电化学免疫分析法研究进展
化学发光免疫分析法研究进展
( Na t i o n a l I n s i t t u t e o f Di a g n o s i t c s a n d Va c c i n e De v e l o p me n t i n I n f e c i t o u s Di s e a s e s , Xi a me n Un i v e r s i t y,Xi a me n ,
动检测体 系并不被 市场所 完全认 可 , 并且性 能上有待进一 步的提高。 为此 , 《 分子诊断与治疗杂志》 特地设 置 国 内化 学发光试剂研 究专刊 , 报道 国产全 自动化 学发光免 疫检测 系统的最新研 究 , 以提 高大家对 于国
产 产 品 的 认 识 和 重视 , 推 动 国产 化 学发 光免 疫检 测 产 业 的发 展 和提 升 市 场 可接 受程 度 。
化学发光免疫分析法研究进展
陆龙飞 葛胜祥
【 摘
张军
要 ] 化学 发光 免疫 分析 法 ( c h e mi l u m i n e s c e n c e i mmu n o a s s a y, C L I A) 是 一种高 灵敏 度高 特异性
的检测 分析技 术 具 有广 泛的应用 领域 。本 文简要 介绍 了化 学发光免疫 分析法 的分类 、 发展和应 用 , 重 点
目前 国 内多数 免 疫诊 断 企 业 包括 上 海 科 华 、 北 京 万泰 、 郑 州安 图 、 广 州达 安 和 达 瑞 、 深 圳 新 产 业 等 均 陆 续研 发 全 自动化 学发 光 免 疫检 测 系统 及 其 配 套试 剂 , 部 分厂 家仪 器 和试 剂 已上 市销 售 。同时 , 国家也 在 该 领 域 设 立 了相 应 的课 题 以支持 国产 全 自动 化 学发 光 免 疫 检 测 技 术 的 发展 。 然 而 , 目前 上 市 的 国产 全 自
电化学发光免疫分析技术(ECLIA)定量检测乙型肝炎病毒表面抗体(抗-HBs)的临床价值
电化学发光免疫分析技术 (ECLIA)定量检测乙型肝炎病毒表面抗体 (抗 -HBs)的临床价值【摘要】目的探讨分析对乙型肝炎病毒表面抗体采用电化学发光免疫技术进行定量检测的作用。
方法本次临床研究选取2018年12月到2020年12月期间在我院接受治疗的200例乙型肝炎病毒患者作为研究对象,全部患者均已得到确诊。
对全部患者通过电化学发光免疫技术对乙型肝炎病毒表面抗体进行定量检测,获取对患者的检测结果,然后与确诊结果进行对比。
结果电化学发光免疫技术的检查结果与确诊结果对比,符合率无显著差异(P>0.05)结论根据本次研究的结果可以确认,通过电化学发光免疫技术对乙型肝炎病毒表面抗体进行定量检测的效果十分理想,不仅可以将其用于对患者的诊断工作,还可以为开展对患者的治疗工作提供重要的数据参考。
【关键词】乙型肝炎病毒表面抗体;电化学发光免疫技术;定量检测;检测效果;对比分析[Abstract] Objective To explore the role of electrochemiluminescence immunoassay in the quantitative detection of hepatitis B virus surface antibody. Methods in this clinical study, 200 patients with hepatitis B virus treated in our hospital from December 2018 to December 2020 were selected as the research objects, and all patients were diagnosed. All patients were quantitatively detected by electrochemiluminescence immunoassay technology for hepatitis B virus surface antibody, and the detection results of patients were obtained, and then compared with the diagnosis results. Results there was no significant difference in the coincidence ratebetween the results of ecli and the diagnosis (P > 0.05) According to the results of this study, it can be confirmed that the effect of quantitative detection of hepatitis B virus surface antibody by electrochemiluminescence immunoassay is very ideal, which can not only be used for the diagnosis of patients, but also provide important data reference for the treatment of patients.[Key words] hepatitis B virus surface antibody; electrochemiluminescence immunoassay; quantitative detection;detection effect; comparative analysis乙型肝炎作为一种临床上比较常见的传染性疾病,该病对人类的生命健康有着十分巨大的威胁。
评价电化学发光免疫分析法(ECLIA)在梅毒检测中的应用效果
评价电化学发光免疫分析法 (ECLIA)在梅毒检测中的应用效果【摘要】目的探讨电化学发光免疫分析法(ECLIA)在梅毒检测中的应用效果。
方法梅毒患者血清标本51例和非梅毒患者血清样本91例,运用电化学发光免疫分析法和毒螺旋体抗体(ELISA)进行检测,对比敏感度、特异性和准确性。
结果电化学发光免疫与毒螺旋体抗体的敏感度为100%、98.04%,而特异性98.90%、100%,对比两方法差异无统计学意义(P>0.05)。
ECLIA方法在敏感性方面高于ELISA方法。
结论 ECLIA用于梅毒检测中,有着很高的敏感度,有着较高的特异性,且准确性也很高,在进行梅毒检测的时候,操作上比较的简便,能够进行快速的检测,结果较为客观,有着较好的重复性等。
【关键词】电化学发光免疫分析法;梅毒检测;诊断梅毒是一种慢性全身性性传播疾病,该疾病的引发主要由苍白密螺旋体苍白亚种感染造成的,梅毒的传染性非常强,能够对全身各器官进行侵犯,对多器官造成损害,对人们的身心健康造成严重的影响。
近年来我国梅毒的发病率呈现攀升的趋势[1]。
但部分梅毒感染者由于有着较长的潜伏期而没有明显的症状,难以及早地发现,若是没有得到有效的治疗,容易引发严重的并发症。
在对梅毒进行诊断的时候,梅毒血清检测是重要的指标。
选择敏感性高、特异性高、准确性高的检测方法,能够使筛查和诊断更加的快速、准确,从而符合检测机构的要求,这显得十分的重要。
本文对梅毒检测中使用的电化学发光免疫分析法进行了研究,现报告如下。
1资料和方法1.1一般资料将2019年5月-2020年8月收治的经过病史询问、临床症状分析、血清学试验诊断,确诊51例梅毒患者血清标本,91例非梅毒患者血清标本,样本年龄介于22至78岁之间,平均(40.11±3.57)岁。
