豆科牧草水浸提液的酚酸物质含量及化感潜力_邬彩霞
藨草水提液酚酸物质含量及化感作用
一
旨在进 一步揭 示藤 草 化 感 作 用 的机 理 ， 为 莎 草科 并 杂 草化感 作用 的 田间应 用提供 理论 依据 。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
藤 草 新 鲜 植 株 。对 一 基 苯 甲 酸 、 魏 酸 、 食 羟 阿 没 子 酸 、 草醛 、 酚 类标准 品 。 香 ４种
主 要 仪 器 ： 国 产 Ｗａｅｓ高 压 液 相 色 谱 仪 ： 美 ｔｒ
ＣＨ ＥＮ Ｓｕｉｈｏ ｇ， Ｉ Ｈ ｕｉ ｉ ｚ ｎ Ｘ Ｅ ｑｎ
（ Ｃｏｌｅ ｅ ｏ ｌ ｇ ｆ Ａｇｒｃ ｌｕｒ Ｓｈｉ ｚ ｎ ｖ ｒ ｉｙ， ｈｉ ｚ ３２ ３， ｉｕ ｔ ｅ， ｈｅ ｉＵ ｉ ｅ ｓ ｔ Ｓ ｈｅ ｉ８ ００ Ｃｈｉａ） ｎ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｐ— ｄ ｏｘ ｅ ｚ ｉ ， － ｏｕ ｒｃ， ａ ｉｌｎ， ｌｉ ｃｄ ｈａ ｅ ｎ ｑ ａ ｉｉｄ ｂ ｉ ｒ ｏ ｍ ａ ｅ ｌｑｕ ｄ ｓ ｒ ｃ ： ｈｙ ｒ ｙｂ ｎ ｏ ｃ ｐ ｃ ｍａ ｉ ｖ ｎ ｌｉ Ｇａ ｌｃａ ｉ ｄ ｂ ｅ ｕ ｎｔｆｅ ｙ ｈ ｇｈ ｐｅ ｆ ｒ ｎｃ ｉ ｉ
文 章 编 号 ：０ ７７ ８ （ ０ ０ ０ ～ ２ ９０ １ ０ —３ ３ ２ １ ） ３０ ９ — ４
蔗 草 水 提 液 酚 酸 物 质 含 量及 化 感作 用
陈遂 中 ， 慧 琴 谢
（ 石河 子 大 学农 学 院 ， 河 子 ８ ２ ０ ） 石 ３ ０ ３
摘 要 ： 用 高 效 液 相 色 谱 法 （ Ｉ ） 定 了藤 草 新 鲜 植 株 水 浸 提 液 中 对 羟 基 苯 甲酸 、 魏 酸 、 草 醛 和 没 食 子 酸 ４ 采 ＨＰ 测 ｃ 阿 香
酸性染料比色法测定苦马豆中总生物碱含量
酸性染料比色法测定苦马豆中总生物碱含量赵清梅;余永涛【摘要】采用酸性染料比色法测定苦马豆[Swainsonia salsulaTaubert(Sphaerophysa salsula (Pall.)DC.)]中总生物碱含量.以苦参碱为标准品,溴麝香草酚蓝为染色液,在pH 7.6缓冲溶液中与生物碱反应,反应产物用氯仿萃取,萃取液于414 nm处测定其吸光度.应用建立的酸性染料比色法对宁夏不同地区采集的苦马豆样品中总生物碱含量进行分析.结果表明,苦参碱在0.001 7～0.013 3 μg/μL内与吸光度线性关系良好,回归方程为y=50.549 0x-0.047 7 (R2=0.999),苦参碱的平均回收率为103.17(RSD为1.70％),测得宁夏平罗县、盐池县、银川市采集的苦马豆中总生物碱质量分数分别为0.026％、0.024％、0.017％.该方法灵敏、可靠、操作简便,可用于苦马豆中总生物碱含量的测定.【期刊名称】《湖北农业科学》【年(卷),期】2015(000)007【总页数】4页(P1710-1712,1716)【关键词】苦马豆[Swainsonia salsula Taubert(Sphaerophysa salsula (Pall.)DC.)];酸性染料比色法;总生物碱;苦参碱【作者】赵清梅;余永涛【作者单位】北方民族大学生物科学与工程学院,银川750021;国家民族事务委员会发酵酿造工程生物技术重点实验室,银川750021;宁夏大学农学院,银川750021【正文语种】中文【中图分类】R927.2;O657.32苦马豆［Swainsonia salsula Taubert（Sphaerophysa salsula （Pall.）DC.）］是豆科苦马豆属草本植物，别名羊卵蛋、羊尿泡、尿泡草、红花苦豆子等，广泛分布于内蒙古、宁夏、甘肃、青海、新疆等地［1］。
苦马豆全草、果可入药，民间用于治疗肾炎、慢性肝炎、肝硬化腹水等疾病。
不同植物对五氯酚生物富集能力的研究
不同植物对五氯酚生物富集能力的研究熊珺n;冯伟科;王学东【摘要】在添加2 000μg/kg五氯酚的土壤中种植芦苇(Phragmites communis(L.)Trin)、香蒲(Typh orientalis Presl)和水葱(Scirpus tabemaemontani Gmel),探讨不司植物对土壤中五氯酚的富集作用.植物和土壤样品以石油醚振荡提取90min,浓硫酸净化和碳酸钠反萃取后,在pH为9的条件下采用衍生萃取同步进行处理样品20 min,以GC-μECD分离测定.通过30天的模拟野外生态试验,发现不同植物对五氯酚富集能力由大到小的顺序依次为水葱、香蒲、芦苇,研究显示植物修复对于土壤中持久性有机污染物五氯酚是一项切实可行的技术.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2011(039)007【总页数】3页(P44-45,50)【关键词】五氯酚;生物富集;衍生化;残留量;GC-μECD【作者】熊珺n;冯伟科;王学东【作者单位】广东省东莞市质量监督检测中心,广东,东莞,523808;广东省东莞市质量监督检测中心,广东,东莞,523808;温州医学院环境与公共卫生学院,浙江,温州,325035;华中师范大学化学学院,湖北,武汉,430079【正文语种】中文持久性有机污染物是一类性质稳定、毒性高、难降解、易累积、分布广的有机化合物,是当前国际社会首要治理的污染物。
五氯酚 (Pentachlorophenol,PCP,分子式C6HCl5O)及其钠盐被广泛用作杀菌剂和木材防腐剂,其化学性质稳定、残效期长、毒性高,对生物体具有广谱毒性和致突变性,被列为环境优先监测的持久性有机污染物之一。
它曾在我国广大地区广泛大量的使用,给环境造成一定的负面影响,因此它在环境中的存在和归宿已引起科学家的高度重视。
目前,环境中持久性有机污染物的治理已经摆在人们面前。
持久性有机污染物在水中的沉积物以往最常用的处理方法是焚化处理,但其存在费用昂贵,且对生态资源破坏严重等缺点。
外来入侵植物牛膝菊和野茼蒿水浸提液化感作用的生物测定
高综合效 应值 逐渐 降低 ， 且前者的化感效 应指 数的综合效应 值大于后 者。研 究结 果显示 ， 野茼蒿 和牛膝 菊水浸提
液对小麦和玉米 的化感活性均表现为抑制作用 ， 且化感 作用 的强 度与水浸 提液 的质量浓度 相关 ； 野茼蒿水 浸提液 的化感作 用效 应大于牛膝菊 。 关键 词 ： 外来入侵植物 ； 野茼蒿 ；牛膝菊 ； 生物测定 ； 化感活性
