平板菌落计数法水中微生物的检测
微生物菌落总数计数方法
微生物菌落总数计数方法微生物菌落总数计数方法有很多种，下面列举了其中的50种方法并对其进行详细描述：1. 胶平板法：将微生物样品通过稀释后均匀涂布在富营养培养基上，培养后统计菌落数量。
2. 液体计数法：使用专门的装置进行微生物菌落计数，例如波形计数器。
3. 膜过滤法：将微生物样品通过膜过滤器，然后将膜放到富养分培养基上进行培养和计数。
4. 容积法：将微生物样品通过稀释，然后使用容积计数器对其进行计数。
5. 水平采样法：将微生物样品通过固体培养基，然后根据采样水平进行菌落计数。
6. 微阵列计数法：使用微阵列技术进行微生物菌落计数，高通量，自动化程度高。
7. 波数计数法：通过光学检测装置对微生物样品的波数进行计数。
8. 流式细胞技术：通过流式细胞仪对微生物样品中的细胞进行计数和分析。
9. PCR技术：通过定量PCR对微生物样品中的特定基因进行定量，从而间接计算出微生物菌落总数。
10. 分光光度计法：通过分光光度计测定微生物样品中生物的光学密度，进而计算其菌落总数。
11. 过膜法：利用薄膜将微生物分布均匀后计数。
12. 电子计数法：通过电子显微镜进行微生物菌落计数。
13. 温度计数法：根据微生物在不同温度下的生长特性进行计数。
14. 荧光法：利用荧光染料对微生物菌落进行标记并计数。
15. 光学显微镜法：利用光学显微镜对微生物进行直接观察和计数。
16. 超声波法：利用超声技术将微生物分散均匀后计数。
17. 图像分析法：对微生物样品在图像上的特征进行分析，并计算菌落总数。
18. 颜色计数法：通过颜色反应对微生物菌落进行计数。
19. 电泳计数法：通过蛋白电泳对微生物进行计数。
20. 微型生物反应器法：利用微型生物反应器的特性对微生物进行计数。
21. 电化学法：通过电化学技术对微生物样品进行计数。
22. 生物传感器法：利用生物传感器对微生物进行快速计数。
23. 感光计数法：利用光敏感材料对微生物进行计数。
24. 气溶胶计数法：利用气溶胶技术对微生物进行计数。
微生物菌落计数实验报告
微生物菌落计数实验报告实验目的：本实验旨在通过微生物菌落计数方法，确定水样中细菌和真菌的菌落数，以评估水质的卫生安全水平。
实验原理：微生物菌落计数是一种常用的微生物计数方法，通过将待检测样品在适当培养基上培养，促使微生物菌落形成，然后用目镜进行观察计数。
细菌和真菌在不同培养基上生长的特性不同，利用这一特性可以分别计数。
瓶子计数法和平板计数法是常用的微生物菌落计数方法。
实验步骤：1. 做好消毒准备，将取样瓶开盖，取适量水样。
2. 用无菌移液管分别移取水样至含有不同培养基的培养皿中。
3. 均匀涂抹样品，覆膜，进行培养。
4. 培养后观察培养皿上的菌落形成情况，用计数板进行计数。
5. 计算出每毫升水样中的微生物菌落数。
实验结果：根据观察和计数，得出水样中细菌和真菌的菌落数分别为XXX CFU/mL和XXX CFU/mL。
实验分析：通过微生物菌落计数实验，我们可以了解水质中微生物的富集情况，评估水样的卫生安全性。
根据实验结果，可以判断水样是否存在污染，进而采取相应措施提高水质。
结论：微生物菌落计数实验是一种简单而有效的水样检测方法，可以帮助我们及时了解水质情况，保障人们的健康。
在日常生活中，我们应该重视水质安全问题，做好水质检测和管理工作。
实验注意事项：1. 操作时要保持无菌环境，避免外界微生物的污染。
2. 操作时要注意个人防护，避免实验中发生意外伤害。
3. 实验后要及时处理实验用具，保持实验室整洁。
通过微生物菌落计数实验，我们可以更深入了解水质情况，及时采取措施改善水质，保障人们的生活健康。
愿我们在未来的生活中，都能享受清洁卫生的水资源，健康快乐地生活。
水中微生物的测定-国标法(水质检测)
水中微生物的测定-国标法(水质检测)
摘要
本文介绍了水中微生物的测定方法，以国家标准法为基础。
水中微生物的测定是水质检测的重要环节，可以评估水的卫生状况，以及相关的环境健康风险。
引言
水是人类生活中必不可少的资源，保证水质安全对于人类健康至关重要。
水中微生物作为一种主要的水质指标，可以反映水中存在的微生物污染程度。
因此，精确测定水中微生物的数量是进行水质检测的基本要求之一。
国标法测定方法
样品收集与处理
1. 确定采样点及采样时间，避免样品受到外界干扰。
2. 使用干燥及密闭的收集水样，并尽量防止样品受到氧气、光照和高温的影响。
3. 避免采样与外界环境接触，以防止二次污染的发生。
样品制备与预处理
1. 根据国家标准法的要求，将收集的水样进行适当的稀释，使其微生物数量在可测量的范围内。
2. 使用适当的培养基进行预处理，以促进微生物的生长。
微生物测定方法
1. 平板计数法：将经稀释处理的水样均匀地分布在培养基上，通过培养基固化后，计数形成的菌落数量，并据此推算出水样中微生物的浓度。
2. 膜过滤法：通过将水样通过细孔滤膜，然后将膜过滤板放置在含培养基的平板上，根据过滤后膜上菌落的数量计算水样中微生物的浓度。
结论
本文介绍了水中微生物的测定方法，基于国家标准法。
这些测定方法可以用于水质检测，评估水的卫生状况，以及相关的环境健康风险。
采样、制备和处理样品的正确操作，以及准确的测定方法选择，对于保证测定结果的可靠性至关重要。
微生物量的测定方法
微生物量的测定方法
常见的微生物量测定方法包括：
1. 平皿计数法：将样品按一定稀释倍数加入琼脂平皿中，培养后通过计数器统计微生物在平皿上的数量，以此计算原样品中微生物的数量。
2. 滤膜计数法：将样品过滤后将滤膜放在富含营养的琼脂平板上培养，通过计数器统计滤膜上微生物的数量，以此计算原样品中微生物的数量。
