植物钙调磷酸酶CaN试剂盒使用说明书
植物(Plant)钙调素(CAM)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断植物（Plant）钙调素（CAM）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被钙调素（CAM）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙调素（CAM）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.样本不能含叠氮钠（NaN3），因为叠氮钠（NaN3）是辣根过氧化物酶（HRP）的抑制剂。
2.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行。
3.植物萃取液或其它相关样本：请1000x g离心20分钟，取上清即可检测。
4.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、10、20、40、80、160pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
人钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析 试剂盒说明书
人钙调磷酸酶(CaN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T1U/L–32U/L使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中钙调磷酸酶(CaN)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人钙调磷酸酶(CaN)水平。
用纯化的人钙调磷酸酶(CaN)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入钙调磷酸酶(CaN)，再与HRP标记的钙调磷酸酶(CaN)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙调磷酸酶(CaN)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人钙调磷酸酶(CaN)浓度。
试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品（64U/L）0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液 1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
32U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液16U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液8U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液4U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液2U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
钙调磷酸酶抑制剂
非器官特异性自身免疫病
多器官/组织
系统性红斑狼疮 类风湿性关节炎 干燥综合征
自身免疫性疾病
自身免疫病肾上腺细胞
脑/脊髓 眼 胃肠道
胃 小肠 大肠
心脏
肾/肺 肝脏
原发性肾上腺皮质萎缩 （Addson病）
多发性硬化 葡萄膜炎
恶性贫血 麦胶性肠病 溃疡性结肠炎和克隆氏病 心肌炎 风湿性心脏病 肾炎肺出血综合症 自身免疫性肝炎
钙调磷酸酶抑制剂
在移植免疫方面的研究方兴未艾,目前临床上应用 最多的是子囊霉素衍生物 环孢素A(cyclosporine A, CsA) 他克莫司(tacrolimus,FK506) 匹美莫司(pimecrolimus) 它们具有相似的理化 性质，作用机理和作用效果
免疫系统的三大功能
免疫功能
免疫防护 免疫自稳
3.狼疮肾炎 lupus nephritis ,LN
肾脏系统疾病
CsA Ⅳ型LN的疗效较好,有效率达90%
首剂量 : 5mg/(kg·d) 分2次口服, 维持3个月后每月减 量1 mg/(kg·d)至每天3mg/(kg·d)口服维持。
监测血药浓度: 开始200～400µg/L 维持治疗时100～200µg/L
初始量: 3-3.5mg·kg-1 ·d – 1 最大剂量: 5mg·kg-1 ·d - 1
一旦临床缓解, 应下调至最低有效量。单用 疗效不充分者可联用小剂量皮质激素。
胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)
胰岛素依赖型糖尿病多因胰岛B细胞自身免疫性破 坏所致. CsA可引起胰岛细胞抗体的消失, 似乎仅对胰 岛的损害起部分保护作用, 以减慢破坏过程, 但不能 防止破坏的发生.