Ａｂ ｔａ ｔ ｓｒ ｃ ：Ｕｓ ｇｗ ｅ ｔ（ ｒｔ ｕ ａ ｓ ｖ ｍ ． ｎ ｉｅ（ ａ ｍａ ｓＬ）ａ ｘ ｅｉ ｎａ ｔｒ ｌ ａ ｄ ｉ ｈ ａ Ｔ ｉｃ ｍ ｅｔ ｕ Ｌ）ａ ｄ ｍａｚ Ｚｅ ｙ ． ｓｅ ｐ ｒ ｎ ｉ ｉ ｍｅ ｔｌｍａｅｉ ｓ ｎ ａ
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分析大豆根系分泌物并检测其化感作用_吴泉
2013． NO． 05
数理与化学研究 μs + a － μs * 100% a % ； μ s + a —加 标 水 样 测 定 值； μs—原 水 式中： P—回 收 率， 样测定值； a—加入标准的质量。 7． 5． 2 通过对纯水加标样品高低浓度进行检测， 回收率 在 101% 。 表 2 准确度数据 P=
一氯苯 浓度 7． 00 63． 0 实测浓度（ μg / L） 1 2 3 4 5 6 7 回收率 % 101 101 SD 0． 15 0． 51
Journal of Henan Science and Technology
河南科技
式中： S—标准偏差； ＲSD—相对标准偏差； x i —某一测量 值； x—组测量平均值； n—测量次数。 表 3 精密度数据
2013． NO． 05
生命科学与农业科学
Journal of Henan Science and Technology
河南科技
分析大豆根系分泌物并检测其化感作用
吴 泉 （ 上饶师范学校， 江西 上饶 334000 ） 摘 要： 本文通过利用 GC － MS 分离， 在大豆幼苗的不同生长周期分别提取其根系分泌物作成分分析并将提取物运用于大豆 种子的萌发试验的方法， 分析研究大豆根系分泌物的鉴定工作， 以及其对大豆种子的萌发试验， 从而揭示大豆根系分泌物对胚根 大豆根系分泌物中有机酸类物质种类最多， 与有机酸有存在较大差异的组 生长的化感抑制作用。结果发现在第 2 周和第 8 周时， 分还有醇类、 酯类等， 它们大体与二氯甲烷提取物种类一样 。大豆胚根生长在第 2 周时受分泌物的化感抑制作用最为明显 。 而 8 周大豆根分泌物的化感抑制作用不显著 。研究得出 2 周大豆根分泌物的化感抑制作用对大豆种子胚根生长非常明显， 其中表现 出最为显著化感抑制作用的是分泌物机酸组分中所含的邻苯二甲酸 。 关键词： 大豆根系； 分泌物； 化感 中图分类号： S633 文献标识码： A 文章编号： 1003 － 5168 （ 2013 ） 10 － 0213 － 02 根系分泌物是通过根向生长基质中释放的有机物的总 称。化感作用是植物或微生物的代谢分泌物对环境中其他植 物或微生物有利或不利的作用 。 化感物质是生物体内产生的 非营养性物质， 能影响其他植物生长、 健康、 行为或群体关系， 化感物质是化感作用的媒介， 主要是植物的次生代谢物质 。 1 根系分泌物 作为化感物质进行环境释放的一种方式， 根系分泌物是最 为常见的。它的具体定义是， 通过某些植物的根系向其根系周 围环境释放化感物质， 从而达到对植物生长的促进与抑制。 就目前统计数据来看， 一般根系分泌物分为三大类， 总计 两百多种， 第一大类主要是糖、 酶、 蛋白质等有机大分子； 第二 类则是酸、 酚、 酮等有机小分子； 第三类则是生长激素、 抑制激 素、 酮等物质。而植物分泌出的化感物质主要包括甲酸 、 肉桂 。 它们的形式多种多样 酸等酸类以及酚类和黄酮类等， 在对于根系分泌物的研究中发现， 其与周围环境的微生 物也有着密切的关系。根系分泌物中的碳水化合物 、 氨基酸、 维生素等物质是其根系周围微生物的碳源和能源的主要来 数量以及 源。且它们的数量和种类直接影响微生物的功能 、 种类， 并对植物生长发育造成影响 。 根系周围微生物群的种 类、 数量会由于植物不同发育阶段根系分泌物的不同而出现 差异。 2 化感作用 在农业生产中， 对于农作物的间作、 轮作、 重茬种植、 种子 萌发和花粉传播等行为的发生， 植物的化感作用是鼻血要考 化感作用是一种普遍存在的现象， 它会 虑到的。在自然界中， 对植物之间的生物化学作用产生一定的抑制和促进 。 从而对 植物生长造成一定的影响， 同时在人们农业生产中， 它也是影 响作物产量、 质量的重要因素之一。 伴随植物在不同生长发 育阶段的根系分泌物， 如生物碱、 黄酮、 蒽醌、 皂苷、 萜烯、 醚、 醛等， 植物周围的微生物生长环境， 以此造成植物、 动物、 微生 物物种之间出现生长发育的相互抑制和促进作用 。 那么环境 因素对植物的化感作用的影响主要分为以下几种： （ 1 ） 自然光环境对化感作用的影响， 它主要表现在对化感 。 、 物质活性能力的影响 在自然环境光质 光度、 以及自然光的 照射能够调剂化感物的合成， 在长时间的日然光线照射下， 植 物中的酚酸和萜的含量会增加 。 同时植物周围的环境温度会 随之上升， 化感物质的活性会随着温度的升高而增强， 从而加 速了其抑制效应。 （ 2 ） 水分对化感作用的影响， 在出现水分缺失的情况下， 植物机体本身会受到其刺激的影响， 促进植物本身化感物质 的合成与释放。 （ 3 ） 在湿度环境下会增加植物体外化感物质的渗透压， 从 加速化感物质的释放速度， 所以根系环境湿度对化感物质是 有影响的。 3 材料与方法 3． 1 材料。大豆； 试验标准石英砂（ 干燥、 酸碱稳定） ； 霍 格兰营养液和阿农微量元素比例配置的试验营养液； 10 毫升 黑色塑料盆， 有孔塑料泡沫盖板； 试验分析纯。 3． 2 大豆的液培。在 20 － 25℃ 条件下， 将双氧水消毒后 的种子播与硫酸钙浸洗过的石英砂中避光发芽待有子叶露出 时进行露光培养。当根长至 5cm － 7cm 时， 小心取出生长均匀 的幼苗， 用去离子水轻轻洗去石英砂后， 置于 1 /2 强霍格兰 － 9］ （ pH6． 2 ） 中定植。每孔定苗 1 株， 阿农营养液［ 每箱定苗 15 株。采用自动定时小型通气泵连续通气 。 每周更换一次营养 1 周后换成完全营养液。 培养器置于光线良好的室内（ 自 液， 然光照） ， 室温 18℃ － 22℃ 。 3． 3 收集并提取根系分泌物 。 将培养 2 周、 8 周的大豆 幼苗， 移栽至 6L 0． 5mmol / L 的 CaCl2 溶液中， 在上述条件下培 养 4 小时（ 9 ∶ 00 － 13 ∶ 00 ） 。 