3. 光密度法：利用菌落浑浊作用测定微生物规模大小的方法，称为“比色法”，并以光密度来表示菌落数量的多少。
4. 电极测定法：利用特定的氧化还原反应来测定微生物量，例如，生物化学需氧量（BOD）和化学需氧量（COD）。
5. 溶解氧测定法：利用溶解氧在水中的含量来推算微生物的存在量。
6. 分子生物学方法：利用PCR、DNA芯片等技术检测微生物数量，也可通过它们的遗传物质（如rRNA）来推算微生物的存在量。
统计菌落数目的方法
统计菌落数目的方法菌落计数是微生物学实验中常用的一种方法，通过对菌落的计数可以了解样品中微生物的数量，是一种常用的微生物定量分析方法。
下面将介绍几种统计菌落数目的方法。
首先，最常见的方法是平板计数法。
这种方法是将待测样品均匀涂布在琼脂平板上，培养一定时间后，用计数器对菌落进行逐一计数，再根据菌落的分布情况和密度进行计算，从而得出样品中微生物的数量。
这种方法简单易行，是常规微生物检测的常用方法之一。
其次，滤膜计数法也是一种常用的统计菌落数目的方法。
这种方法是将待测样品过滤到含有琼脂的滤膜上，培养一定时间后，对菌落进行计数。
相比于平板计数法，滤膜计数法可以适用于微生物数量较少的样品，且可以避免样品中其他微生物的干扰，是一种比较精确的计数方法。
另外，还有一种称为MPN法的统计菌落数目的方法。
MPN法是通过对待测样品进行一系列的稀释，然后在不同浓度的样品中观察微生物的生长情况，最终根据统计学原理计算出微生物的数量。
这种方法适用于微生物数量较少的样品，且可以避免一些培养基的选择对结果的影响。
除了以上介绍的方法外，还有一些新型的统计菌落数目的方法逐渐被应用到实验中。
比如，基于图像识别技术的自动计数方法，通过对菌落图像进行处理和分析，实现对菌落数量的自动计数，大大提高了计数的效率和准确性。
另外，还有一些基于生物传感技术的微生物检测方法，可以实现对微生物的快速检测和定量分析。
总的来说，统计菌落数目的方法有很多种，不同的方法适用于不同类型的样品和不同的实验要求。
在进行微生物数量统计时，需要根据实际情况选择合适的方法，并结合实验操作规范进行准确的计数，以保证实验结果的可靠性和准确性。
希望本文介绍的方法能够对大家有所帮助。
平板菌落计数法实验报告
平板菌落计数法实验报告摘要：平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，用于测定液体样品或表面样品中微生物的数量。
本实验旨在通过平板菌落计数法确定给定液体样品中的微生物菌落的数量。
实验过程包括制备不同稀释度的样品，将样品平铺在琼脂平板上，培养并计数菌落数量。
实验结果显示不同稀释度的样品中菌落的数量，从而计算出原液中微生物的浓度。
材料和方法：1. 试剂和设备：-细菌液体培养物-无菌琼脂平板-灭菌吸管和培养皿-酒精灯或火柴-恒温培养箱-显微镜和计数室-秤量器具2. 实验步骤：1. 准备一系列不同浓度的样品，通过逐步稀释原液来获得不同稀释度的样品。
2. 取一块无菌琼脂平板，将其置于消毒柜中加热至溶化状态。
3. 将一份稀释液均匀地倒入平板上，并轻轻旋转平板，使液体均匀覆盖整个平板表面。
4. 等待琼脂凝固，将平板盖上，反转后放置在恒温培养箱中。
5. 在适当的培养温度下培养一段时间（通常为24至48小时）。
6. 取出培养好的平板，使用显微镜和计数室对菌落进行计数。
7. 根据计数结果和稀释倍数计算原液中的菌落数量和浓度。
结果：以下是实验结果的示例表格：讨论：通过平板菌落计数法，我们成功确定了给定液体样品中的微生物菌落的数量。
实验结果表明，随着稀释倍数的增加，菌落数量逐渐减少，原液中的微生物浓度也相应减少。
这种计数方法的优点是简单易行，但也存在一些限制，例如某些微生物可能不适合在琼脂平板上生长，或者某些微生物形成聚集菌落，使得计数困难。
结论：平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，通过稀释液体样品、平铺在琼脂平板上、培养和计数菌落数量，可以确定原液中微生物的浓度。
这种方法可以应用于食品、环境和医药等领域的微生物数量测定，为微生物研究和质量控制提供了重要的手段。
水中细菌总数的测定实验过程
• 2. 将河水水样分别稀释成10-1、10-2、103三个连续稀释浓度（注意：在稀释前后一 定要充分混匀）、自来水样不稀释。
• 注意：河水样的稀释，取1个灭菌空试管， 加入9mL灭菌水。用取过灭菌水的移液管取 1mL河水样，放入试管中，振荡试管混合均 匀。
• 3.吸取由高倍至低倍的稀释液，每个稀释液 分别注入3个培养皿，每皿1mL。 • 涂布平板法：用移液管吸取0.1mL水样，滴 于平板中；将玻璃涂布棒于酒精灯的外焰 上加热，杀死表面微生物，然后耐心待其 冷却，然后用涂布棒将水滴均匀的涂满整 个平板表面，尽量将水涂干。
水中细菌总数的测定
实验过程教案
教学目标
• 水中细菌总数可说明被有机物污染的程度，细菌 数越多，有机物含量越大。本实验应用平板菌落 记数技术测定水中细菌总数。由于水中细菌种类 繁多，他们对营养和其他生长条件的要求差别很 大，不可能找到一种培养基在一种条件下，是水 中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以某种培养 基平板上生长出来的菌落，计算出来的细菌总数 仅是近似值。本实验采用普通营养琼脂培养基， 该培养基营养丰富，能使大多数细菌生长。所谓 细菌总数，是指在1mL水样在普通营养琼脂培养 基中，37℃经24h培养后，所生长出来的菌落数。
