第三章 芳胺及芳烃胺类药物的分析(2006.5.31)

第一节
芳胺类药物的分析
阳极： NO H2O
阴极： HNO 2 H e
H e HNO 2
NO H2O
导致在两电极间有电子流动，从而回路 中有电流产生，使得电流计指针发生偏转并 且不再返回零点
第一节
芳胺类药物的分析
2）电位法 电极：甘汞-铂电极
终点：溶液中稍过量的NaNO2 使
乙醚5ml 离心 样品（对乙酰氨基酚）g 上清液 1 溶解
2) 对照液
对氯乙酰苯胺乙醚溶液（50g/ml）
第一节
芳胺类药物的分析
3) 点样量 样品液：200l 点于硅胶GF254薄层板上
对照液：40l
4) 限量
40 50 100% 0.005% 1,000,000 200 5
第一节
芳胺类药物的分析
4.与重金属离子反应 1) 铜盐
Na 2 CO 3TS中 利多卡因 CuSO 4 蓝紫色 转溶于CHCl 3 黄色
2) 钴盐
H 利多卡因 CoCl 2 细小的亮绿色
第一节
芳胺类药物的分析
5.水解产物的反应 1) 苯佐卡因
NH2 + NaOH COOC2H5 COONa NH2 + C2H5OH
对照 (对乙酰氨基酚对照品 1.0g+对氨基酚 50g)
2) 限量
0.005%
第一节
芳胺类药物的分析
四、含量测定
(一) 亚硝酸钠滴定法
1. 原理
芳伯氨基，在酸性条件下与NaNO2反应生成
重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算含量
潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等， 可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定
第一节
2．性质
芳胺类药物的分析
1）具有芳伯氨基 发生重氮化或重氮化-偶合反应 2）具有脂烃胺侧链——弱碱性 与酸成盐，与生物碱试剂反应 3）具有酯结构——水解 4）具有苯环结构——紫外吸收
第一节
芳胺类药物的分析
二、鉴别反应
1.重氮化-偶合反应
盐酸普鲁卡因——游离芳伯氨基
在酸性溶液中与NaNO2发生重氮化反应, 再与碱性-萘酚偶合产生红色偶氮化合物 对乙酰氨基酚——潜在芳伯氨基 水解后可得芳伯氨基，能发生类似反应
第一节
芳胺类药物的分析
对乙酰氨基酚——对硝基氯苯为原料
NO2
NO 2 NH2
NHCOCH3
水解
Cl
OH

OH
还原

OH
乙酰化
第一节
芳胺类药物的分析
1．乙醇溶液的澄清度与颜色
对乙酰氨基酚易溶于乙醇中 铁粉作还原剂——乙醇溶液浑浊 对氨基酚(中间体)有色氧化物——橙红色或棕色
第一节
芳胺类药物的分析
4）内指示剂法
特点：操作简便
缺点：生成重氮盐常带有颜色
干扰指示剂颜色变化的观察
应用：较少
第二节
苯乙胺类药物的分析
一、基本结构与典型药物
儿茶酚胺类： 在苯环 3、4 位上 有羟基取代
HO OH HO CH CH2NHCH3 HO
HO OH HO CH CH2NHR
HO OH CH CH2NH2
第一节
芳胺类药物的分析
HN R1 C OR
(二) 对氨基苯甲酸酯类
1.基本结构与典型药物
O
具有对氨基苯甲酸酯基本结构 具有游离的芳伯氨(或仲胺)基
NH2 .HCl COOCH2CH2N(C 2H5)2 COO CH2 CH3
COOCH2CH2N(CH3)2
NH2
NH(CH2)3CH3 .HCl
苯佐卡因 盐酸普鲁卡因 盐酸丁卡因 procaine hydrochloride benzocaine tetracaine hydrochloride
第一节
芳胺类药物的分析
Ar N N NH Ar + HCl
[Ar N+ N]Cl－ + H2N Ar
酸度不足 ——未反应的芳胺与生成的重氮盐产生 偶氮氨基化合物 酸度过大 ——游离芳伯氨的量减小(成盐), 影响 重氮化反应速度, 使反应速度减慢
第一节
芳胺类药物的分析
3）反应速度与滴定温度和速度的关系
电位产生突跃
USP采用这个方法指示终点
第一节
芳胺类药物的分析
3）外指示剂法
指示剂： 淀粉-KI糊剂或试纸 原理： 终点时，溶液中稍过量的NaNO2 在酸性 条件下氧化 KI 析出I2, I2 遇淀粉显蓝色
第一节
芳胺类药物的分析
外指示剂法的缺点：
溶液显强酸性, KI遇光能被空气氧化析 出碘, 近终点时, 可呈现蓝色造成误判 由于经常蘸取溶液试验, 可造成滴定液 的损失而引入误差 方法难掌握
第一节
芳胺类药物的分析
3.对氨基酚 乙酰化不完全或水解引入
1) 检查原理
对氨基酚在碱性条件下，与亚硝基铁氰 化钠作用，生成蓝色络合物
Na2[Fe(CN)5NO] + H2N OH OHNa2[Fe(CN)5H2N OH] + H2O
第一节
芳胺类药物的分析
2) 检查方法
样品(1.0g) 甲醇(12) 碱性 Na2[Fe(CN)5NO] 放置 30 操作同样品 比较
温度升高
反应速度加快 重氮盐分解速度加快 滴定液亚硝酸钠逸失速度加快 重氮化反应宜在低温下慢速进行
第一节
芳胺类药物的分析
操作法(中国药典)


