血清载脂蛋白BAPOB测定

血清载脂蛋白BAPOB测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理
血清中的ApoB与试剂中特异性的ApoB抗体结合，形成抗原抗体复合物而产生浊度，其浊度高低与血清中ApoB成正比。

通过测定特定波长的吸光度值，参照校准曲线即可计算出血清中ApoB的含量。

3 标本：
3.1 病人准备:应禁食12小时抽血.
3.2 类型：血清
3.3 标本存放留取标本后请尽快分离血清。

在冰箱保存的条件下（2～8℃）稳定3天，-20℃保存至少可以稳定3个月。

3.4 标本运输室温条件下运输
3.5 标本拒收标准细菌污染的不能做测定。

4 实验材料
4.1 试剂：宁波美康生物科技股份有限公司APO B测定试剂
盒（浙械注准20142400106）
4.1.1 试剂组成
试剂1（R1）：
磷酸盐缓冲液（）
0.05mol/L
聚乙二醇（PEG）表面活性剂，稳定剂 40g/L
Triton X-100 0.1ml/L
试剂2（R2）：
羊抗人APOB血清（效价大于1:64）
20～30ml/L
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，
可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

缓冲液（R1）和抗体试剂
（R2）可避光密封保存可稳定一年。

打开后抗体试剂（R2）稳定2个月
4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95 g/L）为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂
4.2 校准品：使用宁波美康生物科技有限公司提供的载脂蛋白A-1/B标准品血清进行全点校准操作。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪。

6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪，西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。

7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

8 计算方法
以APO-B复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/L报告。

9 参考值范围
0.60～1.20g/L
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。

根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。

我室参考值0.60～1.20g/L
10 临床意义
载脂蛋白B(ApoB)是低密度脂蛋白(LDL)的主要结构蛋白，它输送胆固醇至细胞中，因此与动脉粥样硬化斑块形成有关。

因为ApoB浓度水平与动脉粥样硬化程度密切相关，因此ApoB浓度水平的上升和冠心病(CHD)紧密有关。

在使用总胆固醇和甘油三酯来过筛冠心病危险时，除检测脂蛋白(a)与载脂蛋白A1之外，同时检测载脂蛋白B能对各种脂蛋白代谢失调提供更多的信息，也可替代低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)检测。

检测载脂蛋B在监视降脂药物治疗时非常有用。

一些研究表明，当ApoB浓度上升(女性ApoB>1.50g/L，男性ApoB>1.55g/L)，而ApoA1浓度下降(女性ApoA1<1.20g/L，男性ApoA1<1.10g/L)，对于预测CHD危险非常有用。

11 操作性能
11.1 线性范围：0.30～2.0g/L(r2≥0.995)；
11.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU1000、ADVIA-2400批内精密度小于3%，总精密度小于3%。

用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。

11.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x)，同时对63个样品进行Apo B检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=1.08x-0.0512g/L；r=0.990。

11.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.003g/L。

11.5 病人结果可报告范围：0.30～2.0g/L(r2≥0.995)
12 超出范围结果处理
本法的检测范围为0.30～2.0g/L(r2≥0.995)对超出可报告范围的结果的处理：取0.1ml样品加0.5ml生理盐水，再测定，结果乘以6。

13 病危报警值的处理
无。

14 方法局限性
14.1 干扰物质：宁波美康公司的ApoB试剂中抗体特异地只与人ApoB发生免疫反应。

当样品中抗坏血酸浓度≤。