两种结核抗体检测方法对结核病的诊断价值_左涛

Ａｂｓｔａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｘｐｌｏｒｅ ｔｈｅ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｂｙ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ． Ｍｅｈｔｏｄｓ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｔｏ Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｉｎ １４１ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｎｄ ５２ ｎｏｎ－ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｗｅｒｅ ｃｏｍｐａｒｅｄ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｈｉｐ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ５２．４８％ ｉｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ １３．４６％ ｉｎ ｎｏｎ－ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗｉｎｇ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ （P＜０．０５）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ＥＬＩＳＡ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ４８．２３％ ｉｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ２１．１５％ ｉｎ ｎｏｎ－ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ，ａｌｓｏ ｓｈｏｗｉｎｇ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（P＜０．０５）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅ ｏｆ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｙ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ｗａｓ ８１．５６％ ，ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ａｌｏｎｅ． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ａｒｅ ｖａｌｕａｂｌｅ ｉｎ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｂｙ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ＥＬＩＳＡ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｅｎｈａｎｃｅｄ．
摘要：目的 研究结核蛋白芯片技术、ＥＬＩＳＡ 法检测结核抗体对诊断结核病的价值。 方法 选取 １４１ 例结核病 患者、５２ 例非结核病患者进行结核蛋白芯片、ＥＬＩＳＡ 法检测结核抗体的表达。 结果 结核蛋白芯片检测在结核病 组表达的阳性率为 ５２．４８％，在非结核病组的阳性率为 １３．４６％，差别有统计学意义（P＜０．０５）；ＥＬＩＳＡ 检测在结核病组的 阳性率为 ４８．２３％，在非结核病组的阳性率为 ２１．１５％，两组表达差异有统计学意义（P＜０．０５）。两种方法联合检测阳性率 为 ８１．５６％。 结论 两种检测方法对结核病的诊断均有一定价值，在肺结核患者中检测的阳性率高于非肺结核患 者。两种方法联合检测能提高检测的阳性率、敏感度。
１．１ 病例资料 选取 ２０１２ 年 １ 月 ￣２０１２ 年 ６ 月间 我院胸外科收治的均经病理确诊的结核病患者 １４１ 名，年龄范围为 ９ 月 ￣６８ 岁，男 ８３ 例，女 ５８ 例；其中 肺结核 ３５ 例，肺外结核 ７８ 例（其中淋巴结核 ３８ 例， 结核性胸膜炎 ２１ 例，胸壁、乳腺结核 １４ 例，气管、支 气管结核 ４ 例，结核性心包炎 １ 例），同时肺内、肺外 结核同时伴发 ２８ 例。所有病例均经病理确诊为结核 病。选取同期在院的非结核患者 ５２ 例作为对照，其中 非特异性淋巴结炎 １４ 例，淋巴瘤 ３ 例，肺癌 １７ 例，肺 真菌病 ７ 例，自发性气胸 ８ 例，支气管扩张 ３ 例。 １．２ 检测方法 １．２．１ 蛋白芯片技术 采取静脉血，新鲜分离血清。 用结核蛋白芯片和芯片阅读仪（南京大渊生物技术工 程有限公司提供），按芯片说明书进行操作。结果根据 仪器生产厂家设置参数自动判别 。 １６ｋＤ、３８ｋＤ 和 ＬＡＭ 中任一指标为阳性判为结核蛋白芯片检测结果 为阳性。 １．２．２ 结核抗体检测 ＥＬＩＳＡ 试剂由四川省绵阳市
组别 Ｇｒｏｕｐ
总数（例） Ｎｏ．ｃａｓｅ
DOI:10.13604/ki.46-1064/r.2013.03.019
中国热带医学 ２０１３ 年第 １３ 卷第 ３ 期 Ｃｈｉｎａ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ａｐｒｉｌ ２０１３ Ｖｏｌ ． １３ Ｎｏ ．３
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两种结核抗体检测方法对结核病的诊断价值
·论 著·
左涛，倪正义，周密，汤中文，杨智峰