用 500mlCH2 Cl2 提取根洗液二 再将 CH2 Cl2 提取液过 0． 45um 膜， 减压浓缩至干， 加入过 次， 0． 45um 膜的 CH2 Cl2 2ml， 0． 5ml 作 GC － MS 分析， 余下用于生 物检测。 3． 4 GC － MS 分析提取液。对 2 周提取液进行质谱室测 定。GC 型号为 HP5890 。 毛细管柱： DB － 5 柱 和 Carowax 柱 （ 30m × 0． 25mm） ， 进样口 240℃ ， 柱温 50℃ （ 2min） ， 以 6℃ / min 250℃ （ 15min ） 。 He ， 程序升温至 保持 载气为 流量 1ml / min， 进样量为 1ul。GC － MS 型号是 TＲI02000 色谱质谱仪， 电子轰 击源， 扫描范围 M / Z 30 － 600 AMU， 扫描速度 0． 2s 扫全程， 离 子源温度 200℃ 。计算机检索进行未知物的鉴定 。 对 8 周提 取液进行质谱室测定。 采用 GC6890 / MS5973 测定， 电子轰击 源， 扫描范围 M / Z30 － 600AMU， 扫描速度 0． 2s 扫全程， 离子源 温度 230℃ 。毛细 管 柱： HP － 5MS 柱 （ Crosslinked 5% pH ME Siloxanle， 30m × 0． 25mm × 0． 25um ） ， 进样口温度 250℃ ， 柱温 50℃ （ 2min） ， 以 6℃ / min 程序升温至 250℃ （ 保持 15min ） 。 载 气为 He， 流量 1ml / min， 进样量为 1ul。 应用 NIST98 质谱数据 库， 通过计算机检索进行未知物的鉴定 。 3． 5 提取液的生物检测。 分别将 2 周、 8 周提取液运用 于大豆种子萌发试验。方法： 在直径为 8． 5cm 的培养皿中， 铺 一张定性滤纸， 加入 5． 0ml 提取液（ 每皿含 1 株大豆 1 小时的 根分泌物） ， 对照加入二氯甲烷试剂 5． 0ml， 各处理待溶剂挥发 干后， 加入 H2 O（ 蒸馏水） 5． 0ml， 再将 10 粒经消毒稍膨胀（ 短 时间浸种） 均匀一致的种子放到滤纸上， 盖上盖， 于 25℃ 恒温 培养箱中培养， 每天加入 1． 0ml H2 O， 种子发芽后记录发芽率 （ 下转第 221 页） 及胚根长。重复三次。 213
豆科牧草水浸提液对几种杂草的化感效应
豆科牧草水浸提液对几种杂草的化感效应近年来，化感抑草作为杂草生物防除的一项重要内容广泛受到人们的重视。
我国化感研究起步晚，化感抑草的研究仅局限于水稻(Dryza sativa L.)、小麦(Triticum aestivum L.)等少数作物上。
许多牧草及饲料作物具有化感潜力，利用饲草的化感作用防除杂草在农业生态系统中具有极大的应用前景。
为探讨豆科牧草对杂草的化感抑制作用，本研究以毛苕子(Vicia villosa [L.] Roth.)、紫花苜蓿(Medicago sativa L.)、白三叶(Trifolium repens L.)、红三叶(Trifolium pratense L.)和黄花草木樨(Melilotus officinalis Desr.)为材料，采用培养皿砂培生物检测法测定了这些豆科牧草分枝期和花期水浸提液对波斯婆婆纳(Veronica persica Poir.)、一年生早熟禾(Poa annua L.)和稗草(Echinochloa crusgalli [L.] Beauv.)种子萌发和幼苗生长的影响，探讨了5种豆科牧草对杂草化感效应的种间、生育期间和器官间差异以及化感作用的浓度效应。
结果表明，供试牧草水浸提液对波斯婆婆纳、一年生早熟禾和稗草种子萌发和幼苗生长具有明显的化感抑制作用，化感作用的强弱存在明显的供体植物种间差异。
其中，毛苕子和紫花苜蓿水浸提液处理对杂草种子萌发和幼苗生长抑制效应最强，其次是黄花草木樨，最后是白三叶和红三叶。
此外，供试牧草水浸提液处理对杂草的化感抑制作用具有明显的浓度效应，随着水浸提液处理浓度的升高，化感抑制作用增强。
有的牧草种类在低浓度处理下表现促进效应，高浓度处理下表现抑制效应，如白三叶在低于0.100g／ml浓度水浸提液处理下对稗草幼根生长表现促进效应，但与对照相比无明显差异(P ＞0.05)，在0.100g／ml浓度处理时对稗草幼根生长抑制作用达显著水平(P＜0.05)。
植物化感作用2021作者
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香豆素对苏丹草种子萌发和 幼苗生长的影响
第34卷第11期Vol.34，No.ll草业科学PRATACULTURALSCIENCE2279-228811/2017DOI： 10.11829/j.issn. 1001-0629.2017-0008王婧怡，姚丹丹，徐军，邬彩霞，赵国琦，华晨岚.香豆素对苏丹草种子萌发和幼苗生长的影响.草业科学，2017,34( 1 1 )2279-2288.Wang J Y»Yao D D»Xu J»Wu C X»Zhao G Q» Hua C L.Effect of coumarin on S o rg h u m s u d a n e n s e s eed germination and seedling growth.Pratacultural Science»201 7( 1 1) ： 2279-2288.|植物|I生产层|香豆素对苏丹草种子萌发和幼苗生长的影响王婧怡，姚丹丹，徐军，邬彩霞，赵国琦，华晨岚(扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州225009)摘要：香豆素为黄花草木樨（A U W o O o/fic m h S)水浸提液的主效化感物质，能抑制多种杂草种子的萌发和幼苗生长。
为探明香豆素的化感抑草作用机理，本研究采用室内培养、生物检测的方法，研究了简单香豆素水溶液对苏丹草（Sor-g/om o g m u m U种子萌发及其幼苗生长和生理生化指标的影响，并采用透射电镜观察了苏丹草幼苗根和茎的超微组织结构。