• 3.水中检出的菌落总数是否代表该水中的所 有细菌数？为什么？ 人类至今没有办法培养出自然样品中的所 有微生物。非培养检测方法也没有达到 100%的效率。由于水中细菌种类繁多，他 们对营养和其他生长条件的要求差别很大， 不可能找到一种培养基在一种条件下，是 水中所有的细菌均能生长繁殖，因此，以 某种培养基平板上生长出来的菌落，计算 出来的细菌总数仅是近似值。
思考
• 1.水的检验为什么要测定细菌菌落总数？ （1）、判定水被细菌污染的程度及卫生质 量. （2）、预测水存用的期限长短. （3）、了解细菌在水中的繁殖动态. （4）、是对样品进行卫生学总评价的综合 依据
实验室生活饮用水微生物检测SOP(一)
实验室生活饮用水微生物检测SOP（一）引言概述：实验室生活饮用水微生物检测SOP是为了确保实验室饮用水的安全与卫生，检测水中的微生物污染情况，并采取相应的措施进行处理。
本文将详细介绍实验室生活饮用水微生物检测的步骤和要点。
正文：一、实验室生活饮用水微生物检测前的准备工作1. 准备所需的检测设备和试剂，包括培养基、平板计数器、显微镜等。
2. 清洗和消毒检测设备，确保设备的洁净和无菌。
3. 确保实验室供水管道的安全和干净，避免水源污染。
二、水样采集和处理1. 选择合适的水样采集器具，如钢质水样容器或无菌采样瓶。
2. 在采集水样前进行必要的洗手和佩戴消毒手套，以避免污染水样。
3. 选取水源合适的位置采集水样，尽量避免水源受到外界污染。
4. 采集水样后立即送至实验室进行处理，避免样品在运输过程中受到污染。
三、水样预处理1. 对水样进行过滤，以去除大颗粒物质和悬浮物。
2. 进行稀释处理，确保微生物数量在检测范围内。
3. 根据需要进行pH调节或添加抑菌剂，以保证后续检测的准确性和可靠性。
四、微生物检测方法1. 采用培养法进行微生物定量分析，包括总菌落计数和特定菌群检测。
2. 根据需求选择合适的培养基和培养条件，如温度、pH值等。
3. 加入样品到培养基中，进行平板计数或液体培养，并进行恰当的菌落计数。
4. 进行特定菌群的检测，如大肠杆菌、沙门氏菌等，采用相应的培养基和检测方法。
5. 采用显微镜观察法进行微生物形态和特征的检测，确保检测结果的准确性。
五、结果分析和处理1. 根据检测结果进行微生物数量统计和分析，比较检测结果与相关标准的符合情况。
2. 如发现微生物污染超过标准限值，及时采取措施进行处理和消毒。
3. 记录检测结果，并保留相关文件和数据，以备日后参考和审查。
总结：实验室生活饮用水微生物检测SOP的实施可以确保实验室饮用水的卫生安全。
通过准备工作、水样采集和处理、微生物检测方法的选择和结果分析处理，可有效地监测和控制实验室饮用水中的微生物污染，保障实验室工作人员的身体健康和实验室环境的卫生安全。
mpn法和平板计数法的原理及适用范围
mpn法和平板计数法的原理及适用范围
MPN法和平板计数法是微生物检测中常用的方法，用于对水样或
其他样品中的微生物数量进行估算。
这两种方法都是基于微生物在特
定条件下的繁殖规律而设计的。
MPN法（Most Probable Number）是一种间接计数法，适用于微
生物含量较低的样品。
它基于微生物在液体培养基中的繁殖规律，通
过观察培养液的变化来估算微生物的数量。
具体操作时，样品通过稀
释系列，分别接种到多个培养管中，并根据培养管内是否有微生物生
长来判断MPN。
平板计数法是一种直接计数法，适用于微生物含量较高的样品。
它通过将样品均匀地涂布在含有固体培养基的平板上，使其中的微生
物形成可见的菌落。
然后，通过数个平板上的菌落数量，可以估算样
品中微生物的数量。
这种方法的优点是操作简单，但对于微生物数量
较低的样品不太适用。
MPN法和平板计数法的适用范围略有不同。
MPN法通常用于对含
有微生物数量较低的样品进行估算，例如食品、饮用水等。
平板计数
法则常用于对微生物含量较高的样品进行计数，例如污水、土壤等。
选择合适的方法取决于待测试样品的特性以及所需的灵敏度和准确性。
综上所述，MPN法和平板计数法是常用的微生物检测方法，通过
对微生物繁殖规律的研究来估算样品中微生物的数量。
两种方法各有
优势，适用范围有所不同，应根据实际需要选择合适的方法进行微生
物检测。
中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法微生物指标
中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验方法微生物指标Standard?examination?methods?for?drinking?water一Microbioloical? parameters 1、菌落总数1.1平皿计数法1.1.137℃?培养48h后，所得1ml水样所含菌落的总数3gC????氯化钠5gD????琼脂10g121℃，15lb）灭菌20?min，储存于冷暗处备用。
1.1.4.1高压蒸汽灭菌器。
1.1.4.2干热灭菌箱。
1.1.4.3培养箱36℃?士2℃?。
1.1.4.4电炉。
1.1.4.5天平。
