医学微生物第12次实验

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医学微生物学考试试卷(附答案)

医学微生物学考试试卷（ A ）(临床医学本科、影像医学本科、中医药学本科、实验技术本科、预防医学本科)班级学号姓名注意事项：1．在试卷上写上姓名、班级。

在答题卡上填上学号，将相应的数字涂黑，并写上班级、姓名和试卷类型（ A 卷 /B 卷）。

交卷时必须将答题卡与试卷一起上交，否则以零分计算！2．本份试卷由基础知识题和病例分析题组成，共150 个选择题，请按题目要求，在备选答案中选择一个最佳答案，并在答题卡上将相应的字母涂黑，做在试卷上无效。

3．考试时请严格遵守考场纪律，原则上不允许上厕所。

第一部分、Ａ型选择题（由一题干和５个备选答案组成，请选出一个最佳答案。

共90 个选择题）1. 哪种疾病的病原体属于非细胞型微生物：A. 疯牛病C. 结核病E.体癣B.梅毒D.沙眼2. 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是:A. 单细胞C.对抗生素敏感B.二分裂方式繁殖D.有由肽聚糖组成的细胞壁E.仅有原始核结构，无核膜3. 革兰阳性菌细胞壁：A. 肽聚糖含量少C.对溶菌酶敏感B.缺乏五肽交联桥D.所含脂多糖与致病性有关E.有蛋白糖脂外膜4. 青霉素杀菌机制是:A. 干扰细胞壁的合成C. 影响核酸复制E.损伤细胞膜B.与核糖体D.与核糖体50S 亚基结合，干扰蛋白质合成30S 亚基结合，干扰蛋白质合成5.有关“细菌鞭毛”的叙述，哪一项是错误的:A.与细菌的运动能力有关B.许多革兰阳性菌和阴性菌均有鞭毛C.在普通光学显微镜下不能直接观察到D.可用于细菌的鉴定E.将细菌接种在固体培养中有助于鉴别细菌有无鞭毛(半固体 )6.有关“芽胞”的叙述，错误的是 :A. 革兰阳性菌和阴性菌均可产生（都是阳性）B. 不直接引起疾病C. 对热有强大的抵抗力D.代谢不活跃7.E.通常在细菌处于不利环境下形成:用普通光学显微镜油镜观察细菌形态时，总放大倍数为A.10 倍B.100 倍C.400 倍D.900～ 1000 倍E.10000 倍8.脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌经结晶紫初染、碘液媒染、95%乙醇脱色后，菌体分别呈 :A. 红色和紫色B.紫色和紫色C. 紫色和无色D.无色和无色E.无色和紫色A. 鉴别细菌C. 了解细菌致病性E.观察细菌的特殊结构B.初选抗菌药物D.了解细菌的染色性10. 在自然界中，细菌与其他生物相比，繁殖速度较快，主要原因是细菌:A.细胞膜有半透性，允许水分及营养物质进入菌体内B.体积小，相对表面积大，有利于同外界进行物质交换C.代谢类型多样化D.表面带有电荷，可以吸附营养物质，利于吸收E.具有多种酶系统11. 研究抗菌药物的杀菌效果，最好是选用细菌生长的:A. 迟缓期B. 对数生长期C. 稳定期D. 衰亡期E.对数生长期和稳定期12.有关“热原质（即脂多糖）” 的叙述，哪一项是错误的 :A.主要是革兰阴性菌的合成代谢产物B.是细菌的内毒素成分C.微量热原质注入人体能引起发热反应D.可被高压蒸汽灭菌法 (121℃ ,20min) 破坏（常用吸附剂、蒸馏或特殊石棉滤板除去）E.注射药剂中不得含有热原质13. 检查细菌对糖和蛋白质分解产物的主要意义在于:A.了解细菌生长繁殖的能力B.了解细菌的致病性强弱C.帮助鉴别细菌的种类D.确定细菌抵抗力的强弱E.了解细菌对营养的需要14.消毒是指：A.杀死物体上包括细菌芽胞在内的所有微生物B.杀死物体上不包括细菌芽胞在内的所有微生物C.杀死物体上的病原微生物D.防止或抑制细菌生长繁殖E.防止细菌进入人体或其他物品15.高压蒸气灭菌法灭菌所需温度和需维持时间分别为：A.100 ℃， 15～20minB.121.3℃， 15～20 minC.100 ℃， 10 minD.121.3 ℃， 10 minE.160 ℃， 2h16. 紫外线常用于物体表面和空气的消毒，其杀菌机制主要是:A. 破坏酶系统B. 损伤细胞膜C. 干扰 DNA 复制D. 干扰蛋白质合成E.干扰肽聚糖合成17.细菌毒力岛：A.是一个分子量较小的染色体DNA 片段B.往往位于 rRNA 基因位点内或附近C.是较稳定的 DNA 区域D.毒力岛与该菌染色体 DNA 的密码使用有明显差异E.毒力岛两侧均有同向重复序列和插入元件18.细菌间的转导是 :A.通过性菌毛传递遗传物质接合B.通过普通菌毛传递遗传物质C.以温和噬菌体为媒介D.以烈性噬菌体为媒介E.受体菌直接摄取供体菌的游离DNA 片段转化19. 白喉棒状杆菌由无毒株变成产毒株的原因是由于:A. 溶原性转换C. 转导E.转座B. 接合D. 转化20.细菌 DNA的转化是否成功与哪一项无关 :A.受体菌是否处于感受态B.转化的 DNA 片段的大小C.供体菌 DNA 的浓度D.供体菌 DNA 片段是否与受体菌基因组有同源性E.进入受体菌的转化因子应是双链DNA21.有关“接合”的叙述，哪一项是错误的：A.F ＋菌与 F－菌进行接合时，转移的是 F 质粒B.Hfr 菌与 F－菌进行接合时，转移的主要是染色体基因－菌进行接合时，转移的是染色体基因和 F 质粒C.F’菌与 F－菌进行接合后，失去 F 质粒D.F ’菌与 FE.F ＋菌与 F－菌进行接合后，F＋菌不变为F－菌22.有关“细菌毒力增强或减弱”的叙述，哪一项是正确的：A.一般因光滑型菌落变成粗糙型菌落而增强B.通过易感动物传代而减弱C.长期在人工培养基传代而减弱D.失去形成菌毛的能力而增强E.溶源性转换后，可能减弱23.由基因突变造成的耐药性 :A.由抗生素诱导产生B.较易在细菌之间转移C.多为对单一抗生素的耐药性D.不稳定24.有关“质粒”的叙述，哪一项是错误的：A.多为闭合环状双链 DNAB.具有自我复制的能力C.是分子生物学研究的基因载体D.不能通过转导方式在细菌之间转移E.可在不同种属的细菌间转移25. 较少产生耐药性的细菌是:A. 金黄色葡萄球菌C. 铜绿假单胞菌B. 大肠埃希菌D.结核分枝杆菌E.A 族溶血性链球菌26. 金黄色葡萄球菌耐甲氧西林的生化机制主要是:A. 产生灭活酶C. 减少药物吸收B.靶位改变D.增加药物排出E.旁路代谢27. 预防耐药菌株产生和扩散的主要措施是:A. 大剂量使用抗生素C. 使用广谱抗生素E.根据药物敏感试验，选择使用抗生素B.少量多次使用抗生素D.多种抗生素联合使用28. 导致菌群失调的最主要原因是：A. 正常菌群的定位转移D.使用免疫抑制剂或放射治疗E.微生物制剂的大量使用29.条件致病菌感染：A. 均为内源性感染C. 是二重感染的主要病原菌E.仅发生于免疫力低下的病人B.均为医院感染D. 近年感染率明显下降30.有关“二重感染”叙述，哪一项是错误的:A.是二种细菌同时感染B.在用抗生素治疗原发感染的同时发生的一种新感染C.是一种严重的菌群失调症D.主要由条件致病菌引起E.多由耐药菌引起31.有关“医院感染”的叙述，哪一项是错误的：A.是指人们在医院接受诊断、治疗期间发生的感染B.感染对象主要是医务人员C.主要由条件致病性微生物引起D.病原体来源广泛E.病原菌常具有耐药性32.有关“超抗原”的叙述，哪一项是错误的：A. 需经过抗原提呈细胞的处理，才能与B. 能直接激活T 细胞增殖-12D. 具有毒性作用E.可引起自身免疫病MHC Ⅱ类分子结合33. 病原菌侵入血流并在其中繁殖，产生毒性代谢产物，引起全身性中毒症状，称为A. 毒血症B. 菌血症C. 败血症D. 脓毒血症E.内毒素血症: 34.可侵入人体血液的细菌是:A. 白喉棒状杆菌C. 结核分枝杆菌B.破伤风梭菌D.肉毒梭菌E.霍乱弧菌35. 有关“抗感染免疫”的叙述，哪一项是A. 细胞免疫主要针对胞内菌感染B. 抗毒素的中和作用主要针对外毒素感染C.SIgA 主要阻挡致病菌定植错误的：D. 抗体与细菌结合直接杀死胞外菌E.血 -脑脊液屏障可保护中枢神经系统36. 有关“ Toll样受体”的叙述，哪一项是A. 是一种跨膜蛋白B. 表达在感染早期直接接触病原体的细胞C. 不能诱导凋亡信号D. 能调控天然免疫向获得性免疫的转变E.能特异性识别病原菌相关分子模式错误的：37. 目前可用类毒素进行预防的疾病是：A. 伤寒与白喉C. 破伤风与结核病E.百日咳与白喉B.破伤风与波状热D.白喉与破伤风38.注射或接种哪一项而获得免疫的方式称为人工被动免疫：A. 破伤风抗毒素（TAT ）B. 卡介苗（ BCG）OPV）E.白喉类毒素39.有关“核酸疫苗”的叙述，哪一项是错误的：A.免疫途径多种B.由免疫原编码基因与载体（如质粒）组成C.免疫维持时间短D.可诱发机体产生细胞免疫和体液免疫E.安全性好40.抗毒素：A.为外毒素经甲醛处理后获得B.用于人工主动免疫C.可中和与易感细胞结合的外毒素的毒性作用D.可中和内毒素的毒性作用E.使用原则是早期、足量、防过敏反应41.直接涂片镜检 :A.不能快速诊断细菌感染B.适用于所有细菌感染疾病的初步检查C.只适用于形态和染色性上具有特征的病原菌D.其结果必须结合临床表现方有诊断价值42～ 47．下篇短文中，每一段可能有 1 处或多处明显错误。