结果表明，20〜100/g• mL—1香豆素水溶液能够显著抑制早期苏丹草种子的萌发（P〈0.05),且随浓度升高抑制作用增强，能够显著抑制苏丹草根伸长，随处理时间的延长和浓度的升高其抑制作用也增强，根变粗扭曲，而对茎长的影响存在浓度效应和时间效应，在4 d时，20〜100/g• m L—1浓度的香豆素水溶液均促进茎长，6和8d则表现为低浓度促进、高浓度抑制；与加蒸馏水的对照组相比，100 /g• mL—1香豆素溶液处理显著（P〈0.05)提高了过氧化氢酶(C A T)活性，并降低了超氧化物歧化酶（SO D)活性，对过氧化物酶（PO D)抑制作用表现为先降低后升高；香豆素处理显著（P〈0.05)提高了可溶性糖的含量，同时显著（P〈0.05)降低了叶绿素的含量；在香豆素处理下，淀粉含量先降低后升高，吲哚乙酸氧化酶（IAAO)活性仅在第4天时低于对照组.香豆素水溶液破坏了苏丹草根细胞的超微结构，出现液泡体积变大，细胞器数量和种类减少的现象，细胞核的核膜发生明显的歪曲，细胞核变小甚至消失；香豆素水溶液处理下的苏丹草幼苗叶绿体内淀粉粒数目显著（P〈0.05)增加，体积变大。
SPE-HPLC法测定大豆中异丙甲草胺的残留量
１ 实 验部 分
１ ． １ 仪器 和主 要试剂
入少量 Ｎ ａ Ｓ Ｏ 和４ ０ ｍ Ｌ乙酸 乙酯 ，经过超声震荡 萃取 １ ５ ｍｉ ｎ ，保 留上层有机相 ，剩余 固体再用 ４ Ｏ
ｍ Ｌ乙酸乙酯经震荡萃取 １ ５ ｍｉ ｎ ， 保留上层有机相 ， （ １ ） 高效液相色谱仪 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ （ 英麟仪器 ） ，色谱 合 并两 次有 机相 转移 至布 氏漏 斗 中过滤 ，再 用 乙酸 条件为 ， 流动相 ： 甲醇 ： 水＝ ８ ５ ＋ １ ５ （ 体积比） ， 流速 ： 乙酯清洗剩余 固体 ，收集滤液 ，经旋转蒸发仪除去 溶 剂 ，将样 品溶 于 甲醇 中。 １ ． ０ ｍ Ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ，进样量 ： ２ ０ ，柱温箱温度 ： ３ ０ ｏ Ｃ ， １ ． ２ ． ２ 样 品提 纯 紫外检测波长 ： ２ ３ ８ ｎ ｍ。 向 Ｃ１ ８固相 萃 取 柱 中 加 入 少 量 乙酸 乙酯 ，再 （ ２）旋转 蒸发 仪 （ 长春 Ｊ Ｉ 顷 发 仪器 经销部 ） 。 （ ３ ） 超声波萃取仪 （ 长春顺发仪器经销部 ） 。 （ ４ ） 固相萃取仪 （ 安捷伦 ） 。 （ ５ ） Ｃ １ ８ 型固相萃取柱 （ 安捷伦 ） 。
（ ６）甲醇 （ Ｇ Ｒ ｏ
将含有样品的溶液加人 固相萃取柱中 ， 静置一会 ， 直到样品溶液完全吸附于固相萃取柱上 ，然后 向萃 取柱中加人少量丙酮 ，废液弃去 ，再 向固相萃取柱 中加人二氯甲烷 ，合并流 出液 ，蒸发流 出液后用 ｌ ｍＬ甲醇溶 解 ，０ ． ５ ｕ ｍ 滤头 过滤 ，准 备进 样 。
０ 引 言
异 丙 甲草 胺 运 用 于旱 地 作 物 、蔬 菜 作 物 和果 园 、苗 圃使 用 ，可 防除牛筋 草 、马唐 、狗尾草 、棉 草 等一 年生 禾本科 杂 草 。大豆样 品所 含物 质复 杂 ， 直 接测 定异 丙 甲革胺 成分 ，结果 有 干扰 。 因此 本文
冰糖草中总酚酸的含量测定
冰糖草中总酚酸的含量测定目的：建立冰糖草水提液中总酚酸的含量测定方法。
方法：采用分光光度法，以没食子酸为对照品，0.6%FeCl3-0.9%K3[Fe（CN）6]（1∶0.9）混合液为显色剂，在720nm波长处进行冰糖草中总酚酸的含量测定。
结果：所测定总酚酸的线性相关系数为0.9995，精密度≤0.99%，平均回收率为99.4%，RSD≤2.31%，重现性好。
结论：该方法简便快、准确、稳定，可作为冰糖草总酚酸含量测定的方法。
标签：冰糖草；总酚酸；含量测定；分光光度法Determination of Total Phenolic Acid in Scoparia dulcisCHEN LizhenAI ZhaohuiCAI LanjieLI JuanZHAI RuiruiFU YurongDepartment of Pharmacy，Hainan Medical College，Haikou 571199，Hainan，P. R. ChinaAbstract：[WTHZ]Objective[WTBZ] To establish the methods for detection of total phenolic acid in Scoparia dulcis. [WTHZ]Methods[WTBZ] Total phenolic acid was analyzed by spectrophotometry at 720nm. Gallic acid as a reference，the colour reaction agent was the mixture solution of 0.6%FeCl3-0.9%K3[Fe（CN）6]（1∶0.9）. [WTHZ]Results[WTBZ] The linear correlation coefficient of total phenolic acid was 0.9995. The precisions were less than 0.99%；the average recovery was 99.4% with RSD of less 2.31%. [WTHZ]Conclusion[WTBZ] The method was proved to be fast，simple，accurate and reliable for the quality control of gallic acid and total phenolic acid in Scoparia dulcis.Keywords：Scoparia dulcis；Total Phenolic Acid；Quantitative method；Spectrophotometry冰糖草为玄参科植物野甘草Scoparia dulcis L.的全草，为多年生草本植物，主要分布于我国广西、海南、广东、福建、台湾及东南亚地区等，别名假甘草、假枸杞、通花草、热痱草、米碎草等[1]。
苦豆草生物碱的酶法提取工艺优选