1.2 方法使用E601电化学发光免疫分析仪,还有与之相配的梅毒检测试剂,通过化学发光免疫来对苍白密螺旋抗体机械能检测苍。
电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析
电化学发光免疫分析及其在临床检验中的应用分析苏东梅【摘要】目的:探讨电化学发光免疫分析及在临床检验中的应用效果。
方法指定一名具有专业知识及丰富经验的临床实验室检验人员分别利用ECLIA、ELISA等方法完成100例乙肝患者血样中乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)检验。
记录两种方法检测抗-HBc阳性率,给予统计学分析后得出结论。
结果ECLIA法检测100例乙肝患者血样中抗-HBc阳性率高达98.00%,显著高于ELISA法检测阳性率81.00%,对比结果具有统计学意义(P<0.05)。
结论电化学发光免疫分析方法可显著提高临床检验结果准确性,为临床医生提供真实可靠的诊断依据,使患者及时确诊病情并获得正确治疗,保障其临床疗效及预后。
%Objective To explore the electrochemiluminescence immunoassay and the application effect in clinical examination. Methods A clinical laboratory staff with professional knowledge and rich experience was specified, using ECLIA, ELISA respectively(anti-HBc)test completed 100 cases of hepatitis B blood samples of patients with hepatitis B virus core antibody. The positive rate of anti–HBc of the two methods was detected and record, gives statistical analysis conclusion. Results The positive rate of anti-HBc ECLIA was up to 98%in 100 cases of hepatitis B patients, it was significantly higher than those of detected by ELISA(81%), comparison of the results was statistical significance(P<0.05). Conclusion Electrochemiluminescence immunoassay method can significantly improve the accuracy of clinical test results, provide the reliable basis for the diagnosis for clinicians, enable patients totimely diagnose the disease and get the correct treatment, ensure the therapeutic effect and prognosis.【期刊名称】《中国医药科学》【年(卷),期】2014(000)023【总页数】3页(P102-103,156)【关键词】电化学发光免疫分析;临床检验;应用效果【作者】苏东梅【作者单位】广东省茂名市中医院检验科,广东茂名525000【正文语种】中文【中图分类】R446.6电化学发光免疫分析(electro-chemiluminescence immunoassay,ECLIA)是近年来于临床推广使用的新型标记免疫测定技术,特点为检测速度快、易于控制、灵敏度较高等[1-3]。
电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用研究
电化学发光免疫分析方法及其在医学中的应用研究目的:分析电化学发光免疫分析的方法和医学中的应用情况。
方法:对AFP 含量进行电化学发光免疫分析与放射免疫分析,做出线性评价、精密度评价与回收实验,并进行对比,运用两种方法对60例患者血清标本的AFP含量进行平行检测,然后进行相关性分析。
结果:电化学发光免疫分析法的重复率明显优于放射免疫分析。
电化学发光免疫分析法的回收率明显优于放射免疫分析。
数据差异具有统计学意义(P<0.05)。
结论:电化学发光免疫检测血清甲胎蛋白的精确度与准确性都要优于放射免疫分析法,值得临床推广与运用。
标签:电化学发光免疫;临床运用;放射免疫;检验电化学发光免疫分析出现于自20世纪90年代,是一类化学发光免疫分析技术,集纳米微粒子技术、电子发光技术、抗原-抗体免疫反应、生物素-亲和素系统以及电磁场分离整合设计的自动化标记免疫分析系统,结合了电化学发光与免疫测定,具有化学发光与电化学两个过程,磁珠微球当做固相载体,发光物质为三氯联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+,电极进行激发,三丙胺参与循环反应,稳定快速的发光,检测的结果可靠、稳定,具有的准确度与精密度要高于酶联免疫法[1]。
发光检测灵敏度高,不具有人为操作误差的影响。
1材料与方法1.1材料选取60例患者血清标本,18份标本血清甲胎蛋白浓度正常,42份标本血清甲胎蛋白的浓度超出正常的范围。
通过Roche Elecsys2010全自动化学发光免疫分析仪器与SN-697型自动双探头放射免疫γ计数器进行检验。
1.2方法放射免疫分析法运用甲胎蛋白宽范围放射免疫分析测定盒,电化学发光免疫分析运用的检测试剂为Elecsys2010配套AFP定量检测试剂盒,按照试剂说明书进行检测操作。
2结果2.1 通过NCCLS精密度评价方案,运用电化学发光免疫分析与放射免疫分析法对高浓度、中浓度、低浓度的血清甲胎蛋白质控血清作重复性实验。
实验结果显示,电化学发光免疫分析与放射免疫分析法都具有较好的重复性,而电化学发光免疫分析的CV值对比放射免疫分析法相对较小。
电化学发光免疫分析法在糖尿病疾病临床检验中的应用效果研究
电化学发光免疫分析法在糖尿病疾病临床检验中的应用效果研究发布时间:2022-07-29T12:11:53.766Z 来源:《中国医学人文》2022年3月3期作者:赵杰[导读]赵杰(眉山市中医医院;四川眉山620010)摘要:目的:研究电化学发光免疫分析法在糖尿病疾病临床检验中的应用效果。
方法:从2020年1月至2021年2月在我院诊治的糖尿病患者中随机选取52例,将其列为观察组,再选取同期在我院体检的健康人52名,将其列为对照组,对其均采用电化学发光免疫分析法进行胰岛素(空腹胰岛素、餐后2h胰岛素)、C肽水平(空腹C肽水平、餐后2hC肽水平)检测,采用葡萄糖氧化酶法进行血糖水平(空腹血糖、餐后2h血糖)检测,比较两组结果。
结果:与对照组相比较,观察组血糖水平、胰岛素、C肽水平均更高,差异有统计学意义(P<0.05)。
结论:对糖尿病患者实施临床检验时,采用电化学发光免疫分析法,准确率比较高,并且诊断操作简单,有较高的推广价值。
