2中规定，检测实验室应有能力对每一项有数值要求的测量结果进行测量不确定度评估。
本文依据JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》和GB 4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》，对1份样品的15次重复测量结果作不确定度评定。
2数学模型和不确定度来源2.1不确定度评定原理测量不确定度：根据所用到的信息，表征赋予被测量值分散性的非负参数。
由多个分量组成，其中一些分量由可用测量列结果的统计分布估算，并用实验标准差表征。
另一些分量则可用基于经验或其他信息的假定概率分布估算，也可用标准差表征。
2.2数学模型A=T/m式中，A——样品中金黄色葡萄球菌MPN数；T——某一稀释度被确认的金黄色葡萄球菌阳性管数；m——被确认阳性管对应的样品重量，g。
因为典型菌落确认（血浆凝固酶试验）为定性试验，所以在数学模型中不予考虑。
2.3不确定度分量的来源测量中可能导致不确定度的来源一般有：取样、样品量、样品种类，目标微生物在样品中分布、样品中含有的微生物数量水平、样品稳定性、信比稀释、读数等”。
和一般测量相比较，样品中微生物测量的结果特点是发散性极大，因此本文对金黄色葡萄球菌MPN计数法结果不确定度评定中，着重从检测仪器设备和检测结果重复性两方面考虑。
3不确定度评定3.1样品称量过程中产生的不确定度（B类不确定度）u rel（m）本实验按照GB4789.1-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验总则》要求，无菌条件操作。
食品中金黄色葡萄球菌定量检测能力验证结果与探析
关键词：食品；金黄色葡萄球菌；定量检测
1 引言
实际检测食品中的金黄色葡萄球 菌时，必须严格遵循法律规定与标准， 逐步提高检测水平与监测质量。一般 情况下，检验人员会利用科学的鉴定 系统完成盲菌的鉴定及分型工作，反 复对比检测与鉴定结果后，明确被检 测食品中的金黄色葡萄球菌数量。能 力验证是一种客观的实验方法，是控 制试验室准确度及精确度的重要途径， 有利于修正实验室检测中可能存在的 误差。为此，文章以能力验证为核心， 对食品中的金黄色葡萄球菌定量检测 及结果进行了分析。这不仅可以改善 实验室工作质量，也可提高实验室的 检测能力验证结果与探析
□ 刘家慧 四川省内江市食品药品检验检测中心
摘 要：世界范围内，由金黄色葡萄球菌导致的中毒现象比比皆是。自然界中金黄色葡萄球菌的分布相当广泛，人体 中也有存在，大多位于黏膜和皮肤，部分人的鼻咽当中也存有金黄色葡萄球菌，具体来说，携带金黄色葡萄球菌原菌的人 数高达 80%。食品当中如果含有金黄色葡萄球菌，会直接威胁人体健康。为此，必须对食品中的金黄色葡萄球菌做好监督 与检测，按标准对食品进行定量检测，以降低金黄色葡萄球菌对食品的影响，维护人们的健康与安全。
盲样的评估，尽量选择稀释度范围较 大一些，尽量使同一稀释度 3 个平板 上的菌落在 20 ～ 200 CFU。每个稀释 度吸取 1 mL 均液以 0.3、0.3、0.4 mL 接种量分别加入到 3 个 BP 琼脂平板上。 在实验过程中要注意的是：新配置的 BP 琼脂平板有水珠，应放置于生物安 全柜吹干或者放在 25 ～ 50 ℃培养箱中 烘干，计数时菌落不会蔓延；涂布时 用一次性塑料涂布棒，注意不要触及 平板边缘，计数时菌落清晰便于计数； 涂布后，静置 10 min，待样液完全吸 收后再倒置于 36 ℃下培养 45 ～ 48 h。 结合研究目的选择与实验研究相符的样 品匀液，合适的样品混合液有利于加快 稀释速度，然后吸取 1 mL 的样品匀液， 注意所选样品匀液稀释度不同，将 0.3 mL 样品匀液直接放入金黄色葡萄球菌 显示培养基中，缓慢搅拌，均匀后停止。 金黄色葡萄球菌的灵敏度会直接影响 实验结果，为此，可反复对比其灵敏度， 从而提高实验结果的准确性，确保其 精准、可行 [2]。
金黄色葡萄球菌标准物质的定值方法
２ ）用镊 子取 下丁基 胶 塞 ， 倒 置放 于桌 面 ； ３ ）加 入 ７ ｍ Ｌ无 菌 水对 冻 干 物 进行 溶 解 ， 静 置
２ ｍｉ ｎ；
４ ） 加入 ９ ｍ Ｌ无 菌 水 ， 盖上 丁基胶 塞 ， 于 涡旋仪
上 高速 混 匀 １ ｍｉ ｎ ． 制 成体 积 比 １ ： ２的菌悬 液原 液 ；
１ ． １ 试 验 样本
别 加 入 到 ３个 平 板 中 （ 根据 Ｇ Ｂ ４ ７ ８ ９ ． １ ０ — ２ ０ １ ０ 规 定） ， 用 无 菌 三 角 推 棒 将 菌 液 涂 布 整 个 平 板 ， 静 置
试 验样 本 （ 含 鸡 肉基质 的金 黄 色葡 萄 球 菌 标 准 物质 ） ，批 次编 号 为 Ｊ Ｐ ０ ２ １ ２ ，由作 者 所在 实 验 室提 供 。样 品检测 前 进 行 了均 匀 性 和稳 定性 试 验 ， 在 随 后 统计 分 析 与 评 价 中可 以忽 略 样 品不 稳 定 性 和不