微生物生理生化反应实验报告

山东大学实验报告2012年 12 月 4日姓名系年级 2011级生科2班组别四科目微生物学实验题目微生物的生理生化反应微生物的生理生化反应一、【实验目的】1. 证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统。

2.掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。

3.了解糖发酵的原理和在肠细菌坚定中的重要作用。

4.掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。

5. 了解吲哚和甲基红试验的原理以及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。

二、【实验仪器与试剂】菌种：枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、普通变形杆菌、产气肠杆菌培养基：培养基：固体淀粉培养基、固体油脂培养基（大分子水解试验）；葡萄糖发酵培养基、乳糖发酵培养基（内装有倒置的德汉氏小管）（糖发酵试验）；蛋白胨水培养基（吲哚试验）；葡萄糖蛋白胨水培养基；试剂：卢戈氏碘液、乙醚、吲哚试剂、甲基红试剂、蒸馏水、仪器：酒精灯、接种针、培养皿、试管、试管架、烧杯、量筒、德汉氏小管三、【实验原理】1.在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程，由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。

2.淀粉的水解：由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用.胞外酶主要为水解酶,通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内.如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精,双糖和单糖；而淀粉遇碘液会产生蓝色，因此能分泌胞外淀粉酶的微生物，则能利用其周围的淀粉，在淀粉培养基上培养用碘处理其菌落周围不呈蓝色，而是无色透明圈，据此可分辨微生物能否产生淀粉酶。

3.油脂的水解：在油脂培养基上接种细菌，培养一段时间后观察菌苔的颜色，若出现红色斑点，则说明此中菌可产生分解油脂的酶。

医学微生物学实验报告答案

竭诚为您提供优质文档/双击可除医学微生物学实验报告答案篇一：南医大医学微生物学实验报告总结优化版脓汁和粪便标本中病原菌的检测20xx级xx专业（x）班学号xx姓名xx第x室第x组组员：xx指导老师：xx[摘要]脓汁和粪便标本中有不同的病原菌。

本实验主要探究检测其病原菌的类型并通过一系列的观察与鉴定从而确定其病原菌的名称和性质。

在实践中学习培养基的制备、消毒和灭菌，细菌的分离与培养，细菌群体和个体形态特征的观察，细菌生化反应鉴定等技巧。

从而掌握微生物实验的各种操作方法，培养对微生物实验的兴趣。

[引言]常见的化脓性病原菌有葡萄球菌、链球菌、淋球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、假单胞菌、流感杆菌等。

浓汁标本在做细菌分离培养的同时，均须直接涂片检查，观察是否有典型形态的菌体，芽孢有无，为临床提供最初的诊治依据。

粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、致病性大肠杆菌属、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。

粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选择培养基（如ss、伊红美蓝平板、碱性蛋白胨水），尽可能抑制杂菌，以利于病原菌的检出。

本实验通过常规的病原菌检测方法从脓汁标本中分离出黄白两种细菌，均为革兰氏阳性球菌，其中黄色是致病菌——金黄色葡萄球菌，白色是白色葡萄球菌；从粪便标本中分离到紫黑色和粉红色的细菌，均为革兰氏阴性杆菌，其中紫黑色的是大肠埃希菌，粉红色的是痢疾志贺菌。

1实验材料1.1器材打火机油性笔酒精灯接种环接种针污物盘普通冰柜隔水式电热恒温培养箱奥林巴斯cx21型生物显微镜电炉试管（带棉塞）称量纸药勺牛皮纸硫酸纸橡皮筋尺子锥形瓶高压蒸汽灭菌器镊子bo片吸水纸拭镜纸1.2试剂药品普通营养琼脂培养基蒸馏水脓汁标本粪便标本石蜡油生理盐水结晶紫卢戈碘液95%乙醇稀释复红葡萄糖微量发酵管（2支）乳糖微量发酵管（2支）青霉素抗菌素纸片链霉素抗菌素纸片庆大霉素抗菌素纸片血浆福氏志贺菌诊断血清2实验方法与步骤实验的总流程细菌的分离培养细菌纯培养细菌的形态学检查细菌的生化试验细菌的血清学试验、结果分析2.1培养基制备干粉培养基→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌→1）平板培养基：倾注平板10ml→琼脂完全凝固后，平板倒放→4℃冰箱保存备用。