关键词:电化学发光免疫分析法;葡萄糖氧化酶法;糖尿病疾病;临床检验Abstract: Objective: To study the application effect of electrochemiluminescence immunoassay in the clinical examination of diabetes diseases.Methods: from January 2020 to February 2021 in our diagnosis and treatment of diabetes patients of randomly selected 52 cases, will be listed as observation group, then select the same period in our medical health 52, using electrochemiluminescence immunometry for insulin (fasting insulin, insulin), C peptide level (fasting C peptide level, 2h C peptide level), glucose oxidase (fasting blood glucose, 2h glucose), compare the results of the two groups.Results: Compared with the control group, insulin and C peptide were higher (P <0.05).Conclusion: When implementing clinical test for diabetic patients, electrochemiluminescence immunoassay is used with high accuracy and simple diagnostic operation, with high promotion value. Key words: electrochemiluminescence immunoassay; glucose oxidase method; diabetes disease; clinical test糖尿病疾病在临床上比较常见,如果为能及时接受有效的治疗,极易引发多种并发症,对患者的脏器器官造成损伤,严重的威胁着患者的生活质量。
磁珠载体-电化学免疫分析研究进展
磁珠载体-电化学免疫分析研究进展康怀彬,马红燕,李芳,陈俊亮,张瑞华,邹良亮 (河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳 471003)摘要:磁珠不仅拥有巨大的比表面积和高效的分散能力,而且在其表面可以形成牢固的免疫复合物;同时利用磁珠的超顺磁性可以快速的将其分离,样品前处理简单,不需要预浓缩、净化等复杂工序就可以实现对目标物的快速检测。
此外,电化学分析技术具有超高的灵敏度,因此将磁珠与电化学免疫分析技术相结合,利用两者的优点则给人们提供了一种新的检测思路。
目前,该领域研究活跃,并取得了重要研究进展,开发出了灵敏度高、检测速度快、简便易用的微型电化学免疫检测系统,可以用于食品检测、环境评估和临床诊断等领域。
本文介绍了以磁珠为固相载体的电化学免疫分析技术的最新研究进展,特别是从磁电极免疫分析、基于旋转圆盘电极的免疫分析、酶标记免疫磁珠分析和纳米粒子标记免疫磁珠分析四个方面进行具体论述,并对该领域的发展前景做了展望。
关键词:磁珠;电化学免疫分析;酶标记;纳米粒子标记文章篇号:1673-9078(2016)9-314-323 DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2016.9.045Research Progress on Magnetic Microbead-based ElectrochemicalImmunoassaysKANG Huai-bin, MA Hong-yan, LI Fang, CHEN Jun-liang, ZHANG Rui-hua, ZOU Liang-liang(College of Food and Bioengineering, Henan University of Science and Technology, Luoyang 471003, China)Abstract: Magnetic microbeads, which possess a huge specific surface area and high dispersion capability, can capture biomolecules and form stable immune complexes that can be rapidly separated as a result of the superparamagnetism of the magnetic microbeads. The sample pretreatment is simple, and the target compounds can be rapidly detected without complex pretreatment steps such as pre-concentration or purification. Moreover, because the electrochemical analysis technique is ultrasensitive, its coupling with magnetic microbeads provides a novel detection system. In recent years, active research programs have been undertaken in this field and important progress has been achieved. Miniaturized electrochemical immunoassay systems with high sensitivity, rapid detection, and simple operation have been developed and can be used in food analysis, environmental evaluation, clinical diagnostics, etc. In this review, the most recent research progresses in electrochemical immunoassay technology using magnetic microbeads as a solid phase are summarized, especially in terms of immunoassays using magnetic electrodes, immunoassays in a droplet using a rotating disk electrode, and magnetic-microbead-based immunoassays using enzyme labels and nanoparticle tags. Additionally, the future work in this field is discussed.Key words: magnetic microbead; electrochemical immunoassay; enzyme label; nanoparticle tag免疫分析是基于抗体和抗原间的特异性结合而建立起来的,在临床诊断、环境分析和食品检测领域已成为一种非常重要的分析方法。
电化学发光免疫检测技术研究进展.