在30C以下，滴定管尖端插入 液面下2/3处 在不断搅拌下快速加入大部分 标准溶液(约80%~90%)；提出液面 后缓缓(1~5min/滴)滴定至终点
H2O2 or I2 放臵 肾上腺素 肾上腺素红 聚合物(棕色) [O] 聚合
同样条件下 去甲肾上腺素 反应速度极慢
无色
or
极微红色
区别肾上腺素和去甲肾上腺素
第二节
苯乙胺类物的分析
2. 三氯化铁反应 在0.1mol/L盐酸中与Fe3+显翠绿色, 加氨试液后, 显紫色或紫红色
避免HNO2逸失 避免终点提前
提高初始反应速度 降低近终点滴定速度
第一节
芳胺类药物的分析
2. 指示终点的方法
永停法
电位法
外指示剂法 内指示剂法
中国药典主要采用永停滴定法
第一节
芳胺类药物的分析
1）永停法(dead stop)
在两个铂电极间外加 10~200mV电压，并且在回 路中串联一个灵敏的检流 计（10A-9/格） 终点前：回路中无电流，电流计指针摆动、回零 终点时：溶液中存在微过量的NaNO2 发生氧化还原反应，电流计指针不回零
四、肾上腺素中肾上腺酮的检查 五、含量测定
(一) 非水溶媒滴定法(侧链显弱碱性) (二) 溴量法(酚羟基邻对位溴代)
肾上腺素 adrenaline
去甲肾上腺素 noradrenaline
第二节
二、性质
苯乙胺类药物的分析
1. 易被氧化 邻苯二酚或苯酚结构, 易被氧化呈色 2. 显碱性 具有烃胺侧链, 显弱碱性, 能与酸成盐
3. 具有旋光性 具有手性碳原子, 具有光学活性
第二节
苯乙胺类药物的分析
三、鉴别试验
1. 氧化反应
第一节
芳胺类药物的分析
2．有关物质(对氯乙酰苯胺)
NO2
NO 2 NH2
NHCOCH3
水解
Cl
OH