1.1.49cm45℃36℃士1℃?1cm翌中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均菌落数．乘以皿底面积63.6cm?中华人民共和国国家标准???生活饮用水标准检验方法微生物指标Standard?examination?methods?for?drinking?water一Microbiolo只ical?parameters?????2、总大肠菌群2.1多管发酵法 2.1.137℃?10g?B????牛肉膏????????????????????3g?C????乳糖??????????????????????5g?D????氯化钠????????????????????5g?E????嗅甲酚紫乙醇溶液（16g16g/l的澳甲酚紫乙醇溶液，充分混匀，分装于装有倒管的试管中，68.95kPa?(115℃，10lb10g?B??乳糖???????????????10g?C??磷酸氢二钾?????????2g?D??琼脂???????????????20g一30g?E??蒸馏水?????????????l000ml?F??伊红水溶液（20g/l)?20ml?G??美蓝水溶液（5g115℃?，10lb）高压灭菌20min。
临用时加热融化琼脂，冷至50℃?～55℃?1g?b??乙醇（95%，体积分数）??20mL?c??草酸钱水溶液（10g1g?b??碘化钾???????????2g?c??蒸馏水???????????300?mlB制法：将碘和碘化钾先进行混合，加人蒸馏水少许，充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水。
微生物生长的常用检测方法
微生物生长的常用检测方法微生物生长的常用检测方法微生物包括：细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，与人类关系密切。
下面是店铺收集整理的微生物生长的几种检测方法，希望对您有所帮助！一、生长量测定法1.1体积测量法：又称测菌丝浓度法。
通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。
方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。
菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。
1.2称干重法：可用离心或过滤法测定。
一般干重为湿重的10-20%。
在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。
干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。
如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。
称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activitydryyeast,ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
1.3比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。
通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。
对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。
将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。
该法主要用于发酵工业菌体生长监测。
如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。
平板菌落计数法实验报告
平板菌落计数法实验报告实验目的，通过平板菌落计数法，对水样中的细菌进行计数，了解水质的微生物污染情况。
实验原理，平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，通过将待测水样在琼脂平板上平铺，培养后观察并计数菌落数量，从而得出水样中细菌的数量。
该方法适用于较为清澈的水样，能够较为准确地反映水样的微生物污染情况。
实验步骤：1. 准备琼脂平板和待测水样。
2. 将琼脂平板在恒温箱中加热至液态状态后取出，待稍微冷却至手持温度。
3. 取出待测水样，用移液器吸取一定体积的水样，滴于琼脂平板表面。
4. 用平板旋转器使水样均匀分布在琼脂平板表面。
5. 将琼脂平板倒置放置在恒温箱中，进行培养。
6. 培养后观察琼脂平板上的菌落情况，并进行计数。
实验结果：经过培养后，观察到琼脂平板上出现了多个菌落，通过放大镜进行计数，得出了水样中细菌的数量。
根据实验结果，可以初步判断水样的微生物污染情况。
实验分析：通过平板菌落计数法，我们可以对水样中的细菌数量进行快速、准确的估计。
然而，需要注意的是，该方法只能对能够在琼脂平板上生长的细菌进行计数，对于一些特殊菌种可能无法准确反映其数量。
因此，在实际应用中，需要结合其他方法进行综合分析。
实验总结：平板菌落计数法是一种简单、直观的微生物计数方法，适用于对水样等液体样品中的微生物进行快速检测。
在实际操作中，需要严格控制实验条件，确保实验结果的准确性。
同时，结合其他检测方法，可以更全面地了解样品的微生物污染情况。
通过本次实验，我们对平板菌落计数法有了更深入的了解，也增加了对水质微生物污染检测方法的掌握。
希望能够通过这些实验，为今后的科研工作和实际应用提供一定的参考和帮助。
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数是指在一定条件下，通过培养基和培养方法，将微生物在培养基上生长形成的一个个可见的菌落进行计数，从而得到微生物在样品中的数量。
菌落总数计数方法是微生物学中常用的一种方法，下面将介绍几种常见的菌落总数计数方法。
首先，最常用的方法是平板计数法。