给药方案: CsA+波尼松
CsA+波尼松+CTX
PH0711 磷酸酶抑制剂(50×) 操作手册
Phosphatase Inhibitor (50×)
货号：PH0711 规格： 1mL | 5mL 保存：-20℃保存
产品简介
磷酸酶抑制剂(50×)为多种磷酸酶抑制剂混合液，可有效抑制酪氨酸磷酸酶、丝氨酸磷酸酶、苏氨酸磷酸酶、酸性和碱性磷 酸酶等各种磷酸酶。适用于动物细胞或组织蛋白的提取，能最大程度地保持蛋白质磷酸化，常用于动物细胞或组织中蛋白激 酶活性和信号传导的研究。该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
使用说明
按照缓冲液：磷酸酶抑制剂(50×)=49:1 的比例，配制 1×的含磷酸酶抑制剂的工作液， 或者直接把磷酸酶抑制剂加入所需 工作液中反复冻融的次数，以免失效。
（2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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Enzo Life Sciences 特色钙调神经磷酸酶检测试剂盒解决方案
Enzo Life Sciences 特色钙调神经磷酸酶检测试剂盒解决方案Enzo Life Sciences/艾美捷特色监测心肌信号转导的科研用品组合：监测钙动员，筛选磷酸酶活性抑制剂，检测心肌梗死标志物等，以助力您心血管生物标志物的相关科学研究。
那么接下来一起看看钙调神经磷酸酶检测试剂盒——监测心肌信号转导的科研工具组合方案...先说说Enzo Life Sciences/艾美捷钙调神经磷酸酶检测试剂盒的优势，如下：1.钙调磷酸酶，一种参与免疫细胞信号转导的蛋白磷酸酶，是抑制剂的靶点。
2.使用有效且选择性高的钙调神经磷酸酶底物：RII磷酸肽；3.方便的一步法检测；4.适用于高通量细胞分析；5.简单的非放射性检测；6.心肌细胞钙调磷酸酶活性检测的高引用频次的分析。
Enzo Life Sciences/艾美捷钙调神经磷酸酶检测试剂盒，用于测量细胞钙调神经磷酸酶（PP2B）活性的完整比色分析试剂盒。
它采用了一种方便的96孔板格式，带有测量组织/细胞提取物中钙调神经磷酸酶（PP2B）活性所需的所有试剂，加上人类重组钙调神经磷酸酶作为阳性对照。
该试剂盒提供的RII磷酸肽底物是已知的钙调神经磷酸酶最有效和选择性最强的肽。
释放的游离磷酸盐的检测基于经典的孔雀石绿分析。
图：新鲜制备的小鼠脑提取物的磷酸酶活性。
在凝胶过滤前，将提取物在含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液中按1:1稀释。
凝胶过滤后和磷酸酶测定前，将提取物在裂解缓冲液中按1:25稀释。
将反应在30°C下孵育30分钟。
Enzo Life Sciences/艾美捷钙调神经磷酸酶检测试剂盒储存方式：将除微量滴定板外的所有成分储存在80°C下，以获得最高稳定性。
钙调神经磷酸酶组分SE163-9090须特别小心处理，以保持zui大的酶活性。
在RT水浴中快速解冻，或用手指摩擦解冻，然后立即存放在冰浴中。
剩余未使用的酶应在-80°C下快速重新冷冻。
磷脂酶 C( Phospholipases C,PLC)试剂盒说明书
货号：MS2413 规格：100管/96样磷脂酶 C（ Phospholipases C，PLC）试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：磷脂酶C（EC3.1.4.3）是一种水解甘油磷酸酯C3位点甘油磷酸酯键的脂类水解酶，广泛存在于微生物及动植物的组织和细胞中，在细胞代谢、细胞传递、生长发育等方面具有重要作用。
测定原理：磷脂酶C催化水解NPPC产生对硝基苯酚，在410nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器：天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
试剂组成和配制：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体102mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体8mL×1瓶，4℃保存。
酶液提取：1.组织：按照质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g 离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心5min，取全部上清于4℃、100000g离心30min，弃上清，取沉淀溶于1mL试剂一。
3.血清：直接测定。
酶活计算公式：a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下第1页，共3页标准曲线：y = 0.0191x - 0.0103，R2 = 0.99911．按照蛋白浓度计算酶活性定义：每毫克蛋白每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性（nmol/min/mg prot）=（△A+0.0103）÷ 0.0191×V反总÷(V样×Cpr) ÷T= 17.45×（△A+0.0103）÷ Cpr2．按照样本质量计算酶活性定义：每克组织每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