DO I :10.3724/S P.J .1096.2010.01219电化学发光免疫检测技术研究进展张军瑞1,2 陈健*1 刘仲明21(华南理工大学轻工与食品学院,广州510640 2(广州军区广州总医院医学实验科,广州510010摘要本文介绍了电化学发光的发展状况和最新研究方向,综述了近年来电化学发光免疫检测技术的应用和研究进展,并展望了电化学发光免疫检测技术的发展前景。
关键词电化学发光免疫检测;抗原;抗体;综述2009 12 17收稿;2010 03 12接受本文系国家科技支撑计划(N o .2006BAD27B04资助*E m ai:l fejc h en @scu t .edu .cn 1 引言免疫检测法具有快速、灵敏、选择性好等特点,被广泛应用于临床诊断、法医学、药物学和环境科学等领域[1~6]。
近年来,随着对免疫传感器的深入研究,发展了多种检测技术,包括电化学、光学、压电检测、放射免疫分析法和电化学发光检测法等[7~12]。
其中较常用的放射免疫分析法涉及环境污染问题,酶免疫分析法受到酶保存和检测灵敏度的限制;时间分辨荧光免疫法有光的散射和杂光的干扰等问题,限制了其在免疫方面的应用。
电化学发光是一种由于电化学反应引起的化学发光现象。
1960年,研究者初次详细报道了红荧烯和类缘化合物电化学发光[13~15],近年来也发表了多篇关于电化学发光的综述[16~25]。
电化学发光因检测范围宽、灵敏度高、信号干扰低、操作简单等优点已在免疫检测领域得到广泛应用[26~30]。
2 电化学发光免疫检测的研究2.1 鲁米诺及其衍生物做标记2.1.1 鲁米诺及其衍生物电化学发光的研究鲁米诺在一定条件下可被一些氧化剂氧化,发生化学发光反应,辐射出最大发射波长为425n m 的化学发光。
鲁米诺的衍生物主要有异鲁米诺、4 氨基已基 N 乙基异鲁米诺、N (4 氨基已基 N 乙基异鲁米诺(AHE I和N (4 氨基丁基 N 乙基异鲁米诺(ABE I等。
固定化联吡啶钌电化学发光免疫分析研究进展
21 0 2年 3月
化
学 研
究
中 国科 技 核 心 期 刊
h y@ h n . d . n xj eu e u c
CH EM I L RESEA RCH CA
固定 化 联 吡 啶 钌 电 化 学 发 光 免 疫 分 析 研 究 进 展
陈 , 捷¨ , 然 。王 刘仲明 , 钰 陈
( .广 州 军 区 广 州 总 医 院 医学 实 验 科 , 东 广 州 50 1 ; 2 1 广 10 0 .华 南 理 工 大 学 生 物 科 学 与 工 程 学 院 , 东 广 州 5 0 0 ) 广 1 0 6
摘
要 : 述 了 固定 化 联 吡 啶钌 [ u b y ̄ 电 化 学 发 光 免 疫 传 感 技 术 的 发 展 状 况 , 绍 了 近 年 来 在 电 化 学 发 综 R ( p ) ] 介
p a m a e t a n l ss a d c i i ig o i ,a d t e e e t o h mi mi e c n e o h r c u i l a y i n l c d a n ss n h lc r c e l c a n u n s e e fRu( p ) b y a z h s a t a t d a g e td a fi t r s .P r i u a l a tr c e r a e l n e e t a tc l ry,i o mm o i z d Ru b bl e ( i
Gu ng h u 5 0 0 a z o 1 0 6,Gu n o g, C n a gd n hi a)
Ab t a t s r c :A e i w s g v n o h e e r h p o r s fi r ve i i e ft e r s a c r g e so mmo i z d t i ( . b p rd 1 r t e b l e rs 2 2 一 i y i y ) u h — i
免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展
免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展免疫学检验是依据免疫学原理,尤其是抗原与抗体反应原理,利用各种敏感的标记、示踪技术,超微量地、特异地分析检测各种生理的和病理的免疫学指标,包括体液的(抗体、细胞因子等)和细胞的(各种效应细胞),进行疾病的诊断、疗效的评估和预后判断的一组医学检验项目[1]。
因此,免疫学检验是构筑基础免疫学与临床免疫学之间的桥梁,是临床医生借以研究疾病的技术手段。
但是由于免疫反应的特殊性及复杂性使许多试验技术操作繁杂、耗时,难以适应临床诊断、治疗的需要。
近年来随着生物和生命科学的迅猛发展,操作的自动化以及新技术新材料的应用,为免疫学快速检验技术的发展带来了新的契机,极大地促进了免疫技术的发展与更新。
现就免疫学检验中的快速检测技术应用与进展作一简要综述。
1 传统的免疫学快速检验技术传统的免疫学检验即血清学试验,主要是通过观察沉淀物的形成、扩散、凝集及溶血现象的发生以及测定来分析待测样品中抗原或抗体的有无及含量,如沉淀反应、凝集反应、溶血反应、中和反应及补体结合反应等。
这些检测方法均为手工操作,大都操作步骤烦琐,需时较长。
而其中的快速检验技术有代表性的当属传统的梅毒快速诊断试验。
1.1 快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) RPR是20世纪80年代问世的非特异性梅毒血清学试验。
RPR法检测血清中非特异性抗体即反应素。
所用抗原为标准的牛心肌脂抗原,抗原中加有活性炭颗粒,检测时直接将试剂与血浆(或血清)在卡片上混匀,摇动8分钟观察结果。
该方法操作简便、迅速、结果容易判定。
