右美托咪定对PC12细胞氧糖剥夺损伤的保护作用

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ） Ｊｕｌ． ２０１９ Ｖｏｌ．５４ Ｎｏ．４
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ｄｏｉ：１０．１３７０５／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１６８２５．２０１８．１１．０５４
右美托咪定对 ＰＣ１２细胞氧糖剥夺损伤的保护作用
汪业铭１），李树铁２），高 艳１），赵继波１），李媛莉２），冯腾尘１）
ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｏｎＰ１２ｃｅｌｌｓｆｏｌｌｏｗｉｎｇｏｘｙｇｅｎｇｌｕ ｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎｉｎｊｕｒｙ
ＷＡＮＧＹｅｍｉｎｇ１），ＬＩＳｈｕｔｉｅ２），ＧＡＯ Ｙａｎ１），ＺＨＡＯ Ｊｉｂｏ１），ＬＩＹｕａｎｌｉ２），ＦＥＮＧＴｅｎｇｃｈｅｎ１） １）ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＡｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＨｅｂｅｉＮｏｒｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｚｈａｎｇｊｉａｋｏｕ，Ｈｅｂｅｉ ０７５０００ ２）ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｒｉｔｉｃａｌＣａｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌ，ＨｅｂｅｉＮｏｒｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｚｈａｎｇｊｉａｋｏｕ，Ｈｅｂｅｉ０７５０００
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ ｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ；ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ；ＰＣ１２ｃｅｌｌ；ｏｘｙｇｅｎｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎｉｎｊｕｒｙ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ａｉｍ：Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｏｎｎｅｕｒｏｎａｌｏｘｙｇｅｎｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉ ｖａｔｉｏｎ（ＯＧＤ）ｉｎｊｕｒｙ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＯＧＤ ｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｉｎｄｕｃｉｎｇＰＣ１２ｃｅｌｌｓｉｎｊｕｒｙｂｙｈｙｐｏｘｉａａｎｄｈｙｐｏｇｌｙｃｅｍｉａ． ＴｈｅｃｅｌｌｓｄａｍａｇｅｄｂｙＯＧＤ ｗｅｒｅｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｌｏｗ，ｍｅｄｉｕｍａｎｄｈｉｇｈｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｓｏｆｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅ，ｓｏｌｖｅｎｔ ｇｒｏｕｐａｎｄｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｕｌｔｕｒｅｄｃｅｌｌｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．ＣｅｌｌｖｉａｂｉｌｉｔｙｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＭＴＴ ａｓｓａｙ．Ｔｈｅｒｅｌｅａｓｅｏｆｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ（ＬＤＨ） ａｎｄｍａｌｏｎｄｉａｌｄｅｈｙｄｅ（ＭＤＡ） ｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｔｈｅｋｉｔ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＡｎｎｅｘｉｎⅤ ＦＩＴＣ／ＰＩｓｔａｉｎｉｎｇ．ＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３，ｔ ＡＫＴａｎｄｐＡＫＴｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｔｈｅＬＤＨ ｒｅｌｅａｓｅａｎｄＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ａｎｄｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅ，ａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆＣｌｅａｖｅｄ Ｃａｓｐａｓｅ３ａｎｄｐＡＫＴｐｒｏｔｅｉｎｓｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ．（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉ ｄｉｎｅｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄｃｅｌｌｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅ，ｄｅｃｒｅａｓｅｄＬＤＨ ｒｅｌｅａｓｅａｎｄＭＤＡ ｃｏｎｔｅｎｔ，ａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣｌｅａｖｅｄ Ｃａｓｐａｓｅ３ａｎｄｐＡＫＴｐｒｏｔｅｉｎｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｄｅｘｍｅｄｅｔｏｍｉｄｉｎｅｍａｙｐｒｏｔｅｃｔｏｘｙｇｅｎｇｌｕｃｏｓｅｄｅｐｒｉｖａｔｉｏｎｉｎｊｕｒｙ ｎｅｕｒａｌｃｅｌｌｓｂｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＰＩ３Ｋ／ＡＫＴｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ．
１）河北北方学院附属第一医院麻醉科 河北张科 河北张家口 ０７５０００
关 键 词 右 美 托 咪 定 ；ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信 号 通 路 ；ＰＣ１２细 胞 ；氧 糖 剥 夺 损 伤 中 图 分 类 号 Ｒ５４３．２ 摘要 目的：研究右美托咪定对 ＰＣ１２细胞氧糖剥夺（ＯＧＤ）损伤的保护作用及机制。方法：采用缺氧缺糖 诱 导 ＰＣ１２细胞损伤建立 ＯＧＤ损伤细胞模型，将 ＯＧＤ损伤的细胞分为右美托咪定低、中、高浓度组，溶剂组及模型 组，并 将正常培养的细胞作为正常对照组。各组 细 胞 处 理 后 采 用 ＭＴＴ法 检 测 细 胞 存 活 率，相 应 试 剂 盒 分 别 检 测 乳 酸 脱 氢酶（ＬＤＨ）释放量和丙二醛（ＭＤＡ）含量，ＡｎｎｅｘｉｎⅤＦＩＴＣ／ＰＩ双 染 法 检 测 细 胞 凋 亡 率，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检 测 各 组 细 胞 中 ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３和 ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号通路相 关 蛋 白 总 ＡＫＴ（ｔＡＫＴ）、磷 酸 化 的 ＡＫＴ（ｐＡＫＴ）蛋 白 表 达 水 平。 结 果：与正常对照组相 比，模 型 组 细 胞 存 活 率 降 低，而 上 清 中 ＬＤＨ 释 放 量 和 ＭＤＡ含 量 增 多，细 胞 凋 亡 率、Ｃｌｅａｖｅｄ Ｃａｓｐａｓｅ３和 ｐＡＫＴ蛋白表达水平升高（Ｐ＜０．０５）。与模型组相比，右美托咪定 能 够 上 调 细 胞 存 活 率，降 低 ＬＤＨ释 放量和 ＭＤＡ含量，抑制 ＣｌｅａｖｅｄＣａｓｐａｓｅ３和 ｐＡＫＴ蛋 白 表 达 水 平 （Ｐ＜０．０５）。 结 论：右 美 托 咪 定 可 能 通 过 抑 制 ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信 号 通 路 的 活 化 对 氧 糖 剥 夺 损 伤 神 经 细 胞 发 挥 保 护 作 用 。