Ca++Mg++-ATP 酶活性检测试剂盒说明书
BC0960 -- 第 1 页，共 4 页Ca Mg -ATP 酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC0960 规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 试剂一 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂二 液体4 mL×1 瓶 2-8℃保存 试剂三 粉剂×2支 -20℃保存 试剂四 液体2 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂五 液体3 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂六 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂七 粉剂×1瓶 2-8℃保存 试剂八 液体15 mL×1 瓶 常温保存 标准品液体1 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂三：临用前取1支加入1 mL 蒸馏水充分混匀待用；现用现配。
用不完的试剂-20℃分装保存一周。
2、 试剂六：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
3、 试剂七：临用前加入15 mL 蒸馏水，溶解后2-8℃保存两周。
4、 标准品：10mmol/L 标准磷贮备液。
将标准品 20倍稀释，即取0.1 mL 标准品加1.9 mL 蒸馏水充分混匀，配成0.5 μmol/mL 标准磷应用液，现用现配。
5、 定磷剂的配制：按H 2O ：试剂六：试剂七：试剂八=2:1:1:1的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。
若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂根据样本量现用现配。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：Ca ++Mg ++-ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中，可催化ATP 水解生成ADP 和无机磷。
根据Ca ++Mg ++-ATP 酶分解ATP 生成ADP 及无机磷，通过测定无机磷的量来确定ATP 酶活性高低。
ATP ADP + Pi注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
磷酸化试剂盒使用方法
磷酸化试剂盒使用方法
1. 组织总蛋白的提取：
- 在1ml的冷裂解液中各加入10ul的磷酸酶抑制剂、蛋白酶抑制剂和PMSF混匀，放置在冰上备用；
- 称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5-1ml 的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程需注意冰上操作；
- 将组织匀浆液移入1.5ml的EP管中，4 ℃ 12000g 离心30min；
- 吸取上清至新的管中；
- 进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
2. 细胞总蛋白的提取：
- 裂解液的用量：107个细胞需要裂解液1ml；
- 贴壁细胞：弃去培养基，用冷的PBS 洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液；在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入EP管中，颠倒裂解20-30min；
- 悬浮细胞：4℃ 400g 离心收集细胞，用冷的PBS洗两次细胞，同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；
- 裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃ 12000g离心30min；
- 将上清移入新的EP管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。
请注意，在使用磷酸化试剂盒时，务必仔细阅读相关说明书和安全注意事项，严格按照操作步骤进行，以确保实验结果的准确性和安全性。
如果你还有关于磷酸化试剂盒使用的其他问题，请咨询专业人士。
钙调蛋白和钙调磷酸酶
钙调蛋白和钙调磷酸酶全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：钙调蛋白和钙调磷酸酶都是与细胞内钙离子平衡调节相关的重要分子。
它们在细胞中扮演着重要的调节作用，对于维持细胞内环境的稳定和功能的正常发挥起着关键的作用。
下面就让我们来详细了解一下这两种分子的特性以及它们在生物体内的重要作用。
让我们先来了解一下钙调蛋白。
钙调蛋白是一类能够调节细胞内钙离子浓度的蛋白质，它们可以通过结合到钙离子上来转变其活性。
钙调蛋白可以通过调节细胞内钙离子平衡来影响多种重要的细胞功能，比如细胞的收缩、分裂、凋亡等。