苦豆草生物碱的酶法提取工艺优选李军;郝彩琴;冷晓红【摘要】目的:优选苦豆草的酶法提取工艺,提高苦豆草生物碱的提取率.方法:以苦豆草生物碱为指标,通过单因素实验及正交试验优化酶质量浓度、pH、酶解温度、酶解时间等工艺参数.结果:最佳提取工艺条件为:酶解时间4h,缓冲液pH=6,酶用量为1mg/g,酶解温度50℃,酶法提取的提取率比传统提取法提高了37%.结论:该工艺简单、合理,适用于工业化生产.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2017(026)006【总页数】3页(P20-22)【关键词】苦豆草;生物碱;酶法提取【作者】李军;郝彩琴;冷晓红【作者单位】宁夏职业技术学院,宁夏银川 750021;宁夏中药材开发与利用工程技术研究中心,宁夏银川 750021;宁夏职业技术学院,宁夏银川 750021;宁夏中药材开发与利用工程技术研究中心,宁夏银川 750021;宁夏职业技术学院,宁夏银川750021;宁夏中药材开发与利用工程技术研究中心,宁夏银川 750021【正文语种】中文【中图分类】R284苦豆草系豆科槐属苦豆子(Sophora alopecuroides L.)的干燥地上部分[1]。
苦豆草全株味极苦、性寒、有毒，具有清热解毒、抗菌消炎的作用，民间用其根治疗喉痛、咳嗽、痢疾及湿疹等[2] 。
其主要化学成分为生物碱和黄酮，且生物碱已制成苦参素、妇炎栓、克泻灵等药物[3] 。
目前，苦豆草中总生物碱的提取多为超声、微波和回流提取方法[4]，其不易放大到工业生产、提取率偏低、提取时间长，而近年来生物酶被用于辅助提取中药材有效成分。
选用恰当的酶，可以温和地将中药材的细胞壁破坏，达到最高提取收率[5]。
酶法提取具有节约能源和时间、降低生产成本，产物稳定、纯度和活性高的优点。
实验拟在酸提工艺前加一步酶解过程，使纤维素酶破坏细胞壁并将纤维素软化，促进有效成分溶出，从而提高苦豆草总生物碱的收率。
1.1 仪器往复式切药机(山东青州精诚制药设备有限公司)；TU-1810紫外分光光度计(北京普析通用分析仪器有限公司)；DHG-9140A型电热恒温干燥箱(郑州南北仪器设备有限公司)；AE-240电子天平(上海梅特勒-托利多有限公司)；DKB-8A 电热恒温水槽(上海精宏仪器设备有限公司)；130-A 型高速粉碎机(长沙市中南制药机械厂)。
紫茎泽兰中的酚酸衍生物和甾类化学成分
紫茎泽兰中的酚酸衍生物和甾类化学成分任慧;张梅;周忠玉;谭建文;万方浩【摘要】为了解紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng.)的化学成分，从其地上部分茎和叶中分离得到4个酚酸衍生物和5个甾体化合物。
经光谱分析，分别鉴定为2-羟基苯丙醇(1)、香豆素(2)、去甲氧基英西卡林(3)、英西卡林(4)、3β-acetoxy-25-hydroxydammara-20,23-diene (5)、3β-acetoxy-24-hydroxydammara-20,25-diene (6)、豆甾-4,22-二烯-3-酮(7)、豆甾醇(8)和β-胡萝卜苷(9)。
化合物1、2、5~7为首次从该植物中分离得到。
%In order to understand the chemical constituents of Eupatorium adenophorum Spreng., four phenolic derivatives and ifve steroids were isolated from the ethanol extract of the stems and leaves of E. adenophorum. On the basisof spectral data, they were identiifed as 2-hydroxyphenylpropanol (1), coumarin (2), demethoxyencecalin (3), encecalin (4), 3β-acetoxy-25-hydroxydammara-20,23-diene (5), 3β-acetoxy-24-hydroxydammara-20,25-diene (6), stigmasta-4,22-dien-3-one (7), stigmasterol (8), β-daucosterol (9), respectively. Compounds 1, 2 and 5-7 were isolated from this plant for the ifrst time.【期刊名称】《热带亚热带植物学报》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】6页(P413-418)【关键词】紫茎泽兰;酚酸衍生物;甾体;化学成分【作者】任慧;张梅;周忠玉;谭建文;万方浩【作者单位】中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室，中国科学院华南植物园，广州510650; 中国科学院大学，北京100049;中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室，中国科学院华南植物园，广州510650; 中国科学院大学，北京100049;中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室，中国科学院华南植物园，广州510650;中国科学院植物资源保护与可持续利用重点实验室，中国科学院华南植物园，广州510650;中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室，北京100193【正文语种】中文紫茎泽兰(Eupatorium adenophorum Spreng.)隶属于菊科(Compositae)泽兰属，为多年生、丛生状常绿半灌木植物，原产于中北美洲墨西哥、哥斯达黎加等地，现已广泛分布于热带、亚热带的30多个国家和地区，是一种世界性入侵杂草[1–2]。
探究外来入侵植物野茼蒿水浸提液对3种豆科植物的化感作用
探究外来入侵植物野茼蒿水浸提液对3种豆科植物的化感作
用
杨义;吴显芝;蒋美琼;赵彩霞;潘豪
【期刊名称】《凯里学院学报》
【年(卷),期】2022(40)6
【摘要】采用纸上发芽法研究野茼蒿(Crassocephalum crepidioides)不同浓度水浸提液对黄豆、绿豆和红豆的化感作用.结果表明,野茼蒿水浸提液对3种豆科植物都有抑制作用,抑制作用大小与水浸提液浓度大小呈正相关.不同浓度野茼蒿水浸提液化感效应指数均为负值,所有浓度的野茼蒿水浸提液对黄豆、绿豆和红豆的化感综合效应均为负值,即均表现为抑制作用.3种豆科植物对野茼蒿的化感作用敏感性不同,野茼蒿对黄豆的抑制作用最强,红豆次之,绿豆最弱.