４０４ 医院科技开发部提供，按试剂盒说明书进行检 测。结果根据仪器生产厂家设置参数自动判别。 １．３ 统计学方法 全组数据经 ＳＰＳＳ １７．０ 统计软件 处理，计数资料、两样本率的比较用 χ2 检验，两组之 间的差异以 P＞０．０５ 为有统计学意义。应用 ＳＰＳＳ１７．０ 软件绘制 ＲＯＣ 曲线，并计算曲线下的面积。 ２ 结果 ２．１ 两种检查检测阳性率在结核组与非结核组的比 较 结核蛋白芯片检测在结核病组的阳性率为 ５２．４８％（７４／１４１）， 其 中 １６ＫＤ 的 阳 性 率 为 １４．８９％ （２１／１４１），３８ＫＤ 的阳性率为 ３６．１７％（５１／１４１），ＬＡＭ 的 阳性率为 ４６．１０％（６５／１４１）。其在非结核病组的阳性 率为 １３．４６％（７／５２）。结核蛋白芯片检测在结核病组 的阳性率大于非结核病组，两组之间的差异具有统计 学意义（P 值 ＜０．００１）。ＥＬＩＳＡ 检测在结核病组的阳性 率 为 ４８．２３％（６８／１４１）， 在 非 结 核 病 组 的 阳 性 率 为 ２１．１５％（７／５２）。ＥＬＩＳＡ 检测在结核病组的阳性率大于 非结核病组，两组之间的差异具有统计学意义（P 值 ＜０．００１）。（见表 １）应用 ＳＰＳＳ 软件计算结核蛋白芯片、 ＥＬＩＳＡ 两种检测方式在两组患者间阳性率的差异， P＞０．０５，不具有统计学意义。
２．４ 两者联合检测 在同一样本上同时应用两种检 测方法，以两种检测方法中任意一种阳性为联合检测 阳性，结核病组阳性例数为 １１５ 例，阳性率为 ８１．５６％ （１１５／１４１），非结核的阳性率为 ３２．６９％（１７／５２）。联合 检测的敏感度为 ８１．５６％（１１５／１４１），特异度为 ７１．１５％ （３５／５２）。联合检测阳性率 ８１．５６％（１１５／１４１）大于单独一 种方法检测的阳性率，差异具有统计学意义（P＜０．０５）。
作者单位：武汉市医疗救治中心胸外科，湖北 武汉 ４３００２３ 作者简介：左涛（１９８７￣），男，汉族，湖北潜江，硕士，医师，研究方向：肺结核的临床与基础研究。
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Ｃｈｉｎａ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ａｐｒｉｌ ２０１３ Ｖｏｌ ． １３ Ｎｏ ．３ 中国热带医学 ２０１３ 年第 １３ 卷第 ３ 期
酶联免疫
ｃｈｉｐ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ
吸附法
ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ P 值 （ＥＬＩＳＡ）
总数
阳性率 P ｖａｌｕｅ
阳性 P 值
（例）
Ｐｏｓｉｔｉｖｅ
＋
Ｎｏ．ｃａLeabharlann ｅｒａｔｅ（％）Ｐｏｓｉｔｉｖｅ P ｖａｌｕｅ ＋
ｒａｔｅ（％）
１４１ ７４ ５２．４８ ＜０．０５ ６８ ４８．２３ ＜０．０５
的患者上检测的阳性率为 ５７．１４％。三者之间的差异 具有统计学意义（P＜０．０５），两两比较，发现结核蛋白 芯片在肺外结核病中的阳性率小于有肺结核病存在 的患者中的阳性率。ＥＬＩＳＡ 法在三者中检测的阳性率 分别为 ６０％（２１／３５）、４１．０３％（３２／７８）、５３．５７％（１５／２８）， 三者之间的差异无统计学意义（P＞０．０５）。 ２．３ 敏感度、特异度及 ＲＯＣ 曲线 结核蛋白芯片检 测 的 特 异 度 为 ８６．５４％（４５／５２）， 灵 敏 度 为 ５２．４８％ （７４／１４１）。ＥＬＩＳＡ 的特异度为 ７８．８５％（４１／５２），灵敏度 为 ４８．２３％（６８／１４１）。两者之间灵敏度、特异度的差异 不具有统计学意义 （P＞０．０５）。统计结核蛋白芯片和 ＥＬＩＳＡ 的阳性表达和阴性表达样本，采用 ＳＰＳＳ１７．０ 对结核蛋白芯片和 ＥＬＩＳ 检测绘制 ＲＯＣ 曲线 （如图 １） 结核蛋白芯片的曲线下面积为 ０．６８８，ＥＬＩＳＡ 的曲 线下面积为 ０．６３２。
０５２ ０７ １３．４６
１１ ２１．１５
２．２ 不同类型结核病人结核蛋白芯片、ＥＬＩＳＡ 阳性 检测率的比较 结核蛋白芯片在肺结核病患者上检 测的阳性率为 ６８．５７％（２４／３５），在肺外结核病的阳性 率为 ４３．５９％（３４／７８），在肺结核、肺外肺结核同时存在
图 １ 结核蛋白芯片、ＥＬＩＳＡ 的 ＲＯＣ 曲线 Ｆｉｇｕｒｅ １ Ｔｈｅ ＲＯＣ ｃｕｒｖｅｓ ｏｆ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ，ＥＬＩＳＡ
表 １ 结核病组与非结核病组检测结果的阳性率比较 Ｔａｂｌｅｒ １ Ｔｏ ｃｏｍｐａｒｅ ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｉｎ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｎｏｎ－ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ ｇｒｏｕｐ
组别 Ｇｒｏｕｐ
结核病组 ＴＢ 非结核病组 Ｎｏｎ－ＴＢ
结核蛋白芯片
ＴＢ ｐｒｏｔｅｉｎ
两种抗体检测方法联合检测无显著性差异，有无 相关性吗是互补同时检测，还是只要一种检测方法就 够了未讲明白。
表 ２ 不同类型结核病人结核蛋白芯片、ＥＬＩＳＡ 阳性检测率的比较
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ ｏｆ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｔｔｅｒｎｓ ｏｆ ＴＢ ｃａｓｅｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＴＢ ｐｒｏｔｅｉｎ ｓｈｉｐｓ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