在真核生物中，钙调蛋白种类众多，比如肌钙蛋白、调节蛋白C、调节蛋白D等。
这些钙调蛋白在不同的细胞类型中扮演着不同的角色，但它们的共同点是都能感知细胞内钙离子浓度的变化，并通过调节相应的信号通路来传递这种信号。
另外一种重要的调节细胞内钙离子平衡的分子是钙调磷酸酶。
钙调磷酸酶是一种能够调解细胞内钙离子信号的酶，它通过去磷酸化或磷酸化靶蛋白来完成对信号分子的调节作用。
钙调磷酸酶在细胞内被广泛分布，可以调节多种重要的细胞功能，比如信号传导、代谢调节、基因表达等。
在细胞内，钙调磷酸酶与钙调蛋白通常会形成一个负反馈调节回路，通过相互作用来维持细胞内钙离子的稳定水平，避免发生过高或过低的钙离子浓度。
钙调蛋白和钙调磷酸酶的相互作用在细胞内起着重要的协同作用，它们共同维持了细胞内钙离子平衡，保证了细胞功能的正常运转。
在激活信号通路、细胞增殖、细胞凋亡等过程中，钙调蛋白和钙调磷酸酶的协同作用非常重要。
通过调节这两种分子的活性，细胞可以有效地对抗外界环境的变化，保持自身的生存优势。
钙调蛋白和钙调磷酸酶在细胞内起着非常重要的调节作用，它们共同维持了细胞内钙离子平衡，保证了细胞的正常功能。
这两种分子的相互作用和调节机制为我们深入了解细胞内信号传导、代谢调节等生物学过程提供了重要的参考。
在未来的研究中，更深入地探究钙调蛋白和钙调磷酸酶的功能和调节机制，将有助于我们更好地理解细胞内的调控机制，从而为疾病的治疗和药物的研发提供新的思路和途径。
钙调神经磷酸酶的研究新进展
钙调神经磷酸酶的研究新进展摘要本文对CaN的分子结构、酶学特性、组织分布、信号传导及生物学功能方面的研究进展进行文献复习。
关键词钙调神经磷酸酶肾移植分子结构信号传导生物学功能钙调神经磷酸酶(CaN)属丝/苏氨酸蛋白磷酸酶家族成员(又称蛋白磷酸酶2B,PP2B),是迄今发现的惟一受Ca2+/钙调素(CaM)调节的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶。
目前认为CaN是一种广泛分布的、参与多种细胞功能调节的多功能信号酶,在细胞因子介导的T细胞活化中起到调节枢纽的作用［１］；在神经递质的释放、突触可塑性方面亦具有重要的调节作用［2］；特别是新近研究表明，CaN介导的信号通路在心肌肥大的发生发展中可能起到中心作用［3］，使CaN的研究受到基础及临床科学家的广泛关注。
免疫系统CaN 在T细胞活化中的作用机制已被阐明。
T细胞受到抗原刺激后可激活膜磷脂系统而产生IP3和DAG，分别使胞内Ca2+浓度升高和PKC活化，Ca2+/CaM使CaN活化，活化的CaN可使胞浆内的NF-ATc去磷酸化，暴露出NF-ATc上的核定位信号，使NF-ATc转位入核，调节IL-2、IL-4及CD40L 等基因的表达。
CsA和FK506抑制其活性，阻断TCR的信号传导通路，使T细胞不能活化，从而抑制急性排斥反应，所以在临床上CsA和FK506是主要的免疫抑制剂，他们的应用大大提高了移植肾的近期及远期成活率。
另外，还参与对胸腺淋巴细胞发育阳性选择的调节［4］。
神经系统CaN参与神经系统多种功能的调节，如神经递质和激素的释放、神经突触的生长发育及可塑性的调节［2］。
NMDA受体通道在神经兴奋性的传递及神经可塑性的调节中起重要作用，CaN可在两个不同的水平上调节NMDA受体通道的活性。
一是通过改变受体通道的磷酸化状态控制通道的开闭；二是介导受体的失敏(Lieberman,1994年)。
另外，NO作为一种逆信使在突触可塑性的长时程增强（LTP）中起重要作用，而NOS是CaN的底物、CaN对NOS去磷酸化可能增进其催化活性，使NO生成增多，间接地实现对LTP的调节。
人钙调素(CAM)ELISA 试剂盒说明书
人钙调素(CAM)ELISA试剂盒使用说明书产品编号：E0640h操作步骤实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。
每次检测都应该做标准曲线。
如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100ul，余孔分别加标准品或待测样品100ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体，甩干，不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100ul（取1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制），37℃,60分钟。
3.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，350ul/每孔，甩干。
4.每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液）100ul，37℃，60分钟。
5.温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350ul/每孔，甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
7.依序每孔加终止溶液50ul，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。
为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。