的琼脂 计 数 培养 基 。摇 匀 。待 平 板 冷却 凝 固后 ， 在 （ ３ ６ ＋ １ ）ｏ Ｃ 下倒 置培 养 １ ８ ～ ２ ４ ｈ ； ２ ） Ｂ Ｐ倾 注 法 ：吸取 １ ｍＬ制备 的菌 液稀 释 液 ， 倾 注入 １ ５ ｍＬ冷 却 至 ４ ２℃的 Ｂ Ｐ培 养基 ， 摇 匀 。待 平板 冷却 凝 固后 ， 在（ ３ ６ ￣ １ ）℃下倒 置培 养 ｌ ８ ～ ２ ４ ｈ ； ３ ） Ｂ Ｐ平 板涂 布 法 ：取 ３片 制 好 的 Ｂ Ｐ琼 脂 平 板 ，将制 备 的菌液 稀 释液 以 ０ ． ２ 、 ０ ． ３ 、 Ｏ ． ４ ｍＬ的量分
１ ） 用 酒精 棉球 擦拭 冻 干瓶 丁基 胶塞 ， 待 冻 干物
食品中金黄色葡萄球菌检验方法
食品中金黄色葡萄球菌检验方法金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus ) 是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属(Staphylococcus)，有“嗜肉菌"的别称，是革兰氏阳性菌的代表，可引起许多严重感染。
而对于金黄色葡萄球菌在速冻食品中的存在量，卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准《速冻面米制品》，允许金葡菌限量存在。
实验设备耗材吸管(1ml、10ml)、恒温培养箱(36±1℃)、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜、接种棒等培养基和试剂普通肉汤培养基、胰蛋白胨大豆肉汤、Baird-Prker琼脂平板、缓冲蛋白胨水(BP)、凝固酶试验冻干血浆检验程序(非选择性增菌法)检样25g+225mlBP胨水10ml匀液+10ml双料胰胨肉汤操作步骤1.称取25g固体样品;吸取25mL液体样品，加入225mLBP胨水，固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。
2.吸取10mL上述混悬液，接种于10mL双料胰蛋白胨大豆肉汤中，置36±1℃培养2h。
3.再加入20ml 含20%NaCl的单料胰蛋白胨大豆肉汤，置36±1℃培养24±2h。
4.划线转种2个表面干燥的Baird-Parker琼脂平板上，36±1℃培养46±2h。
5.挑取可疑菌落移种到肉汤培养基中，置36±1℃温箱培养24h。
6.取肉汤培养物0.3ml同0.5ml凝固酶试验冻干血浆于8mm*100mm试管内充分混合，置36±1℃培养，定时观察是否有凝块形成，至少观察6h，以内容物完全凝固，使试管倒置或倾斜时不流动为阳性。
试验中需同时做已知阳性和阴性对照。
对可疑结果，应进行革兰氏染色、镜检和其他辅助试验。
7.本菌为革兰氏阳性球菌，排列是葡萄球状，无芽胞，无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径约为0.5～1μm。
在Baird-Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。
食品中两类致病微生物检测结果不确定度评定
582020/12中国食品工业安全与检测SAFETY AND TESTING肖 炜 伊犁州检验检测认证研究院 新疆伊犁 835000食品中两类致病微生物检测结果不确定度评定用外行话说，不确定度额定值是指不可靠的程度，主要用来表示实验测量结果的可行性程度。
它可以用来测试参与实验的人员、适用的测量仪器和设备、以及具体的实验环境条件等因素对测量能力的水平进行量化。
1实验材料与实验方法1.1材料实验食品从2018年至2019年随机抽检的236批蛋糕和肉制品中抽取。
实验中涉及的食物主要有火腿、烤鸡、蛋糕等不同种类。
[1]BP 计数琼脂:用北京路桥有限公司提供的培养基按照说明书配制培养液，将配制好的培养液倒在平板上。
脑心提取肉汤(BHI)、兔血浆、小斜营养琼脂均由北京路桥有限公司提供，直接用于实验。
生理盐水缓冲液由伊犁州产品质量检验所食品室配制而成。
1.2检测方法1.2.1分析培养基增菌技术目前，在我国食品微生物检测过程中，主要采用选择性培养基和显色培养基两种技术来实现培养基的生长[2]。
值得注意的是，虽然选择性培养基常用于区分不同类型的细菌，但检测结果不能用于准确识别细菌类型，只有通过分型鉴定等方式才能确定是否有相应菌株的存在。
1.2.2沙门氏菌检验在食品病原微生物实验室检测过程中，微生物检测能力的高低直接影响检测结果的可靠性和准确性，是检测质量控制的关键[3-4]。
长期以来，中国食品药品检验所等机构一直以实验室比对计划的形式开展沙门氏菌检测能力验证活动。
在具体的验证过程中，盲样检测过程主要采用《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》（GB4789.4-2016）。