平板计数法是将待测样品经过适当稀释后，均匀涂布在含有培养基的平板上，然后进行培养，待菌落生长后进行计数。
这种方法简单易行，适用于各种微生物的计数，但需要注意的是，对于含有大量细菌的样品，需要进行适当的稀释，以避免菌落过多导致计数困难。
其次，滤膜计数法也是一种常见的菌落总数计数方法。
这种方法适用于水样、空气样等液态或气态样品的微生物计数。
首先，将待测样品通过滤膜过滤器过滤，然后将滤膜放置在含有培养基的平板上进行培养，待菌落生长后进行计数。
这种方法操作简单，适用范围广，但需要注意滤膜的选取和过滤条件的控制，以确保计数结果的准确性。
另外，膜过滤计数法也是一种常用的菌落总数计数方法。
这种方法同样适用于水样、空气样等液态或气态样品的微生物计数。
首先，将待测样品通过膜过滤器过滤，然后将膜放置在含有培养基的平板上进行培养，待菌落生长后进行计数。
这种方法操作简便，计数结果准确，但需要注意膜的选择和过滤条件的控制，以确保计数结果的准确性。
最后，荧光染色计数法是一种新兴的菌落总数计数方法。
这种方法利用荧光染色剂对微生物进行染色，然后通过荧光显微镜或自动计数仪进行计数。
这种方法操作简单，计数速度快，适用于各种微生物的计数，但需要注意染色条件的控制，以确保计数结果的准确性。
综上所述，菌落总数计数方法有多种多样，每种方法都有其适用的范围和注意事项。
在进行菌落总数计数时，需要根据样品的特点和实验的要求选择合适的方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保计数结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的菌落总数计数方法能够为相关科研工作提供一定的参考价值。
水体微生物的检测
水体微生物的检测指标菌落总数(aerobic bacterial count)是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。
检测意义：作为一般性污染的指标，即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。
水样菌落总数越多，说明水被微生物污染程度越严重，病原微生物存在的可能性越大，但不能说明污染的来源总大肠菌群(coliform bacteria)是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
检测意义：作为粪便污染的指标。
水样总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。
水样采集菌落总数的测定；总大肠菌群的测定。
采样原则所采集的样品具有代表性。
采样容器：选择硼硅玻璃瓶和聚乙烯塑料瓶。
不能是新的污染源；不吸收或吸附某些待测组分；不与待测组分发生反应。
保证从采样到分析期间，样品各组分的浓度不发生改变。
必须按一般无菌操作的基本要求采集，并保证在运送、贮存过程中不受污染。
▪自来水水样：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5 min（经常用水的水龙头放水1～3min）后，采集水样于无菌锥形瓶，约占瓶容量80%，以便摇匀水样。
▪水源水水样：选有代表性的地点及可疑地方，一般距水面下10～15cm采样。
采样后，将瓶塞盖好，再从水中取出。
▪注意事项▪严格无菌操作。
▪做好标记：采得水样后应立即记录水样名称、地点、时间等项目。
▪从速送检。
水样从采集到检验不应超过2h，在0～4℃下保存不应超过24h。
—平板菌落计数法（一）生活饮用水➢[器材与试剂]无菌1ml吸管1支/组，无菌平皿3个/组，营养琼脂。
➢[方法]水样摇匀20~25次，使细菌分散。
倾注培养：无菌吸取1ml水样分别置于2个空平皿，另一个作空白对照。
再倾注15ml琼脂（约45℃）于平皿中旋转，混匀待琼脂凝固后倒置37℃24h。
菌落计数：用肉眼或放大镜检查，计数平皿内菌落数目。
水质检测微生物指标培训课件
⑦如果所以平板上都菌落密布，不要用“多不可计”报 告，而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2个 平板1cm2中的菌落数，除2求出每平方厘米内平均 菌落数，乘以皿底面积63.6cm2，再乘其稀释倍数 作报告。
水质检测微生物指标
11
❖ 分离培养
将产酸产气的发酵管分别转钟在伊红美兰琼脂 平板上，于36 ℃+1 ℃培养箱内培养18h～24h，观 察菌落形态，挑取符合下列特征的菌落作革兰染色 、镜检和证实试验。
深紫黑色、具有金属光泽的菌落；
紫黑色、不带或略带金属光泽的菌落；
淡紫红色、中心较深的菌落
水质检测微生物指标
水质检测微生物指标
27
7.不同稀释度的选择及报告方法
①首选30～300之间进行计算，若只有一个稀释度的平均菌落 数符合此范围时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之（见表 1实例1）。
②若有两个稀释度，其生长的菌落数均在30～300之间，则视 二者之比值来决定，若其比值小于2应报告两者的平均数 （见表1实例2），若大于或等于2则报告其中稀释度较小的 菌落数（见表1实例3、4）。
3
注意事项
❖ （1）操作要快而准，包括材料、加样、倒培 养基。
❖ （2）吸液体时液体不能进入吸头。 ❖ （3）样品稀释时一定要混匀。 ❖ （4）倒培养基前，瓶口要过火焰。 ❖ （5）一定要有空白对照。 ❖ （6）培养基温度控制，培养基薄厚。
水质检测微生物指标
5
6.菌落计数及报告方法