RPR滴度变化是观察治疗效果、复发、或再感染的重要指标[2]。
但其特异性较差,孕妇、疟疾、乙肝、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等疾病时可出现生物学假阳性反应,因此阳性结果常需要做确证试验后最后诊断。
1.2 甲胺苯红不加热血清反应素实验(TRUSR) 其原理与RPR相同,以甲胺苯红染料颗粒代替活性炭颗粒作为指示物,实验结果清晰易读,简便快速,稳定性好。
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析的原理电化学发光免疫分析(electrochemiluminescenceimmunoassay,简称ECLIA)是一种快速、准确、高灵敏度的新型生物分析技术,它主要用于检测抗体、抗原、药物、细胞因子以及其他生物分子,在临床医学和农业生物学中得到广泛应用。
原理ECLIA的原理是利用免疫反应原理检测抗体和抗原的相互作用。
首先,将待检样品和相应抗体在被探针载体上分子结合,形成抗原-抗体复合物,探针载体上的抗原结合的抗体称作“特异性抗体”,其包含一种特异性的发光活性物质;然后,使用适当的电化学方法,将抗原-抗体复合物中的发光活性物质进行电化学激活,使其发出可测量的电化学信号,从而实现抗体和抗原的检测。
ECLIA的特点ECLIA技术具有很好的灵敏度,可以快速准确地检测到极低的抗体和抗原;它的发光信号可以动态检测,可以测定蛋白质结构的动态变化;它还具有操作简便、反应迅速、耗费低廉等特点,使它成为当前应用最为广泛的生物分析技术之一。
应用ECLIA技术已经在临床医学和农业生物学中得到广泛应用,例如:检测慢性病如糖尿病、肝炎、HIV感染、癌症以及其他疾病的抗原、抗体或其他生物标记物;在农业上,可以用来检测农作物的病原体和有害物质,以及动物的有害营养物质的精确浓度;同时,它可以用来检测药物的浓度、活性物质的含量和活性程度等。
结论ECLIA技术是一种快速、准确、高灵敏度的新型生物分析技术,已经在临床医学和农业生物学中得到广泛应用。
ECLIA的原理是利用免疫反应原理检测抗原和抗体的相互作用,使用适当的电化学方法,将抗原和抗体复合物中的发光活性物质进行电化学激活,使其发出可测量的电化学信号,从而实现抗原和抗体的检测。
ECLIA技术在临床医学和农业生物学中具有重要的应用价值,相信在不久的将来ECLIA 技术将成为现代生物分析技术的主流。
化学发光免疫分析技术的研究现状与展望
3 第 3代 : 在 2 纪 8 . 早 O世 O年 代 中期 , 内外 学 者 的 实 验 国 结 果 显 示 , 啶酯 衍 生物 是 理 想 的 直 接 标 记 抗 体 或 抗 原 的发 光 吖
李振 甲 应 希 堂 马世 俊 ,
【 关键词】 化学发光测定法 ; 免疫测定 ; 放射免疫测定
近 l O多年 来 , 当代 生 物 技 术 的研 究 和应 用 取 得 高 速 发 展 的 同时 ,也 大 大 推 动 了 化 学 发 光 免 疫 分 析 方 法 ( hmi m — ce l i u 这一方法称 之为“ 强 发光 酶免 疫 分析” 增 。Ames a 公 司虽 rh m
广泛应用 到基础和 临床 医学 的各 领域 , 为取代 R A的 首选 成 I
技术 。
技术 、 生物素一 亲和素 系统、 原一 体免疫 反应 、 抗 抗 电磁场 分离 整
合 为一 体 而设 计 的 一种 自动 化 标 记 免 疫 分析 系统 。 目前 国 内 引 进 的 R ce 司产 品 E L代 表 当 代 E IA 自动 分 析 系 统 。主 oh 公 C LC 要特 点 是 本底 信 号 极微 , 异性 更 高 , 小检 出值 可 < lmo, 特 最 p l 操
踪物信号建 立起 来 的 一种 非放 射 标 记 免疫 分析 法 。早 期 的
C I 具 有 和 R A 相 似 的 特 异 性 , 灵 敏 度 低 于 R A, 1 7 EA I 但 I 98
年, 自从 Hal n 功 地 建 立 了 C I 以来 , 历近 2 hi . a成 LA 经 O年 , 过 经
电化学发光免疫分析的原理
电化学发光免疫分析的原理化学发光(Electrochemiluminescence,ECL)免疫分析技术属于毗邻双重抗原识别(sandwich)免疫分析技术之一,它是一种高敏感、高灵敏度和自动化的免疫分析方法,它可以通过细胞内标记的抗原分子检测活性过程中的特异性结合反应来测定抗体和抗原的相互作用,从而准确可靠地测定抗原的存在量及其水平。
由于它具有极高的灵敏度,可以在超低浓度的抗原水平上得到检测结果,因此,它在免疫检测方面受到越来越多的关注。
在这篇文章中,我们将探讨一下电化学发光免疫分析的原理以及其在实际应用中的优势。
电化学发光免疫分析原理是这样的:首先,将抗原和特异抗体混合,其中抗原与抗体之间形成特异性双重抗原识别复合物;其次,在上清液中加入发光标记的抗体,此抗体与双重受体复合物形成特异性三重抗原识别复合物;最后,将上清液接触到电极上,将产生的离子流动到电位活化的族金属标记的抗体上,使抗体电极活化,产生发光反应,从而测定抗原的存在量。
电化学发光免疫分析具有诸多优势,首先它具有极高的灵敏度。
它可以检测非常低浓度的抗原,其灵敏度比传统的比色测定法要高出3到4个数量级,因此在检测低抗原水平时可以节省大量时间;其次,它操作简单快速,实验步骤短暂,耗时比其他免疫分析技术短;第三,它能够高效、安全地检测抗原,准确可靠,且可视化的检测过程具有很强的稳定性和可重复性。
电化学发光免疫分析技术已广泛用于医学、生物、食品安全和环境监测等领域。
例如,它可用于检测血清中癌抗原、血清素、抗体、病毒抗原等;它可以用于检测食物中的变质抗原、有毒物质、细菌等;它可以用于环境样品中有毒物质的检测,如重金属、氯代烃等有害物质。