1.2.3金黄色葡萄球菌检验在食品微生物检测过程中，日常采用《食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验》(GB4789.10-2016)作为检测方法，包括预富集培养、分离培养、菌落形态观察、血浆凝固酶实验等多个实验步骤。
然而，在传统的检测过程中，检测的具体摘要：不确定度评定是测量不确定度的缩写，包括综合标准不确定度、A 类标准不确定度和标准不确定度等多个不确定度。
金黄色葡萄球菌的风险评估1
虾仁中金黄色葡萄球菌的风险评估摘要：金黄色葡萄球菌对水产品的污染比较严重，大部分中毒事件来源于金黄色葡萄球菌产生肠毒素。
本文参照国际上风险评估的经验，按照CAC的规定，从危害识别、危害描述、暴露评估和危害特性等方面客观地对单冻生虾仁中金黄色葡萄球菌进行了风险评估。
最后对水产品加工企业提出了一些建议。
关键词：草冻生虾仁；金黄色葡萄球菌；风险评估引言：金黄色葡萄球菌是细菌性食物中毒中极为重要的细菌之一，葡萄球菌肠毒素导致的中毒症状已成为世界性卫生问题。
我国海域宽广，盛产虾类，其中南美白对虾肉鲜壳薄且易于养殖被加工而成的包装冻生虾仁产品在国内外很受欢迎，如今已成为我国出口的主要水产品之一。
由于我国对冻生虾仁产品缺乏预测方面的研究，近十年来国外发达国家利用其检测技术优势建立森严的技术壁垒，其中包含各类微生物的限量指标。
金黄色葡萄球菌是常见的引起食物中毒的多发性致病菌，且与之相关的中毒事件有逐年增长的趋势。
冻生虾仁的生产过程包括原料养殖，运输、贮藏、工厂加工等环节，每个环节都可能受到金黄色葡萄球菌的污染。
金黄色葡萄球菌产生的金黄色葡萄球菌肠毒素在原因明确的食物中毒事件中占50％，世界各地均有SE中毒的报道，世界各国都把金黄色葡萄球菌检测列为食品卫生的法定检测项目。
本文应用食品安全微生物风险分析手段对单冻生虾仁中金黄色葡萄球菌进行风险评估，运用风险分析原理分析虾仁中金黄色葡萄球菌带来的风险，对控制单冻生虾仁产品质量，提高我国对虾加工品的市场竞争力，促进对虾加工品出口贸易的进一步发展有重大意义。
一单冻生虾仁中金黄色葡萄球菌的风险评估（一）单冻生虾仁中金黄色葡萄球菌的危害识别1.金黄色葡萄球菌的自身性质典型的金黄色葡萄球菌为球型，显微镜下排列成葡萄状。
无芽孢、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最低生长温度为7℃，最高生长湿度为50℃，最适生长温度37℃，产生肠毒素最佳温度为21～37℃，在6.7℃以下则不能生长及产生毒素。
冷冻猪肉食品中金黄色葡萄球菌的定性检测方法
表1 44种农药的保留时间、定性定量离子对、回收率、相关系数和精密度结果表序号农药保留时间/min定量离子对（m/z）定性离子对（m/z）相关系数回收率/%RSD/% 1敌敌畏 5.961109.00>79.00185.00>93.000.999 09476.5 1.55 2速灭磷7.751127.00>109.00192.00>127.000.998 65683.4 1.82 3氧乐果9.572156.00>110.00110.00>79.000.999 34177.6 2.46 4灭线磷10.030200.00>158.00158.00>97.000.998 55881.6 4.91 5治螟磷10.421322.00>202.00322.00>174.000.998 47090.30.55 6久效磷10.508127.10>109.00127.10>95.000.998 99286.8 2.12 7乐果11.002125.00>47.00125.00>79.000.998 66072.6 3.47 8克百威11.107164.10>149.10149.10>121.100.999 02995.6 4.34 9地虫硫磷11.608137.10>109.10246.00>137.100.998 98294.70.88 10二嗪磷11.650304.10>179.10179.10>137.100.998 91680.9 1.20 11氯唑磷11.885257.00>162.00257.00>119.000.999 34398.4 3.45 123-羟基克百威12.668180.10>137.00180.10>162.100.999 19588.6 3.30 13甲基对硫磷12.714263.00>109.00125.00>47.000.998 931100.6 1.98 14杀螟硫磷13.208277.00>260.00277.00>109.100.998 62170.8 2.24 15马拉硫磷13.377173.10>99.00173.10>127.000.998 60989.1 3.65 16毒死蜱13.529196.90>168.90313.90>257.900.998 58597.20.89 17对硫磷13.670139.00>109.00291.10>109.000.998 