在加终止液后15分钟以内进行检测。
注：1．每次实验留一孔作为空白调零孔，该孔不加任何试剂，只是最后加底物溶液及2NH2SO4。
测量时先用此孔调OD值至零。
2．为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。
3. 未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用。
钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法)
钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法) 简介：钙(Calcium)是一种金属元素，常温下呈银白色晶体，动物的骨骼、蛤壳、蛋壳都含有碳酸钙。
检测生命体钙含量，主要通过检测钙离子浓度实现的。
用分光度法检测钙较为常见，该法需要合适的金属指示剂或选择性结合钙离子后引起变色的染料化合物，目前较为常用的染料有邻-甲酚酞络合铜(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚蓝等。
Leagene 钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝微板法)是利用溶液中钙离子在碱性条件下能与甲基麝香草酚蓝(MTB)结合，生成蓝紫色的复合物，加入镁离子螯合剂，去除镁离子背景干扰，通过酶标仪检测610nm 处吸光度，根据公式计算出总钙含量。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 96孔板2、 酶标仪操作步骤(仅供参考)：1、 制备样品：①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃冻存，用于Ca 的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于Ca 的检测。
③高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Ca ，可以使用ddH 2O 稀释，不宜使用普通蒸馏水稀释。
2、 配制Ca 显色工作液：临用前，取Ca Assay buffer 和MTB 显色液等量混合，即配即用，4℃避光保存，不宜久置。
编号 名称 TC1021 100T Storage 试剂(A): 钙标准(2.5mmol/L) 1ml 4℃ 试剂(B): Ca Assay buffer 10ml RT 试剂(C): MTB 显色液 10ml 4℃ 避光 使用说明书 1份计算：血清、血浆中钙(mmol/L)=(A测定/A标准)×2.5组织中钙(mmol/mg)=(A测定/A标准)×2.5/待测样品蛋白浓度(mg/L)式中：A测定=测定孔的吸光度A标准=标准孔的吸光度单位换算：mg/dl=mmol/L/0.411参考区间：健康成年人血清钙浓度：2.08-2.6mmol/L(8.3-10.4mg/dl)儿童血清钙浓度：2.23-2.8mmol/L(8.9-11.2mg/dl)注意事项：1、溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。
钙调磷酸酶抑制剂的使用
免疫抑制方案器官移植组免疫抑制方案的选择•可以分为四大类•诱导治疗•预防排斥反应方案•抗排斥方案•维持治疗方案•诱导治疗•时机•移植术后2-4周•CNI毒性考虑•使用抗体制剂降低早期急性排斥反应的发生率•巴利昔单抗或ALG/ATG预防排斥方案•以CNI为主•CNI+MMF+Pred—标准三联免疫抑制方案•西罗莫司的使用•激素撤除目录CNI的免疫机制1环孢素的使用2他克莫司的使用3CsA vs FK5064免疫抑制剂抗代谢药糖皮质激素抗体钙调磷酸酶抑制剂移植术常用免疫抑制剂钙调磷酸酶抑制剂（CNI）目前临床上应用最多的有：环孢素A（Cyclosporin A, CsA）他克莫司（tacroclimus, FK506）钙调磷酸酶（Calcienuirn，CaN）CaN是迄今发现的唯一受Ca2+和钙调素调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白质磷酸酶。
在细胞信号传递的过程中，CaN被Ca2+和钙调素（CaM）激活后，通过对靶蛋白NFAT的脱磷酸化而实现对生理活动的调节。
是能够参与多种细胞功能调节的多功能信号酶，它在免疫系统/神经系统/心血管系统等方面均具有重要作用。
CNI作用机制：抑制IL-2等细胞因子的释放，实现免疫抑制作用。
目录CNI的免疫机制1环孢素的使用2他克莫司的使用3CsA vs FK5064环孢素来源：真菌（白僵菌属）培养液性质：几乎不溶于水，溶于无水乙醇储存：不应贮存于PVC容器内ADR环孢素最主要的不良反应，约有1/3的患者有肾毒性。
可出现血清肌酐和尿素升高，肾小球滤过率减低等损害。
肾毒性常见ADR高血压、胃肠道紊乱、肝毒性、多毛症、齿龈增生、震颤、头痛、高脂血症、高钾血症、低镁血症、高尿酸血症、感觉异常以及肌肉痉挛和肌痛等。
少见ADR贫血症、血小板减少症、皮疹、体重增加、水肿、胰腺炎、肌病、神经病和高血糖症，抽搐、谵妄、视物不清、运动障碍或精神障碍环孢素警惕高血压和电解质紊乱（K 、Mg ）加强监护，降低感染的可能性避免接种活疫苗，以免发生全身感染如发生ADR ，立即减量或停药，并对症治疗常规监测血药浓度及肝、肾功能注意事项环孢素与其他药物的相互作用：环孢素在肝脏中广泛代谢。