以上就是电化学发光免疫分析的原理以及它在实际应用中的优势。
它的灵敏度极高,操作快速,可靠精准,能够准确有效地检测抗原,被广泛应用于许多领域,是近年来进行免疫检测的重要技术手段。
基于功能化脂质体的高灵敏光电化学免疫分析方法
光电化学免疫分析方法的应用
生物分子检测
食品安全检测
光电化学免疫分析方法可用于检测生 物分子,如蛋白质、激素、细胞因子 等,在疾病诊断、药物研发等领域具 有广泛的应用价值。
光电化学免疫分析方法可用于检测食 品中的有害物质,如农药残留、添加 剂等,保障食品安全。
环境污染物检测
光电化学免疫分析方法也可用于检测 环境中的污染物,如重金属、有机污 染物等,对于环境监测和保护具有重 要意义。
基于功能化脂质体的高灵敏 光电化学免疫分析方法
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目录
• 引言 • 功能化脂质体的制备与表征 • 光电化学免疫分析方法概述 • 基于功能化脂质体的高灵敏光
电化学免疫分析方法的设计与 实现
目录
• 基于功能化脂质体的高灵敏光 电化学免疫分析方法的性能评 价
• 结论与展望
01
引言
背景与意义
未来还可以将该方法应用于临床诊断 、药物研发和环境监测等领域,为相 关领域的研究和应用提供新的思路和 方法。
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04
基于功能化脂质体的高灵敏光 电化学免疫分析方法的设计与 实现
功能化脂质体在光电化学免疫分析中的应用
功能性脂质体作为药物载体
通过在脂质体表面引入特定的功能性基团,可以实现对药物的高效负载和控释,提高药物 的疗效和降低副作用。
功能性脂质体作为生物传感器
脂质体具有较好的生物相容性和通透性,可以作为生物传感器的敏感膜,实现对生物分子 的高灵敏检测。
光电化学免疫分析方法的分类
直接光电化学免疫分析
直接光电化学免疫分析是将目标分析物与光电活性标记物直接结合,通过光电化学信号的转换实现对目标分析物 的定量检测。
免疫电化学检测技术
免疫电化学检测技术免疫电化学检测技术是一种利用电化学方法来检测免疫反应的技术。
免疫反应是人体在抵御外源性抗原侵袭时产生的一种具有高度特异性和高度敏感性的免疫应答。
通过检测体内特定抗原和相应的抗体的相互作用,可以对人体的免疫状态进行评估,从而达到诊断和治疗疾病的目的。
免疫电化学检测技术是在传统的免疫学方法的基础上发展而来的一种新型检测技术。
相比传统的免疫学方法,免疫电化学检测技术具有以下几个优势:首先,免疫电化学检测技术的检测灵敏度非常高。
电化学方法可以通过控制电势差和电流,对免疫反应过程中产生的电化学信号进行精确测量,并将之与待测物浓度进行定量分析。
这使得免疫电化学检测技术能够检测非常低浓度的抗原或抗体,对于疾病的早期诊断具有重要意义。
其次,免疫电化学检测技术的特异性非常高。
免疫电化学检测技术通常通过特异性标记抗体或抗原,并采用特定的电化学信号进行检测。
这种特异的标记和信号使得免疫电化学检测技术能够准确地区分待测物和其他干扰物,避免了误判的情况。
再次,免疫电化学检测技术的操作简便快捷,并且不需要复杂的仪器设备。
相比传统的免疫学方法,免疫电化学检测技术能够大大缩短检测时间,提高检测效率。
同时,由于不需要复杂的设备支持,免疫电化学检测技术更加适用于一些资源匮乏的地区和条件艰苦的情况。
最后,免疫电化学检测技术具有良好的可重复性和稳定性。
免疫电化学检测技术通常采用电化学方法来测量抗原或抗体的信号响应,这种电化学信号可以通过精确控制实验条件来获得稳定和可重复的结果。
这使得免疫电化学检测技术具有良好的实验准确性和可靠性,并且能够满足药物研发和临床检测的需求。
综上所述,免疫电化学检测技术是一种能够高灵敏、高特异地检测免疫反应的新型检测技术。
它具有操作简便、快速高效、特异度高以及可重复性和稳定性好等优势。
对于疾病的早期诊断和药物研发具有重要意义,并且在临床医学和生物医学研究中有广泛的应用前景。
电化学发光免疫分析方法及其应用
[ 1 ] 1 9 2 9 年电致化学发光现象由 H a r v e y 发现。2 0
免疫反应系统和电化学发光系统。免疫反应系统主 要是抗原抗体结合形成免疫复合物, 而电化学发光 系统是利用电化学发光物质经氧化剂氧化形成激发 态中间体, 这种中间体不稳定, 在其返回基态时, 会 发射出光子, 其产率可以用发光信号检测仪接收测 [ 4 ] 检测 量 。以钌标记物电化学发光免疫分析为例, 中以标记有链霉亲和素直径几微米的磁珠作为固相 载体, 与生物素标记抗原或抗体结合后可以捕获检 测样本中的抗体或抗原, 再与反应体系中钌分子标 记的抗抗体或抗体结合, 形成的免疫复合体在外磁 场的作用下, 借助磁珠的磁力吸附完成固液相分离, 截留特异性抗原 抗体复合体, 洗涤除去多余或游离 的抗体或抗原。当反应体系中加入电子供体三丙胺 后, 在电场作用下, 钌分子和三丙胺在电极表面分别 被氧化成三价钌和带阳离子的自由基三丙胺。后者 很不稳定, 迅速失去一个质子形成强还原剂自由基 三丙胺, 将三价钌分子还原成激发态的二价钌, 其自 身则被氧化成二丙胺和丙醛。接着激发态的钌分子 2 0n m的 衰减成基态钌分子, 同时放出一个波长为 6 [ 3 , 5 ] 光子 。这一过程在电极表面以每毫秒几十万次 的速度循环进行, 产生的光子经光电倍增管检测光 强度, 从而测出待检抗体或抗原的含量。
2 + 3 [ 7 ]