914103.5 5.20 18水胺硫磷13.745289.10>136.00230.00>212.000.998 94788.6 2.87 19三氯杀螨醇13.832139.00>111.00139.00>75.000.999 520104.5 2.24 20甲基异柳磷14.058199.00>121.00241.10>121.100.999 00078.5 4.65 21二甲戊灵14.174252.10>162.10252.10>191.100.998 16082.9 5.10 22戊菌唑14.292248.10>157.10159.10>123.100.999 35479.8 4.50 23硫环磷14.363255.00>227.00255.00>140.000.999 70586.4 3.64 24杀扑磷14.752145.00>85.00145.00>58.000.998 32289.5 2.22 25杀虫畏14.87628.90>109.00330.90>109.000.998 10987.6 1.95 26抑霉唑15.288215.00>173.00215.00>159.000.998 35174.6 2.23 27腈菌唑15.527179.10>125.00179.10>152.000.998 71277.2 3.68 28氟硅唑15.575233.10>165.10206.10>151.100.998 73582.9 4.44 29肟菌酯16.756222.10>190.10222.10>130.100.998 77284.6 5.01 30戊唑醇17.223250.10>125.10125.10>89.000.999 04184.40.18 31亚胺硫磷17.816160.00>77.00160.00>133.000.998 06691.3 1.69 32联苯菊酯17.839181.10>166.10181.10>179.100.998 43487.4 3.69 33溴螨酯17.902340.90>182.90340.90>184.900.998 41679.6 2.84 34乙螨唑17.996359.10>187.10330.10>300.100.998 68883.3 4.13 35甲氰菊酯18.020181.10>152.10265.10>210.100.998 27279.6 4.28 36伏杀硫磷18.489182.00>111.00182.00>138.000.998 15385.9 2.75 37氯氟氰菊酯20.244163.10>127.10163.10>91.000.998 077103.3 5.11 38蝇毒磷19.750362.00>109.00362.00>226.000.999 41684.4 4.20 39腈苯唑20.141198.10>129.10129.10>102.100.998 86076.3 3.47 40氟氯氰菊酯20.244163.10>127.10163.10>91.000.998 06689.5 2.86 41氯氰菊酯20.471163.10>127.10163.10>91.000.998 92781.6 1.11 42氰戊菊酯21.560225.10>119.10225.10>147.100.999 18775.6 2.55 43苯醚甲环唑21.885323.00>265.00265.00>202.000.998 84784.60.98 44溴氰菊酯22.128180.90>151.90252.90>93.000.998 44979.2 1.66行试验，计算回收率和相对标准偏差。
思念水饺检出金黄色葡萄球菌的专业探讨
思念检出金葡菌，尴尬“标准”之争食品安全事件：2011年10月19日，北京市工商局公布的一批不合格食品名单，其中在国内速冻食品行业有龙头和领军企业之称的郑州思念食品有限公司，其生产的“思念”牌三鲜水饺，被检出含有金黄色葡萄球菌。
据中国农业大学食品科学与营养工程学院院长罗云波介绍，金黄色葡萄球菌能引起急性中毒，是非常厉害的病菌。
据悉，金黄色葡萄球菌在食品安全检查中为不得检出物质，该菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染。
对于被曝光的食品安全问题，郑州思念食品有限公司的公关部负责人朱小姐表示，被曝光的相关批次产品的问题，是在今年7月初北京工商部门的相关抽检中发现的。
北京市工商局对外公布的信息显示，思念食品有限公司此次被检出的三鲜水饺批次为“201106 28106A”，系2011年6月份生产，该批次产品一共350件（每件20袋），产品型号为鲜水饺。
此后，经思念食品方面核实，发现产品确实带有金黄色葡萄球菌，其原因最终判断为公司产品在物流运送过程中不慎，使产品受损所致。
为此，思念食品方面已被当地工商部门予以5万余元的处罚。