钙调磷酸酶抑制剂
钙调磷酸酶抑制剂（一）器官移植排斥反应1、移植排斥反应人体的免疫系统对各种致病因子有着非常完善的防御机制，能够对细菌、病毒、异物、异体组织、人造材料等“异己成分”进行攻击、破坏、清除，这种复杂的免疫学反应是人体非常重要的一种保护机制。
受者进行同种异体组织或器官移植后，外来的组织或器官等移植物作为一种“异己成分”被受者免疫系统识别，后者发起针对移植物的攻击、破坏和清除，这种免疫学反应就是移植排斥反应（transplantrejection）。
移植排斥反应是影响移植物存活的主要因素之一。
移植排斥反应是非常复杂的免疫学现象，涉及细胞和抗体介导的多种免疫损伤机制，发生原因主要是受体和移植物的人类白细胞抗原HLA（human leucocyte antigen）不同。
因此，供者与受者HLA的差异程度决定了排异反应的轻或重。
除同卵双生外，二个个体具有完全相同的HLA 系统的组织配型几乎是不存在的，因此在供受者进行配型时，选择HLA配型尽可能地接近的供者，是减少异体组织、器官移植后移植排斥反应的关键2、发病机制排斥反应的发生机制主要包括细胞免疫和体液免疫两个方面。
临床最常见的急性排斥反应主要由细胞免疫介导，而超急性排斥反应和慢性排斥反应主要由体液免疫介导。
（1）细胞介导的排斥反应细胞免疫在急性排斥反应发生发展过程中起主导作用。
移植物中供体的淋巴细胞和树突状细胞具有丰富的HLA-Ⅰ和Ⅱ类抗原，是诱发排斥反应的主要致敏原。
在移植物植入受体后，随着移植物的血液循环重建，供者的HLA-Ⅰ和Ⅱ类抗原不可避免的暴露于受者的免疫系统，受者的免疫细胞识别外来抗原后，即可引发下述一系列免疫反应：CD8+细胞毒性T细胞前体细胞与供者HLA-Ⅰ类抗原结合后活化增殖为成熟的细胞毒性T细胞，对移植物产生攻击效应；CD4+T辅助细胞识别供体HLA-Ⅱ类抗原，促使抗原递呈细胞释放IL-I，后者可促进T辅助细胞增殖和释放IL-2，IL-2可进一步促进T辅助细胞增殖并为细胞毒性T细胞的分化提供辅助信号；除了IL-2之外，TH细胞还能产生IL-4、IL-5、促进B 细胞分化并产生抗移植物的抗体，参与移植排斥；此外与迟发变态反应相伴随的血管损害、组织缺血以及巨噬细胞介导的破坏作用，也是移植物毁损的重要机制。
钙调磷酸酶在神经退行性疾病中的作用
AMPA
AMPA 受体介导中枢神经系统快速兴奋性 突触传递，其在突触后膜的动态表达与长 时程增强、长时程抑制的诱发和维持有关， 参与调节学习记忆活动。它还参与谷氨酸 介导的兴奋性损伤，C a 2 + 通透性A M P A R 亚型的过度激活能导致阿尔茨海默病 神经元的功能障碍甚至死亡。
结论
• 错误折叠蛋白质的积累，能够引起内质网应 激和Ca2+稳态的变化，细胞利用错误折叠的 蛋白质尝试正确反映内质网应激带来的负面 影响.内质网应激的一个负面影响是释放钙到 细胞质中，导致了信号传导通路的阻碍,持续 的突触功能障碍和神经元细胞凋亡导致了神 经退行性疾病。最近数据表明：在大脑中有 一个关键的钙调磷酸酶，它的变化可导致神 经突触损伤和神经元细胞死亡，通过控制钙 调磷酸酶的变化，对抑制神经退行性病的产 生有一定作用。通过对这方面的研究，可能 在分子水平上增进对神经退行性病的了解和 一些必要的治疗措施的发展。
概述
神经退行性疾病 是由错误折叠的蛋白质在大脑中积
累导致神经元功能障碍。证据表明：错误折叠的蛋 白质通过诱导内质网压力和改变钙的稳态平衡来破 坏细胞 。胞质钙浓度的变化导致信号传导通路障碍， 钙介导的超活化钙调磷酸酶（CaN）是大脑中的主要 磷酸酶，能够引起大脑功能障碍和神经突触触发器 死亡，导致形成神经退行性疾病。因此，抑制钙调 磷酸酶的活性可能在脑损伤的神经退行性疾病治疗 方面是一个很有前途的策略。
钙调磷酸酶（ 简称CaN ）：依赖钙和钙调 蛋白的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶，激活磷酸化的 转录因子NF-ATp，参与T细胞激活信号的转 导.
CaN的结构和功能是当前研究很活跃的领 域，由于其在神经及免疫系统中发挥着重要 的作用，尤其是90年代后证明它在T细胞活 化过程中起关键作用。
钙测定试剂盒(偶氮砷 III 法)产品技术要求haifeng
钙测定试剂盒（偶氮砷 III 法）
适用范围：本产品适用于体外定量测定人血清中的钙含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无破损；
2.1.2试剂为紫红色液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2净含量
净含量不低于标示值。
2.3空白吸光度
在主波长660nm、副波长750nm、37℃条件下：试剂空白吸光度A≤0.5。
2.4线性范围
[1.0,4.0]mmol/l范围内，线性相关系数r≥0.990，相对偏差不超过±10.0%。
2.5分析灵敏度
在产品说明书规定参数设定条件下，浓度为2.5mmol/L时，吸光度变化△A≥0.30。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤3.0%。
2.6.2批间差
相对极差R≤5.0%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW09152，测定结果应不超过标称值的±5%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃～8℃储存,有效期为12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测, 检测结果应满足2.4和2.7的规定。