3 项肿瘤标志物糖类抗原1 5 3 ( c a n c e r a n t i g e n , C A 1 5 3 ) 、 糖类抗原1 2 5 ( c a n c e r a n t i g e n , C A 1 2 5 ) 、 癌胚抗原 c a r c i n o e m b r y o n i ca n t i g e n , C E A ) 的含量进行检测, 结 ( 果显示3 项指标联合检测的灵敏度和特异度分别为 9 0 . 7 6 % 和9 6 . 8 3 %, 优 于 单 项 检 测 时 的7 7 . 9 4 %和 8 9 . 5 7 %、 9 5 . 6 3 %和4 1 . 1 7 %、 3 8 . 2 3 %和9 3 . 9 1 %, 提示 用E C L I A联合检测能提高乳腺癌早期诊断和鉴别诊
罗氏电化学发光免疫分析总结
罗氏电化学发光免疫分析总结总结是在一段时间内对学习和工作生活等表现加以总结和概括的一种书面材料,它可使零星的、肤浅的、表面的感性认知上升到全面的、系统的、本质的理性认识上来,不如我们来制定一份总结吧。
总结怎么写才能发挥它的作用呢?以下是店铺为大家收集的罗氏电化学发光免疫分析总结,欢迎阅读与收藏!技术是罗氏公司开发的,但全自动机械制造却由日本的日立公司承担,所以仪器上还有Hitachi的标志。
这个仪器让大家吃惊的一大原因就在于一直在实验室研究的电致化学发光居然已经真正地产业化了,其中我们一直无法解决的诸多问题(尤其是重现性)均已得到解答,看来罗氏的确花了不少心血开发这款仪器。
罗氏电化学发光免疫分析技术的性能特点——创新的技术,与众不同一、最先进的检测原理电化学发光免疫测定,是目前最先进的标记免疫测定技术,是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术,具有敏感、快速和稳定的.特点,在固相标记免疫测定中技术上居领先地位。
电化学发光(ECL)是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上是电化学和化学发光两个过程的完美结合。
电化学发光与普通化学发光的主要差异在于前者是电启动发光反应,循环及多次发光,后者是通过化合物混合启动发光反应,是单次瞬间发光。
因此ECL反应易精确控制,重复性极好。
电化学发光免疫测定是电化学发光(ECL)和免疫测定相结合的产物,直接以[Ru(bpy)3]2+标记抗体,反应时标记物直接发光。
且[Ru(bpy)3]2+在电极表面的反应过程可以周而复始进行,产生许多光子,使光信号得以增强。
二、专利的包被技术链霉亲和素(streptoavidin,SA)和生物素(biotin,B)是具有很强的非共价相互作用的一对化合物,特异性强且结合紧密。
一分子SA可与四分子B相结合,增大了抗体结合量,达到放大效果。
在ECL的试剂中,SA通过特殊的蛋白结合物均匀牢固地包被在磁性微粒上,形成通用的能与B结合的固相载体,另一试剂为活化的B衍生物化合的抗原或抗体。
免疫检测技术的新进展
免疫检测技术的新进展免疫检测技术在医学领域中有着重要地位。
随着科技的发展,免疫检测技术也得到了快速发展和不断创新。
近年来,新兴免疫检测技术层出不穷,进一步完善了医学诊断和治疗的手段,对于各种病理情况的鉴定及治疗,均起到了重要的作用。
下面,就让我们来看看免疫检测技术的新进展。
一、免疫电化学检测技术免疫电化学检测技术是一种新型的免疫检测技术,主要应用于血液、尿液等体液的检测。
它采用了电极技术,使传统免疫学检测技术与电化学方法相结合,形成了一种全新的检测手段。
免疫电化学检测技术具有准确性高、灵敏度高、快速度、可重复性好和便于实现自动化等特点。
将这种技术进一步应用于临床医学,可以为疾病的快速检测和早期诊断提供重要的支持。
二、免疫芯片检测技术免疫芯片技术是指将一系列具有代表性的蛋白质或其他生物高分子固定在一个芯片上,采用多路同步检测的技术,同时检测多项指标,从而得到一些重要的生物信息的技术。
与传统的ELISA检测技术相比,免疫芯片技术的优势在于可以快速检测多个样本,同时能够得到更为详细的生物信息。
针对检测结果,医生可以根据不同的结果进行有针对性的调整,并制定出更为有效的治疗方案。
因此,免疫芯片技术对于癌症、肝病、心脏病等重大疾病的防治具有十分重要的意义。
三、免疫荧光检测技术免疫荧光检测技术主要是利用荧光探针来进行检测,通过掺银、增强荧光和利用荧光共振能量转移等方式,实现免疫荧光检测。
免疫荧光检测技术主要应用于分析生物分子、寻找分子、检测细胞、免疫组化等多领域,具有检测快、敏感度高、分辨率高等优点。
未来还可以将该技术应用到微纳米尺度分子结构的研究上,通过其高分辨率的成像能力实现对分子级别的精细研究。
四、免疫质谱技术免疫质谱技术是指将免疫学和质谱技术结合在一起,以检测分子量和一个或多个抗原结构的组成、化学性质和量,从而实现对生物活性物质的确定和鉴定的技术。
比如,将质谱技术用于细胞和蛋白质组研究方面,可以实现对细胞蛋白、膜蛋白的效应、对组成胞间且原的规律,以及确定蛋白结构和功能等研究。
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三、标记物
电化学免疫分析中,能够直接检测的抗原和抗体是不 多的,往往需要给抗原或抗体连接一个具有氧化还原 性能的标记物,以便采用电化学方法检测。
电化学免疫分析的标记物主要有两类:生物酶 及电化学活性物质
可用作电化学免疫分析的生物酶及反应体系必须满足以下条件: 1、酶具有高活性,可以在短时间内将大量底物分子转化为产物。 2、容易与抗体或抗原结合,且不降低活性。 3、在检测过程中和保存条件下稳定。 4、在测定条件下体系底物为非活性。 5、酶催化反应产物具有电化学活性
标记物 In(III) 乙酸汞 偶氮基 二硝基 二硝基苯基 二茂铁基
检测方法 阳极溶出伏安法 示差脉冲极谱 极谱 示差脉冲极谱 极谱 伏安法
四、电化学分析测定方法
电化学免疫分析法是用电化学分析技术测定用作标记