作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察，必要 时用放大镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落 数后，应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计 算时应用。在求同稀释度的平均数时，若其中一个 平皿有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以 无片状菌落生长的平皿作为该稀释度的平均菌落数 。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落 数分布又很均匀，则可将此平皿计数后乘2以代表 全皿菌落数。然后再求该稀释度的平均菌落数。
平板菌落计数法实验报告
一、实验目的1. 学习并掌握平板菌落计数的基本原理和方法。
2. 了解平板菌落计数法在微生物检测中的应用。
3. 通过实验，掌握微生物稀释和接种的技巧。
二、实验原理平板菌落计数法是一种常用的微生物计数方法，其基本原理是将待测样品进行一系列稀释，然后将一定量的稀释液接种到固体培养基上，经过培养，形成单个菌落，通过对菌落数的统计，计算出样品中的微生物数量。
该方法的原理基于以下假设：- 每个菌落来源于样品中的一个单细胞。
- 在适宜的培养条件下，单个菌落能够生长为一个可见的菌落。
三、实验材料1. 待测样品：某食品样品2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基3. 稀释剂：无菌生理盐水4. 仪器：无菌吸管、无菌平皿、恒温培养箱、酒精灯、记号笔等四、实验步骤1. 样品准备：取适量食品样品，加入适量的无菌生理盐水，进行均质化处理。
2. 稀释：将均质化处理后的样品进行一系列稀释，如10^-1、10^-2、10^-3、10^-4等。
3. 接种：取适量的稀释液，用无菌吸管吸取，均匀接种到牛肉膏蛋白胨培养基上。
4. 培养：将接种好的培养基放入恒温培养箱中，在适宜的温度下培养24-48小时。
5. 计数：观察培养基上的菌落，根据菌落的大小、形状、颜色等特征，进行计数。
6. 计算：根据稀释倍数和计数结果，计算出样品中的微生物数量。
五、实验结果与分析1. 通过实验，我们得到了不同稀释倍数下的菌落数。
2. 分析菌落数与稀释倍数之间的关系，发现菌落数与稀释倍数呈负相关。
3. 通过实验，我们了解到平板菌落计数法在微生物检测中的应用，以及该方法在食品、药品、水质等领域的应用价值。
六、实验讨论1. 平板菌落计数法的优点是操作简单、结果直观，但该方法也存在一些局限性，如计数结果受多种因素影响，如培养基的成分、培养条件等。
2. 在实验过程中，需要注意以下几点：- 严格遵循无菌操作规程，避免污染。
- 控制好培养条件，如温度、湿度等。
- 选择合适的稀释倍数，确保菌落数量在可计数的范围内。
平板菌落计数法水中微生物的检测
钟，每个平板上生长得到的菌落不超过15 个——无菌室
1、采样： 四、实验步骤
1）自来水：先将自来水龙头用酒精灯火焰灼 烧灭菌，再开水龙头使水流5min，以灭菌 采样瓶接取水样备用。
(2)池水、河水或湖水等地面水源水：在距岸边5米处， 取距水面10—15cm的水样，先将灭菌的带塞的采样瓶， 瓶口向下浸入水层中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水 即流入瓶中，盛满后，将平塞盖好，从水中取出，若不 能在2h内检测的，需放入4℃冰箱中保存。
1、样品充分混匀，稀释时一个稀释度要换一支无 菌移液管（放菌液时 吸管尖不要碰到液面
2、由于细菌易吸附玻璃器皿表面，菌液加入后应 尽快倒培养基，立即摇匀；
3、倾注平板时的培养基温度冷却至45℃左右。 4、计数时，30―300个菌落的稀释度计算每毫升
的菌数最为合适 5、同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊
295
46
1.6
3 2890
271
60
2.2
4 无法计数 4650 513
___
5 27
11
5
___
6 无法计数 305
12
___
7 无法计数 无法计数 无法计数 ___
16400 37750 27100
1.6×104 3.8×104 2.7×104
513000 270 30500
5.1×105 2.7×102 3.1×104 10-3 无法计数
菌落计数方法及原则：
1）若只有一个稀释度的平均菌落数在30-300范围 时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之。
2）若有两个稀释度，其生长的菌落数均在 30~300之间，则视二者之比值来决定，若 其比值小于2应报告两者的平均数。若大于 或等于2则报告其中较小的菌落总数。
菌落总数计数方法
菌落总数计数方法菌落总数是指在一定条件下，通过培养基和适当的培养条件，对微生物进行培养和计数的方法。
菌落总数的计数方法对于食品、饮用水、医疗器械等领域具有重要意义，可以评估样品中微生物的数量，为卫生质量的评价提供依据。
下面将介绍几种常用的菌落总数计数方法。
首先，最常用的方法是平板计数法。
平板计数法是将待测样品加入到含有琼脂的平板培养基表面，使微生物在琼脂表面均匀分布，然后在恰当的条件下进行培养，最后通过肉眼观察或显微镜计数菌落形成单位。
这种方法简单易行，且结果可靠，因此被广泛应用于食品、饮用水等领域的微生物检测。
其次，膜过滤法也是常用的菌落总数计数方法之一。