统计第12次作业

统计学第12次作业郭晓兰微生物学 122136412．将18名原发性血小板减少症患者按病情和年龄都相近的原则配为6个单位组，每个单位组中的3名患者随机分配到A、B、C三个治疗组中，治疗后患者的血小板升高，结果见教材表16-16，问3种治疗方法的疗效有无差别？10·L-1）教材表16-16 不同人用鹿茸草后血小板的升高值/（×12年龄组 A B C1 3.8 6.3 8.02 4.6 6.3 11.93 7.6 10.2 14.14 8.6 9.2 14.75 6.4 8.1 13.06 6.2 6.9 13.4分析：该题为随机区组设计，应用随机区组方差分析。

总变异可分解为处理变异、区组变异和误差。

解：（1）统计描述表1 18名原发性血小板减少症患者用不同治疗方法后血小板升高值情况Treat Block N Mean Std.DeviationA 1~6 6 6.200 1.793B 1~6 6 7.833 1.619C 1~6 6 12.517 2.411Total 18 18 8.850 3.319（2）统计推断建立检验假设，确定检验水准：对于处理组：H：三种治疗方法的平均血小板升高值相等。

H：三种治疗方法的平均血小板升高值不全相等。

1对于区组：0H ：各区组的总体效应相等。

1H ：各区组的总体效应不全相等。

均取05.0=α；假设资料符合方差分析的前提条件，用SPSS 软件进行随机区组方差分析，步骤如下： Analyze→General Linear Model→Univariate→Dependents variable：血小板升高值；Fixed factors ：treat ；Block ；→Model：Custom ：Build terms ：main effects ；Treat : Model ；Block : Model ；Continue…→点击Post Hoc ，Treat: Post Hoc Test for ；Equal Variances Assumed: LSD 、SNK 、Bonferroni ；Continue…→点击Save ，Unstandardized (Predicted Values)，Standardized (Residuals) →OK 将数据进行方差分析后，计算结果如表2：表2 方差分析表变异来源 SSνMSFP总变异 187.265 17 处理间 129.003 2 64.502 79.338 0.000 0 区组间 50.1325 10.026 12.3330.000 1误差8.13100.813由表可知：对处理因素和区组因素统计检验后的P 均小于0.05，按05.0=α水准拒绝0H ，接受1H ，可认为三种治疗方法的平均血小板升高值不全相等；可认为：对于同一种治疗方法而言，各区组血小板升高值的差异有统计学意义。

医学微生物学实验指导

革兰染色的原理目前存在三种假说：
1．通透性学说革兰阳性菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入；革兰阴性菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层薄，含大量脂质，乙醇易渗入。
2．等电点学说革兰阳性菌等电点（pI 2 ~3）比革兰阴性菌（pI 4 ~5）低，在相同pH条件下，革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多，故与带正电荷的结晶紫染料结合牢固，不易脱色。
2．革兰染色：
⑴初染：将已固定的涂片标本，加结晶紫染液于涂面上染色1 min，然后水洗。
⑵媒染：加革兰氏碘液媒染1 min，水洗。
⑶脱色：滴加95%酒精，频频摇动载玻片，斜持载玻片，使脱下的染液流下，再次滴加酒精脱色，直至流下酒精无色或稍呈淡紫色为止，水洗。
⑷复染：用稀释复红或沙黄染液复染30 s至1 min，水洗，自然干燥或吸水纸印干。
3．观察结果：
用油镜观察染好后的标本片，记录所见结果，染成紫兰色者为革兰氏阳性菌，染成红色者为革兰氏阴性菌。
注意事项
1．玻片一定要清洁无油。
2．加生理盐水切莫贪多以免难于干燥，涂片要均匀且薄。
3．固定标本时切勿过热，以免菌体变形。
4．要掌握好染色时间，尤其是酒精脱色的时间，不宜过长或过短，以脱色至涂片为灰色为宜。
高等医学院校实验教材
医学微生物与免疫学
三峡大学医学院病原生物与免疫学教研室
二00五年六月
高等医学院校实验教材
医学微生物与免疫学
实验指导
主编韩莉
副主编张昌菊宋利琼
编者（以姓氏笔画为序）
王磊朱平刘嘉刘英
宋利琼吴红艳杨建林周永芹
张颖张昌菊韩莉
三峡大学医学院生物病原部
2005年6月29日
前言
本教材由医学微生物学和医学免疫学两部分组成，通过实习课教学使学生了解和掌握医学微生物学、医学免疫学的基本实验技能操作和基本研究方法，同时也能获取相应的感性知识。为培养学生的思维能力和独立操作能力，在进行设计性实验课教学时，学生也能利用本实习指导作为工具，顺利地进行实验操作，以节省学生获取知识的时间。为此目的，对每项实验的目的及实际意义都有所交代，对实验结果的观察与分析，也予以必要的辅导。限于教学时数和条件，有些内容将以示教、电视或电影教学方式教学，这部分尤其需要加强复习，以弥补未能亲自操作之不足。有关实验课的改革设想，仍须不断地接受实践考验，发扬成绩克服缺点，以不断地充实和提高。

12医学检验医学微生物学阶段练习题2参考答案

12医学检验医学微生物学阶段练习题2参考答案化脓性球菌一、名词解释1．化脓性球菌：是一类能感染人体并引起化脓性炎症的病原性球菌，包括革兰阳性球菌和革兰阴性球菌。

2、SPA：即葡萄球菌A蛋白，是葡萄球菌细胞壁的一种表面蛋白，能与人及某些哺乳类动物的IgG分子Fc段发生非特异性结合，与吞噬细胞的Fc受体争夺Fc段，从而降低了抗体的调理吞噬作用，起到了协助细菌抗吞噬的作用。

3．血浆凝固酶：由致病性葡萄球菌产生的一种酶，可使液态纤维蛋白变成固态纤维蛋白。

4．抗链球菌溶素O试验：简称抗O试验,是以链球菌溶素O为抗原，检测血清中相应抗体ASO，常用于风湿热的辅助诊断。

5．TSST-1: 即毒性休克综合征毒素-1，由噬菌体Ⅰ群金黄色葡萄球菌产生的一种蛋白质，可增加宿主对内毒素的敏感性，可引起机体多个器官系统的功能紊乱，出现毒性休克综合征（TSS）。

二、填空题1．葡萄球菌链球菌肺炎球菌脑膜炎球菌淋球菌2．血浆凝固酶3．金黄色葡萄球菌4．食物中毒剥脱性皮炎假膜性肠炎毒性休克综合征5．甲型溶血性链球菌乙型溶血性链球菌丙型链球菌6．巧克力色血琼脂平板7. 甲型溶血性链球菌8．葡萄球菌9．透明质酸酶链道酶IO．IgG Fc段11．化脓性感染中毒性疾病变态反应性疾病12．荚膜大叶性肺炎三、选择题A型题 1．C 2．C 3．C 4．A 5．A 6．E 7．A 8．E 9．D 10．D 11．D 12．B 13．C 14．E 15．E 16．BB型题 17.A 18．E 19．A 20．B 21.A 22．E 23．B 24．D 25．A 26．D 27.E 28．B29．C X型题 30．CD 31．ABCD 32．BCDE 33．ABC 34．BD 35．ABDE四、问答题1．金黄色葡萄球菌的致病物质及所致疾病有哪些？金黄色葡萄球菌的致病物质有：血浆凝固酶、杀白细胞素、葡萄球菌溶血素、肠毒素、表皮剥脱毒素、毒性休克综合征毒素（TSST-1）。