各方反应：涉及企业：思念食品于19日晚在其官网上发布声明，“2011年7月是一个令思念同仁难过和反思的日子，在这个月，食品安全部门检验出批次号为20110628106A的思念牌三鲜水饺含有致病菌金黄色葡萄球菌，我们获悉这一消息后，当即就对该批次产品做出及时下架处理，并且已经接受相关部门的罚款处理。
”质监部门：郑州思念一直未向质监局汇报召回一事，不过该事件近日被曝光后，食品处肖处长等人已去该公司调查此事。
郑州思念已经违反了国家《食品召回管理规定》，并未在7月份知晓日后3日内向郑州质监局提交食品召回计划。
新闻媒体：媒体向来是对食品安全事故最为关心的一群人，其中，经上网查阅，解放日报《“思念”水饺检出病原菌》新华网《思念公司回应致病菌水饺郑州市展开联合调查》新快报《思念再曝毒水饺八成网民称拒绝再买思念产品》京华时报《思念水饺7月已知产品含病菌专项咨询形同虚设》等等各家媒体都对此做出了褒贬不一的评价以吸引眼球。
从一份速冻食品中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌结果分析
从一份速冻食品中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌结果分析目的为了解南京市速冻食品中食源性致病菌的污染情况，初步确定被污染的高危食品，从而更好地开展食品安全预警预防控制食源性疾病发生。
方法参照国家标准方法，采用进口生物梅里埃生化培养基和试剂条，对样本进行食源性致病菌的分离、生化鉴定。
结果20份速冻食品中5份受到污染,分别检出单核细胞增生李斯特菌4株和金黄色葡萄球菌3株，其中1份市售速冻水饺中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌。
结论检测结果表明,该类速冻荤馅食品已受到致病菌严重污染，需加强监测，严防食品安全事件发生。
标签：食源性致病菌; 李斯特菌; 金黄色葡萄球菌; 食品安全Analysis and investigation on food-borne pathogens in frozen-rice-food WANG Wei，JIANG Xiao.Center for Disease Control and Prevention，Nanjing 210003，China【Abstract】Objective In order to investigate food-borne pathogens in deepfreeze foods in Nanjing.Confirming highly dangerous foods primly so as to prevent and control food borne disease happen.Methods According to international standard method and API biochemical medium to isolate and identify three kinds of pathogens in samples.Results We detected 20 deepfreeze samples,four Listeria-moncytogens and three staphylococcs aureus were detected in which Listeria monocytogenes and staphylococcus were detected simultaneously from one marked dumpling.Conclusion The results showed this kinds of foods had been polluted because of two pathogens detected .【Key words】Food-borne pathogens; Listeria-moncytogens; Staphylococcs aureus; food-Safety单核细胞增生李斯特菌和金黄色葡萄球菌均为致病菌，它们可以通过食物、水源污染和接触传播使人类感染致病或发生食物中毒，各国食品安全卫生指标对这些致病菌均规定禁止检出。
揭露三全水饺内幕 被曝金黄色葡萄球菌超标
揭露三全水饺内幕被曝金黄色葡萄球菌超标目录：第一章：金黄色葡萄球菌的特性与致命性第二章：三全水饺步思念后尘被检出金黄色葡萄球菌第三章：金黄色葡萄球菌控制方法与感染处理治疗方法编者按：当今社会生活水平大大提高，但是生活质量却在日趋月下，一系列的食品健康问题频频爆出。
思念水饺“病菌门”风波还未平息，另一知名品牌“三全”的速冻水饺也被查出金黄色葡萄球菌超标。
那么黄色葡萄球菌是什么呢？他对人体都多大危害呢？接下来小编就为大家一一解答。
三全水饺，郑州三全食品股份有限公司的产品，主要有三全东北水饺和三全珍鲜灌汤水饺。
2011年11月，三全水饺在第三季度流通环节食品抽检中，发现有14批次的产品金黄色葡萄球菌不合格。