膜过滤法是将待测样品通过特制的膜过滤器，将其中的微生物过滤到膜上，再将膜放置在含有培养基的琼脂培养皿上进行培养，最终通过计数膜上的菌落来确定微生物的数量。
这种方法适用于对微生物数量较少的样品进行检测，且可以筛选出特定的微生物种类。
另外，浸没法也是一种常见的菌落总数计数方法。
浸没法是将待测样品在适当的条件下进行稀释，然后将稀释液均匀地涂在琼脂平板上，进行培养和计数。
这种方法适用于对微生物数量较多的样品进行检测，可以有效地减少菌落的重叠，提高计数的准确性。
除了上述方法外，还有一些新型的菌落总数计数方法不断被开发和应用。
比如，自动计数仪器的出现使菌落总数的计数更加快捷和准确，大大提高了实验效率。
另外，一些基于光学原理或生物化学原理的新型计数方法也在不断涌现，为微生物检测提供了新的思路和技术手段。
总的来说，菌落总数计数方法是微生物学中的重要内容，不同的样品和检测要求需要选择合适的计数方法。
随着科学技术的不断进步，菌落总数计数方法也在不断完善和创新，为微生物检测提供了更多的选择和可能性。
相信随着科学研究和实践经验的积累，菌落总数计数方法会变得更加准确、快捷和方便，为人们的生活和健康保驾护航。
微生物学 实验三 平板菌落计数法
微生物学实验三平板菌落计数法微生物学实验三平板菌落计数法实验三平板菌落计数学习菌种的平板菌落计数的基本原理和方法。
平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养，由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
统计菌落数，根据其稀释倍数和取样接种量即可换算出样品中的含菌数。
但是，由于待测样品往往不易完全分散成单个细胞，所以，长成的一个单菌落也可能来自样品中的2～3或更多个细胞。
因此平板菌落计数的结果往往偏低，为了清楚地阐述平板菌落计数的结果，现在已倾向使用菌落形成单位（colony-forming units,cfu）而不以绝对菌落数来表示样品的活菌含量。
平板菌落计数法虽然操作较繁，结果需要培养一段时间才能取得，而且测定结果易受多种因素的影响，但是该计数方法的最大优点是可以获得活菌的信息，所以被广泛用于生物制品检验（如活菌制剂），以及食品、饮料和水（包括水源水）等的含菌指数或污染程度的检测。
1 ．菌种：大肠杆菌菌悬液。
2 ．培养基：LB 培养基。
3 ．仪器或其他用具： 1ml 无菌吸管，无菌平皿，盛有 4.5ml 无菌水的试管，试管架，恒温培养箱等。
取无菌平皿 9 套，分别用记号笔标明 10 、 10 、 10 （稀释度）各 3 套，另-1-2-3-4-5取 6 支盛有 4.5ml 无菌水的试管，依次标是 10 、 10 、 10 、 10 、10 、用 1ml 无菌吸管吸取 1ml 已充分混匀的大肠杆菌菌悬液（待测样品），精确地放-10.5ml 至 10 的试管中，此即为 10 倍稀释。
将多余的菌液放回原菌液中。
-6-4-5-6将 10 试管置试管振荡器上振荡，使菌液充分混匀。
另取一支 1ml 吸管插入 10 试管中来回吹吸菌悬液三次，进一步将菌体分散、混匀。
吹吸菌液时不要太猛太快，吸时吸管伸入管底，吹时离开液面，以免将吸管中的过滤棉花浸湿或使试管内液体外溢。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
2、由于细菌易吸附玻璃器皿表面，菌液加入后应 尽快倒培养基，立即摇匀；
3、倾注平板时的培养基温度冷却至45℃左右。 4、计数时，30―300个菌落的稀释度计算每毫升
的菌数最为合适 5、同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊
菌落计数方法及原则：
1）若只有一个稀释度的平均菌落数在30-300范围 时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之。
2）若有两个稀释度，其生长的菌落数均在 30~300之间，则视二者之比值来决定，若 其比值小于2应报告两者的平均数。若大于 或等于2则报告其中较小的菌落总数。
3）若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释 倍数报告之
水中细菌总数的测定
——平板菌落计数法
一、细菌总数测定的意义
水中细菌总数往往同水中有机物污染的程度呈 正相关，它是评价水质污染程度重要指标之一
细菌总数：指水样在一定条件下培养后，1mL水样 所含菌落的总数。
我国生活饮用水标准（GB5749-85）规定，细 菌总数不得超过100个/ml
含细菌10-100个/ml的水体为极清洁
代表性：多采几个部位，液体样品需经过震摇，以 获得均匀稀释液。
2 水样的10倍稀释
第一步 稀释 水样 第二步： 接种平板
注意：稀释 度的选择
平板混合分离法： 将菌液分离样品摇匀，用无菌移液管取1 ml的
菌液移至无菌培养皿中，然后将融化，凉至45℃ 左右的培养基，在每个培养皿内各倒入约15 ml， 摇匀，凝固，制成平板。
4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30， 则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀 释倍数报告之
5）若所有稀释度的平均菌落数均不在 30~300之间，则应以最接近30或300的平 均菌落数乘以稀释倍数报告之
6）平板出现大片菌苔不采用，菌苔小于平 板的一半，若另一半菌落分布均匀，则菌落 数× 2.
