血清脂蛋白a测定标准操作规程

血清脂蛋白a测定标准操作规程

1 检验申请

单独检验项目申请：组合项目申请：血脂测定。临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理

2.1标本采集

2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本

2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存

2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定1天，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。-20℃可保存数月；-70℃至少可保存半年；应避免标本反复冻溶。为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3标本采集的注意事项

2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。抽血前3天内避免高脂饮食，24小时内不饮

酒。

2.3.2不建议采集抗凝血标本，如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是肝素。EDTANa2(1mg／mL)抗凝。

2.1.5 抽血前最好停用影响血脂的药物（如调脂药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。

2.1.6 妊娠后期各项血脂都会增高，应在产后或终止哺乳后3个月查血才能反映基本血脂水平。

3 方法原理

人体中的Lpa与试剂中的抗体在缓冲液中快速形成抗原抗体复合物，使反应液出现浊度。当反应液中保持抗体过剩时，形成的复合物随抗原量增加而增加，当反应液的浊度亦随之增加，与校准品对照，即可计算出未知标本中的Lpa的含量。

340nm

样本中LPa + 试剂中LPa抗体-----------------大分子免疫复合物

在340nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中LPa含量成正比

4 试剂及其他用品

4.1试剂：Lpa测定试剂盒(货号LP6192)，由北京利德曼生化技术有限公司出品。

4.2试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。启封使用的试剂置仪器试剂仓冰箱内稳定7 天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者试剂出现明显的粉红色，或空白吸光率>0.3时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.3试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。

4.4试剂盒主要成分：R1: Lpa缓冲液，0.9%氯化钠溶液,含0.095%的叠氮钠.

R2:抗人Lpa抗体, 含0.095%的叠氮钠。

5 校准品与校准模式

5.1校准品：与试剂盒配套的校准液，

5.2校准类型和校准点数目：非线性模式，5个校准点。

5.3校准周期：校准间隔时间不限。但在：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。

5.4校准液重建方法：将校准品倍比依次稀释成5个浓度即可（第一管为生理盐水），

6 质控品与室内质控规则

6.1质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。

6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。

6.3质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。

6.4质控规则：采用Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。

6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。

7 适用仪器

适用AEROSET和C16000全自动生化分析仪器全自动生化分析仪器。

8 标本检测步骤

装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。

9 主要分析参数

参见说明书。

10结果计算

仪器根据非线性校准曲线自动给出每个标本测定结果。

11 检验结果的报告及范围

11.1结果的报告

11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。

11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。

11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。

11.2 报告范围：0.0--100mg/dl，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。

12 操作性能

12.1精密度：批内CV <10.0％，总CV <10.0％；

12.2准确度：测定值在质控品质控靶值±2SD范围内。

12.3灵敏度：Lpa在100mg/dl时，显色吸光度A546nm 约0.05-0.15。

12.4线性范围：0.0～100mg/dl。

12.5方法的有限性及干扰因素

12.5.1 若标本中含有的干扰物浓度满足以下要求时，对检测结果无影响：抗坏血酸<0.5 g/L, 直接胆红素<40mg/dl,总胆红素<24mg/dl,溶血<100mg/dl.

13 参考范围及医学决定水平

参考范围：0-300mg/l

14 临床意义

Lpa是一种与LDL结构相近的人体血清中的蛋白，密度介于HDL和LDL之间，由于遗传因素的影响，Lpa在不同人群的血清中差异很大，个体Lpa不受饮食和生活习惯的影响。血清中高浓度的Lpa是动脉硬化和心脏疾病危险程度的指标。研究表明：正常的胆固醇浓度和超过30mg/dl 的Lpa，患心脏疾病的危险性比正常人高2倍。而LDL和Lpa的浓度都高，则危险性为8倍。

15 结果审核以及分析与相关项目的联系