物的无机离子或有机功能基团或酶的标记物的催化反 应产物。因而,原则上各种电化学分析技术均可以作 为电化学免疫分析的检测手段.现在已用于电化学免 疫分析的电化学分析测定技术主要有离子选择性电极,
• Zhang Y,Heller A等人通过利用抗体的电化学 免疫分析法在7 pg/mL-100 ng/mL (40 fM-400 pM) 范围内对目标抗体与它的酶标记检测探 针非特定结合作了变形,它就是采用了夹心 反应模式,检测IgG的浓度近似到达7pg/mL , 其检测线达到了4个数量级。
引自 Anal Chem. 2005 Dec 1;77
异相反应和均相反应
异相分析:是指抗原抗体反应后,将结合物与游离抗原 (或抗体)及样品基体用常规物理方法分离,然后对 分离出的结合物进行敏度10-12g/ml;干扰少。
均相分析:不需将游离抗原与结合物分离,直接进行测 定。一般采用竞争反应进行。 特点:简化省时,适合于测定小分子化合物。灵敏度 10-9g/ml。
电化学免疫分析法研究进展
报告人: 李林林
目录
一、电化学免疫分析法发展 二、免疫方法 三、标记物 四、电化学检测技术
一、电化学免疫分析法
电化学免疫分析法(Electrochemical Immunoassay,ECIA) 是将免疫技术与电化学检测结合的一种免疫分析新方 法.1951年由Breyer和Radclic首次应用。他们用极普法 测了由偶氮标记的抗原. 随着电分析化学仪器及技术的发展,电化学免疫分析法
的标记抗原浓度是固定的,当样品中抗原含量越高时, 能够竞争结合在固相载体上的标记抗原越少,所以, 最终检测出的标记物含量与样品中抗原含量成反比关 系。
竞争反应的特点
竞争反应可一步完成,也可分布进行。 未标记和标记抗原同时加入,并使之反应达 平衡,称为平衡饱和法。 若分两步,首先加入样品抗原反应一定时间, 再用标记抗原进行饱和,称为分步饱和法。
安培法,极普法和伏安法,阳极溶出伏安法,电位溶出分
析法等。
根据所选用的标记物及分析对象具体的方法有:
液相色谱电化学免疫分析(LCECIA) 流动注射电化学免疫分析(FIAECIA) 伏安法和极谱法检测电化学免疫分析
电化学酶联免疫分析法
液相色谱电化学免疫分析(LCECIA)将色谱的高分离能力与 电化学检测的高灵敏度相结合,此方法对于未经分离被分析物和 样品基体的均相免疫分析尤其有效,经过一个短的色谱柱,便可将 酶催化产物的分析信号与样品基体的空白响应完全分开,如用碱 性磷酸酶做标记物,以磷酸苯酯为底物,用LC进行分离,以安培法 检测酶催化反应产物苯酚,其线性范围超过三个数量级(9.0×10-9 ~9.6×10-6 mol/L),检测线为1.0×10-9 mol/L. 流动注射电化学免疫分析(FIAECIA)具有高效率,低分析费用及 适用范围广的优点,已广泛应用于现代分析中. FIA本身不能改善 分析的选择性,但它很容易与高选择性的测定方法相结合,从而提 高测定的精密度,并极大的提高测定速度.现以用LCECIA和 FIAECIA分别测定了地谷新,苯妥英钠,茶碱,甲胎蛋白,人绒膜促 性腺激素等物质. LCECIA和FIAECIA是电化学免疫分析中最具吸引力的两种技 术.
以其崭新的内容及独特的优点得以迅速的发展,近十多
年来,电化学免疫分析发的研究有了迅速的发展。现 已有200余篇论文发表于全世界各种刊物.
二、电化学免疫分析法原理
免疫反应类型:竞争反应和夹心反应
免疫分析方法:异相反应和均相反应
竞争反应和夹心反应
竞争反应:
免疫分析中最基本的反应之一,其原理是基于标记 抗原(Ag*)和非标记抗原(Ag)共同竞争与抗体的 反应: Ag(样品)+ Ab = Ag-Ab Ag*(定量加入) +Ab = Ag*-Ab
葡萄糖氧化酶 GOD 葡萄糖-6-磷酸 脱氢酶 G-6-PDH 过氧化物酶
• 在这些酶中,最常用的是碱性磷酸酶(ALP) 和辣根过氧化物酶(HRP).磷酸苯酯和对氨基 磷酸苯酯可以用作ALP的底物,其酶催化产物 苯酚和对氨基苯酚以安培法或伏安法检测.邻 苯二胺、邻联茴香胺等可以用作HRP的底物, 在H2O2存在下酶催化氧化产生的偶氮产物以
极谱法或伏安法检测。
用作标记物的电化学活性物质为具有电化学 氧化还原性质的金属离子和电活性的有机功 能基团。金属离子通过螯合剂如二亚乙基三 胺五乙酸与抗原结合,经过酸化再释放出来, 可用电化学方法测定。许多有机活性功能基 团可以通过引进入抗原,从而进行电化学测 定。
可以作为免疫分析标记物的某些金属离子和 有机活性功能基团及它们的电化学检测列于 表中
竞争中,抗体和抗原的一种必须过量,以保 证高的灵敏度。
夹心反应原理
夹心反应:是将抗体、抗原和第二抗体结合在一起,
形成夹心式结合物。也称“三明治”式结合物。 分析时,第一抗体(Ab1)往往预先固化在载体上, 加入待测样品(抗原),让抗原和抗体反应而附在载 体上。然后,洗去游离抗原,加入已标记的第二抗体 (Ab2*),使之与抗原继续反应,在固相表面生成夹 心式结合物: Ab1+ Ag + Ab2* = Ab1-Ag-Ab2* 最终,检测夹心结合物上标记物,计算样品中抗原含 量。
反之,若对抗体进行标记,则标记和非标记抗体共 同竞争与抗原的反应
实际分析中,抗体和抗原的一种被固定在载体上,这 个过程在免疫分析中称为包被步骤。如上,抗体被包 被在固相载体上,当加入样品和一定量标记抗原后, 未标记抗原和标记抗原竞争结合与抗体所提供 的点位
上。然后,测定固相载体上的标记物含量。由于加入
表 电化学免疫分析中的酶标记物
酶 底物 检测物
碱性磷酸酶 ALP
辣根过氧化物酶 HRP
磷酸苯酯 对氨基磷酸苯酯
邻苯二胺、H2O2、I氢醌、 H2O2 对氟苯胺、 H2O2 林联茴香胺、 H2O2 葡萄糖、苯醌 葡萄糖、二茂铁 葡萄糖-6-磷酸、 NAD+ H2 O2
苯酚 对氨基苯酚
I苯醌 偶氮化合物 偶氮化合物 氢醌 二茂铁 NADH H2 O2