植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书中文版
植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过钙离子特异性荧光探针Fluo-4，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定植物组织裂解悬液中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解萃取样品中总钙离子的浓度检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。
其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。
非骨组织钙成分主要存在于细胞内。
钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。
钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。
钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求。
Fluo-4，一种与钙离子结合，其荧光强度迅速增强100倍的荧光探针，可以敏感测定微量游离钙离子水平。
在荧光分光光度仪下，激发波长485nm，散发波长520nm，来定量测定植物组织细胞的钙浓度。
产品内容清理液（Reagent A）60毫升裂解液（Reagent B）20毫升反应液（Reagent C）6毫升饱和液（Reagent D）2毫升阴性液（Reagent E）2毫升产品说明书1份保存方式保存清理液（Reagent A）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；反应液（Reagent C）避免光照；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器15毫升锥形离心管：用于样品操作的容器DOUNCE匀浆器：用于组织匀化微型台式离心机：用于样品沉淀培养箱：用于反应物孵育黑色96孔板：用于样品荧光测定的容器荧光酶标仪：用于样品荧光分析实验步骤一、样品准备1．准备好新鲜的植物组织（叶片、谷粒、种子等），并秤重以确定1克组织重量2．（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管3．（选择步骤）加入3毫升清理液（Reagent A）清洗1次4．即刻用刀片切碎组织5．放进一个预冷的15毫升锥形离心管6．加入预冷的1毫升裂解液（Reagent B）7．涡旋震荡5秒，充分混匀8．即刻放进预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约80下）9．将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管，放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）10．小心移出上清液（注意：不要触碰沉淀物）到另一个新的预冷的15毫升锥形离心管11．（选择步骤）如果上清液含有肉眼可见的残渣，重复离心5分钟一次，速度为5000g（或7500RPM，例如eppendorf 5415）12．即刻移入到1.5毫升离心管13．移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－GMS30030.1）14．放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、测定准备1．准备好上述制备的待测样品，置于冰槽里备用2．设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长485nm，散发波长520nm三、荧光测定1．准备1个黑色96孔板，标记为：样品孔、空白对照孔、最大对照空2．移取100微升（20微克蛋白）上述制备的样品到样品孔里3．移取100微升饱和液（Reagent D）到最大对照空里4．移取100微升阴性液（Reagent E）到空白对照空5．分别加入100微升反应液（Reagent C）到所有孔里6．轻轻摇动黑色96孔板，混匀7．室温下（22℃），孵育30分钟，避免光照8．即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relative fluorescence unit；RFU）9．计算样品钙离子浓度：纳摩尔（注意：不要遗忘乘上稀释倍数）【（样品RFU－空白对照孔RFU）÷（最大对照空RFU－样品RFU）】X 345 （纳摩尔；解离常数）注意事项1．本产品为20次操作2．操作时，须戴手套3．避免使用EDTA等处理样品4．孵育反应完成后即刻进行荧光测定5．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度6．检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围7．样品浓度可以按照蛋白量或组织量定义8．本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感。