【总页数】5页(P49-53)
【作者】杨义;吴显芝;蒋美琼;赵彩霞;潘豪
【作者单位】黔东南州民族高级中学;凯里学院;黔东南州振华民族中学
【正文语种】中文
【中图分类】S52
【相关文献】
1.外来入侵植物银胶菊水提物对三叶鬼针草和茶条木种子萌发的化感作用
2.恶性入侵植物土荆芥浸提液对大豆种子的化感作用研究
3.外来入侵植物牛膝菊和野茼蒿
水浸提液化感作用的生物测定4.青葙叶水浸提液对豆科植物种子发芽化感作用研究5.4种菊科入侵植物叶水浸提液对狗牙根种子萌发的化感作用
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四种豆科牧草生产能力和质量的比较试验
四种豆科牧草生产能力和质量的比较试验
滕少花
【期刊名称】《广西畜牧兽医》
【年(卷),期】2000(016)002
【摘要】采用随机区组排列进行２年的４个豆科牧草品比试验，结果表明：合萌
的产量最高，适应性好、再生能力强，年产鲜草６０２０千克／亩，比其它参试豆科牧草提高１￣２０倍；合萌的营养素含量高，粗蛋白质达干物质的１９．８９％，比其它参试品种高２１．８％￣３９．４％。
氨基酸含量，特别是赖氨经其它品种高２２．５３％￣１１１．１１％，蛋氨酸含量高２９．０３％。
它适用于改良草地，供刈割鲜喂或晒制干草粉。
【总页数】3页(P11-13)
【作者】滕少花
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】S54
【相关文献】
1.三种豆科牧草中过氧化物酶同工酶及脂酶同工酶的比较试验 [J], 孙立杰;高原;宋彩芹;东彦新
2.四种豆科牧草的种植及生产性能比较试验 [J], 滕少花;赖志强;顾国才;韦锦益;李
冬郁;梁永良
3.豆科与禾本科牧草在山羊瘤胃内的降解率比较试验 [J], 刘大林;赵国琦;王学峰;
任善茂;殷海艳
4.豆科与禾本科牧草在山羊瘤胃内的降解率比较试验 [J], 刘大林;赵国琦;王学峰;任善茂;殷海艳
5.铁杆蒿枯落物对四种豆科牧草的化感作用 [J], 雷威肖;李伟;郭梁;程积民;张义;郑周敏;赵妮
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不同产地珠子草药材中有效成分咖啡酸含量的测定
不同产地珠子草药材中有效成分咖啡酸含量的测定梁云;李彩东;张伟;王信【摘要】Objective: To establish the determ ination method of caffeic acid in ZhuZiCao (Phyllanthus niruri Linn) and compare its contents of ZhuZiCao from different producing areas. Method: HPLC was adopted, chrom atographic colum n: Shim azu C18 (150 m m ×4.6 m m , 5 μm); m obile phase: acetonitrile (B): 0.1% phosphoric acid (A); gradient elution, the flow rate was 0.8 mL/min; the temperature was room temperature; detection w avelength w as 270 nm ; sam pling w as 10 μL. R esult: Caffeic acid of ZhuZiCao from 11 producing areas show ed the linear relationship in the range of 0.122 to 0.610 mg/m average recovery rate was 100.06% . Conclusion: The method, sim ple, accurate and feasible, could be used forthe determ ination of caffeic acid of ZhuZiCao; the contentof caffeic acid from Yunnan is higher than the ones from others places, the genuineness of ZhuZiCao from Yunnan could be identified by judging the contents of caffeic acid.%目的:建立珠子草药材中咖啡酸含量的测定方法,并对不同产地珠子草咖啡酸含量进行比较.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:ShimazuC18(150 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈(B)∶0.1%磷酸(A)梯度洗脱,流速:0.8 mL/min;柱温:室温;检测波长:270 nm;进样量10 μL.结果:测得11个产地珠子草中咖啡酸含量在0.122～0.610 mg/mL浓度范围内,平均加样回收率100.06%.结论:该测定方法操作简便,结果准确,可用于珠子草中咖啡酸含量的测定;云南产珠子草咖啡酸含量明显高于其他各地,以咖啡酸含量进行评判,云南产珠子草具有其道地性.【期刊名称】《西部中医药》【年(卷),期】2013(026)005【总页数】3页(P22-24)【关键词】珠子草;高效液相色谱法;咖啡酸;含量测定【作者】梁云;李彩东;张伟;王信【作者单位】兰州市肺科医院,甘肃,兰州,730046;兰州市第二人民医院;兰州市第二人民医院;兰州市第二人民医院【正文语种】中文【中图分类】R284.1珠子草(Phyllanthus niruri L inn)为大戟科叶下珠属植物，是我国传统的中草药，具有平肝清热、利水解毒之功效，常用于肠炎、肝炎、痢疾、尿路感染、无名肿痛等疾病的治疗，具有明显的抗乙型肝炎病毒活性及对肝损伤的保护作用，且毒副作用低，是一种值得深入开发的天然药物。
水分含量对红豆草青贮发酵品质的影响
水分含量对红豆草青贮发酵品质的影响吴璞;王虎成;沈禹颖【期刊名称】《草业科学》【年(卷),期】2024(41)3【摘要】以红豆草(Onobrychis viciaefolia)为试验材料,探究不同水分含量对其青贮发酵品质的影响,并利用主成分分析进行青贮品质综合评价,以期筛选出红豆草青贮调制的适宜水分。
试验以含水量为60%的红豆草为原料,在此基础上添加无菌水,使其水分含量分别达到65%、70%和75%,青贮60 d后测定其感官品质、发酵性能、营养成分及微生物组成。
结果表明:1)水分含量为65%的青贮组感官评价得分最高;2)水分含量对红豆草青贮pH、乳酸、丁酸、粗蛋白、粗灰分影响显著(P<0.05),其中70%水分含量青贮组pH(P=0.04)及丁酸(P=0.04)含量显著高于其他处理组,65%和75%水分含量的青贮组乳酸含量显著高于其他处理组(P=0.01),粗蛋白含量在含水量为65%的青贮组中最高(P=0.001);3)60%和65%水分含量的红豆草青贮其乳酸菌含量显著高于其他处理组(P<0.05);4)通过主成分分析,红豆草青贮品质排名依次为水分含量65%、60%、70%、75%的青贮组。
综合分析,65%的水分含量为红豆草青贮调制的适宜水分。
【总页数】9页(P770-778)【作者】吴璞;王虎成;沈禹颖【作者单位】兰州大学草地农业科技学院【正文语种】中文【中图分类】S81【相关文献】1.贮藏温度和青贮时间对高水分苜蓿青贮发酵品质的影响2.同型发酵乳杆菌对低水分紫花苜蓿青贮发酵品质及体外消化率的影响3.不同水分吸附材料对象草青贮发酵品质及好氧稳定性的影响4.皇竹草与茅台酒糟混合青贮对其养分含量、发酵品质及微生物多样性的影响5.不同水分含量和添加物对柚皮渣青贮发酵品质及营养成分的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
刺芫荽水提液中总酚酸含量的测定
刺芫荽水提液中总酚酸含量的测定
翟锐锐;付煜荣;艾朝晖;陈丽珍;周丹
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2015(042)005
【摘要】目的:测定刺芫荽水提液中总酚酸(TPA)的含量.方法:总酚酸的含量测定采用可见分光光度法,以没食子酸为对照品,以0.6％FeCl3～0.9％
K3[Fe(CN)6](1∶0.9)混合液为显色剂,在720 nm波长处进行测定.结果:分光光度法测定总酚酸在所试浓度范围内(0.224～1.120μg/mL)线性关系良好,r=0.9996.总酚酸的平均回收率为97.3％,RSD为1.7％.结论:本法简单快捷,重现性好,可作为刺芫荽总酚酸的质控方法.