微生物实验教程

实验 1—1 普通光学显微镜的使用……………………………………………………………
实验 1—2 细菌的形态结构观察 (简单染色、革兰氏染色、抗酸染色) ……………………
实验 1—3 细菌的特殊结构和运动性观察 (芽胞染色、荚膜染色、鞭毛染色) ……………
实验 1—4 放线菌的形态结构观察 …………………………………………………………
一滴镜油作为介质。国产显微镜的油镜常标有“油”字，国外产品则常用“oil”（oil Immersion）
或“HI”（Hemcyeneous Immersion）字样，以供识别。物镜上通常标有放大倍数、数值孔径
（亦称镜口率）、工作距离等主要参数。
3、聚光器：也叫集光器，由聚光镜和可变光阑组成。聚光镜由一片或数片透镜组成，
面是平面镜，另一面是凹面镜，其作用是使光源发出的光或自然光射向聚光镜。光强时用平
面镜，光弱时用凹面镜。有的显微镜的人工光源安装在镜座内，其反光镜也固定在镜座内。
（三）普通光学显微镜的光学原理
心
由单透镜构成的放大镜和由几块透镜组成的实体显微镜（解剖镜）称单式显微镜生物学教学及科研所用的光学显微镜一般是复式显微镜。
高学生的综合能力与创新意识。
教
验
实 3. 提高学生分析问题和解决问题的能力。根据本学科的特点，逐步使学生认识微生物的基本
学特性，比较它们与其它生物的相似和不同之处，知道如何研究微生物以及对研究中所出现的
问题点样分析，
范
师
京
南
第一节微生物的形态结构观察
微生物的个体微小，肉眼难以看见，必须借助显微镜才能观察到。因此．显微镜就成为微物学研究工作者不可缺少的基本工具，从事有关微生物学教学、科研和生产的人员，都应该了解显微镜的种类、结构、功能和正确地掌握不同显微镜的使用方法。

《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验

《医学微生物学》细菌的分布与外界因素对细菌的影响实验[目的]1．掌握皮肤消毒方法。

2．掌握标准纸片扩散法(K-B法)的原理、操作方法、结果的判读与解释及其临床意义。

3．掌握纸片扩散法的质量控制方法。

了解空气、水中细菌的检查方法。

4．熟悉人体皮肤、咽喉部细菌检查方法。

5．熟悉紫外线灭菌方法。

6．了解高压蒸汽灭菌方法一、细菌的分布检查[材料]普通琼脂平板，1％高层琼脂，无菌试管，1毫升无菌吸管，无菌平皿。

[方法]1．空气中的细菌检查取琼脂平板一个，打开皿盖，暴露于空气中10分钟，然后盖好，在平皿底面注明地点、班组，放入37℃温箱内培养24小时后观察结果，计算菌落数，并观察不同的菌落形态。

2．污水和净水中细菌数的检查（1）用无菌试管分别采取自来水和未经净化消毒处理的污水各一管。

取自来水样时，须先将水龙头用酒精灯烧灼灭菌，再将龙头完全开放，放水5分钟，然后用无菌试管以无菌操作采集水样。

（2）用无菌吸管吸取自来水及经适当稀释的污水各1毫升，分别放入两个无菌平皿内。

（3）将已溶化并冷至约45℃（手握琼脂管感觉热而不烫手）的高层琼脂1支，倾注入平皿内，盖好平皿，立即将皿底贴桌面轻轻摇动，使琼脂与水样均匀混合后（但勿溢出于皿外），静置桌面，待琼脂凝固。

（4）标记，皿底向上置于37℃培养24小时，取出观察结果。

比较自来水及污水内生长的菌落数。

3．皮肤及飞沫中的细菌检查材料：普通琼脂平板，血琼脂平板。

方法：（1）皮肤细菌检查取普通琼脂平板一块，用手指轻轻涂抹培养基表面，置37℃温箱中培养24小时，观察结果。

（2）飞沫中的细菌检查取血琼脂平板一个，打开皿盖，将培养基面置于口腔前约10厘米处，用力咳嗽数次，约30秒钟，然后盖上皿盖，置37℃温箱培养24小时，观察结果。

二、外界因素对细菌的影响（一）高压蒸汽灭菌法（示教）[材料] 手提式高压蒸汽灭菌器、电炉等构造：手提式高压蒸汽灭菌器是一双层金属圆桶，外层坚厚，顶端有厚盖，盖边有翅状螺旋，借此紧闭此盖，防止蒸汽外溢。

医学微生物学各章节经典习题

细菌绪论1. 下列微生物中，属于非细胞型微生物的是：A. 立克次体B. 真菌C.衣原体D. 病毒E.螺旋体2.细胞核的分化程度高，有核膜和核仁；胞质内细胞器完整的微生物是：A. 立克次体B. 真菌C.衣原体D. 病毒E. 螺旋体3.第一次用显微镜观察到各种形态的微生物的伟人是：A．吕文虎克B.巴斯德C.柯霍D.伊凡诺夫斯基E.弗莱明4.创用固体培养基和细菌染色技术，使得病原菌的分离培养和鉴定成为可能的伟人是：A. 吕文虎克B.巴斯德C.柯霍D.伊凡诺夫斯基E.弗莱明5.首次研制了炭疽疫苗、狂犬病疫苗的伟人是：A. 吕文虎克B.巴斯德C.柯霍D.伊凡诺夫斯基E.弗莱明6. 细菌属于原核细胞型微生物的主要依据是A. 单细胞，结构简单B. 原始核、细胞器不完善C. 二分裂方式繁殖D. 有细胞壁E. 对抗生素敏感7. 有关原核细胞型微生物错误的描述是A. 无核质B. 无核膜和核仁C. 细胞器不完善D. 具有胞浆膜E. 仅有核质、无核的形态二、填空题1. 微生物可以按细胞结构特点，为、、三种类型。

2. 细胞的分化程度低，仅有原始核质，呈环状裸DNA团块结构，无核膜、和核仁的微生物属于。

3. 寄居在人体的体表及与外界相通的腔道中对人无害的细菌称为。

这些微生物在机体健康或正常情况下不致病，只是在抵抗力低下时才导致疾病，这类微生物又称为或。

4. 能引起人类和动植物发生疾病的微生物称为。

5. 支原体、放线菌、、、和均属于型微生物。

三、名词解释1.微生物2.非细胞型微生物3.原核细胞型微生物4.真核细胞型微生物5.致病微生物（病原微生物）6.条件致病微生物四、问答题1. 根据微生物大小、结构、组成等，可把微生物分成几大类？特点如何？2. 简述原核细胞型微生物的种类与特征。

参考答案一、选择题1. D2. B3. A4. C5. B6. B7. A二、填空题1. 非细胞型微生物，原核细胞型微生物，真核细胞型微生物2. 原核细胞型微生物3. 正常菌群，条件致病菌，机会致病菌4. 病原微生物或致病性微生物5. 立克次体，螺旋体，衣原体，细菌，原核细胞三、名词解释：1. 是存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍，甚至数万倍才能观察到的微生物。