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植物钙调磷酸酶（CaN）试剂盒使用说明书
目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及其它相关样本中钙调磷酸酶（CaN）含量。
实验原理：
植物钙调磷酸酶试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物钙调磷酸酶（CaN）水平。
用纯化的植物钙调磷酸酶（CaN）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入钙调磷酸酶（CaN）抗原，再与HRP标记的钙调磷酸酶（CaN）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的钙调磷酸酶（CaN）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中植物钙调磷酸酶（CaN）抗原浓度。
试剂盒内容及其配制：
自备材料：
1. 蒸馏水。
2. 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
样品收集、处理及保存方法：
1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
2、血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液……1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。
1000×g离心10分钟，取上清液。
5、保存……如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。
不要在37℃或更高的温度加热解冻。
应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
植物钙调磷酸酶试剂盒操作注意事项：
● 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
● 不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
● 使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
● 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。
避免用手接触，有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
● 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
植物钙调磷酸酶试剂盒操作步骤：
1. 使用前，将所有试剂充分混匀。
不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。
每个标准品和空白孔建议做复孔。
每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。
立即加入50ul的生物素标记的抗体。
盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
重复此操作4次。
如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5.每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。
重复此操作4次。
如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育5分钟。
避免光照。
8. 取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。
试剂盒性能：
1. 灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与其它细胞因子反应。
重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
试剂的准备：
1. 标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。
稀释前将标准品振荡混匀。
稀释比例按下表中进行：
２.洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。
结果判断与分析：
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的BALP标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的BALP含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度，再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
3、检测值范围：0-400u/l
4、敏感度：1.0u/l。