【总页数】2页(P136,135)
【作者】翟锐锐;付煜荣;艾朝晖;陈丽珍;周丹
【作者单位】海南医学院,海南海口571199;海南医学院,海南海口571199;海南医学院,海南海口571199;海南医学院,海南海口571199;海南医学院,海南海口571199
【正文语种】中文
【中图分类】O65
【相关文献】
1.木瓜中总酚酸的含量测定及不同炮制品的含量比较 [J], 吴艳芳;曾秋霞;王光宁
2.刺芫荽中总黄酮含量的测定 [J], 杨梦成;谢飞;黄晓孟;林华铭;艾朝辉;杨瑞;翟锐锐
3.桃红四物汤水提液中总酚酸含量测定 [J], 李倩;李俊娟;郭春燕;付煜荣
4.刺芫荽中多糖的提取工艺优化及含量测定 [J], 何月秀;王崟宁;曾维晶;李安顺;翟锐锐;李娟;艾朝辉
5.桃红四物汤乙醇提取液和水提液中总酚酸含量测定及清除DPPH自由基活性的研究 [J], 杨辉;胡燕峰;郭春燕
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NaNO_2-Al(NO_3)_3显色测定丹参及其制剂中水溶性酚酸总量
NaNO_2-Al(NO_3)_3显色测定丹参及其制剂中水溶性酚酸
总量
黄喜茹;曹冬;樊淑彦;侯海妮
【期刊名称】《化学试剂》
【年(卷),期】2005(27)12
【摘要】研究建立丹参及丹参制剂中水溶性酚酸总量的测定方法,以其中水溶性酚酸总量可作为质量控制指标之一。
利用丹参中水溶性酚酸类成分与亚硝酸钠和硝酸铝溶液在碱性条件下的显色反应,比色法测定丹参及其制剂中水溶性酚酸(以原儿茶醛计)的总量。
原儿茶醛在3.336～14.46μg/mL范围内呈良好的线性关系,回归方程为A=0.02777c+0.01279(r=0.9996),加样平均回收率为100.8%,RSD为
0.96%。
该法可用于丹参及其制剂的质量控制。
【总页数】3页(P745-746)
【关键词】丹参;原儿茶醛;水溶性酚酸总量;比色法;质量标准
【作者】黄喜茹;曹冬;樊淑彦;侯海妮
【作者单位】河北医科大学药学院分析化学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】O657.3;R917
【相关文献】
1.丹参及丹参制剂中水溶性酚酸总量的测定 [J], 曹冬;黄喜茹;刘振通;范桂敏
2.高效液相色谱法测定注射用丹参多酚酸中6种水溶性成分的含量 [J], 徐静瑶;刘小琳;佟玲;岳洪水;鞠爱春;于治国
3.HPLC法同时测定丹参当归复方制剂中丹酚酸B和阿魏酸的含量 [J], 张中华
4.铁氰化钾-三氯化铁显色体系测定野生和栽培丹参及其制剂中水溶性酚酸总量 [J], 黄喜茹;高洁;马骊;韩春龙;刘振通
5.复方丹参注射液中水溶性酚酸总量的测定 [J], 曹冬;黄喜茹;刘伟娜;侯海妮
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第15卷 第5期V ol.15 N o.5草 地 学 报ACT A AG REST IA SINICA2007年 9月 Sep. 2007文章编号:1007-0435(2007)05-0401-06豆科牧草水浸提液的酚酸物质含量及化感潜力邬彩霞,李志华,沈益新*(南京农业大学动物科技学院,南京 210095)摘要:酚酸是豆科牧草水浸提液中一类重要的化感物质。
试验采用高效液相色谱法(H PL C)测定了紫花苜蓿(Medicago sativ a L.cv.A lfaking)、毛苕子(Vicia rillosa Ro th.)、黄花草木樨(Melilotus of f icinalis Desr.)、白三叶(T ri folium repens L.cv.Haifa)、红三叶(Tri f olium pretense L.)和杂三叶(Tri folium hy bridum L.)地上部分水浸提液中对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸、香豆酸、阿魏酸、原儿茶酸、丁香酸、香草酸和肉桂酸9种酚酸的含量,并检测了这6种豆科牧草水浸提液处理以及不同浓度的酚酸纯品溶液处理对多花黑麦草(Lolium multi f lorumLam.cv.T etrag old)幼苗根生长的影响。
结果表明:豆科牧草水浸提液处理能显著地抑制多花黑麦草幼苗根生长,抑制率达59.6%～97.7%;所测9种酚酸在供试豆科牧草水浸提液中普遍存在;酚酸类物质的化感作用强弱因种类而有显著差异,但均随浓度升高而加强;豆科牧草水浸提液中酚酸类物质的化感潜力存在相互作用。
关键词:豆科牧草;水浸提液;酚酸含量;化感作用中图分类号:S812 文献标识码:AQ uantification and Allelopathy Potential of Phenolic Acidsin Aqueous Extracts of LegumesWU Cai-xia,LI Zhi-hua,SH EN Yi-x in*(College of Anim al Science and T echnology,Nanjin g Agricultural University,Nanjing210095,China)A bstract:Pheno lic acid is one of the allelo chemicals.Pheno lic acids,namely p-hydroxy benzoic,chlo rogen-ic,caffeic,fe rulic,p-coum aric,pro to catechuic,sy ringic,vanillic and cinnam onic acids,in aqueous ex tracts of o ver ground part of alfalfa(Medicago sativ a L.cv.Alfaking),hairy vetch(Vicia rillosa Ro th.),y ellow sw ee tclover(Melilotus o f f icinalis Desr.),w hite clo ver(Tri folium repens L.cv.H aifa),red clo ver (Trif olium pretense L.),and alsike clove r(Tri folium hybridum L.)had been quantified by high perform-ance liquid ch ro matography.A nd the inhibitio n rate o f ro ot grow th of Italian ry eg rass(Lolium m