医学微生物学实验指导

医学微生物学实验指导西安交通大学医学院微生物学教研室第一次实验课内容实验内容1. 实验目的与要求实验内容2. 实验室规则实验内容3. 细菌形态学观察技术实验内容4. 染色标本的制备—革蓝染色实验目的与要求医学微生物学实验课是该专业课程的重要组成部分，指导学生上好实验课是教学过程中的重要环节，学习实验课的目的是：1. 使学生加深理解并巩固理论知识，学习和掌握有关的实验操作技术，为以后的医学专业课学习打好基础：2. 在实验中，培养学生观察、思考和分析问题的能力，主动参与实验的动手能力及独立工作的能力。

训练学生严格的科学作风、严肃白的科学态度和严密的工作方法。

3. 培养学生在集体工作环境中互帮互让，团结协作，共同完成好实验的精神品德。

为了达到上述目的，提高实验课的教学效果，特提出以下要求：1. 实验课前做好预习，明确本次实验课的内容及其原理、方法及注意事项；2. 实验中要仔细认真，注意分工与协作，操作实验要按操作步骤进行。

学会正确操作手法、准确记录实验结果。

示教实验要注意观察，并记录好相关内容；3. 详细讨论实验结果，提倡同学之间互帮互学，并紧密联系理论课内容。

要注意不论实验结果与理论符合与否，都有讨论的价值，并分析其原因，有可能的话还应重复实验；4. 严格遵守实验室规则，在微生物学实验课上，要树立“有菌观点”，严格掌握和不断完善无菌操作技术。

实验室规则一、进入实验室须穿工作服、戴工作帽。

除必要的书籍文具外，其它个人物品一律不得带入实验室。

二、在实验室内，禁止饮食、吸烟及与学习无关的其它活动，不得大声喧哗或嘻戏。

三、未经老师许可，不得擅自搬动实验器材及示教物品，不准随意摆弄和旋转实验仪器上的开关及旋扭等。

四、按照实验要求，在老师的指导下，主动安排要进行的实验，认真进行实验操作，严格遵守无菌操作规程，争取顺利地完成实验。

五、实验中使用完毕的器材和试剂，必须放回规定的位置。

废弃物必须按规定进行处理或归放于指定的容器内，不能随便乱丢乱放。

《医学微生物学》自测题

《医学微生物学》自测题（一）一、单项选择题（每题1分，共40分）1、革兰阳性菌与革兰阴性菌细胞壁共有的成分是A、磷壁酸B、LPSC、肽聚糖D、外膜E、脂蛋白2、与细菌定植有关的细菌结构是A、普通菌毛B、性菌毛C、芽孢D、胞质颗粒E、质粒3、细菌具有抗吞噬作用的结构是A、芽胞B、菌毛C、荚膜D、鞭毛E、质粒4、紫外线的杀菌机制是A、破坏细菌DNA构型B、破坏酶系统C、破坏菌体蛋白D、干扰蛋白质合成E、破坏RNA5、噬菌体的生物学特性与下列哪种微生物相似？A、细菌B、病毒C、支原体D、衣原体E、立克次体6、肠道杆菌耐药性形成的主要方式是A、转化B、接合C、转导D、溶原性转换E、原生质体融合7、因长期大量使用抗生素引起的腹泻多属于A、内源性感染B、外源性感染C、交叉感染D、环境感染E、潜伏感染8、手术器械的的最佳灭菌方法是A、紫外线照射B、75%酒精浸泡C、高压蒸汽灭菌法D、间歇蒸汽灭菌法E、煮沸法9、下述哪项检查不能协助临床诊断？A、脓汁涂片找到G+葡萄串状球菌B、咽试子涂片找到革兰阴性双球菌C、痰涂片找到抗酸杆菌D、脑脊液涂片找到革兰阴性杆菌E、瘀斑血中找到革兰阴性双球菌10、金黄色葡萄球菌引起化脓性炎症，其脓汁粘稠、局限，与下列哪种因素有关？A、溶素B、杀白细胞素C、血浆凝固酶D、透明质酸梅E、链激酶11、关于脑膜炎奈瑟菌的抵抗力，下列哪项叙述是错误的？A、对干燥敏感B、对热敏感C、耐低温D、置室温3小时即可自溶E、75%乙醇可使之死亡12、抗链球菌溶素O试验可辅助诊断A、恙虫热B、出血热C、回归热D、风湿热E、登革热13、取米泔水样粪便作悬滴镜检，见到呈穿梭样运动的细菌可能是A、肠侵袭性大肠杆菌B、伤寒沙门菌C、猪霍乱沙门菌D、变形杆菌E、霍乱弧菌14、引起食物中毒很少有胃肠炎症状的细菌是A、金黄色葡萄球菌B、肠炎沙门菌C、肉毒梭菌D、副溶血性弧菌E、产气荚膜梭菌15、白喉杆菌致病的最主要物质是A、内毒素B、外毒素C、菌毛D、侵袭性酶E、β-噬菌体16、目前麻风病微生物学诊断的主要方法是A、直接镜检B、分离培养C、麻风菌素试验D、动物试验E、血清学试验17、结核杆菌胞壁中脂质含量高与下列哪种特性无关？A、染色性B、抵抗力C、生长速度D、致病性E、免疫性18、能在无生命培养基中生长繁殖的最小的微生物是A、支原体B、衣原体C、细菌D、立克次体E、病毒19、协助诊断斑疹伤寒的交叉凝集试验是A、反向间接血凝试验B、间接血凝试验C、肥达试验D、外斐反应E、冷凝集试验20、衣原体与病毒的相同点是A、含有RNA和DNAB、有核糖体C、严格活细胞内寄生D、二分裂方式繁殖E、对抗生素敏感21、发病1周内作钩体病原体检测应采取哪种标本？A、粪便B、小便C、脑脊液D、血液E、局部分泌液22、真菌细胞壁特有的成分是A、糖苷类B、糖蛋白C、胆固醇D、几丁质E、角质23、引起深部感染的真菌大多数是A、致病性真菌B、产毒素真菌C、条件致病性真菌D、多细胞真菌E、具有变应原的真菌24、常用墨汁染色法检查的病原体是A、钩端螺旋体B、白假丝酵母菌C、皮肤丝状菌D、新生隐球菌E、脑膜炎球菌25、皮肤癣菌侵犯部位仅限于表皮、毛发和指（趾）甲是与其哪种特性有关？A、嗜油脂B、嗜角质蛋白C、嗜干燥D、这些组织有其受体E、这些部位易通过接触传播26、病毒体是A、能刺激机体产生免疫应答的病毒颗粒B、具有完整的DNA或RNA的病毒颗粒C、病毒核心与衣壳组成的裸露病毒D、裸露病毒和包膜病毒E、结构完整的成熟的病毒颗粒27、病毒与其他微生物最重要的区别是A、体积微小，以纳米为计量单位B、不能生长于无生命培养基上C、对干扰素及中草药敏感D、无细胞结构，仅有1种核酸E、严格活细胞内寄生28、病毒入侵机体后最早产生的具有免疫调节作用的免疫分子是A、IFNB、IgMC、中和抗体D、SIgAE、补体结合抗体29、病毒中和抗体的作用是A、直接杀伤病毒B、阻止病毒吸附C、阻止病毒核酸转录D、阻止病毒脱壳E、阻止蛋白合成30、关于干扰素，下列叙述哪项不正确A、是一组具有高活性的多功能糖蛋白B、可由病毒及其他干扰素诱生剂诱生C、不能由病毒寄生的宿主细胞产生D、产生后对邻近的细胞可发生作用E、其作用发生早于抗体31、关于包涵体的叙述，下列哪项是错误的？A、是病毒感染的检测指标之一B、可能是病毒增殖场所C、HCMV的包涵体称内基小体D、可位于胞质，也可位于胞核E、可以是嗜酸性，亦可为嗜碱性32、最容易发生抗原性变异的病毒是A、甲型流感病毒B、麻疹病毒C、腮腺炎病毒D、风疹病毒E、肝炎病毒33、脊髓灰质炎病毒主要侵犯A、三叉神经节B、脑神经节C、脊髓前角神经细胞D、神经肌肉接头E、海马回锥体细胞34、婴幼儿急性胃肠炎的主要病原体是A、腺病毒B、人类轮状病毒C、埃可病毒D、葡萄球菌E、霍乱弧菌35、Dane颗粒是指A、HAV颗粒B、完整的HBV颗粒C、HBV球形颗粒D、HBV管形颗粒E、狂犬病病毒包涵体36、诊断甲型肝炎最实用的病原学检测方法是A、免疫电镜法检测粪便标本中病毒颗粒B、ELISA检测血中抗-HAV IgMC、取粪便标本作病毒分离培养D、PCR检测血液中HAV RNAE、粪便标本中特异性抗原的检测37、下列哪种病毒为缺陷病毒A、HAVB、HBVC、HCVD、HDVE、HEV38、在乙脑的流行环节中，幼猪是A、传染原B、中间宿主C、传染原和扩散宿主D、储存宿主E、传染原和储存宿主39、HIV最易发生变异的部位是A、核衣壳B、衣壳蛋白C、包膜糖蛋白D、内膜蛋白E、跨膜蛋白40、被狂犬咬伤后，用抗狂犬病病毒血清于伤口作侵润性注射，其目的是A、刺激局部产生SIgAB、中和伤口内狂犬病病毒C、刺激机体产生细胞免疫D、诱导机体产生干扰素E、刺激机体产生抗体，以起到免疫保护作用二、多项选择题（每题1分，共5分）1、细菌细胞壁具有哪些功能A、维持细菌的外形B、物质交换作用C、抗低渗D、与细菌致病性有关E、具有抗原结构，与免疫应答有关2、病毒的复制周期包括A、吸附B、穿入C、脱壳D、生物合成E、组装、成熟和释放3、医院内感染的发生常见于A、老年人、婴幼儿及免疫功能缺陷或低下的患者B、机会性致病菌发生毒力变异C、器官移植D、血液透析E、导尿4、能通过垂直传播引起宿主子代感染的病原体是A、风疹病毒B、巨细胞病毒C、HAVD、淋球菌E、梅毒螺旋体5、在机体抗病毒感染中起主要作用的是A、干扰素B、中性粒细胞C、CTLD、中和抗体E、抗毒素三、填空题（每题0.5分，共10分）1、消毒与灭菌的方法一般可分为（）和（）两大类。