金黄色葡萄球菌的特性与致病性生物学特性金黄色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus Rosenbach）是人类的一种重要病原菌，隶属于葡萄球菌属（Staphylococcus），在空气、水、灰尘中都可以找到，主要会引起局部化脓感染发炎。
由于这是一种嗜肉菌，人和动物是其主要携带者，所以食品受其污染的机会很大。
要杀灭这种病菌其实也很简单，因为它耐不住高温，煮饺子时只要充分加热，彻底煮熟就能杀死这种病菌了。
可引起多种严重感染。
典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。
显微图像金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4，干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1~2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10~15%NaCl肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
科学看待速冻面米食品中检出金黄色葡萄球菌的问题
科学看待速冻面米食品中检出金黄色葡萄球菌的问题
中国食品科学技术学会冷冻与冷藏食品分会
【期刊名称】《食品与机械》
【年(卷),期】2011(027)006
【摘要】2011年10月19日下午,有媒体报道北京市工商局例行食品安全检查结果,其中思念三鲜水饺(批号:20110628106A)检测不合格,检出金黄色葡萄球菌,并处以下架及罚款.有关此类问题,我会已于2007年4月以《就知名品牌速冻食品被检出金黄色葡萄球菌的说明》为题发文,就速冻面米食品中被检出金黄色葡萄球菌进行了科学的解读.
【总页数】1页(P6)
【作者】中国食品科学技术学会冷冻与冷藏食品分会
【作者单位】
【正文语种】中文
【相关文献】
1.速冻食品行业问题不断速冻面米制品新国标备受关注 [J], 李芳
2.面米速冻食品速冻率测试方法浅谈 [J], 余群
3.从一份速冻食品中同时检出单增李氏菌和金黄色葡萄球菌结果分析 [J], 王炜;江晓
4.速冻预包装面米食品中金黄色葡萄球菌污染状况分析 [J], 曹军;俞彩娥
5.速冻食品中金黄色葡萄球菌的检出与存活情况 [J], 于梅;徐景野;扬元斌
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速冻水饺中金黄色葡萄球菌计数结果不确定度的评定
I ustry科技文苑行业金黄色葡萄球菌系指一类革兰氏阳性球菌，其排列成葡萄状、无芽胞和荚膜，是评价食品卫生质量的重要指标之一。
美国疾病控制中心报告指出，由金黄色葡萄球菌引起的感染占全球第2位，仅次于大肠埃希菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大占到45%，我国每年也有此类中毒事件发生。
因此，做好金黄色葡萄球菌的检测尤为重要，特别是我国卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准《速冻面米制品》，允许金黄色葡萄球菌限量存在，而金黄色葡萄球菌计数存在很大的分散性，故做好金黄色葡萄球菌计数不确定度评定更为重要。
1 原理与方法1.1 评定原理不确定度含义为:表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。
本文介绍的是依据GB 4789. 10-2010《食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》，在同一相对恒定的实验条件下，由检测人员对同一份质控菌液进行4次独立检测，共做20次，然后对检测结果进行不确定度评定。
1.2 检测方法25mL检样+225mL稀释液，均质；选择2个连续的适宜稀释度的样品均液，每个稀释度分别吸取1mL；样品匀液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接种量分别加入3块Baird-Parker平板，然后用无菌L棒涂布整个平板，36℃，48h；计数及血浆凝固酶试验；报告。
2 数学模型及不确定度来源2.1 数学模型T-样品中金黄色葡萄球菌菌落数；A-某一稀释度典型菌落的总数；B-某一稀释度血浆凝固酶阳性的菌落数；C-某一稀释度用于血浆凝固酶试验的菌落数；d-稀释因子。
2.2 不确定度分量的主要来源在微生物检测中一般认为不确定度来源于培养基、培养条件、计量器具校准、操作人员技能等。
由于重复检测结果的发散性较大，所以本文只对称样、稀释、重复性检验、Baird-Parker培养基储存条件引起的不确定度进行分析。
食品安全国家标准 金黄色葡萄球菌检验
食品安全国家标准金黄色葡萄球菌检验1 范围本标准规定了食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的检验方法。