ulti f lo-rum Lam.cv.Te trago ld)treated by the aqueous ex tracts and phenolic acid solutions w ere tested.The re-sult show ed that ro ot g ro w th of Italian ryeg rass seedling w as inhibited significantly by application of the a-queous ex tracts with inhibition rates o f59.6%～97.7%.Nine tested phenolic acids w ere all detected in the aqueous extracts of the6tested leg umes.A lthought the allelo pathic effect of the phenolic acids o n ro ot grow th o f Italian ryeg rass seedlings w as sig nificantly diffe rent,but the inhibitio n rate o f the ro ot grow th w as stronger w ith the phenolic acid so lutions concentration increasing.Allelopa thic inte ractio ns existed a-m ong phenolic acids in the aqueo us ex tracts of legume herbages.Key words:Legume herbages;Aqueous extracts;Phenolic acids content;Allelopathy 紫花苜蓿(Medicago sativa L.)、毛苕子(Vicia rillosa Ro th.)、黄花草木樨(Melilotus o f f icinalis Desr.)、白三叶(Trif olium repens L.)、红三叶(Tri folium pretense L.)和杂三叶(Tri f olium hy-bridum L.)等豆科牧草均具有较强的化感作用潜势[1～3]。
在以前的研究中,我们已经探讨并比较了紫收稿日期:2007-04-04;修回日期:2007-05-08基金项目:江苏省自然基金(BK2005092)作者简介:邬彩霞(1978-),女,汉,内蒙古人,博士研究生,研究方向为牧草栽培与利用;*通讯作者Author for corresp on dence,E-mail: yxshen@草 地 学 报第15卷花苜蓿、毛苕子、黄花草木樨、白三叶、红三叶和杂三叶6种豆科牧草地上水浸提液对多花黑麦草(Lolium multi f lorum Lam.)种子萌发及幼苗生长的化感作用,发现豆科牧草水浸提液对多花黑麦草生长有较强的化感抑制作用,且多花黑麦草幼苗根生长的受抑程度可以很敏感地反映豆科牧草化感潜势的强弱[1]。
酚酸是植物体内普遍存在的重要的化感物质之一[4],也是一些豆科植物所含有的重要化感物质[5]。
有研究证明,大部分酚酸类物质均具有化感作用[6],但各类研究对各种酚酸物质的化感作用强度尚未有一致结论。
有关豆科牧草酚酸类物质的含量及其在化感作用中的相互作用更是鲜见报道。
本研究采用高效液相色谱(H PLC)法[7]测定了紫花苜蓿等6种豆科牧草水浸提液中香豆酸、原儿茶酸、丁香酸、香草酸和肉桂酸等9种酚酸类物质的含量,并分析了各种酚酸物质的化感作用潜力及其在天然混合状态下的化感作用,旨在进一步揭示豆科牧草化感作用的机理,并为豆科牧草化感作用的田间应用提供理论依据。
1 材料与方法1.1 材料来源供试豆科牧草紫花苜蓿(品种:Alfaking)、白三叶(品种:H aifa)、红三叶、毛苕子、黄花草木樨和杂三叶于2004年10月中旬播种于江苏省农科院试验田。
2005年5-6月分别于各豆科牧草盛花期采集其完整植株备用。
供试豆科牧草种子均由北京中种草业公司提供。
多花黑麦草(品种:Te trago ld)种子由百绿集团北京办事处提供,作为生物检测的受体植物。
1.2 豆科牧草茎叶水浸提液的制备及生物检测水浸提液制备:分别取供试豆科牧草盛花期新鲜茎叶100g,剪成2cm长的小段,用1000m L蒸馏水5℃浸提72h,获得初提液;经双重过滤(分别用定量滤纸过滤和用滤元单位为0.45μm的滤膜过滤),得到无微生物污染的水浸提液,4℃冷藏备用。
生物检测:在Ø9cm的培养皿中加入70g石英砂,每个培养皿播多花黑麦草种子50粒,加15m L 豆科牧草茎叶水浸提液,对照加等量去离子水。
20℃光照培养(光照时间12h/d,光照强度4000lx)。
试验采用完全随机区组设计,3次重复,14d后测量多花黑麦草幼苗根长,计算化感作用抑制率(IR)。
IR=(T0-T i)/T0其中,T i为豆科牧草水浸提液处理组的多花黑麦草幼苗根长;T0为对照组多花黑麦草的幼苗根长。
IR>0时,处理表现为抑制作用,IR<0时,表现为促进作用;IR的绝对值表示作用强度的大小。
1.3 豆科牧草茎叶水浸提液的酚酸含量测定1.3.1 色谱条件 日本岛津高效液相色谱仪,LC-10ATv p液相色谱泵,岛津SPD-10Avp紫外可见检测器,C TO-10A svp柱温箱,岛津N-2000色谱工作站和岛津色谱柱(C18,4.6×250m m)。
双泵体积流量“SI”之和为1.0m L/min,调整两泵的流量比例以分离酚酸物质。
流动相:乙腈(A泵)和含冰醋酸0.5%的水(B 泵),乙腈和冰醋酸均为色谱纯,水为双蒸水。
乙腈和冰醋酸均购自美国TEDIAM公司。
柱温:35℃。
进样量:20μL。
流速:1.0mL/min。
梯度洗脱:程序设定0.01min时A∶B(V∶V)为10%∶90%,到25min时A∶B匀速升到20%∶80%,到35min 时,A∶B匀速升到25%∶75%,保持A∶B=25%∶75%到37min,37.01min时,A∶B回到初始的10%∶90%。
检测波长:254nm。
1.3.2 标准曲线及样品的测定 准确配制对羟基苯甲酸、丁香酸和香草酸等9种酚酸标准品各0.0100g,分别溶于少量色谱纯乙腈中,用双蒸水定容至100m L,配成标准溶液备用。
9种酚酸标准品均购自美国Sigma公司。
准确吸取0.0125、0.05、0.2、1、5、20m L标准液于容量瓶中,双蒸水定容至100m L,得到系列浓度的标准液。
将系列浓度标样分别在ODS柱上分离,确定酚酸浓度与紫外吸收峰面积之间的回归关系,得到标准曲线。