《医学微生物学》教案-细菌的生物学性状

教研室主任签名：年月日
容）
一、课前复习（5分钟）
微生物的概念，微生物的三型八大类
二、课程引入（10分钟）
用复习导入，使学生认识到细菌个体十分微小，只能用高倍显微镜和电子显微镜观察细菌。

随即播放细菌大小对比视频，引导学生观看视频，形象认识细菌大小。

三、课程内容（100分钟）
第一章细菌的生物学性状
第一节细菌的大小与形态
细菌的大小以微米（μm）作为测量单位，如球菌的直径多为1微米左右。

1.球菌
2.杆菌
3.螺形菌
第二节细菌的结构
基本结构——细胞壁细胞膜细胞质核质
特殊结构——荚膜鞭毛菌毛芽胞
1．细胞壁
细胞壁的功能与意义：⑴抵抗低渗，保护细胞;⑵维持细胞固有形态;⑶参与物质交换;⑷具有抗原性.
G+ 菌的细胞壁结构：
⑴肽聚糖：又称粘肽，为三维立体结构，50-100层，约占细胞壁干重的50%。

包括：聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥
⑵磷壁酸：①壁磷壁酸：是菌体的重要抗原。

②膜磷壁酸：有粘附作用，类似内毒素样活性
⑶其它成分
G- 菌的细胞壁结构：
⑴肽聚糖：平面网络结构，仅1-2层，约占细胞壁干重的5-10% 包括：聚糖骨架、四肽侧链
⑵脂蛋白
⑶外膜：磷脂双层膜 + 镶嵌蛋白
☆胞质周围间隙:是革兰阴性菌细胞壁和细胞膜之间的间隙。

⑷脂多糖：LPS
①类脂A：毒性基团
②核心多糖：具有属和组的特异性。

微生物学实验报告

2012级制药专业工业微生物学实验报告姓名: 刘甜甜学号: 2012304090 班级: 制药12-2班指导老师：王健日期：2014.6.11一、实验目的1、抑制或杀死微生物的一些物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的原理。

2、掌握物理、化学及生物的因素抑菌、杀菌的试验方法。

3、了解细菌的形态特征、染色特点。

4、了解细菌在普通培养基、选择培养基、血平板上的菌落特征。

5、掌握细菌分离划线培养的方法。

6、掌握细菌的初步生化反应。

7、掌握细菌密集划线法，掌握细菌K-B药敏纸片法。

二、实验内容1 细菌Gram’s stain染色，镜检，观察记录细菌形态和特色特征1.1 实验原理：染色原理：G+菌与Gˉ菌细胞壁不同，G+菌比Gˉ菌细胞内核糖核酸镁盐含量高，G+菌比Gˉ等电点低。

1.2 实验步骤：1.2.1.制片：○1涂片：取半滴生理盐水置一洁净玻片上，以无菌操作技术自平板上去菌落少许，与生理盐水混匀，均匀涂布约1cm2大小，自然干燥；②固定：取含菌膜的玻片与酒精灯火焰上来回三次，使菌膜牢固附于玻片表面；1.2.2染色：①初染：取结晶紫一到两滴覆盖于菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,细流水冲洗，切勿直接冲洗涂片区域；②媒染：取卢氏碘液1~2滴覆盖菌膜表面，轻微摇动，维持30〃~40〃,用上法细流水冲洗；③脱色：取95%酒精2~3滴于菌膜表面，轻微摇动，局部接近无色即可, 用上法细流水冲洗；④复染：取1：10稀释石炭酸复红覆盖涂片区域，轻微摇动，用上法细流水冲洗；⑤吸水纸初步吸干玻片水分，然后自然干燥；1.2.3 镜检：于涂片区域加半滴香波油，油镜（100倍目镜）下。

三、分离培养1实验原理：四区划线法是把混杂着在一起的微生物或同一微生物群体的不同细胞用接种环在平板培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养繁殖后生成个菌落。