本标准第一法适用于食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌的定性检验；第二法适用于金黄色葡萄球菌含量较高的食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌的计数；第三法适用于金黄色葡萄球菌含量较低而杂菌含量较高的食品中凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌的计数。
2 设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：2.1 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。
2.2 冰箱：2 ℃～5 ℃。
2.3 恒温水浴箱：37 ℃～65 ℃。
2.4 天平：感量0.1 g。
2.5 均质器。
2.6 振荡器。
2.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL 刻度）、10 mL（具0.1 mL 刻度）或微量移液器及吸头。
2.8 无菌锥形瓶：容量100 mL、500 mL。
2.9 无菌培养皿：直径90 mm。
2.10 L涂布棒。
2.11 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
3 培养基和试剂3.1 7.5 %氯化钠肉汤：见附录A 中A.1。
3.2 血琼脂平板：见附录A 中A.2。
3.3 Baird-Parker 琼脂平板：见附录A 中A.3。
3.4 兔血浆纤维蛋白原（RPF）琼脂培养基：见附录A 中A.4。
3.5 脑心浸出液肉汤(BHI) ：见附录A 中A.5。
3.6 兔血浆：见附录A 中A.6。
3.7 稀释液：磷酸盐缓冲液：见附录A 中A.7。
3.8 营养琼脂小斜面：见附录A 中A.8。
3.9 革兰氏染色液：见附录A 中A.9。
3.10 无菌生理盐水：见附录A 中A.10。
第一法金黄色葡萄球菌定性检验4检验程序金黄色葡萄球菌定性检验程序见图1。
图1 金黄色葡萄球菌检验程序5 操作步骤5.1 样品的处理称取25 g 样品至盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL 7.5 %氯化钠肉汤无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min。
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速冻水饺中金黄色葡萄球菌计数结果不确定度的评定
作者：戴婕妤周钦方
来源：《食品安全导刊》2016年第07期
摘要：评定速冻水饺金黄色葡萄球菌检测结果的不确定度，检测方法依据GB 4789.10-2010，分析速冻水饺中金黄色葡萄球菌计数结果的不确定来源，并对实验结果取对数后评定其不确定度。
结果显示扩展不确定度为0.05，金黄色葡萄球菌含量为1.6×104～2.7×104CFU/g。
结论为不确定度的分析能够有效掌握检测结果的可信程度和准确性。
关键词：金黄色葡萄球菌计数不确定度评定
金黄色葡萄球菌系指一类革兰氏阳性球菌，其排列成葡萄状、无芽胞和荚膜，是评价食品卫生质量的重要指标之一。
美国疾病控制中心报告指出，由金黄色葡萄球菌引起的感染占全球第2位，仅次于大肠埃希菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是世界性卫生难题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大占到45%，我国每年也有此类中毒事件发生。
因此，做好金黄色葡萄球菌的检测尤为重要，特别是我国卫生部于2011年11月24日公布食品安全国家标准《速冻面米制品》，允许金黄色葡萄球菌限量存在，而金黄色葡萄球菌计数存在很大的分散性，故做好金黄色葡萄球菌计数不确定度评定更为重要。
1 原理与方法
1.1 评定原理
不确定度含义为：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。
本文介绍的是依据GB 4789. 10-2010《食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》，在同一相对恒定的实验条件下，由检测人员对同一份质控菌液进行4次独立检测，共做20次，然后对检测结果进行不确定度评定。
1.2 检测方法
25mL检样+225mL稀释液，均质；
选择2个连续的适宜稀释度的样品均液，每个稀释度分别吸取1mL；样品匀液以0.3mL、0.3mL、0.4mL接种量分别加入3块Baird-Parker平板，然后用无菌L棒涂布整个平板，36℃，48h；
计数及血浆凝固酶试验；报告。