OH
还原

OH
乙酰化
副反应
N H2
NHCOCH3

Cl
还原

Cl
乙酰化
检查方法——TLC
第一节
芳胺类药物的分析
检查方法——TLC(硅胶GF254)
1) 样品液
第一节
芳胺类药物的分析
Ar -
H NHCOR H 2O Ar D
NH 2 RCOOH
Ar - NO2 6[H] Ar - NH2 2H 2O
Ar - NH2 NaNO 2 2HCl [Ar - N2 ]Cl NaCl 2H2O
Zn HCl
药物分析Ⅱ
(药物分析专论)
第三章
芳胺及芳烃胺类药物的分析
概述
定义 芳胺类——氨基直接与苯环相连的药物 芳烃胺类——氨基在烃基侧链上的药物 分类 根据结构分为： 芳胺类** 酰胺类 对氨基苯甲酸酯类 苯乙胺类* 氨基醚衍生物
第一节
芳胺类药物的分析
一、结构与性质
(一) 酰胺类药物
1. 基本结构与典型药物
——具有酰胺结构的共性
水解成芳伯氨基，发生重氮化偶合反应 利多卡因 酰胺基邻位上有两个甲基，有很大空间位 阻，水解较为困难（80%硫酸溶液中加热）
第一节
芳胺类药物的分析
2) 与FeCl3反应
具有酚羟基或水解后能产生酚羟基
——对乙酰氨基酚 3） 碱性 利多卡因侧链中具有叔氨N原子 显弱碱性，能与酸成盐 能与生物碱沉淀试剂或重金属离子反应 4） 紫外吸收 具有苯环结构，有紫外吸收
第一节
芳胺类药物的分析
2. 操作中的主要条件 重氮化反应属于分子反应
滴定液NaNO2及生成物重氮盐均不稳定
反应速度受多种因素影响
第一节
芳胺类药物的分析
1）反应速度与药物结构的关系 重氮化反应机制
NaNO2 HCl HNO2 NaCl
HNO2 HCl NOCl H2O
NHCOCH3
N HC O CH 2N (C 2H 5)2 C H3 C H3 . HCl
R3 R1 R4 NH C O R2
苯胺酰基衍生物 邻位或对位有取代基
OH
盐酸利多卡因 对乙酰氨基酚 paracetamol Lidocaine hydrochloride
第一节
2．性质
芳胺类药物的分析
1）水解后可发生重氮化反应
HNO2 HBr NOBr H 2O
溴化亚硝酰
K1
HNO2 HCl NOCl H2O
K1比K2大300倍
K2
第一节
芳胺类药物的分析
芳胺∶盐酸＝1∶2 mol 芳胺∶盐酸＝1∶2.5~6 mol
(2) 酸的用量 理论上: 实际上: 原因 强酸性可加速反应 重氮盐在酸性下稳定 酸性下避免副反应发生
第一节
芳胺类药物的分析
盐酸丁卡因——芳香第二胺结构 与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化 合物沉淀
NO NH(CH2)3CH3 NaNO2 H+ COOCH2CH2N(CH3)2 COOCH2CH2N(CH3)2 N(CH2)3CH3
第一节
芳胺类药物的分析
2.三氯化铁反应 对乙酰氨基酚——酚羟基 与FeCl3作用显蓝紫色 3.与生物碱沉淀试剂反应 烃胺侧链：颜色或熔点——鉴别 常用生物碱沉淀试剂 氯化金，碘，碘化汞钾，苦味酸 TS
氯化亚硝酰
H Ar-NH2
NOCl, -HCl
Ar-N-NO
|
Ar-N=N-OH
HCl
[Ar- 2] Cl N
+
-
（慢）
（快）
（快） 重氮盐
第一节
芳胺类药物的分析
(1) 氨基邻、对位有吸电基时,如 –SO3H; -COOH; -NO2; -X等, 使氨基的碱性降 低, 重氮化反应速度加快 吸电基通过诱导效应使氨基上电
使湿润的 红色石蕊试纸变蓝
NH2.HCl HCl
COOH 白色
COOH
溶解
第一节
芳胺类药物的分析
三、杂质检查
(一) 对乙酰氨基酚杂质检查
一般杂质
——酸度、氯化物、硫酸盐、重金属、水分、 炽灼残渣
特殊杂质 —— 乙 醇 溶 液 的 澄 清 度 与 颜 色 、 有 关 物 质 （对氯乙酰苯胺）、对氨基酚
C2H5OH + I2 +NaOH
CH3I 黄色
+ HCOONa + H2O
第一节
芳胺类药物的分析
2) 盐酸普鲁卡因
NH2
N aO H
NH2
N aO H
NH2
+ HOCH2CH2N(C 2H5 )2
COOCH2CH2N(C2H5)2 .HCl
COOCH2CH2N(C2H5)2
COOH HCl NH2
.. N H2
子云密度降低，从而碱性降低，游离
芳伯胺浓度增大，反应速度加快
X
(2) 相反，供电基, 如-R; -OR, 使反应速度降低
第一节
芳胺类药物的分析
2）反应速度与酸及酸度的关系
(1) 酸的种类 重氮化反应在HBr、HCl、H2SO4中反应速度 是 HBr＞HCl＞H2SO4 ( KBr + HCl )