有时这些单菌落并非由单个细胞繁殖而来，故必须反复分离多次才能得到纯种。

《医学微生物学》动物接种实验与病毒培养技术实验

《医学微生物学》动物接种实验与病毒培养技术实验实验动物在病原微生物中的研究上占有重要地位。

利用实验动物可以进行病原菌的分离鉴定、毒力的检测、制备免疫血清等生物制品；进行各种皮肤试验；建立人工感染的动物模型；进行发病机制、疾病防治以及免疫机制的研究等。

一、实验动物的管理1．实验室常用的动物：家兔、豚鼠、小白鼠、大白鼠、地鼠、绵羊、鸡等，根据实验的目的选择最适宜的动物。

2．实验动物必须与正常动物分开饲养，动物室内要经常保持清洁和空气畅通，并应有防蚊、防蝇、防逃跑及保暖设备。

3．实验动物要精心饲养，喂以适当的饲料并给以充足的水，任何动物也不要断水。

4．实验动物要有详细的记录，包括性别、体重、体表特征(如毛色等)、接种材料、接种日期、接种途径、剂量、次数以及接种变化等。

5．实验动物应做好标记，对较大动物如家兔、豚鼠等可用金属号码牌固定于耳朵上，对较小动物如大白鼠、小白鼠等可用复红(或苦味酸等染料)涂于身体的不同部位，以资识别。

盛装动物的笼具等，也应付以标签。

6．接种后的动物应每天观察1～2次，注意动物的精神状态，活动能力、饮食和大小便情况，体温、注射部位的反应以及全身反应，如不安、耸毛、震颤、弓背、麻痹及死亡等，并应详细记录之。

7．感染动物死亡后，应立即剖检或暂时冻存。

动物的排泄物及使用的笼具等必须严格消毒。

任何用过的动物，不宜再做其他试验。

二、实验动物的选择选择实验动物应注意以下几点：1．易感性：是选择实验动物的首要条件。

2．动物健康：体质健康、发育正常、体重适宜；最好使用自己繁殖的动物，由市场购买的动物至少经过一周的隔离观察，证明无隐性感染方可使用；某些特殊实验应需选用专门喂养繁殖的无菌动物；实验动物应容易获得，便于喂养和管理。

3．动物大小：同一实验应选用大小一致的动物，通常以年龄或体重为标准。

4．性别：某些实验最好选用同一性别，特别是免疫的动物和需要观察较长时间的实验动物。

5．动物品系：某些实验要求使用纯系动物，纯系小鼠用于免疫学、杂交瘤及病毒感染等研究。

BSL2实验室安全要求2017

（GB19489，WS233）
30
生物安全实验室
三项技术措施
样品隔离技术（机械、气幕），防止传染因子进入环境接触人体
定向流技术（三级负压系统），防止传染因子扩散
消毒灭菌技术（物理、化学），灭活传染因子
31
生物安全实验室
一级屏障（primary barrier）是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级隔离
定期召开生物安全管理会议，对实验室生物安全相关的重大事项做出决策
批准和发布实验室生物安全管理体系文件
实验室生物安全管理责任部门负责…… 实验室负责人为实验室生物安全第一责任人，全面
负责实验室生物安全工作……
14
病原微生物实验室生物安全管理条例
有关工作以国家标准为依据强制认可
国家认可委
Contaminated air under positive pressure
HEPA-filtered air
Room air
42
43
洁净实验室与生物安全实验室
一些健康相关产品的检测标准提出了100 级洁净度的要求， 100级洁净实验室是必需的
洁净实验室不能代替生物安全实验室
生物安全实验室不允许正压洁净实验室仅提供了对样品的保护
以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平
以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物实验室的相应生物安全防护水平
20

实验室生物安全水平分级
WS233定义（待发布）关于实验室分级
4.1.3生物安全防护水平为二级的实验室适用于操作能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物

卫生微生物实验讲解

饮用水采集
采集自来水时，放水 5-10 min，排除管内
贮存水
水源水采集
江河、湖、水库等水样，采集距水面 10-15 cm深处水
②用1 ml无菌吸管吸取水源水原样
1ml
换1 ml无菌吸管换1 ml无菌吸管混匀后（来回吸混匀后（来回吸 3次）吸出1 ml 3次）吸出1 ml
9 ml 生理盐水 9 ml 生理盐水 9 ml 生理盐水释释度 1: 10(10-1) 1: 10(10-2) 1: 10(10-3)
7
不可计不可计不可计 —
10-3无法计数
1）应选择平均菌落数在30-300之间的稀释度，乘以稀释倍数报告之
平均稀释
菌落
4、结果
①菌落计数
1、平皿分4部分点数（见图） 2、求同一稀释度的平均菌落数
如： A1数 + A2数 25. 菌落计 Nhomakorabea的报告：
1）平板菌落数的选择 2）稀释度的选择 3）菌落数的报告
菌落数＜100
按实有数报告
菌落数＞100 采用两位有效数，后面数值四舍
五入（也可用10的指数表示）
无法计数
无法计数报告
高压蒸汽灭菌锅操作过程
• 加水 • 装锅 • 加盖 • 排气 • 灭菌 • 起锅
一、水的卫生细菌学检测（2人/组）
• （一）水的细菌总数测定（2人/组） 1 原理采用营养琼脂倾注平板计数法，测定被检物
在单位重量或体积（g或ml）内所含有的活细菌数量，以判明被检物（水）被细菌污染的程度。
2 材料
卫生微生物检验技术实验
授课对象：12级预防医学专业授课地点：8号楼--511 主讲教师：曹亦菲
医学微生物学实验室规则

微生物实验内容汇总

链球菌
脑膜炎双球菌
血浆凝固酶试验
[原理和意义] 致病性葡萄球菌能产生血浆凝固酶，使人或动
物血浆发生凝固，因此，测定血浆凝固酶的有无是鉴定葡萄球菌致病性的重要依据。
血浆凝固酶试验
步骤：
1
2
生理盐水
+
+
无菌操作：金葡
白葡
+
+
血浆
血浆
凝集（+）不凝集（-）
血浆凝集试验结果
抗“O”试验（ASO test）
培养结果
斜面培养基接种法（操作）
用途：常用于扩大纯种细菌及实验室保存菌种。
液体培养基接种法
半固体培养基接种法（操作）
方法：穿刺接种结果：沿穿刺线生长——动力-
扩散生长——动力+
三、细菌在培养基上生长现象
1. 固体 2. 半固体
菌落菌苔动力+ 动力-
3. 液体
沉淀—成链生长浑浊—均匀分散生长菌膜—表面生长（需氧菌）
一、细菌的分布实验
（1）空气细菌检查材料：培养基，普通琼脂平皿
（2）皮肤（其他物品）消毒前后的细菌检查材料：培养基，无菌生理盐水，75%酒精棉球， 2.5%碘酒棉球，无菌棉棒
（3）自来水中的细菌检查材料：培养基，无菌棉棒，酒精灯
1. 空气中细菌的检查
材料：
普通琼脂平板
方法：结果：
取三块琼脂平板，将2个打开皿盖分别置于不同的环境15~30min后，盖好皿盖。另外1个不启盖作为对照。置37℃培养18~24h。
步骤：
阴性对照（1滴） +
胶乳试剂（1滴）
2min
-
待检血清（1滴） +