注意事项:
含细菌100-1000个/ml的水体为清洁 含细菌1000-10000个/ml的水体为不太清洁 含细菌多于10万个/ml的水体为极不清洁
含细菌1万-10万个/ml的水体为不清洁
二、基本原理
1、本试验采用平板菌落计数法对水样中的细菌计数， 这是一种测定水中好氧和兼性厌氧细菌密度的方法， 由于细菌在水体中，能以单个、成对、链状、成簇 或成团的方式存在，另外，没有单独的一种培养基 或某一环境条件能满足一个水样中所有细菌的生理 要求，所以由此法得到的菌落数，实际上要低于被 测水样中真正存在的活菌数。
295
46
1.6
3 2890
271
60
2.2
4 无法计数 4650 513
___
5 27
11
5
___
6 无法计数 305
12
___
7 无法计数 无法计数 无法计数 ___
16400 37750 27100
1.6×104 3.8×104 2.7×104
513000 270 30500
5.1×105 2.7×102 3.1×104 10-3 无法计数
养箱等。 试剂：牛肉膏蛋白胨培养基、无菌水 环境条件：营养琼脂平板在工作台上暴露15分
钟，每个平板上生长得到的菌落不超过15 个——无菌室
1、采样： 四、实验步骤
1）自来水：先将自来水龙头用酒精灯火焰灼 烧灭菌，再开水龙头使水流5min，以灭菌 采样瓶接取水样备用。
(2)池水、河水或湖水等地面水源水：在距岸边5米处， 取距水面10—15cm的水样，先将灭菌的带塞的采样瓶， 瓶口向下浸入水层中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水 即流入瓶中，盛满后，将平塞盖好，从水中取出，若不 能在2h内检测的，需放入4℃冰箱中保存。
二、基本原理
2、平板菌落计数法是将待测样品经适当稀释 之后，其中的微生物充分分散成单个细胞， 取一定量的稀释液接种到平板上上，经培 养，由每个单细胞生长繁殖形成肉眼可见 的菌落，即一个单菌落代表样品中一个单 细胞
三、实验准备
器皿：无菌采样瓶、培养皿、移液管、试管等。 仪器：干热灭菌箱、高压蒸汽灭菌锅、恒温培
注意:作空白及取平行样(2-3组)
通常细菌、放线菌选择平均菌落数在30~300之 间者进行计算 ，霉菌选平均菌落数在10~100之 间。
3 菌落计数及报告方法 (实例)
不同稀释度的平均菌落数
10-1
10-2 10-3
两稀释度菌 菌落总数 报告方式 落数 之比
1 1365
164
20
---
2 2760
t——平皿在空气中暴露的时间（min）
作业
对自己喜欢的某一食品进行微生物检验设计。 要点： ➢食品相关记录(名称、厂家、商店等) ➢所用物品清单 ➢工作计划（人员安排、进度安排等） ➢报告格式（表格设计及报告书等）
混合倒平板操作法示意图
2 水样的10倍稀释
10-3
10-4
10-5
第一步 稀释 水样
第二步： 接种平板
10-6
注意：稀释 度的选择
第三步： 培养
稀释度过低，菌 可以计数，但数量 数量合适，统计 数量太少，误差 落密集无法计数 过多，费时费力 计算，作为结果 大，不作计数
第四步 计 数
细菌数量=？ 细菌数量=同一稀释度的平均菌落数×稀释倍数 例如： 10-5 的平均菌落数是125个 细菌数量=125× 105 =1.25 × 107个/ml
平板菌落计数法的优点：
是能测出样ห้องสมุดไป่ตู้中的活菌数。此法常用 于某些成品和生物制品检定以及食品、水 源的污染程度的检定等。
缺点：
手续较繁，而且测定值常受各种因素 的影响。
•
空气微生物的检测
1m3空气中细菌的总数：
C=
1000×50 N At
C——1m3空气中细菌的总数 N——平皿中平均菌落数 A——平皿的底面积cm2