《医学微生物学》微生物的形态检查实验

《医学微生物学》微生物的形态检查实验[目的]1．掌握显微镜油镜的使用和保护。

2．掌握细菌的基本形态和特殊结构。

3．掌握细菌涂片标本的制备及革兰染色的步骤，判断革兰染色性及明确其临床意义。

4．了解特殊结构的染色方法。

5．了解放线菌和霉菌的形态。

6．了解放线菌和霉菌的形态观察方法。

[内容]一、显微镜油镜的使用方法（一）普通光学显微镜的接物镜有高倍镜、低倍镜和油镜三种，检查微生物最常用者为油镜，在使用前首先要识别油镜头，在油镜头上常有下列标记：（1）放大倍数是90×或100×。

（2）油镜头前端有一白圈。

（3）物镜的前面透镜最小。

（4）刻有“油”或外文“HI”（Homogene Immersions）, “Oil Immersion”等字样。

（二）使用方法（1）使用显微镜时，必须端坐，坐凳和桌面高度配合适宜，显微镜应直立在桌上。

把显微镜的电源线插在适当的电源插座中。

（2）把照明器的开关移到“ON（开）”的位置，滑动光亮控制钮以获得适宜的照明亮度。

集光器越靠近载物台平面，则光线越强；光圈放得越大，光线也越强。

检查染色标本时，光线应强，光圈应放大，集光器要抬高。

检查未染色标本时光线宜较弱，此时应适当缩小光圈，降低集光器。

（3）染色标本上加一小滴香柏油，油勿过多，更勿将油涂开。

（4）置标本于载物台上。

弹簧夹固定，将待检部分移至接物镜下。

（5）转动接物镜旋转盘，使油镜头对准标本。

眼睛从侧面看着，转动粗调节器，使载物台逐渐上升，直至油镜头侵没入油滴内（上升程度是使油镜头几乎与标本接触，但两者切勿相碰！）然后眼睛转到目镜处，一面观察，一面调节粗调节器使载物台缓慢下降，待获得模糊物象时，再换用细调节器调节至物象清晰为止。

调节时千万不可使用强力将载物台任意上升，以至压碎标本玻片，甚至将贵重的油镜头损坏。

观察标本时，两眼应同时睁开，调节视度圈，使其与瞳距基本一致。

（6）观察完毕，转动粗调节使载物台下降，取下标本片，用滴加有乙酸乙酯的擦镜纸将油镜头的油擦净，再用干净的擦镜纸将镜头擦净（7）显微镜见图1-1二、革兰染色法[原理]革兰染色的原理可能与下列因素有关：1．革兰阳性菌等电点（PI2~3）比革兰阴性菌的等电点（PI4~5）低。

《医学微生物学(原“病原微生物”)》B040第3-1次作业(111)

《医学微生物学（原“病原微生物”）》B040第3-1次作业(111)1、以下微生物中属于原核细胞型微生物的是（单选题1分）1）细菌2）病毒3）真菌4）朊粒学生答案：1 答案：正确2、革兰阳性细菌和革兰阴性细菌细胞壁中共有的化学组成成分是（单选题1分）1）磷壁酸2）脂多糖3）肽聚糖4）脂蛋白学生答案：3 答案：正确3、细菌特殊结构中荚膜的功能是（单选题1分）1）粘附易感细胞2）在细菌间传递遗传物质3）辅助细菌向周围组织扩散4）抵抗吞噬细胞对细菌的吞噬学生答案：4 答案：正确4、在人或动物体内能够使细菌向周围组织扩散的结构是（单选题1分）1）荚膜2）芽孢3）鞭毛4）普通菌毛学生答案：3 答案：正确5、细菌在固体培养基中生长时产生的生长现象是（单选题1分）1）穿刺线模糊2）形成空斑3）形成菌落4）形成噬斑学生答案：3 答案：正确6、细菌的增殖方式是（单选题1分）1）复制2）出芽3）二分裂4）形成孢子学生答案：3 答案：正确7、噬菌体主要侵犯的对象是（单选题1分）1）细菌2）红细胞3）病毒4）吞噬细胞学生答案：1 答案：正确8、决定细菌耐药性产生的细菌结构是（单选题1分）1）R质粒2）F质粒3）Vi质粒4）col质粒学生答案：1 答案：正确9、细菌质粒的生物学特点是（单选题1分）1）具有抗原性2）促进细菌扩散3）抗吞噬细胞吞噬4）细菌染色体外的遗传物质学生答案：4 答案：正确10、细菌变异现象中，“H-O”变异是指（单选题1分）1）鞭毛丢失的变异2）细胞壁缺陷型变异3）细菌菌落发生变异4）F质粒丢失的变异学生答案：1 答案：正确11、结构完整，具有感染性的病毒颗粒被称为（单选题1分）1）朊粒2）病毒体3）缺陷性干扰颗粒4）拟病毒学生答案：2 答案：正确12、病毒的生物学特点是（单选题1分）1）专性活细胞内寄生2）结构中含有细胞壁3）以二分裂的方式进行繁殖4）大多数球形病毒直径大于1个微米学生答案：1 答案：正确13、裸露病毒的结构组成中包含（单选题1分）1）衣壳2）细胞壁3）核糖体4）线粒体学生答案：1 答案：正确14、病毒结构组成中具有的化学成分是（单选题1分）1）蛋白质2）肽聚糖3）脂质A4）磷壁酸学生答案：1 答案：正确15、观察病毒形态时，正确的方法是（单选题1分）1）革兰氏染色法2）抗酸染色法3）电子显微镜4）荧光显微镜学生答案：3 答案：正确16、病毒吸附宿主易感细胞的结构是（单选题1分）1）刺突2）肽聚糖3）DNA4）荚膜学生答案：1 答案：正确17、能够抑制病毒逆转录酶的抗病毒药物是（单选题1分）1）金刚烷胺2）阿糖腺苷3）无环鸟苷4）叠氮脱氧胸苷学生答案：4 答案：正确18、金刚烷胺抗病毒作用机制是（单选题1分）1）抑制病毒吸附2）抑制病毒脱壳3）抑制病毒逆转录4）抑制病毒释放学生答案：1 答案：正确19、病毒引起的持续性感染包括（单选题1分）1）亚临床感染2）隐性感染3）急性感染4）潜伏感染学生答案：4 答案：正确20、干扰素的抗病毒作用特点是（单选题1分）1）裂解病毒衣壳蛋白2）间接抗病毒作用3）只作用于RNA病毒4）只作用于DNA病毒学生答案：2 答案：正确21、制作灭活病毒疫苗时，最常使用的方法是（单选题1分）1）甲醛处理2）紫外线照射3）传代细胞培养4）低温冷冻干燥学生答案：1 答案：正确22、革兰染色法中必须使用的化学试剂是（单选题1分）1）盐酸乙醇2）美蓝3）95%乙醇4）孔雀绿学生答案：3 答案：正确23、对抗生素进行消毒除菌处理时，只能采用（单选题1分）1）煮沸法2）甲醛熏蒸3）过滤法4）高压蒸汽灭菌学生答案：3 答案：正确24、红霉素的杀菌机理是（单选题1分）1）抑制细菌细胞壁的合成2）抑制细菌叶酸代谢3）抑制细菌RNA聚合酶4）抑制细菌蛋白质的合成学生答案：4 答案：正确。